五味子脂A联合卡铂对人卵巢癌Skov3细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用及其机制

目的：探讨五味子脂A （GA）与卡铂（CBP）联用对人卵巢癌Skov3细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用及其机制,阐明GA的协同抑瘤作用。方法：采用不同浓度GA与CBP单独或联合对卵巢癌Skov3细胞株进行干预,MTT法检测细胞增殖抑制率,根据其结果选择GA和CBP合适浓度。实验分为对照组、GA （0.04 μmol· L^-1）组、CBP （16mg· L^-1）组、GA （0.04 μmol·L^-1）联合CBP （16mg·L^-1）组（GA+CBP组）,药物处理48h后,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,RT-PCR法检测各组细胞中基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9） mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中MMP-2、MMP-9、AKT1和pAKT1蛋白表达水平。结果：与GA组和CBP组比较,GA＋CBP组细胞增殖抑制率明显升高（P<0.01）,且GA和CBP浓度分别为0.04 μmol·L^-1、16 mg·L^-1时量效比最佳。克隆形成实验,与对照组比较,CBP组和GA+CBP组Skov3细胞克隆形成率均降低（P<0.05或P<0.01）;GA+CBP组Skov3细胞形成率明显低于GA组和CBP组（P<0.01）。细胞划痕实验,与对照组比较,GA组和CBP组Skov3细胞迁移的数量减少;GA+CBP组细胞迁移的数量明显低于GA组和CBP组。Transwell实验,与对照组比较,GA组和CBP组Skov3细胞穿过细胞外基质（ECM）的能力降低;与GA组和CBP组比较,GA+CBP组Skov3细胞穿过ECM的能力降低。RT-PCR法,与GA组和CBP组比较,GA+CBP组Skov3细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA表达水平明显降低（P<0.01）;Western blotting法,与GA组和CBP组比较,GA+CBP组Skov3细胞中MMP-2、MMP-9、AKT1和pAKT1蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。结论：GA可增强CBP抑制人卵巢癌Skov3细胞增殖、侵袭和转移的能力,从而发挥化疗的减毒增效作用。     

褪黑素联合卡铂对卵巢癌SKOV3细胞体外增殖及凋亡的影响

目的: 探讨褪黑素(MLT)、卡铂(CBP)单独及联合应用在体外对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,阐明MLT和CBP的药物协同作用。 方法: 将体外培养的人卵巢癌SKOV3细胞分为空白对照组、MLT组(1和2 mmol·L^-1)、CBP组(12.5、25.0和50.0mg·L^-1)、联合用药组(不同浓度MLT及CBP联合用药)。应用MTT比色法、流式细胞术(FCM)测定各组SKOV3细胞的增殖抑制率及凋亡情况,并应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定各组SKOV3细胞中Bcl-2和Bax基因表达水平。 结果: MTT法检测,联合用药组SKOV3细胞增殖抑制率高于MLT组,且高于 50.0mg·L^-1CBP组,差异有统计学意义(P<0.05), 2 mmol·L^-1MLT联合50mg·L^-1CBP 组效果最佳,增殖抑制率为(70.7±4.2)%;与双倍浓度CBP组比较,联合用药组SKOV3细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05)。流式细胞术检测,联合用药组SKOV3细胞凋亡率高于MLT组,且高于50.0mg·L^-1CBP组,差异有统计学意义(P<0.05), 2mmol·L^-1MLT 联合50mg·L^-1CBP组SKOV3细胞凋亡率为(58.9±2.0)%;与双倍浓度CBP组比较,联合用药组SKOV3细胞凋亡率明显增高(P<0.05)。与同浓度CBP组比较,联合用药组SKOV3细胞中Bax基因表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2基因表达水平明显降低(P<0.05)。 结论: MLT可增强CBP在体外对卵巢癌SKOV-3细胞的增殖抑制作用及促凋亡作用,通过增强Bax基因表达及下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡。     

