中药四毒清抑制LPS性肾脏损伤的机制研究

目的：研究中药复方四毒清防治内毒素性肾功能衰竭的作用机制。 方法： 将小鼠随机分成对照组、LPS组、四毒清防治组和四毒清组，用水（0.2 mL/10 g BW）或四毒清（1 000 g/L, 0.2 mL/10 g BW）灌胃3 d，每天2次, 第3 d灌胃后2 h，腹腔注射LPS(30 mg/kg，0.2 mL/10 g BW)或生理盐水（0.2 mL/10 g BW），腹腔注射后2 h，再用水或四毒清（0.2 mL/10 g）灌胃1次。测定各组小鼠血清肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的含量，观察肾脏超微结构，肾组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化， 并用半定量RT-PCR方法测定肾组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1) mRNA的表达。 结果： LPS引起小鼠血清Cr和BUN含量明显升高，肾脏近曲小管出现明显病理改变。四毒清有效降低LPS攻击小鼠血清Cr和BUN的含量，明显减轻近曲小管的损伤。LPS组小鼠肾组织MDA含量和ICAM-1 mRNA的表达显著高于对照组，而四毒清防治组肾组织MDA含量和ICAM-1 mRNA的表达明显低于LPS组，四毒清处理能显著升高肾组织SOD的活性。 结论： 中药四毒清防治内毒素性肾功能衰竭的作用机制与其升高肾组织SOD的活性、减轻肾组织氧化损伤并抑制肾脏ICAM-1 mRNA的表达有关。     

急性肝功能衰竭小鼠肠屏障功能障碍的实验研究

目的探讨急性肝功能衰竭时肠屏障功能的变化。方法腹腔注射D-氨基半乳糖（D-GalN,700mg/kg）/内毒素（LPS,10μg/kg）建立小鼠急性肝功能衰竭模型,造模6h后测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）的活性,取肠内容物及肝组织进行细菌培养,同时检测肠组织二胺氧化酶（DAO）的活性。结果腹腔注射D-GalN/LPS6h后,小鼠血清中ALT、AST活性显著提高（P〈0.01）;肠道内肠杆菌、肠球菌数量明显上升（P〈0.01）,乳酸杆菌、双歧杆菌数量明显下降（P〈0.05）;肠组织DAO活性明显降低（P〈0.01）;肝脏细菌培养阳性率达100%。结论急性肝功能衰竭时肠屏障明显受损,并发生菌群失调及细菌易位。     

钩藤碱降低内毒素血症小鼠死亡率的机制研究

目的： 观察钩藤碱对内毒素血症小鼠死亡率及器宫损伤的影响，并探讨其作用机制。方法: 雄性小鼠随机分为对照组、脂多糖（LPS）组、钩藤碱（Rhy）防治组和Rhy对照组，分别予以生理盐水、Rhy皮下注射，1 time/d，连续3 d，第3 d皮下注射后1 h，腹腔注射生理盐水或LPS（20 mg/kg）。观察各组小鼠的死亡率，肺、小肠组织病理改变；测定注射LPS后12 h各组肺湿/干重比值 (W/D)及血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）的水平；用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）及白细胞介素-10（IL-10）的含量，用硝酸还原酶法试剂盒测定血清一氧化氮（NO）的含量。进一步复制盲肠结扎穿孔的脓毒症模型， 观察钩藤碱对脓毒症小鼠生存率的影响。结果: LPS攻击后24 h小鼠的生存率明显低于对照组，8、16 mg/kg的钩藤碱防治组小鼠生存率高于LPS组。但钩藤碱并不能降低CLP小鼠的死亡率，而且，8 mg/kg钩藤碱治疗组小鼠的死亡率反而高于CLP小鼠的死亡率。LPS攻击后12 h病理检查发现LPS组小鼠肺及小肠组织均有严重的炎症表现；肺W/D、血清ALT、AST、BUN、Cr水平显著高于对照组；LPS攻击后2 h血清TNF-α、IL-1β及IL-10含量及8 h血清NO水平显著高于对照组。LPS攻击后12 h， Rhy防治组肺及小肠组织损伤无明显改善；肺W/D、血清ALT、AST、BUN、Cr水平与LPS组比较无显著差异；LPS攻击后2 h血清TNF-α水平显著低于LPS组，但2 h血清IL-1β及IL-10含量及8 h血清NO水平与LPS组比较无显著差异。结论: 钩藤碱能降低内毒素血症小鼠的死亡率，但不能降低脓毒症小鼠的死亡率，抑制TNF-α的生成可能是钩藤碱降低内毒素血症小鼠死亡率的机制之一。     

