miR-33b靶向HMGA2基因表达抑制食管癌细胞迁移的实验研究

目的研究miR-33b靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)基因表达抑制食管癌细胞迁移的作用。方法培养食管癌Eca9706细胞,转染阴性对照(NC)模拟物、miR-33b模拟物、NC-siRNA、HMGA2-siRNA、pcDNA3.0空白质粒、pcDNA3.0-HMGA2质粒后,采用Transwell及划痕实验检测细胞的迁移,采用荧光定量PCR及western blot检测mi R-33b、HMGA2表达量,采用双荧光素酶报告基因验证miR-33b对HMGA2的靶向调节作用。结果转染miR-33b模拟物后mi R-33b的表达量明显增加,HMGA2的表达量明显减少,细胞的迁移明显受到抑制;转染HMGA2-siRNA后HMGA2的表达量明显减少,细胞的迁移明显受到抑制;转染pcDNA3.0-HMGA2质粒后HMGA2的表达量明显增加且miR-33b抑制细胞迁移的作用发生逆转;双荧光素酶报告基因证实miR-33b靶向HMGA2 m RNA的3’UTR。结论 miR-33b直接靶向HMGA2并抑制食管癌细胞的迁移。     

miR-98对鼻咽癌细胞生物学行为的影响及作用机制

目的探讨miR-98对鼻咽癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法选择我院收治的鼻咽癌25例,分别取癌组织和距离肿瘤1 cm的癌旁正常组织,并将用于后续试验的鼻咽癌细胞株CNE1分为对照组(NC组)和实验组(miR-98-inhibitor组)。NC组转染阴性对照慢病毒模拟物,miR-98-inhibitor组转染miR-98-inhibitor模拟物,同时选取4周龄雌性裸鼠制备肿瘤异种移植模型。检测miR-98在鼻咽癌组织、癌旁正常组织和不同鼻咽癌细胞株(CNE1、TW03、NP69)中的表达情况,分析miR-98与乳腺癌易感基因相互作用蛋白1(BACH1)的关系,观察miR-98对鼻咽癌细胞侵袭能力的影响,记录miR-98对鼻咽癌细胞裸鼠体内成瘤能力的影响。结果癌旁正常组织、鼻咽癌组织miR-98的表达量分别为2.05±0.28、3.98±0.56,比较差异有统计学意义(P0.05);鼻咽癌细胞株CNE1、TW03、NP69的miR-98表达量分别为5.21±0.43、2.29±0.21、0.56±0.10,比较差异有统计学意义(P0.05)。miR-98可明显抑制BACH1-3'UTR野生型双荧光素酶的活性。NC组、miR-98-inhibitor组细胞侵袭数分别为191.36±23.98、41.09±8.75,裸鼠成瘤体积分别为(4.32±0.34)cm~3、(1.02±0.09)cm~3,重量分别为(4.16±0.29)g、(0.96±0.06)g,比较差异均有统计学意义(P0.05)。miR-98-inhibitor组裸鼠肿瘤组织BACH1蛋白的阳性表达率明显低于NC组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 miR-98可靶向调节BACH1的表达以影响鼻咽癌细胞的生物学行为。     

宫颈癌患者HMGA1、HMGB1表达水平与高危型HPV感染的关系及临床意义

目的 探究宫颈癌患者高迁移率族蛋白A1(HMGA1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达水平与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系及临床意义.方法 选取2017年8月至2020年8月南方医科大学附属小榄医院收治的200例宫颈癌患者作为研究组,另选取同期在本院体检健康女性就诊者50名作为对照组,研究组患者根据HPV感...     

长链非编码RNA KCNQ1OT1靶向调控miR-218-5p对结肠癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(lncRNA KCNQ1OT1)调控micro RNA-218-5p(miR-218-5p)对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响及其可能机制。方法:收集2019年1月至4月在宜昌市第一人民医院行根治性结肠癌切除术的30例肿瘤组织和相应的癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测lncRNA KCNQ1OT1,miR-218-5p在结肠癌组织、癌旁正常组织、5种结直肠癌细胞系(HCT-116,SW480,SW620,DLD-1,HT29)及正常结肠上皮细胞系CCD841中的表达水平;干预结肠癌细胞系HCT-116和SW480中lncRNA KCNQ1OT1和miR-218-5p的表达,采用CCK-8法检测结肠癌细胞的增殖,Transwell法检测结肠癌细胞的迁移和侵袭;采用流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率;用Starbase数据库预测lncRNA KCNQ1OT1的靶向miRNA,并用qRT-PCR、双荧光素酶报告基因法验证lncRNA KCNQ1OT1与miR-218-5p的靶向关系。结果:与癌旁正常组织和正常结肠上皮细胞系相比,结直肠癌组织和结直肠癌细胞系中lncRNA KCNQ1OT1的表达水平显著上调,miR-218-5p的表达显著下调(P<0.05);过表达lncRNA KCNQ1OT1促进SW480细胞的增殖、迁移和侵袭,且减少处于G0/G1期的细胞比率,抑制细胞凋亡;在结直肠癌组织中lncRNA KCNQ1OT1的表达水平与miR-218-5p的表达水平呈负相关(r^2=0.437,P<0.001);双荧光素酶报告基因法分析证实lncRNA KCNQ1OT1能特异性结合miR-218-5p,并能降低其表达;过表达miR-218-5p抑制HCT-116细胞的增殖、迁移和侵袭,增加处于G0/G1期的细胞比率,促进细胞凋亡,且miR-218-5p的表达可以抑制由lncRNA KCNQ1OT1过表达引起的细胞增殖、迁移和侵袭能力的增加及凋亡的减少。结论:LncRNA KCNQ1OT1通过靶向调控miR-218-5p表达影响结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进结直肠癌的发展。     

