S/D灭活血浆内脂包膜病毒及病毒灭活血浆的研究

研究磷酸三丁酯(TNBP)／Triton X-100对血浆内脂包膜病毒的灭活效果。用VSV病毒和Sindbis病毒作指示病毒,加入血浆后再加磷酸三丁酯／Triton X-100,观察病毒的滴度变化及对血浆蛋白的影响。结果发现终浓度各为1％的磷酸三丁酯／Triton X-100在60min内可以灭活血浆内的两种指示病毒,而血浆蛋白的组成和功能变化很小。经层折、超滤后血浆内磷酸三丁酯和Triton X-100的残余量分别低于5μg/ml,表明S／D处理血浆的安全性和治疗作用都很好,其制剂冰冻血浆或冻干血浆可用于临床治疗凝血因子缺乏症,或用作血容量扩张剂。     

SARS灭活病毒免疫兔后IgG特异抗体应答

将灭活的SARS冠状病毒抗原每隔两周多点注射免疫兔,共免疫3次,以观察SARS灭活病毒免疫兔后兔血清中IgG特异性抗体的应答变化。免疫前及第一次免疫后第8、14、21、28、35天耳静脉取血,分离血清。间接ELISA法测得血清中特异性IgG抗体持续升高,并表现出一定的剂量依赖性：第35天G1、G2、G3组血清IgG抗体滴度分别为1：51200、1：49600、1：25600;中和试验测得G1组第28天血清样品中和抗体效价为1：2560;蛋白芯片测得M、N、3CI,、S1、S2、S3、S4等病毒蛋白抗原都可特异性结合抗血清中的IgG抗体,但是不同蛋白抗原结合能力有差别。因此可认为SARS灭活病毒经皮下注射免疫兔后,可诱导全身性IgG抗体应答,产生SARS冠状病毒特异性抗体。     

病毒灭活和SD血浆的制备

建立制备病毒灭活SD血浆的方法。血浆内加入 1%TNBP/ 1%TritonX10 0 ,30℃保温 4h后用反相层析和超滤去除血浆中的TNBP和TritonX10 0。在 30℃保温 15min后血浆内脂包膜病毒全部被杀灭。超滤后的血浆内TNBP和TritonX10 0的含量都低于 5mg/L。SD血浆蛋白含量的改变都在准许的范围内。建立了一种病毒灭活血浆的制备方法。     

新疆伊犁地区马脑组织西尼罗病毒感染的调查

目的了解新疆伊犁地区草原放养马群中西尼罗病毒(W estN ile virus,WNV)中枢感染的流行状况。方法采用一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real Tim e RT-PCR)对采自新疆伊犁地区草原放养、未接种WNV疫苗的189例马脑组织进行WNV包膜蛋白(E)基因片段检测。结果被检马脑组织标本中未发现WNV E基因片段。结论目前尚没有证据表明我国新疆伊犁地区的放养马中存在WNV脑炎的感染,提示该地区出现WNV脑炎流行的可能性小。     

S／D处理血浆过程中的脂包膜病毒灭活试验观察

通过有机溶剂/去污剂对血浆中指示病毒VSV灭活的观察评估有机溶剂/去污剂对脂包膜病毒死活的效果。血浆样品与VSV病毒按9:1混合,然后用1％TNBP/1％ Triton X-100在30℃处理4h,测定开始样品中的病毒总量和S/D处理后不同时间取样内的病毒总量。实验中样品内加入1％TNBP/1％ Triton X-10015min后VSV病毒已全部灭活,灭活效果≥6.0log。按所述S/D处理方法可以完全灭活血浆内所有的脂包膜病毒而没有主要血浆蛋白的损失。     

亚甲蓝/光灭活处理血浆的研究进展

人血浆是一种重要的临床应用的血液制剂，但其安全性却不容忽视。本文对年来来有关亚甲蓝／光灭活处理技术用于人血浆病毒灭活研究的进展作了综述。     

利用入境人员血清盘评价西尼罗病毒IgG抗体检测试剂盒

鉴于国内尚无明确的西尼罗病毒(West nile virus,WNV)感染病例报道,通过建立入境人员血清样品盘来评价自行研制西尼罗病毒IgG抗体的间接ELISA检测试剂盒。选择来自WNV感染区的入境人员血清286份,通过美国食品药物管理局(Food and drug administration,FDA)认证的FOCUS公司的West Nile Virus IgG Dxselect试剂盒以及Panbio公司的Dengue IgG Capture ELISA试剂盒筛选出评价用血清样品盘,平行比较评估自行研制的WNV IgG检测试剂盒结果,进一步对试剂盒的特异性,重复性和稳定性进行评价研究。结果显示,自行研制的试剂盒阳性检出率为35.6%,FOCUS West Nile Virus IgG Dxselect检测试剂盒则为32.5%,两者之间无统计学差异(χ2=3.05,P=0.0780.05),并具有良好的一致性(Kappa=0.837 2);其中两者的阳性检出符合率为91.18%,阴性符合率为95.34%,总符合率为92.66%。研制的间接ELISA方法诊断试剂盒具有良好的特异性,稳定性和敏感性,检测效果与境外权威认证的商品化试剂盒基本一致,为我国防控西尼罗病毒等外来传染病入境提供技术储备,也为尚未传入的传染病免疫试剂盒评价方法提供了参考依据。     