小檗碱通过非α_2肾上腺素能受体途径减轻LPS诱导的心功能障碍

目的:观察小檗碱(Ber)预防内毒素血症小鼠心功能障碍的作用机制是否与其激活α2肾上腺素能受体有关,并探讨中性粒细胞在其中的作用。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为对照组(control)、脂多糖组(LPS)、小檗碱+LPS组(Ber+LPS)、α2肾上腺素能受体拮抗剂育亨宾+小檗碱+LPS组(Yohimbine+Ber+LPS)、育亨宾+LPS组(Yohimbine+LPS)、小檗碱组、育亨宾+小檗碱(Yohimbine+Ber)组和育亨宾(Yohimbine)组,分别用蒸馏水,小檗碱(50 mg/kg),育亨宾+小檗碱(2 mg/kg+50 mg/kg)或育亨宾(2 mg/kg)灌胃,每天1次,连续3d,第3 d灌胃后1 h,腹腔注射生理盐水或LPS(20 mg/kg)。观察注射LPS后12 h各组小鼠心肌组织结构的改变,用VisualSonies Vevo770TM高分辨小动物超声系统测定小鼠的心功能,并用Western blotting方法测定LPS注射后0.5 h心肌髓过氧化物酶(MPO)的含量。结果:LPS注射后12 h,LPS组小鼠心肌组织出现明显水肿。小檗碱、育亨宾、小檗碱+育亨宾组小鼠心肌的病理改变明显轻于LPS组。超声心动图检测显示,LPS组小鼠心输出量(CO)和每搏量(SV)均显著低于对照组、小檗碱、育亨宾、小檗碱+育亨宾组。腹腔注射LPS后0.5 h,LPS组心肌MPO的含量显著高于对照组,小檗碱、育亨宾+小檗碱组心肌MPO的水平显著低于LPS组,而育亨宾组心肌MPO的含量与LPS组没有显著差别。结论:小檗碱预处理能够减轻内毒素血症小鼠的心功能障碍,其作用机制与其激活α2肾上腺素能受体和抑制LPS引起的心肌中性粒细胞浸润无关,体内α2肾上腺素能受体激活可能在LPS引起的心功能障碍中发挥重要作用。     

当归(粗)多糖对麻黄素肝组织损伤的保护作用

目的 探讨当归多糖对麻黄素致肝损伤的保护作用。 方法 72只小鼠分为正常对照组、实验对照组、当归多糖1组和当归多糖2组4个组,实验对照组和当归多糖组连续腹腔注射0.2ml浓度为4.0g/L麻黄素溶液15d(每天2次),正常对照组注射等量生理盐水,当归多糖1组和2组在腹腔注射麻黄素溶液1h后,灌胃0.3ml(12.5g/L、25.0g/L)当归（粗）多糖溶液,正常对照组和实验对照组灌胃等量的生理盐水。分别于5、10、15d用光学显微镜技术观察各组小鼠肝组织结构的变化,用比色法检测小鼠血浆γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的变化,用免疫组织化学方法检测小鼠肝组织Bax蛋白、Csapase-3蛋白表达的变化。 结果 实验对照组小鼠肝组织有不同程度的损伤,肝细胞索排列紊乱,肝细胞疏松,肝血窦扩张,血浆γ-GT、AKP、ALT、AST活性明显升高,肝组织SOD活性显著降低,MDA含量显著升高,Bax、Caspase-3蛋白的表达显著升高;当归多糖组小鼠肝组织病理损伤明显减轻,血浆γ-GT、AKP、ALT、AST活性明显降低,肝组织SOD活性明显升高,MDA含量显著降低,Bax、Caspase-3蛋白的表达有所降低。 结论 当归（粗）多糖可提高肝组织细胞的抗氧化能力,抑制细胞凋亡,促进组织细胞损伤修复,对麻黄素致肝损伤具有一定的保护作用。     