乳胞素联合卡铂对卵巢癌SKOV3细胞的增殖抑制作用和促凋亡作用

目的：探讨蛋白酶体抑制剂乳胞素（LAC）对体外卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法：体外培养卵巢癌SKOV3细胞,采用0、2.5、5.0、10.0和20.0μmol·L^-1 LAC干预SKOV3细胞48 h,5μmol·L^-1 LAC干预SKOV3细胞0、24、48和72 h;将细胞分为对照组（细胞不经药物干预）、LAC组（加入5μmol·L^-1 LAC）、卡铂组（加入10、20、40及80μmol·L^-1卡铂）和LAC联合卡铂组（加入5μmol·L^-1 LAC和10、20、40、80μmol·L^-1卡铂）。采用MTT法和流式细胞术（FCM）检测各组卵巢癌SKOV3细胞的增殖抑制率和凋亡率。结果：MTT检测,随着LAC作用时间的延长和浓度的升高,SKOV3细胞的增殖受到明显抑制,48 h时LAC的半数抑制浓度（IC₅₀）为5.36μmol·L^-1;LAC联合卡铂组细胞的增殖抑制率较相同浓度卡铂组明显升高（P<0.05）,卡铂的IC₅₀由58.08μmol·L^-1下降至18.37μmol·L^-1。FCM检测,随着LAC作用时间的延长,SKOV3细胞凋亡率呈升高趋势;与卡铂组和LAC组比较,LAC联合卡铂组SKOV3细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。结论：LAC可有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的体外增殖且能诱导其凋亡,并可以明显增强卡铂对卵巢癌SKOV3细胞株的增殖抑制作用。     

人绒毛膜促性腺激素对顺铂介导的卵巢癌3AO细胞凋亡的影响

目的 分析HCG对卵巢癌细胞株3AO凋亡的影响，探讨HCG在卵巢癌发生发展中的作用。方法 首先用顺铂诱导3AO细胞凋亡，然后在顺铂处理前后用不同浓度的HCG作用48h，采用丫啶橙(AO)和溴化乙锭(EB)荧光双染色法对凋亡细胞计数。结果 HCG能抑制3AO细胞凋亡，而且这种抑制作用具有浓度依赖性，随着HCG浓度的增加抑制作用加强。结论 HCG可以通过抑制顺铂介导的凋亡而影响卵巢癌细胞的化疗敏感性。     

丹皮酚协同顺铂对人卵巢癌细胞A2780s的增殖抑制及促凋亡作用

目的:探讨丹皮酚(Pae)单药及联合顺铂(CDDP)对人卵巢癌细胞A2780s的增殖抑制,凋亡诱导作用及对细胞周期分布的影响.方法:以不同浓度的Pae、CDDP和两药联合作用于人卵巢癌细胞A2780s,采用MTT法测定药物对体外培养的人卵巢癌细胞A2780s增殖的抑制作用,应用两药相互作用指数(CDI)进行联合用药分析...     

流式细胞术分析顺铂对人卵巢癌细胞系HO─8910细胞凋亡的诱导作用

流式细胞术分析顺铂对人卵巢癌细胞系ＨＯ┐８９１０细胞凋亡的诱导作用马向东陈必良叶永清郑维国王德堂（第四军医大学西京医院妇产科西安７１００３３）关键词细胞凋亡卵巢肿瘤流式细胞术顺铂中图号Ｒ７３７．３１细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是一种生理性细胞程序化...     

顺铂诱导人卵巢癌COC1,COC1／DDP细胞凋亡的研究

目的：探讨顺铂作用于卵巢癌细胞的作用机理。方法：通过电镜,光镜,流式细胞仪等方法观察顺铂诱导人亲代和耐药卵巢癌细胞ＣＯＣ１、ＣＯＣ１／ＤＤＰ凋亡,进行细胞周期分析及计算凋亡率。结果：顺铂引起细胞Ｓ期增多、Ｓ期细胞凋亡,ＣＯＣ１,ＣＯＣ１／ＤＤＰ细胞凋亡率不同,结论：顺铂药理机制之一是诱导细胞凋亡,耐药与凋亡减少有关。     

