莲房原花青素提取纯化工艺研究与抗氧化活性评价

目的 优化莲房原花青素提取纯化工艺并评价抗氧化活性。方法 以正交设计L₉(3⁴)优化莲房原花青素提取工艺参数,用大孔吸附树脂进行纯化,而后通过1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)和羟基自由基(·OH)清除率评价其体外抗氧化活性。结果 在最佳提取工艺条件下(8倍量50%乙醇回流提取2次,每次3 h),提取率达91.3%,进一步通过大孔树脂AB-8纯化,最终提取物中原花青素纯度为80.7%。莲房原花青素抗氧化活性与葡萄籽原花青素无显著性差异,均明显优于维生素C。结论 该提取纯化方法简单、高效,可用于莲房原花青素提取物的制备。莲房原花青素具有较强的抗氧化活性,值得进一步开发利用。     

罗布麻叶总多酚纯化工艺及抗氧化活性研究

目的建立并优化罗布麻叶总多酚的纯化工艺及其抗氧化活性研究。方法以吸附量和解吸率为指标,通过静态吸附实验,确定罗布麻叶总多酚纯化的最佳树脂;并通过动态吸附和解吸实验,对最佳吸附树脂工艺条件进行考察。结果最佳纯化工艺条件:上样浓度6.0 mg·m L-1,吸附速率2 BV·h-1,最大上样量8 BV,除杂用水量5 BV,洗脱液为50%乙醇,洗脱流速2 BV·h-1,洗脱体积为3 BV。结论经HPD-300大孔树脂分离纯化后,罗布麻叶总多酚纯度提高,纯化后抗氧化活性明显增加。     

天麻多糖提取工艺及纯化研究

目的:比较天麻多糖(GEP)超声波提取和水提工艺的多糖提取率,探讨超声技术在多糖提取方面的优势。方法:利用超声波提取工艺从中药天麻中提取天麻多糖,并用sevag法脱蛋白,经透析、冷冻干燥得天麻粗多糖。然后通过Sephadex G-75凝胶色谱柱将其进行分离纯化,得到两个天麻多糖分级组分GEPⅠ和GEPⅡ。再利用紫外可见分光光度法对GEPⅠ和GEPⅡ的纯度进行鉴定。结果:在提取温度60℃、料水比1:40、提取时间0.5h的条件下,用超声波回流提取3次,是天麻多糖超声提取的最佳方法。在相同因素的条件下,得到的提取率较传统的水提取法提高了11.2%,同时缩短了提取时间。结论:用超声波提取,相比传统水提醇沉法,在提取率方面得到了显著的提高。     

鸭跖草总黄酮的大孔树脂纯化工艺及抗氧化活性研究

【】目的：研究鸭跖草(Commelina communis L.)总黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化活性。方法：以静态饱和吸附量和解析率为指标,对3种大孔树脂(D101,NKA-9,AB-8)进行筛选,并以回收率为指标,通过选用L₉(3₄)正交表设计实验,确立纯化总黄酮的最佳条件;以V_C为对照品,测定鸭跖草总黄酮清除1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)、超氧阴离子(O_2- )和羟基自由基(.OH)的抗氧化活性。结果：AB-8纯化鸭跖草总黄酮效果最好,优于D101和NKA-9,最佳纯化工艺：上梯液质量浓度为1.482mg/ml,淋洗pH为4,乙醇洗脱液体积分数70％,洗脱流速为2ml/min;鸭跖草总黄酮对3种自由基的清除效率与浓度呈正相关,清除DPPH、超氧阴离子自由基、羟自由基的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为0.0170mg/ml、0.0055mg/ml、1.9327mg/ml,对DPPH和羟自由基的清除作用弱于Vc,而对超氧阴离子的清除作用强于Vc,其中鸭跖草对超氧阴离子自由基的清除能力最强。结论：大孔树脂纯化鸭跖草总黄酮的效果显著,鸭跖草黄酮类化合物具有较强的抗氧化活性,值得进一步开发。     