肾上腺素对内毒素致大鼠炎症性肝损害的保护作用

目的 探讨肾上腺素（Epi）对内毒素（脂多糖，LPS）致大鼠炎症性肝损害的保护作用及其作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为5组（每组各10只）：对照组：静脉滴注生理盐水2．4mL·kg^-1·h^-1；LPS组：静脉注射LPS6mg·kg^-1后，静脉滴注生理盐水2．4mL·kg^-1·h^-1；低、中和高剂量Epi组：静脉注射LPS6mg·kg^-1后，分别静脉滴注Epi0．12、0．3和0．6μg·kg^-1·min^-1。在LPS注射前、注射后2和6h3个时点取血，检测血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-10水平，并在6h时点观察肝脏的组织病理学改变。结果 LPS组注射LPS后2、6h血清AST和ALT水平较对照组显著升高。同时血清TNF-α、IL-1β和IL-10水平亦较对照组显著升高（P〈0．05）。病理检查结果示：LPS组肝窦扩张、充血，局灶性肝细胞坏死。高剂量Epi可显著降低血清AST和ALT水平，减轻肝脏病理损伤，并显著可降低TNF-α水平和升高IL-10水平（1）8LPS组，P均〈0．05），但对IL-1β水平无影响。中、低剂量Epi对LPS致炎症性肝损害无明显保护作用。结论 Epi可通过抗炎作用减轻LPS诱导的炎症性肝损害。     

早期胰岛素泵注对脓毒症大鼠肝损害的影响

目的探讨早期胰岛素泵注对脂多糖（LPS）致大鼠脓毒症模型肝损害的保护作用。方法24只SD大鼠随机分为LPS＋生理盐水组、LPS＋胰岛素组和生理盐水对照组,各组均为8只。各组大鼠在实验前1d行右颈外静脉置管术。LPS＋生理盐水组腹腔注射LPS10mg·kg^-1,同时持续静脉泵注生理盐水1mL·h^-1;LPS＋胰岛素组腹腔注射LPS10mg·kg^-1,同时持续静脉泵注胰岛素生理盐水溶液1mL·h^-1（胰岛素用量为0．25U·kg^-1·h^-1）。生理盐水对照组腹腔注射生理盐水10mg·kg^-1,同时持续静脉泵注生理盐水1mL·h^-1。测定各组腹腔注射LPS或生理盐水前和注射后2、6、12、24h的血糖水平,检测各组腹腔注射LPS或生理盐水后2、6h的血清TNF-α、IL-6水平及24h的血清ALT和AST水平,并观察各组腹腔注射LPS或生理盐水后24h的肝脏组织病理学改变。结果LPS＋生理盐水组在腹腔注射LPS后各采样时间点,血糖水平较生理盐水对照组均显著升高（P〈0．05）。注射LPS或生理盐水后2和6h,LPS＋生理盐水组血清TNF-α和IL-6水平显著高于生理盐水对照组（P〈0．05）。注射LPS或生理盐水后24h,LPS＋生理盐水组血清ALT和AST水平均较生理盐水对照组显著升高（P〈0．05）。LPS＋胰岛素组注射LPS后各采样时间点血糖、TNF-α、IL-6、ALT及AST水平均显著低于LPS＋生理盐水组（P〈0．05）,LPS＋生理盐水组肝脏病理学检查示局灶性肝细胞坏死,炎性细胞浸润,小叶间静脉充血扩张;LPS＋胰岛素组肝脏病理学改变较LPS＋生理盐水组明显减轻。结论早期胰岛素静脉泵注可通过抗炎和降低应激性高血糖作用减轻LPS诱导的肝损害。     