抑制ClC-3表达对顺铂诱导人卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的促进作用

目的：探讨抑制氯离子通道-3(ClC-3)基因表达对顺铂(DDP)诱导的人卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的促进作用,为卵巢癌的治疗提供实验依据。方法：转染pSH1-siRNA-ClC-3 重组质粒至人卵巢癌SKOV3/DDP细胞,Western blotting方法检测转染重组质粒对ClC-3蛋白表达的影响;MTT法检测细胞增殖率;Western blotting方法检测凋亡相关蛋白细胞色素C（Cyt-c）及Caspase-3活化片段蛋白表达。结果：与SKOV3细胞比较,SKOV3/ DDP细胞中ClC-3蛋白表达水平增加( P<0.05);转染pSH1-siRNA-ClC-3 重组质粒后,SKOV3/DDP细胞ClC蛋白表达水平明显降低;ClC-3-siRNA联合DDP作用后,SKOV3/DDP细胞增殖率下降( P<0.05),Cyt-c和Caspase-3活化片段蛋白表达水平增加( P<0.05) 。结论：pSH1-siRNA-ClC-3可有效抑制SKOV3/DDP细胞ClC-3蛋白的表达,并促进DDP诱导SKOV3/DDP细胞凋亡。     

小鼠IL-12基因转染对人卵巢癌Skov3细胞的生长及细胞因子的表达

目的:观察含小鼠IL-12全长基因的质粒转染到Skov3人卵巢癌细胞中,在脾细胞存在的情况下对肿瘤细胞的影响及相关细胞因子的表达. 方法:脂质体转染技术将基因转染至Skov3人卵巢癌细胞中,ELISA方法检测IL-12及INF-γ的表达,MTT方法检测对Skov3卵巢癌细胞增殖的影响. 结果:转染后48 h检测到IL-12的高表达,约(473±38) ng/L;而未转染组约13～17 ng/L,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05). 在脾细胞作用下产生INF-γ,以作用后24 h表达量高,约(173±18) ng/L,较未转染组高,比较有统计学意义(P＜0.05). 转染后癌细胞免疫组化可见IL-12表达,在脾细胞的作用下,IL-12对Skov3卵巢癌细胞有抑制其增殖的作用(P＜0.05). 结论:可以将IL-12基因转染至Skov3人卵巢癌细胞中并表达IL-12,脾细胞检测其活性并有相应的细胞因子产生,对Skov3细胞有抑制其增殖作用,从而杀伤卵巢癌细胞,具有抗肿瘤作用.     

Genistein对人卵巢癌细胞系3AO抑制增殖的作用及机制的探讨

目的:研究植物雌激素染料木黄酮对人卵巢癌细胞系3AO细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用,探讨其抗癌作用的机制. 方法:应用MTT法检测不同浓度染料木黄酮对3AO细胞的生长抑制作用,电镜观察药物作用后细胞的超微结构改变,TUNEL法确定凋亡,流式细胞仪检测细胞周期、定量分析凋亡,免疫细胞化学技术检测雌激素β受体的表达. 结果: 3AO细胞经不同浓度染料木黄酮处理后,细胞生长明显受到抑制,且这种抑制作用随时间延长及浓度增高而增强,10 mg/L和20 mg/L染料木黄酮作用72 h后,抑制率分别达到54.24%和65.99%. 染料木黄酮阻断3AO细胞生长于G2/M期,在G0/G1前出现典型亚二倍体凋亡峰,且凋亡呈时间依赖性. 电镜观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征. TUNEL法观察到大量阳性凋亡细胞. 免疫细胞化学法检测到用药后,ERβ表达明显加强. 结论:染料木黄酮对3AO细胞的生长有明显的呈时间及浓度依赖性的抑制作用,并诱导其发生凋亡. 染料木黄酮可能通过雌激素β受体途径发挥药理作用,诱导卵巢癌细胞发生凋亡.     

卡铂联合紫杉醇腹腔化疗对高级别浆液性卵巢癌的疗效

目的：研究卡铂联合紫杉醇腹腔化疗对高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）的疗效。方法：选取2015年1月至2019 年7月温州医科大学附属第一医院收治的110 例HGSOC患者,根据治疗方式不同分为卡铂联合紫杉醇静脉化疗组（A组）34例,卡铂联合紫杉醇腹腔化疗组（B组）30例,顺铂联合紫杉醇腹腔化疗组（C组）28例,传统化疗药（环磷酰胺、阿霉素等）静脉化疗组（D组）18例。比较各组患者生存情况及不良反应,评判卡铂联合紫杉醇腹腔化疗治疗HGSOC的实用性、有效性与安全性。结果：A组、B组、C组5年生存率较D组均显著增高,组间差异有统计学意义（P ＜0.05）;B组、C组3年生存率亦较D组增高,组间差异有统计学意义（P ＜0.05）;而A组、B组、C组间3年、5年生存率差异均无统计学意义（P ＞0.05）。4组间III、IV级骨髓抑制的发生率差异均无统计学意义（P ＞0.05）。III、IV级胃肠道反应与腹痛发生情况：C组、D组分别与A组、B组比较,差异均有统计学意义（P ＜0.05）,但A组与B组间、C组与D组间差异无统计学意义（P ＞0.05）。4组间皮疹发病率差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论：卡铂联合紫杉醇腹腔化疗可以延长HGSOC患者的生存时间,提升临床治疗效果,且不良反应较小。     

