利用激光共聚焦显微镜观察骨骼肌肌纤维中的钙火花现象

钙火花(Ca^2 sparks)现象是近年来在骨骼肌、心肌兴奋收缩偶联研究中发现的重要生理现象，但目前确切的机制还不清楚。我们利用激光扫描共聚焦显微镜对经Flou-3AM染色的人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析，在骨骼肌肌纤维中捕获到钙火花现象，并对钙火花现象的发生进行了初步探讨。     

用激光扫描共聚焦显微镜观察仙人掌提取物镇痛作用对小鼠脑细胞内钙离子的影响

根据荧光探针FLUO—3/AM能与活细胞内[C_a~(2+)]特异性结合后发出荧光的特性,将20只小白鼠随机分成给药组和对照组,给药组动物腹腔注射仙人掌(Opuntia Ailleii Haw)提取物使其产生镇痛作用,用FLUO—3/AM荧光探针对两组动物的脑细胞进行染色,利用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术分别对两组小鼠的脑细胞内[C_a~(2+)]的变化进行了观察研究,并用图像分析技术进行处理,进一步探讨仙人掌提取物镇痛作用的机制,实验结果表明：仙人掌提取物镇痛作用时,小鼠脑细胞内[C_a~(2+)]的平均荧光像素明显低于对照组(p＜0．001)。这说明仙人掌提取物能够降低小鼠脑细胞内[C_a~(2+)],证实了仙人掌提取物的镇痛机理与钙离子有关。     

激光扫描共聚焦显微镜在纳米毒理学研究中的应用

随着激光扫描共聚焦显微镜技术的不断更新,功能不断拓展,已成为新兴学科纳米毒理学及其交叉学科科学研究的重要工具.激光扫描共聚焦显微镜能够动态检测纳米颗粒在活细胞内的定位及其与细胞骨架、细胞内离子、生物大分子的相互作用,有助于深入研究纳米颗粒对机体的毒理学效应及其机制.     

激光共焦扫描显微镜及其在生物医学中的应用

本文介绍了激光共焦扫描显微镜的结构,分析了它的原理,研究了它的光学特性,并阐述了它在生物、医学上的应用,并给出了此系统的基本光学系统及其光路设计。     

牙体玻璃离子充填材料边缘微渗漏的激光扫描共聚焦显微镜与金相显微镜比较研究

目的:在两种不同显微镜下定量观测人离体牙充填玻璃离子水门汀后边缘微渗漏的情况,并对两种方法进行比较.方法:选取新鲜无龋前磨牙,备洞,充填玻璃离子水门汀,37℃水浴条件下分别置于0.1%罗丹明B荧光染料或1%甲基蓝溶液浸染,激光扫描共聚焦显微镜和金相显微镜下分别测量染液渗入深度,定量评价微渗漏程度,对两种方法的检测结果进...     

利用快速共聚焦显微镜观察花粉管中线粒体的分布及其动态变化

线粒体是真核细胞中高度动态变化的一种细胞器。但目前有关植物细胞,尤其是花粉管中线粒体的分布及其动态变化的信息还比较少。本文应用Zeiss 5 live快速共聚焦显微镜结合线粒体荧光探针Mitotracker Green对百合花粉管中线粒体的分布及其动态变化进行了观察和测定。结果显示,正常培养的百合花粉管中线粒体呈倒喷泉式移动,即花粉管基部的线粒体移动到亚顶端后即发生回流,因此花粉管顶端锥形区域内很少观察到线粒体的存在。对单个线粒体进行跟踪分析结果表明花粉管中的线粒体分为快速运动和锚定状态两种。快速移动的线粒体在花粉管两侧质膜下及花粉管中央沿着与花粉管长轴平行的方向运动,在花粉管亚顶端则沿着一定曲线移动;锚定在细胞质中的线粒体则随着胞质环流而被动移动。低浓度的微丝骨架抑制剂Jas处理时间依赖性地引起花粉管亚顶端的线粒体逐渐前移,并最终充满整个花粉管顶端,同时花粉管中快速移动线粒体的比例逐渐减少。上述结果表明,花粉管中的线粒体主要沿着微丝骨架进行快速移动,而花粉管亚顶端精细微丝组成的领区(Collar)在花粉管线粒体的分布和动态变化中起重要作用。     