沙棘多糖对扑热息痛诱导的小鼠肝损伤保护作用的研究

目的：研究沙棘多糖（SP）对扑热息痛（APAP）诱导的小鼠急性肝损伤组织的保护作用和机制。方法：C57BL/6雄性小鼠随机分为6组：空白组（Ctrl）,APAP模型组（APAP,350 mg/kg),N-乙酰半胱氨酸组（NAC,150 mg/kg）,SP低剂量组（APAP/SP100,100 mg/kg）,SP高剂量（APAP/SP200,200 mg/kg）,SP对照组（SP200,200 mg/kg）,SP连续灌胃30 d,30 d后腹腔注射APAP建立急性肝损伤模型,NAC在造模前1 h腹腔注射,16 h后处死小鼠。收集血清检测AST、ALT指标,HE染色检测肝脏组织学变化,实时定量PCR检测肝组织炎症因子,Western blot检测TLR4和p-JNK表达。结果：SP降低了APAP诱导的AST和ALT水平,减轻了肝损伤,抑制了TLR4和p-JNK表达,降低了TNF-α和IL-6的水平。结论：SP通过抑制TLR4-p-JNK通路,减轻了APAP诱导的肝损伤。     

小檗碱和育亨宾对LPS诱导的小鼠肠道损伤和肠上皮细胞增殖抑制的影响

目的:观察小檗碱(Ber)和育亨宾(Y)对LPS诱导的小鼠肠道损伤和肠上皮细胞增殖抑制的影响。方法:雄性BALB/c小鼠随机分为对照组(control)、脂多糖组(LPS)、小檗碱组(Ber+LPS)、小檗碱与育亨宾合剂组(Ber+Y+LPS)、育亨宾组(Y+LPS)、小檗碱组(Ber)、小檗碱和育亨宾合剂组(Ber+Y)及育亨宾组(Y)。分别予以双蒸水、Ber(50mg/kg)、Ber(50mg/kg)+Y(2mg/kg)、Y(2mg/kg)灌胃,1time/d,连续3d,于实验第3d灌胃后1h,腹腔注射生理盐水或LPS(18mg/kg,0.2mL/10g)。观察各组小鼠肠组织形态学、肠黏膜重量和绒毛高度的改变;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定肠组织二胺氧化酶(DAO)含量;免疫组化染色方法分析各组肠组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:LPS组小鼠肠腔显示炎性渗出、出血;肠损伤评分明显高于对照组;LPS组肠黏膜重量、肠绒毛高度、肠组织DAO含量、肠上皮细胞PCNA表达明显低于对照组。与LPS组比较,Ber组、Ber+Y组上述改变明显减轻,但两组间未见明显差异;育亨宾对LPS引起的上述指标变化无明显抑制作用。结论:Ber通过非α2肾上腺素能受体依赖的途径减轻LPS引起的肠上皮细胞增殖抑制和肠道损伤。     

