黄水芽胞杆菌Bacillus aquiflavi 3H-10全基因组序列分析及功能探究

黄水芽胞杆菌Bacillus aquiflavi 3H-10分离自浓香型白酒黄水样品,是我国四川省宜宾地区首株酿酒微生物新种菌株。为了深入挖掘其功能特性,利用高通量测序技术测定菌株的全基因组序列,并通过数据库比对、平板透明圈法、福林酚法和GC-MS技术解析该菌株的功能基因、产生物酶和发酵风味物质的能力。研究结果表明,菌株B.aquiflavi 3H-10基因组大小3.62 Mb, G+C含量35.40 mol%,其中预测到3 224个蛋白质编码基因。通过与KEGG、NR和CAZy数据库比对发现,基因组中含有编码22种蛋白酶和多种碳水化合物酶类的基因;B.aquiflavi 3H-10在蛋白酶培养基平板上透明圈较明显,蛋白酶活力可达85 U/mL;在大豆酪蛋白液体培养基37℃培养72 h的菌体发酵液中,可检测到56种代谢风味化合物,包括酯类、醇类、芳香族、羰基化合物、杂环化合物等,其中,相对含量较高的物质包括苯甲醛(杏仁香,坚果香)、2,5-二甲基吡嗪(炒芝麻香)、正丁醇(水果香)、3-甲基己醇以及浓香型大曲酒的主体香味物质己酸乙酯(甜香,水果香,窖香,青瓜香)。研究表明,黄水芽胞杆菌B...     

基于全基因组测序的黄水芽胞杆菌Bacillus aquiflavi 3H-10安全性评价

黄水芽胞杆菌Bacillus aquiflavi 3H-10分离自我国四川省宜宾地区传统发酵浓香型白酒黄水样品,具有产生蛋白酶和多种风味物质的能力。对黄水芽胞杆菌3H-10进行高通量基因组测序,并开展耐药基因、毒力基因和致病性分析,以及药物敏感性检测、小鼠毒力实验,以综合评价黄水芽胞杆菌3H-10的安全性。结果显示,黄水芽胞杆菌3H-10基因组为一条环状的DNA,大小3 806 094 bp, G+C含量为35.66%(摩尔百分含量),基因组中预测到4 031个基因、81个tRNA基因、27个rRNA基因、16个sRNA基因;3H-10基因组中未检测到潜在耐药基因,且对常见的9大类、10种抗生素表现为敏感,判断菌株无横向转移耐药性的风险;3H-10基因组中未检测到潜在毒力相关基因,受试小鼠不产生毒性反应或死亡,判断菌株无毒力或人体致病性。黄水芽胞杆菌3H-10在耐药性、毒力与致病性方面无安全性风险。     

乳品中芽胞杆菌

在日本人龟井俊郎、叶鸿剑等的研究基础上,对乳中可能存在的芽孢杆菌:枯草芽胞杆菌、蜡状芽胞杆菌、肉毒梭状芽胞杆菌、环状芽胞杆菌等的特性进行了描述,并对其危害和检测方法进行了探讨,希望能对建立乳品新的检测指标起到一定作用。     

蜡样芽胞杆菌食物中毒死亡案例分析

一般由蜡样芽胞杆菌(Bc)引起的食物中毒通常症状较温和而且可自愈.但随着国内外相关研究的深入,发现少数Bc食物中毒可能导致非常严重的后果,甚至致死.本研究主要分析国内外已报道的Bc食物中毒死亡案例12起,探讨其中的规律和共性.     

一株蜡样芽胞杆菌的鉴定及鉴别诊断

我室接收蜡样芽胞杆菌菌种一株,经我室鉴定为蜡样芽胞杆菌７型,现报告如下。     

北京地区饲料添加剂中蜡样芽胞杆菌的检测及分析

目的分析北京地区饲用酶制剂、微生态制剂和混合型饲料添加剂产品中蜡样芽胞杆菌污染情况。方法本实验方法在GB/T26427-2010《饲料中蜡样芽胞杆菌的检测》基础上进行优化,利用VITEKII Compact 15全自动生化鉴定及药敏分析系统,对生产环节的94批次样品,进行计数检测和生化鉴定分析。结果对94批次样品进行检测分析,46批次检出蜡样芽胞杆菌,检出率为48.94%。其中30批次样品含量102CFU/g,占总样品数31.91%;4.26%的样品中蜡样芽胞杆菌含量103CFU/g,分别为饲料添加剂植酸酶2批次,混合型饲料添加剂复合酶制剂2批次。结论北京地区饲用酶制剂、微生态制剂和混合型饲料添加剂产品,存在不同程度上被蜡样芽胞杆菌污染的情况。其中酶制剂类产品的污染状况最为严重,酶制剂和含有酶制剂成分的混合型饲料添加剂产品中蜡样芽孢杆菌检出率均高于50%。     