黄瓜子多糖的分离、纯化和体外抗氧化活性研究

目的:对黄瓜子多糖进行分离、纯化,并考察其体外抗氧化活性。方法:采用水提醇沉法提取黄瓜子粗多糖(CCL),然后以Amberlite FPA90Cl阴离子和Amberlite FPC3500H阳离子串联交换树脂柱和离子交换纤维素DEAE Cellulose 52柱对CCL进行分离、纯化得到CCL-M2、CCL-M3、CCL-M6等3种多糖。结合高效液相色谱-蒸发光散射法、超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法和紫外、红外光谱等多种技术对3种均一多糖的纯度、分子量、结构和单糖组成等进行分析。以维生素C(VC)为阳性对照,考察CCL-M2、CCL-M3、CCL-M6(质量浓度均为0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mg/mL)对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O^2-·)的清除能力,并计算其半数清除浓度(IC₅₀)。结果:CCL-M2、CCL-M3、CCL-M6均为吡喃糖形式的均一多糖,分子量分别为9.614×10⁶、2.024×10⁷、3.343×10^(7 )Da。CCL-M2的单糖组成为鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,其摩尔比为5.1∶2.6∶1.7∶1.4∶31.6;CCL-M3和CCL-M6的单糖组成均为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,其摩尔比分别为1.7∶3.8∶6.4∶3.3∶1.3和1.3∶3.0∶3.2∶4.4∶8.9。体外抗氧化活性结果显示,3种均一多糖对DPPH·、·OH、O^2-·均具有一定的清除活性,其对DPPH·的清除活性强弱顺序为VC>CCL-M2>CCL-M3>CCL-M6(IC₅₀依次为0.309、1.240、1.489、1.713 mg/mL),对·OH的清除活性强弱顺序为VC>CCL-M2>CCL-M6>CCL-M3(IC₅₀依次为0.968、1.032、1.233、1.356 mg/mL),对O^2-·的清除活性强弱顺序为VC>CCL-M2>CCL-M3>CCL-M6(IC₅₀依次为0.335、0.379、0.812、1.662 mg/mL)。结论:从黄瓜子中分离得到3种吡喃糖形式的均一多糖均具有一定的体外抗氧化活性,其中以CCL-M2的活性最强。     

半枝莲多糖的提取纯化及抗氧化活性研究

目的研究半枝莲多糖的分离纯化及抗氧化作用。方法采用正交试验L9(34)对半枝莲多糖提取工艺进行优化,并利用DEAE-Cellulose-52和Sepharose 4B柱色谱进一步纯化多糖组分;分光光度法测定半枝莲多糖对小鼠红细胞溶血、小鼠血清、肝组织中的超氧化物岐化酶(SOD)活力以及过氧化产物丙二醛(MDA)生成的影响。结果半枝莲多糖提取工艺的最佳条件为温度70℃,提取6 h,料水比1∶30,温度是提取多糖的关键影响因素。抗氧化活性实验表明半枝莲多糖的两个组分SBPW、SBPS在一定浓度范围内均能降低化学法诱导的红细胞溶血和肝组织过氧化物损伤;能剂量依赖性提高小鼠血清、肝组织中的SOD活力,降低小鼠血清、肝组织中MDA的水平。结论SBPW和SBPS具有较好的抗氧化作用。     

毛蚶提取物的抗氧化活性分析

目的 制备毛蚶提取物并分析其抗氧化活性.方法 利用Superdex-75,Sephadex LH-20凝胶柱层析等方法从毛蚶中分离纯化具有抗氧化活性的组分P3,采用铁氰化钾,DPPH等方法测定P3的还原力及清除自由基能力,同时采用茚三酮法、蒽酮法、考马斯亮蓝结合法、薄层层析等方法对该组分进行了定性分析.结果 与结论从毛蚶中分离得到了具有抗氧化活性的组分P3,经定性分析推测该活性组分为糖肽.     