正正常肠淋巴液对内毒素休克小鼠多器官损伤的作用*

 目的： 观察正常肠淋巴液对内毒素休克小鼠肺、心、肝等器官损伤以及MAPK信号通路主要信号分子p38 MAPK、ERK1/2和JNK磷酸化水平的影响。方法: 引流18只BALB/c雄性小鼠正常肠淋巴液,去除细胞成分后用于内毒素休克的干预。18只小鼠均分为假休克组、内毒素休克组与肠淋巴液干预组（n=6）;腹腔注射脂多糖（LPS,35 mg/kg）,复制小鼠内毒素休克模型;在LPS注射60 min后,淋巴液干预组小鼠经股动脉注射正常淋巴液（全血量的1/15）;整个实验过程监测平均动脉血压（MAP）;在腹腔注射LPS后6 h或相应时点,心尖穿刺取血,检测反映心肌和肝细胞损伤的生化指标;同时,留取固定位置的肺、心肌和肝组织,部分观察组织形态,部分检测p38 MAPK、ERK1/2和JNK的磷酸化水平。结果: 内毒素休克组与肠淋巴液干预组小鼠在腹腔注射LPS后90 min多个时点的MAP显著低于假休克组,肠淋巴液干预组小鼠MAP在腹腔注射LPS后80 min、90 min、190 min、210 min、240 min、250 min、340 min、350 min和360 min显著高于内毒素休克组。假休克组小鼠肺、肝和心肌组织结构基本正常,内毒素休克组小鼠出现了一定的结构损伤,肠淋巴液干预组小鼠组织损伤较轻;内毒素休克组小鼠血浆AST、ALT和CK-MB活性高于假休克组,肠淋巴液干预组小鼠血浆CK-MB活性亦高于假休克组,AST和LDH-1活性低于内毒素休克组。注射LPS后6 h,小鼠肺组织p38 MAPK、ERK 1/2和JNK的磷酸化水平显著升高,心肌和肝组织的这些指标未见显著变化;输入正常肠淋巴液降低了内毒素休克小鼠肺组织p38 MAPK以及心肌组织p38 MAPK、ERK 1/2和JNK磷酸化水平。结论: 输入正常肠淋巴液可减轻内毒素休克小鼠的器官损伤,降低肺组织p38 MAPK磷酸化水平。     

Montelukast, a leukotriene receptor antagonist abrogates lipopolysaccharide-induced toxicity and oxidative stress in rat liver

Endotoxemia-induced hepatotoxicity is characterized by disturbed intracellular redox balance, excessive reactive oxygen species (ROS) generation inducing DNA, proteins and membrane lipid damages. In the present study, the protective effects of montelukast (MNT) against Escherichia coli lipopolysaccharides (LPS)-induced oxidative stress were investigated in rat liver. LPS (10 mg/kg, i.p.) was injected and the animals were sacrificed 6 h after LPS challenge. MNT (10 mg/kg) was administered orally for seven successive days before endotoxemia induction. Blood samples were withdrawn for assessing the activities of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALP), lactate dehydrogenase (LDH) and levels of serum total bilirubin, total protein, tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and interleukin 1β (IL-1β). Livers were dissected out and used for histological examination or stored for the determination of malondialdehyde (MDA), protein carbonyl content (PCC), reduced glutathione (GSH) levels, enzymatic activities of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px) and myeloperoxidase (MPO). Sepsis significantly increased ALT, AST, ALP, LDH, total bilirubin, TNF-α and IL-1β, MPO, MDA and PCC levels and decreased total protein, GSH and enzymatic antioxidants (CAT, SOD and GSH-Px). MNT decreased the markers of liver injury (AST, ALT, ALP, LDH, and total bilirubin), inflammatory biomarkers (TNF-alpha, IL-1β), MDA, PCC and MPO after LPS challenge. In conclusion, MNT abrogates LPS-induced markers of liver injury and suppresses the release of inflammatory and oxidative stress markers via its antioxidant properties and enhancement enzymatic antioxidant activities.     

蜂胶黄酮对卡介苗联合脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的 探讨蜂胶黄酮(PF)对卡介苗(BCG)与脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤的作用.方法 除正常对照组外,采用BCG和LPS诱导小鼠建立免疫性肝损伤模型,随机分为5组,药物实验组分别用300 ms/ks、150 mg/ks、75 mg/ks的蜂胶黄酮干预后,计算肝指数;检测血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(...     

Misoprostol decreases oxidative stress and liver injury in bacterial lipopolysaccharide-induced endotoxemia in mice