ccpN敲除对地衣芽胞杆菌DW2杆菌肽合成代谢的调控效应

地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)DW2生长和杆菌肽合成代谢在能量及前体利用方面存在竞争关系,为了提高杆菌肽的合成效率,在20 L发酵罐水平研究了ccpN基因敲除对杆菌肽合成与细胞生长的调控效应。结果显示：菌株DW2ΔccpN杆菌肽峰值效价(1 337 U/mL)比菌株DW2峰值效价(1 024 U/mL)提高30.6%。但是,其峰值生物量(3.39×10¹⁰ CFU/mL)仅为菌株DW2峰值生物量(5.56×10¹⁰ CFU/mL)的61%。另外,DW2ΔccpN胞外氨基酸浓度在36 h时、溢流有机酸总量在22～27 h时分别比DW2提高43.8%和24.7%～37.6%。同时,细胞对数期能量代谢(citZ、icd、zwf、cydA)、氨基酸转运(relA、brnQ、vpr、yvbW)以及丙酮酸转化(pycA、pckA、pyk)和hprK等13个基因的转录组表达(TPM值)也上调2.0～18.4倍,说明菌株DW2ΔccpN的溢流代谢增强,为对数后期提供了更多的碳源和能源分子;细胞严谨响应增强使CodY的调控活性下降...     

广州市市售食品中蜡样芽胞杆菌监测结果分析

目的 了解广州市市售食品中蜡样芽胞杆菌污染及分布情况, 发现危险因素。方法 2014~2018年共采集6类共2011份食品样品, 开展蜡样芽胞杆菌监测分析。结果 蜡样芽胞杆菌检出阳性样品共146份, 总体检出率为7.26%。其中6份样品蜡样芽胞杆菌检出值超过105 CFU/g。不同食品类别中小摊贩食品检出率最高, 达到了10.62%, 其次为烘焙食品(8.69%)、寿司(7.50%)、冷藏膳食(6.67%)、盒饭(6.36%)和熟制米面制品(5.00%)。第3季度检出率最高, 为8.77%, 其次为第2季度(7.98%), 最低的是第1季度(5.09%)。不同采样场所中采自小摊贩的食品蜡样芽胞杆菌检出率最高(11.21%), 其次为餐饮单位(9.31%)和农贸肉菜市场(8.07%), 最低的是超市(6.56%)。散装食品蜡样芽胞杆菌检出率(7.61%)高于预包装食品(5.38%)。中心城区食品蜡样芽胞杆菌检出率(9.24%)高于周边区(3.65%)。结论 广州市市售食品存在不同程度的蜡样芽胞杆菌污染, 部分食品存在安全隐患, 相关部门应针对性加强监管, 预防食源性疾病的发生。     

嗜热芽胞杆菌在高温大曲发酵中的作用

嗜热芽胞杆菌是高温大曲培养过程中的常见菌种。本文采用纯菌种和混合菌种制曲，测定了夫曲营养物质含量，对夫曲发生的褐变反应进行了紫外扫描分析，并研究了一株嗜热芽胞杆菌胞外淀粉酶同功酶的耐热性，分析了这一类群微生物酒曲发酵过程中的作用。     

乳酸对蜡样芽胞杆菌的抑制研究

本文研究了乳酸在营养肉汤培养基对蜡样芽胞杆菌的抑制,以及前期乳酸浸泡大豆后对蜡样芽胞杆菌在天培中生长情况的影响.研究发观,在营养肉汤培养基中,当采用乳酸调整pH时,在pH值为4.5时可以较好地抑制蜡样芽孢杆菌的生长.在天培的制作过程中,在前期未加乳酸浸泡处理的天培中,菌数可达108cfu/g并最终导致天培的酸败;在前期加乳酸浸泡处理过的天培中,蜡样芽胞杆菌亦可以生长,但菌数有所下降,为106cfu/g,乳酸浸泡对抑制天培中蜡样芽胞杆菌的生长起到一定的作用.     

贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis)分类学及功能研究进展

近年来,贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis)、甲基营养型芽胞杆菌(Bacillus methylotrophicus)、解淀粉芽胞杆菌植物亚种(Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)在农业、工业、食品加工、环境保护等领域的应用日益增多。然而,有研究表明甲基营养型芽胞杆菌和解淀粉芽胞杆菌植物亚种是贝莱斯芽胞杆菌的同物异名,且当前科学命名为贝莱斯芽胞杆菌。为了明确贝莱斯芽胞杆菌的分类学地位,该文梳理了其与甲基营养型芽胞杆菌、解淀粉芽胞杆菌植物亚种之间的关系,并从功能研究方面介绍了贝莱斯芽胞杆菌的国内外研究现状,同时对其研究前景进行了展望,为贝莱斯芽胞杆菌的深入研究与应用提供参考。     

胆固醇氧化酶高产菌类芽胞杆菌的诱变选育

由本实验室产胆固醇氧化酶的菌株类芽胞杆菌作为出发菌株,经过紫外＋LiCl、紫外＋光敏试剂（8-mop）物理化学诱变处理,最后得到一株突变株XUM-10,并对其进行发酵条件的优化,最终酶活为221．20U／L,其酶活为出发菌株的2.5倍。     

2011—2019年吉林省食品中蜡样芽胞杆菌污染状况分析

目的 了解2011—2019年吉林省食品中蜡样芽胞杆菌污染情况,为食品安全监管及食源性疾病防治提供理论依据。方法 采集2011—2019年吉林省九个地(市)级的餐饮服务环节和流通环节中的样品3 173份,参照GB 4789.14—2014《食品安全国家标准 食品微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验》中的方法,对食品中的蜡样芽胞杆菌进行检测并分析。结果 2011—2019年吉林省3 173份食品样品中,蜡样芽胞杆菌总检出率为23.6%(750/3 173),2015年检出率最高(38.5%, 62/161),2017年检出率最低(11.8%, 20/170);白山市检出率最高(35.8%, 139/388),其次为延边州(31.4%, 97/309),四平市检出率最低(15.3%, 76/496);蛋与蛋制品检出率最高(60.0%, 3/5),其次为乳与乳制品(39.3%, 114/290)及婴幼儿食品(31.1%, 185/595);百货商场中蜡样芽胞杆菌检出率最高(32.4%, 22/68),其次为小吃店及饮品店(30.9%, 43/139)、快餐店(29.1%, 25/86)。平板计数(CFU)法测得蜡样芽胞杆菌检出结果的中位数(四分位数间距)为5.8(2.9,8.7)CFU/g(mL),稀释培养测数(MPN)法测得结果的中位数(四分位数间距)为6.4(3.2,9.6)MPN/g(mL)。结论 吉林省各地市食品中存在不同程度的蜡样芽胞杆菌污染,以白山市最为严重,蛋与蛋制品、乳与乳制品是主要受污染食品,食品监管部门应加强百货商场、小吃店及饮品店等地点的安全监测与管理。     

吉氏芽胞杆菌来源来氟米特分析与检测

目的对吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019来源的来氟米特成分进行分析与检测。方法 采用高效液相四级杆飞行时间质谱分析吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019发酵液中胞外代谢物的成分。运用安捷伦公司的Mass Hunter软件,对数据进行分子特征提取(MFE),并通过Metlin代谢物质谱数据库检索,获得总体代谢物的信息。结果 在吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019发酵液中,用液相质谱检测到561种代谢物,通过Metlin谱库搜索得到初步鉴定结果的有15种。其中,来氟米特是相对含量和匹配率最高的成分。来氟米特的匹配得分达到90.89,占其发酵液总代谢物相对含量的1.14%。来氟米特的保留时间为6.522分钟,精确质量数为270.0623。结论 为吉氏芽胞杆菌来源的该免疫调节剂的开发与利用提供理论依据。     

烟草赤星病拮抗芽胞杆菌的筛选及培养基优化

以赤星病原菌Alternaria longipes为筛选指示菌,采用平板共培养初筛和发酵上清滤液复筛的方法,筛选了烟草赤星病拮抗芽胞杆菌3株。其中菌株K₁₁的菌体径向生长抑制率（PIRG）为63.64%,发酵上清滤液的PIRG值达67.44%。盆栽试验证明,该菌对烟草赤星病具有良好的拮抗能力。经鉴定菌株K₁₁为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。由单因素实验和正交实验优化得到了K₁₁菌株生物量较高的摇瓶发酵培养基配方：葡萄糖20.0 g/L,豆粕30.0 g/L,K₂HPO₄·3H₂O 1.0 g/L,MgSO₄·7H₂O 0.1 g/L。优化后生防菌株K₁₁的生物量比对照提高6.5倍,生物量高达1.28×10¹⁰ CFU/mL,芽胞形成率在95%以上。     

蜡样芽胞杆菌生长特性及大蒜精油对其抑菌活性的研究

主要研究了37℃条件下3种蜡样芽胞杆菌在营养肉汤中的生长状况,建立了37℃下蜡样芽胞杆菌在营养肉汤中的Boltzmann牛长模犁,3条牛长曲线相关系数鼯均大于0．97;检测了不同培养时间蜡样芽胞杆菌的产芽胞情况,结果表明1号菌株和14号菌株较早产芽胞,培养相同时间,产芽胞数：1号菌株,4号菌株〉标准菌株;采用牛沣杯法和平板计数法研究了大蒜精油对蜡样芽胞杆菌的抑制效果,结果表明浓度为lO。的人蒜精油对3种蜡样芽胞杆菌都有很好的抑制效果,3种菌株中l号菌株最难抑制。     