紫贻贝粗多糖的提取及其体外抗氧化的研究

目的研究紫贻贝粗多糖的提取及其抗氧化活性。方法通过乙醇沉淀、Sevage法除蛋白后得到贻贝粗多糖。对其DPPH自由基清除能力、还原力、羟自由基清除能力进行测定,考察其抗氧化能力。结果在10～60μg·mL^-1浓度范围内,紫贻贝粗多糖显示良好的DPPH自由基清除能力、还原力及羟自由基清除能力,并且随着紫贻贝多糖浓度的升高而增加,同时,在此浓度范围内紫贻贝粗多糖的浓度与抗氧化活性呈较好的量效关系。结论紫贻贝粗多糖具有良好的抗氧化活性。     

紫球藻B—藻红蛋白的分离纯化

紫球藻（Porphyridium cruentum)的藻胆蛋白粗提物经硫酸铵沉淀及透析后,分别用羟基磷灰石（HA）和Sephadex G-100两种方法柱层析,均可分离纯化出B－藻红蛋白（B－PE）,纯度（A545nm/A280nm)分别为4．92和3．78,两种方法纯化后的B－PE在聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳时均得到一条带,B－PE的最大吸收峰在545nm,其室温荧光发射峰为574．5nm。     

耐盐紫甘薯花色苷的纯化工艺研究

目的 建立有效的紫甘薯花色苷提取物分离纯化方法,为其产业化发展提供理论依据。方法 通过静态吸附解吸试验筛选适合耐盐紫甘薯Z103花色苷纯化的大孔树脂,并进行动态吸附解吸工艺条件优化。结果 在供试树脂中,HPD-300大孔树脂纯化效果最好。其静态吸附达平衡的时间为6-8 h,解吸附平衡时间为1-2 h,最大吸附量为33.67 mg·g^-1。动态吸附解析最适工艺条件为：上样流速1.0 mL·min^-1,上样浓度为0.3 mg·mL^-1,体积为145 mL时,HPD-300树脂动态最大吸附量为13.82 mg·g^-1（树脂）,采用80%乙醇溶液作为洗脱剂,洗脱流速1.0 mL·min^-1,用3倍柱体积洗脱花色苷,收率可达92.01%。纯化后的紫甘薯花色苷含量为181.58 mg·g^-1,比纯化前提高13.18倍;色价 （528 nm）为142.63,比纯化前提高11.01倍。结论 该工艺具有较好的实用性与参考价值。     

枇杷叶总黄酮的纯化工艺及抗氧化活性研究

目的 优选枇杷叶总黄酮分离纯化的工艺条件,考察枇杷叶总黄酮抗氧化活性。方法 考察不同型号大孔树脂吸附洗脱能力,及大孔树脂、聚酰胺、硅胶对枇杷叶总黄酮的纯化能力,选择最佳分离纯化工艺,并采用ABTS自由基清除试验对黄酮提取物进行抗氧化活性评价。结果 D101树脂对枇杷叶总黄酮的吸附性能最好,最佳纯化工艺为D101树脂每1g上样相当于1.5g原药材样液,水、10%乙醇、40%乙醇、90%乙醇分别洗脱,洗脱流速为80mL？h-1（12BV？h-1）,收集40%乙醇部分经D101大孔树脂同样条件二次洗脱,收集40%乙醇洗脱液得总黄酮提取物。提取物对ABTS自由基有较好的清除作用。结论 D101大孔树脂重复吸附是分离纯化枇杷叶总黄酮的理想方法。枇杷叶总黄酮具有良好的抗氧化活性。     