The effect of misoprostol, a synthetic prostaglandin E1 analog, on the development of oxidative stress induced in mice with lipopolysaccharide (LPS) endotoxin was investigated. Misoprostol was administered by intraperitoneal route (i.p.) at doses of 10, 100, or 1,000 μg/kg at the time of LPS injection (200 μg/kg, i.p.). Mice were euthanized 4 h later. Lipid peroxidation (malondialdehyde; MDA), reduced glutathione (GSH), nitric oxide (nitrite/nitrate) levels as well as paraoxonase activity were measured in brain and liver. Aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) activities as well as DNA fragmentation were determined in the liver. The administration of LPS increased oxidative stress both in the brain and liver tissue. There were significantly increased MDA and nitrite and decreased GSH and PON1 activity in the brain and liver, respectively. In addition, LPS was associated with markedly elevated plasma ALT and AST level as well as increased liver DNA fragmentation. The administration of misoprostol at 100 or 1,000 μg/kg decreased brain MDA by 17.6 and 30 %, increased GSH by 29.8 and 33.3 %, and decreased nitric oxide by 21.74 and 42.5 %, respectively, compared with the lipopolysaccharide control group. Liver MDA decreased by 27 %, GSH increased by 47.7 %, and nitric oxide decreased by 37.2 % with misoprostol at 1,000 μg/kg. Paraoxonase activity increased in both the brain and liver by misoprostol administration. The increase in liver AST and ALT and DNA fragmentation after endotoxin administration was normalized by misoprostol. These results indicate that misoprostol can alleviate oxidative stress in the presence of a mild systemic inflammatory illness, indicating a new and potentially important therapeutic application for the drug.     

原卟啉钠对急性肝损伤小鼠肝组织SOD、MDA的影响

 目的 探讨原卟啉钠对四氯化碳（CCl4）致急性肝损伤小鼠血清转氨酶和肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的影响。方法 60只ICR小鼠随机分为正常对照组、CCl4模型组、联苯双酯组、原卟啉钠低、中、高剂量组。各治疗组每天灌胃给药及造模16h后,摘眼球取血测定血清中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性,剖腹取肝测定肝脏SOD活力和MDA含量。结果 CCl4模型组小鼠血清ALT和AST活力分别为（1879±1219）、（2210±1585）U/L,与正常对照组比较,降低显著（P<0.01）;联苯双酯组、原卟啉钠低、中、高剂量组的SOD活力和MDA含量分别为（207.61±16.02）、（184.35±13.42）、（190.88±17.77）、（199.38±14.43）U/mgprot和（1.08±0.15）、（1.35±0.26）、（1.07±0.16）、（0.92±0.18）nmol/mgprot,与CCl4模型组比较,差异有统计学意义（P<0.05～P<0.01）。结论 原卟啉钠能有效阻止CCl4致急性肝损伤小鼠肝组织SOD活性降低,脂质过氧化产物MDA含量升高,具有一定的保肝降酶作用。     

酸性成纤维细胞生长因子复方保存液对大鼠肝脏低温保存的作用

目的: 探讨人酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对离体大鼠肝脏低温保存的效果。方法: 24只Wistar大鼠随机分为高渗枸橼酸盐腺嘌呤(HCA)液对照组和aFGF复方保存液(HCA液中含aFGF_14-154 40 μg/L)实验组,分别用HCA液和aFGF复方保存液进行肝脏离体灌注,并低温保存肝脏。12和24 h后,测定肝脏保存前后的重量、肝组织丙二醛(MDA)含量及肝保存液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性的变化,并检查肝组织病理学改变。结果: 离体肝脏低温保存24 h后,aFGF复方保存液组肝脏重量差、ALT、AST和MDA水平均明显低于HCA对照组 (P<0.05);肝脏病理学检查结果显示,aFGF复方保存液组肝组织损伤明显减轻。结论: aFGF复方保存液对肝脏的低温保存效果较单纯HCA液更明显,其机制可能与aFGF参与抑制细胞肿胀和抗氧化损伤作用有关。     