1986-2007年中国299起蜡样芽胞杆菌食物中毒案例分析

目的了解我国蜡样芽胞杆菌(B.cereus)食物中毒的发生情况。方法对我国文献报道的1986-2007年299起蜡样芽胞杆菌食物中毒案例进行统计、归类和分析。结果我国蜡样芽胞杆菌食物中毒以呕吐型为主(占75.9%),腹泻型仅占11.4%。蜡样芽胞杆菌食物中毒在我国各省均有报道,其中南方地区发病起数较多。中毒场所中,学生食堂、饮食服务单位和职工食堂特别突出。食物中毒的高发期为夏秋季,9月份尤为突出。在引发呕吐型食物中毒的食品中粮食加工品占非常高的比例(69.6%),而在腹泻型B.cereus食物中毒中粮食加工品、肉制品和混合型食物各占30%左右的比例。呕吐型B.cereus食物中毒的潜伏期很短,一般在0.5～6h,而腹泻型B.cereus食物中毒的潜伏期则一般在4h以上。引发食物中毒的食品中的B.cereus含菌量绝大多数在105CFU/g(ml)以上,但也有部分案例中B.cereus含菌量较少。结论由我国的饮食结构、气候、食品加工和保藏方式等因素导致的蜡样芽胞杆菌食物中毒,特别是呕吐型B.cereus食物中毒,在我国比较常见。     

双氧水对地衣芽胞杆菌合成杆菌肽的影响

在研究地衣芽胞杆菌浊液发酵生产杆菌肽过程中发现存在发酵前期溶氧为零、发酵中期菌体自溶以及二次生长现象,而H2O2是一种携氧剂,可释放O2以及不影响产物分离,因此在10L罐上,考察了流加H2O2对地衣芽胞杆菌浊液发酵合成杆菌肽的影响.在发酵24h时以速率为3mmol/(L·h)恒速流加H2O2至34h,菌体生物量在34h达到最大值为73.5× 109cfu/mL比对照最大值高6.5％(对照最高值为69× 109cfu/mL),自溶时间延后了8h,而且细胞自溶后的菌数最小值为42h的62.1×109cfu/mL,比对照自溶后最低值高了77％.24h～34h的挥发性脂肪酸(VFA)最高值为12.8g/L,比对照减少了11％,糖耗速率是0.36g/(L· h),比对照提高了3％.杆菌肽在24h～34h的合成速率为44.9U/(mL·h)比对照高12％(对照为40.1U/(mL·h)),杆菌肽最终效价为1021U/mL,比对照提高9.9％,说明适量流加H2O2不仅改善了细胞的生长环境,还能促进杆菌肽的生物合成效率.     

动物性食品中蜡样芽胞杆菌的建模及风险评估应用进展

动物性食品有极高的营养价值,在食品组成中占有重要地位。蜡样芽胞杆菌是动物性食品中常见的一种食源性致病菌。综述了近年来国内外对蜡样芽胞杆菌的建模及在风险评估中的应用所开展的研究,对肉类、乳及乳制品、蛋及蛋制品等食物中建立的生长模型与失活模型的最新研究成果进行总结,概述了动态变化环境下的界面模型研究及模型在风险评估中的应用情况,最后对蜡样芽胞杆菌预测建模的研究及应用提出了展望,以期为今后的研究提供参考。     

烟草赤星病拮抗芽胞杆菌的筛选、鉴定及促生防病作用

为获得对烟草赤星病菌具有较好生防效果的芽胞杆菌,从福建、山东、云南等地烟草叶片中分离得到187株菌株,对烟草种子进行浸种处理,通过测定发芽率筛选到能够促进种子萌发的6株菌株;利用平板拮抗法、离体叶片接种法、温室生测发现FJ1、FJ1-6能促进烟草生长且对赤星病防效较好;通过生理生化和分子生物学鉴定,FJ1为萎缩芽胞杆菌（Bacillus atrophaeus）,FJ1-6为贝莱斯芽胞杆菌（Bacillus velezensis）。防病特性研究发现,两菌株含有参与脂肽类抗生素Surfactin、Fengycin和Iturin合成的基因且脂肽类粗提物对赤星病菌丝生长有明显的抑制作用,抑制率分别为56.9%、65.0%。综上,FJ1、FJ1-6具有优良的促生防病特性及显著的促种子萌发效应,可应用于烟草育苗及赤星病的防治。