脱油油樟叶总酚提取纯化工艺优化及体外抗氧化研究

摘要：目的 优选脱油油樟叶总酚的提取纯化工艺,考察纯化前后的抗氧化活性,为油樟合理开发和利用提供依据。方法 在单因素实验基础上结合正交试验法,优选提取工艺;采用大孔吸附树脂法,优选纯化工艺;并采用DPPH、ABTS+法及总还原能力测定比较总酚纯化前后的体外抗氧化活性。结果 总酚最佳提取工艺：液料比30 mL·g-1,乙醇浓度50%,回流时间120min,温度90℃,次数2次,脱油油樟叶总酚提取量为15.63 mg·g-1。最佳纯化工艺：采用HPD-600树脂,上样液浓度0.5g·L-1,上样液pH3.0,上样量2.5BV,上样流速1mL·min-1,6BV蒸馏水除杂,乙醇洗脱浓度为60%,洗脱液pH7.0,洗脱流速1 mL·min-1,收集4BV洗脱液,总酚含量由12.51%提升至26.40%。纯化后总酚体外抗氧化能力良好,DPPH、ABTS+自由基清除能力IC50值分别为(38.07±0.66) mg·L-1、(14.28±0.19) mg·L-1,总还原能力为纯化前的1.68倍。结论 该工艺方法稳定可行,适合工业生产,具有简便、快速、准确等优点,为油樟的进一步研究及开发奠定基础。     

冬凌草多糖的提取、分离及抗氧化活性研究

目的研究冬凌草多糖的性质及抗氧化活性。方法冬凌草经过热水、稀碱提取,乙醇沉淀得到冬凌草粗多糖,进一步纯化后得到两个主要组分命名为ST和JT,通过高效液相色谱法对其单糖组成、纯度及分子质量进行了测定,并通过清除二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和抗脂质过氧化能力等体外实验,考察了ST和JT的体外抗氧化活性。结果 ST中主要含有D-半乳糖(Gal)、D-甘露糖(Man)、D-(+)-半乳糖醛酸(GalUA)和D-木糖(Xyl)四种单糖,JT中主要含有Xyl、L-鼠李糖(Rha)、Gal和D-葡萄糖醛酸(GlcUA)四种单糖,ST和JT纯度均较高,分子质量分别约为39 100和26 200。ST和JT对DPPH自由基和羟基自由基均有较强的清除能力,且均没有清除超氧阴离子自由基和抗脂质过氧化能力。结论冬凌草多糖为复杂的杂聚多糖,且具有一定的抗氧化活性。     

葛花总黄酮提取工艺及抗氧化活性的研究

目的研究葛花总黄酮最佳提取工艺,测定葛花提取物的抗氧化能力。方法采用超声波辅助萃取的方法,对溶剂浓度、溶剂用量、超声时间、温度进行了考察。用总抗氧化能力试剂盒提供的方法对提取物的抗氧化能力进行了测定。结果葛花总黄酮最佳提取工艺是乙醇浓度为70％,料液比为1：20,时间为80min,温度为80℃,总黄酮含量为5．19％．抗氧化能力（单位／毫升溶液）最多达到53左右。结论本方法采用全物理过程,无任何污染．是提取葛花黄酮类物质的有效途径。     

贞芪扶正注射液的提取纯化工艺研究

目的优选贞芪扶正注射液的提取纯化工艺。方法以贞芪总多糖含量和转移率为指标,考察了多糖提取及超滤工艺对多糖含量的影响。结果该优选工艺制备的贞芪总多糖含量为50%以上。结论本方法简单可行,可为工业生产提供依据。     

胞红蛋白表达纯化及抗氧化活性研究

研究人胞红蛋白(Cytoglobin,CYGB)的表达纯化、复性和抗氧化活性。人胞红蛋白基因工程菌pET28a/hC YGB/BL21(DE3)经IPTG诱导表达,包涵体分离,复性,透析和Sephacryl S-200层析分离,获得纯化的rhC YGB。SDS-PAGE和HPLC检测表明rhC YGB纯度达95%以上,紫外光谱分析证明rhC YGB分子含有血红素,圆二色谱分析表明该复性蛋白质具有正确的α-螺旋结构。生化分析及细胞水平试验表明rhC YGB具有过氧化物酶活性和抗氧化活性。小鼠急性乙醇肝损伤模型试验表明rhC YGB能有效保护乙醇所致的肝损伤。研究结果表明经添加血红素复性和纯化所得的rhC YGB具有正确的空间结构和抗氧化活性。     