小檗碱抗小鼠脂多糖性肺损伤的作用机制

目的：探讨小檗碱(Ber)对抗脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法：雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、ALI组和Ber防治组，分别予以双蒸水、Ber(50 mg/kg)灌胃，1次/d，连续3 d，于实验第3 d灌胃后1 h，腹腔注射生理盐水或LPS (20 mg/kg)。测定各组12 h肺湿/干重比值(W/D)，肺泡灌洗液(BALF)中微量总蛋白含量、白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN)总数；观察肺组织病理改变及磷酸化胞浆型磷脂酶A₂(cPLA₂)在肺组织中的表达。进一步用酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中血栓素B₂(TXB₂)的含量，并测定肺组织丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果：ALI组，LPS 攻击后12 h肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC 及PMN总数显著高于对照组(P<0.05)；病理检查发现肺间质充血、水肿，大量炎性细胞浸润。免疫组织化学观察显示肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显增加；同时，BALF中TXB₂含量、肺组织MDA的含量显著高于对照组(P<0.05)。Ber防治组，肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC及PMN总数均明显低于ALI组；与ALI组比较，Ber防治组肺组织病理损伤明显减轻(P<0.05)；而且，肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显减少 (P<0.05)； BALF中TXB₂含量和肺组织MDA的含量显著低于ALI组。结论：抑制肺组织cPLA₂的磷酸化并对抗脂质过氧化损伤可能是Ber防治小鼠脂多糖性肺损伤的重要机制。     

Protective effects of pirfenidone on D-galactosamine and lipopolysaccharide-induced acute hepatotoxicity in rats

OBJECTIVE AND DESIGN: To investigate the protective effects of pirfenidone on acute liver damage caused by D-galactosamine (GalN)/lipopolysaccharide (LPS) in rats. MATERIAL AND TREATMENT: Sprague-Dawley rats were divided into five groups (five rats per group): normal control group, GalN/LPS-treated group, and three pirfenidone-treated group (100, 300 and 500 mg/kg i.p., respectively). All biochemical and histological indexes were determined at 12 h after GalN/LPS challenge. METHODS: Severity of liver injury was assessed by determination of serum ALT, AST levels and histological analysis. SOD activity and MDA concentrations as well as TNF-alpha and IFN-gamma levels in the liver of rats were measured. The expression of iNOS and its product, NO concentration were also determined. RESULTS: Pretreatment with pirfenidone significantly attenuated GalN/LPS-induced severe hepatotoxicity, as evidenced by decreased ALT, AST levels and MDA content and improved histopathological changes. Pirfenidone inhibited the elevated levels of TNF-alpha and IFN-gamma and reduced the induction of iNOS/NO in a dose-dependent manner, which might be important mechanisms related to its protective effect. CONCLUSIONS: Pirfenidone can provide a definite protective effect against acute hepatic injury caused by GalN/LPS in rats, which may be mainly mediated through its anti-inflammatory effect.     

核黄素预处理减轻大鼠肝缺血再灌注损伤

目的: 探讨核黄素对肝缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法: 将24只SD大鼠随机分为3组,每组8只。假手术对照组(sham组)和缺血再灌注组(I/R组)大鼠喂以正常饲料,核黄素预处理组(R+I/R组)大鼠补充核黄素。喂养4周后,阻断大鼠肝门1 h,再灌注1 h建立I/R模型。术后采血并收集肝脏标本,分别检测血清及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平和血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性;蛋白印迹法检测肝组织血红素加氧酶-1(HO-1) 表达情况;HE染色观察肝组织病理学改变。结果: 与sham组比较,I/R组大鼠血清AST、ALT活性及MDA水平均明显升高,SOD活性显著降低(P<0.01);肝组织中SOD活性亦明显下降(P<0.01),MDA水平及HO-1蛋白表达则显著增高(P<0.05)。而R+I/R组较I/R组大鼠血清AST、ALT活性及MDA水平均明显下降,SOD活性显著增强(P<0.01);肝组织中MDA水平亦明显降低,SOD及HO-1蛋白表达显著增高(P<0.01)。组织切片显示I/R组大鼠肝细胞肿胀,炎症细胞浸润,小叶结构紊乱;R+I/R组大鼠肝细胞仅轻度肿胀,几乎无气球样变,小叶结构清晰。结论: 核黄素预处理对缺血再灌注肝脏具有显著的保护作用,其作用机制可能与核黄素通过降低MDA水平、提高SOD活性及HO-1蛋白表达,增强肝脏的抗氧化能力,减轻脂质过氧化反应有关。