SPHK1基因对上皮性卵巢癌细胞恶性行为影响及相关机制初步探讨

目的 探讨鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,SPHK1)对上皮性卵巢癌细胞生物学行为改变的作用及其相关机制,通过本研究,可为上皮性卵巢癌的早期诊断、预后、耐药治疗、靶向治疗等提供新的依据。方法 通过小干扰RNA(siRNA)转染SKOV3细胞干扰SPHK1基因表达后,检测SPHK1表达的高低对于细胞增殖力、细胞克隆形成力以及对于顺铂的敏感性的改变,并检测对于相关干细胞标记物NANOG,耐药相关基因MDR1的表达情况的影响。结果 SPHK1基因的表达降低会引起上皮性卵巢癌细胞增殖力的降低、克隆形成力的降低,以及对顺铂的敏感性的增加,影响上皮性卵巢癌细胞中NANOG、MDR1的表达。结论 SPHK1可能通过NANOG的表达影响肿瘤干细胞的构成,从而影响上皮性卵巢癌细胞的恶性行为。     

杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡诱导作用

目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60 mg·L^-1。MTT法检测各组SKOV3细胞存活率;激光共聚焦显微镜观察各组SKOV3细胞核形态变化并计算异常细胞核比率;免疫荧光法检测各组SKOV3细胞中凋亡相关蛋白-活化半胱氨酸蛋白酶3(active Caspase-3)的表达;Western blotting法检测各组SKOV3细胞中DNA损伤相关蛋白γ-H₂AX的表达水平。结果:与对照组比较,低、中和高浓度杨梅素组SKOV3细胞存活率明显下降(t=-12.35,t=-11.42,t=-10.21,P<0.05);激光共聚焦显微镜下各浓度杨梅素组细胞出现核皱缩等凋亡形态学改变,且细胞中异常细胞核比率高于对照组(t=6.87,t=9.35,t=7.22,P<0.05),高浓度杨梅素组异常细胞核比率高于低、中浓度杨梅素组(t=9.55,t=7.25,P<0.05);随着杨梅素给药浓度的增加,SKOV3细胞中active Caspase-3的表达水平有升高趋势,各浓度杨梅素组SKOV3细胞中γ-H₂AX的表达水平高于对照组(t=5.41,t=3.21,t=6.58,P<0.05)。结论:杨梅素可抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡,DNA双链断裂可能是其促凋亡的机制之一。     

吉西他滨联合卡铂在复发性上皮性卵巢癌治疗中的应用

目的探讨吉西他滨联合卡铂治疗复发性上皮性卵巢癌的有效性和不良反应。方法对76例复发性上皮性卵巢癌患者应用吉西他滨1 000 mg/m2,第1天和第8天静脉滴注;CBP浓度-时间曲线下面积(AUC)=5,第1天静脉滴注;21天为一个疗程。依据世界卫生组织实体瘤疗效评估标准和国际妇科肿瘤学会卵巢癌疗效判断标准进行疗效评定,并观察化疗后不良反应。结果 76例患者中,完全缓解21例(27.63%),部分缓解36例(47.37%),稳定13例(17.11%),进展6例(7.89%);治疗总有效率75.0%(57/76)。患者无进展生存期平均为4.1个月(2～10个月)。化疗后第8天,中性粒细胞减少、血小板减少、红细胞减少、消化道不良反应的发生率分别84.21%、78.95%、26.32%和86.84%;其他不良反应的发生率均低于20%。无死亡病例。结论吉西他滨联合卡铂是治疗复发性上皮性卵巢癌的有效方案,临床疗效较好,安全性高,其不良反应可控制,患者可耐受。