西尼罗病毒的RT-PCR检测与鉴定

建立西尼罗病毒敏感、特异、快速的RT-PCR检测方法用于实验室诊断和流行病学监测。采用一步RT-PCR和套式PCR法对西尼罗病毒感染的乳鼠脑和细胞培养上清进行扩增,并对扩增产物进行序列测定。两种方法均可分别从两种组织中扩增出与预期大小相一致的片段,套式PCR法比一步RT-PCR法更为敏感,该扩增片段与西尼罗病毒埃及Eg101株相应序列的同源性为99％。     

基于文献计量学的中国西尼罗病毒研究特征分析

为了解我国关于西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）文献的各项研究特征,本文应用文献计量学方法对1942-2021年中国知网（CNKI）和Web of Science(WOS)数据库收录的WNV文献进行分析。由于1999年美国出现WNV暴发流行,全球发文量显著增加,2006年达到峰值,将发文情况总体分为3个阶段：1999年之前对于WNV的关注度有限;1999-2006年,全球整体发文量大幅增加,国内文献数量随之增加,以综述和国外疫情介绍类为主;2006年后全球发文量在300篇/年左右,国内文献类型以实验研究类为主。当前研究热点主要集中在病原学机制研究、暴发疫情、监测与检测、传播媒介和传播模式等方面,而国内以检测方法的建立为主。国内WNV研究主要局限在数家国家级研究机构。鉴于中国已在局部地区发现WNV流行,在今后的研究工作中,亟需在开展WNV病原学、致病机制研究的基础上,建立全国监测体系、提高检测能力、扩大监测范围、增加检测内容,为WNV病防控策略的制定及潜在暴发流行的应对提供科学依据。     

利用入境人员血清盘评价西尼罗病毒IgG抗体检测试剂盒北大核心CSCD

鉴于国内尚无明确的西尼罗病毒(West nile virus,WNV)感染病例报道,通过建立入境人员血清样品盘来评价自行研制西尼罗病毒IgG抗体的间接ELISA检测试剂盒。选择来自WNV感染区的入境人员血清286份,通过美国食品药物管理局(Food and drug administration,FDA)认证的FOCUS公司的West Nile Virus IgG Dxselect试剂盒以及Panbio公司的Dengue IgG Capture ELISA试剂盒筛选出评价用血清样品盘,平行比较评估自行研制的WNV IgG检测试剂盒结果,进一步对试剂盒的特异性,重复性和稳定性进行评价研究。结果显示,自行研制的试剂盒阳性检出率为35.6%,FOCUS West Nile Virus IgG Dxselect检测试剂盒则为32.5%,两者之间无统计学差异(χ2=3.05,P=0.078>0.05),并具有良好的一致性(Kappa=0.837 2);其中两者的阳性检出符合率为91.18%,阴性符合率为95.34%,总符合率为92.66%。研制的间接ELISA方法诊断试剂盒具有良好的特异性,稳定性和敏感性,检测效果与境外权威认证的商品化试剂盒基本一致,为我国防控西尼罗病毒等外来传染病入境提供技术储备,也为尚未传入的传染病免疫试剂盒评价方法提供了参考依据。     

关于血液制品灭活试验的指示病毒及灭活指标问题的商榷

<正>一、血液制品灭活的重要性和必要性 由于血液制品在急救、治疗和防病中具有良好的效用,在临床上已受到十分广泛的大量应用。对于皿液制品的高质量要求,特别是保证使用安全已成为当前大家所关注的首要问题。 制备血液制品的原料是人的血浆,因而通过血液传播的病原体特别是某些病毒是导致不安全的主要因素。自七十年代以后,人们先后发现大批量制备的未经病毒灭活的凝血因子Ⅷ制剂,使甲型血友病患者大多数感染了乙型肝炎、丙型肝炎或AIDS病。     