毛竹茎秆纤维发育过程中Ca~(2+)-ATPase分布的动态变化

采用超微细胞化学定位方法,对毛竹茎秆纤维发育过程中Ca2 -ATPase分布的动态变化进行了研究.在原始细胞形成期,Ca2 -ATPase活性产物主要分布在质膜、核染色体、染色质及核仁上.在初生壁形成早期,质膜上Ca2 -ATPase活性增强;随着纤维细胞的逐渐液泡化,液泡膜、细胞质、质膜内陷和同心圆潴泡上逐渐出现Ca2 -ATPase活性产物的分布;在初生壁形成后期,液泡膜上的Ca2 -ATPase活性增强,在运输小泡上出现Ca2 -ATPase活性产物分布,质膜、细胞质、染色质和核仁上始终具有较强的Ca2 -ATPase活性.随着次生壁的形成,纤维细胞发生程序性死亡(PCD),在质膜、胞间连丝和降解的液泡膜、细胞质、核染色质上具有较强Ca2 -ATPase活性;随着次生壁的逐渐增厚,大量具有Ca2 -ATPase活性的运输小泡在前四年中持续存在,以后逐渐减少;而在六年生茎秆纤维细胞的质膜、胞间连丝、凝聚的核染色质和降解的原生质体中始终具有Ca2 -ATPase活性.结果表明,ca2 -ATPase参与了毛竹茎秆纤维细胞的增殖过程、细胞壁形成过程及PCD过程中原生质体的降解.     

槐定碱对心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放的影响

目的:研究槐定碱对心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支制备心力衰竭模型,随机分为假手术组、心力衰竭组、槐定碱5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg剂量组。4周后酶解法分离各组大鼠心室肌细胞,采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时记录系统记录心肌细胞的L-型钙电流(ICa.L)及胞浆内的钙瞬变。结果:心力衰竭组大鼠心肌细胞的ICa.L、钙火花发生率及钙瞬变峰值明显低于假手术组;槐定碱中剂量和高剂量组大鼠心肌细胞的ICa.L、钙火花发生率及钙瞬变峰值明显高于心力衰竭组;槐定碱低剂量组与心力衰竭组相比差异不显著。结论:一定浓度的槐定碱对改善心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放功能具有重要的作用。     

优化大鼠肺动脉平滑肌细胞骨架F-actin图像的激光共聚焦显微技术

目的:优化大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)骨架蛋白F-actin图像的激光共聚焦显微技术.方法:采用不同浓度梯度的荧光染料及不同孵育条件,应用激光共聚焦显微扫描技术对PASMCs细胞骨架F-actin进行形态学现察.结果:终浓度10 mg/mL FITC-鬼笔环肽及10 mg/mL PI,分别染色30 min,并经...     

激光共聚焦显微技术在细菌粘附肾小管上皮细胞研究中的应用

目的:观察尿路致病大肠杆菌和甘露糖在肾小管上皮细胞(PTEC)内的共定位,探讨细菌粘附PTEC的可能机制.方法:在C5a刺激和C5aR拮抗剂(PMX53)作用下,利用激光共聚焦扫描显微镜观察荧光标记的大肠杆菌和甘露糖在原代培养的肾小管上皮细胞中的表达位置.结果:在无任何刺激情况下,PTEC本身表达的甘露糖主要分布在细胞核周围;加入细菌后,甘露糖表达明显升高,并观察到少数细菌与甘露糖共定位;在C5a刺激和等量细菌刺激情况下,PTEC表面粘附的细菌明显增多,且甘露糖的表达明显增多,另外细菌与甘露糖共定位也明显增多;而在PMX53和等量细菌作用下,PTEC粘附的细菌量和甘露糖表达均明显减少.结论:C5a-C5aR信号改变了细胞表面甘露糖的表达,从而影响了细菌在PTEC上的定殖.     

Nd~(3+)∶NaY(WO_4)_2晶体的激光性能研究

本文报道一种新型的激光晶体Nd~（3+）∶NaY（WO_4）2．测定了它的结构、荧光光谱、吸收光谱。用φ3mm×25mm2的小型脉冲觎灯泵浦φ3mm×5．95mm2的激光棒，获得22．5mJ的激光能量输出，物化性能好，是一种有良好应用前景的激光晶体．