紫草酸在大鼠体内的药动学研究

目的建立紫草酸血药浓度的高效液相色谱测定方法,研究其在大鼠体内药代动学变化规律。方法大鼠静脉注射紫草酸10mg/kg后,于不同时间点采血,用HPLC测定其血药浓度,并用DAZ软件拟合,计算药代动力学各参数。结果紫草酸血药浓度的回归方程的线性关系良好,最低检测浓度为0.2μg/ml。药时曲线符合二室开放模型。结论首次建立了紫草酸血药浓度的HPLC测定方法。方法操作简单、专属性强、灵敏度高。静脉注射紫草酸,其体内过程的药时曲线符合二室开放模型,具有体内分布快、血药浓度下降迅速等特点。     

紫草酸B的抗HIV-1活性研究

目的研究紫草酸B(lithospermic acid B,LAB)在体外和细胞培养内的抗HIV-1作用及小鼠口服后的血清在细胞培养内的抗HIV-1活性.方法在体外无细胞系统内采用放射性核素3H掺入法、荧光方法和酶联免疫吸附法分别测定其对HIV-1逆转录酶、蛋白酶和整合酶的半数抑制浓度(IC50);以传代人T淋巴细胞MT-4细胞感染实验病毒株HIV-1 Ⅲ B测定其对细胞的毒性和对HIV-1 P24抗原的抑制作用;给小鼠单剂量灌胃LAB 200 mg·kg-1后不同时间取血,分离血清,测定其在MT-4细胞培养内对HIV-1 Ⅲ B P24抗原的抑制率.结果LAB在体外抑制HIV-1整合酶和蛋白酶,其Ic50分别为(7.91±1.59)和(34.84 4±1.11)μmol.L-1,对HIV-1逆转录酶无效.在MT-4细胞培养内对细胞的半数有毒浓度(CC50)为(13.31 ±3.05)μmol稬-1,对MT-4细胞感染HIV-1 ⅢB后的P24抗原表达有抑制作用,IC50为(0.240±0.003)μmol稬-1,选择指数为54;与临床应用的HIV-1逆转率酶抑制剂核苷类齐多夫定(AZT)和非核苷类奈韦拉平(NVP)联合用药,均有协同抗HIV-1的作用,联合指数(CI值)分别为0.09和0.41.小鼠灌胃LAB 200 mg.kg-1后血清在细胞培养内有抑制HIV-1 ⅢB P24抗原的活性.结论LAB在MT-4细胞培养内抑制HIV-1的P24抗原表达,与临床应用的逆转录酶抑制有协同抗HIV-1的作用,但小鼠口服生物利用度较低.     

天麻多糖的分离纯化与抗氧化活性研究北大核心CSCD

目的从天麻中分离纯化出活性多糖并考查其抗氧化活性。方法用水提醇沉法提取天麻粗多糖,Sevage法脱去其中的蛋白质,依次通过D101大孔吸附树脂、DEAE-52离子交换色谱及Sephadex G-100凝胶色谱纯化,得到2个天麻多糖(GEP):GEP1-G和GEP2-G,测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力,以评价其抗氧化作用。结果天麻中粗多糖提取率为5.6%,经D101大孔吸附树脂纯化后,粗多糖中多糖含量为65.7%;DEAE-52纯化后,有6个洗脱组分GEP 1~6;组分GEP1和GEP2再经Sephadex G-100纯化得到纯品多糖GEP1-G和GEP2-G,其多糖含量分别是97.3%和98.1%。在抗氧化活性实验中:当GEP1-G和GEP2-G浓度为1 mg·mL^(-1)时,两者对DPPH的清除率分别为44.50%和25.60%,对超氧阴离子抑制率分别为33.32%和21.55%,对羟自由基抑制率分别为39.50%和22.80%。结论通过大孔吸附树脂、离子交换色谱和凝胶过滤色谱得到了纯品天麻多糖,其具有一定的抗氧化作用。