因子Ⅷ浓缩物的病毒灭活

<正>自六十年代后期以来,患血友病A的病人用血浆浓缩物进行治疗,在以后的二十年中,以冷沉淀为原料提制的几种中间体以及高度纯化制品的各种类型浓缩物已被使用。最近,应用免疫吸附剂获得的高纯因子Ⅷ浓缩物已制备出来 表1概括了因子Ⅷ浓缩物在质量上的进展。为急需提高浓缩物的质量,则要求减少异源蛋白质的含量,依据一些体外研究报道此异源蛋白质可引起免疫抑制。此外,自1984年以来尽管所有的血浆衍生物均经过了病毒灭活过程。这些高纯浓缩物也还要求尽可能减少病毒污染。     

我国西尼罗病毒和Tahyna病毒的发现与流行

已发现100余种蚊传虫媒病毒在世界各地流行,其引发的人兽共患病是全世界关注的公共卫生问题。长期以来我国仅发现乙型脑炎和登革热两种蚊传虫媒病毒病,但近年来新发现西尼罗病毒和Tahyna病毒及其感染疾病流行。从我国新疆维吾尔自治区采集的蚊虫标本中分离到西尼罗病毒,大量血清学研究证明当地不仅存在西尼罗病毒感染所致疾病,还发生过西尼罗病毒感染引发的病毒性脑炎流行。目前已从新疆维吾尔自治区、青海省和内蒙古自治区采集的蚊虫标本中分离到Tahyna病毒,并发现其在自然界动物中的循环和导致的人类感染流行。西尼罗病毒和Tahyna病毒及其相关感染性疾病的发现为我国虫媒病毒及虫媒病毒病的预防与控制提出了新的挑战。     

呼吸道合胞病毒IgG酶联检测试剂盒的研制

为了研制检测呼吸道合胞病毒IgG的酶联检测试剂盒,以呼吸道合胞病毒Long株病毒液作为包被抗原,HRP标记羊抗人IgG作为信号抗体,制备ELISA抗体检测试剂盒。结果表明建立的RSV酶联检测试剂盒敏感性与进口试剂盒接近,特异性达 95. 24%,重复性好,批内变异系数为 6. 35%,试剂盒置于 37℃ 0天与 7天检测结果无显著差异。成功制备了RSVIgG酶联检测试剂盒。     

西尼罗病毒及其所致疾病的研究现状

西尼罗病毒是一种蚊媒病毒,原发于非洲,后传播至欧洲以及西亚,主要在鸟类中传播,也可以感染其他一些哺乳动物(如马、人等)引发脑炎及脑膜炎等症,重者可致死亡.1999年传入北美,在美国纽约地区首次流行,2004年以来被感染的人及动物数量不断增加,分布范围不断扩大,形成了迄今为止西半球最大的虫媒病毒性脑炎的流行.     

加热灭活病毒的静脉注射免疫球蛋白的研究

<正>静脉注射免疫球蛋白(IVIG)的研究已有30多年的历史,能够大量供临床应用还是近十几年的事情。自1987年以来,我国的IVIG研究发展很快,已有较大规模生产条件问世,并已在加紧研究灭活病毒的新工艺。IVIG的出现,为需要大剂量注射免疫球蛋白的病人带来了许多好处和方便。但随之也不断出现因输注IVIG而发生非甲非乙肝炎的报导。近年来,日本学者致力于灭活病毒的IVIG-IH生产研究,并取得了成功。我有幸在1991年春赴日学习该技术,在导师指导下进行了VIG的提取及质量分析研究,现将结果介绍如下:     

亚甲蓝光化学法灭活新鲜冰冻血浆病毒及其效果评价

目的:探讨以亚甲蓝光化学法(MB-P)灭活新鲜冰冻血浆病毒及其效果。方法:选取2013年3月-2016年11月来青海省血液中心无偿献血者捐献的400 mL全血共1500份,分离新鲜冰冻血浆200 mL后,再分为两份即对照组和观察组各100 mL,各1500份。对照组不经灭活,实验组经MB-P病毒灭活。比较两组的纤维蛋白原(FIB)、总蛋白(TP)、凝血因子VⅢ(FVⅢ)及白细胞(WBC)的含量。再随机抽取500例接受了上述病毒灭活血浆输注的患者,观察其输血反应的发生情况。结果:观察组的FIB和TP含量及FVⅢⅠ活性比对照组有所降低,但差异不具有统计学意义(P0.05);观察组的WBC含量较对照组明显降低,且具有统计学差异(P0.05);FIB、TP、FVⅢⅠ的回收率的分别为85.43%、91.08%和80.49%,WBC的残留率为0.21%;500例接受了上述病毒灭活血浆输注的患者中,有1例出现发热症状。结论:经MB-P灭活病毒血浆的有效成分含量较高,符合国家相关标准,并且WBC含量和输血不良反应发生率均较低,满足临床安全输血的要求,但仍需严格要求血液收集和血浆病毒灭活的操作过程并严格掌握输血适应症,避免人为造成的输血风险。