高迁移率族蛋白B1的细胞生物学效应及其与脓毒症的关系

Goodwin和 John早在 4 0多年前就发现了高迁移率族蛋白 (high m obilitygroup protein,HMG) ,证明它是一类典型的非组蛋白 (nonhistone chromatinprotein,NHCP)。 NHCP及其他众多核内蛋白质通过与 DNA的相互作用 ,参与了细胞核内诸如转录、复制、重组等复杂有序的功能过程。 HMG在细胞核内含量非常丰富并具有广泛功能 ;细胞核外及血清中也存在一定量的 HMGB1。近年来的研究发现 ,核外 HMGB1可能具有“晚期”炎症介质的作用 ,并日益引起了人们的关注 〔1 3〕。在本文中拟重点介绍有关 HMGB1的细胞生物学效应及其与脓毒症关系的…     

免疫组化检测急性白血病HMGA1表达情况及临床意义探讨

目的通过免疫组化的方法来研究急性白血病骨髓细胞高迁移率蛋白A1（HMGA1）的表达情况并探讨其临床意义。方法建立免疫组化检测HMGAI蛋白的方法：采用HMGA1蛋白特异性抗体与相应抗原反应,加生物素化的二抗及酶标底物显色。观察染色情况并比较各组细胞阳性率的差异。结果急性白血痛（AL）组HMGA1多呈阳性表达（阳性率86．7％）,非白血病（对照）组多呈阴性表达（阳性率15％）,两组比较有显著性差异（P〈0．01）;AL各组以M7原始巨核细胞表达阳性率最高（47．8±12．0％,P〈0．05）,其它各组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论HMGA1蛋白在急性白血病患者中呈过度表达,尤其在M7中表达率最高,可作为M7的鏊别诊断指标。     

缺氧对巨噬细胞HMGB1释放的影响及其机制

目的观察缺氧对巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用,并初步探讨其可能的机制。方法采用巨噬细胞株RAW264.7,观察缺氧培养不同时间对培养上清液中HMGB1含量、细胞HMGB1mRNA表达和HMGB1胞内分布的影响,及不同浓度N-乙酰半胱氨酸对HMGB1释放的抑制作用。HMGB1含量和HMGB1mRNA表达水平分别采用酶联免疫吸附试验、实时荧光定量PCR法检测。结果缺氧培养6h后HMGB1mRNA表达水平已显示增强(P0.05),缺氧培养12h后培养上清液中HMGB1含量明显升高(P0.01),且显示HMGB1核浆转移;N-乙酰半胱氨酸对缺氧培养HMGB1释放有剂量依赖性抑制作用。结论缺氧能诱导巨噬细胞释放HMGB1,其机制可能与胞内氧自由基产生有关。     

自发性脑出血患者血清miR-143 和HMGA2 表达水平与预后的预测价值研究

目的 分析自发性脑出血 (spontaneous intracerebral hemorrhage, sICH)患者血清微小核糖核酸（microRNA, miR）-143,高迁移率族蛋白 A2（high mobility group protein A2 ,HMGA2）的水平及其与预后的关系。方法 选取 2020年 8月～2022年 6月首都医科大学附属北京友谊医院平谷医院收治的 129例 sICH患者作为 sICH组,根据 sICH患者脑出血体积分为小血肿组 50例（n=50,<10 ml）、中血肿组（n=45,10~30 ml）和大血肿组（n=34,>30 ml）;根据 sICH患者住院 30天内是否死亡,将患者分为死亡组（n=40,预后不良）和存活组（n=89,预后良好）,另选取同期来医院体检的 131例健康者作为对照组。收集受试者临床资料,分别采用荧光定量 PCR法和酶联免疫吸附法检测 sICH患者入院 24 h内、健康者体检时血清 miR-143和 HMGA2水平;分析 sICH患者血清 miR-143和 HMGA2水平与美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）、格拉斯哥昏迷量表 (GCS)、Rankin量表 (mRS)评分间的相关性, miR-143和 HMGA2对 sICH患者预后不良的预测价值以及影响 sICH患者预后不良的危险因素。结果 与对照组比较, sICH组血清 miR-143水平（0.35±0.10 vs 1.03±0.07）降低, HMGA2水平（266.97±79.38mg/ml vs 153.13±40.24mg/ml）升高,差异具有统计学意义（t=63.599,14.618,均 P<0.001）。小血肿组、中血肿组和大血肿组 sICH患者血清 miR-143水平（0.38±0.11,0.34±0.10,0.27±0.09）依次降低, HMGA2水平（212.01±78.72mg/ml,251.62±79.31mg/ml, 368.11±80.44mg/ml）依次升高,差异具有统计学意义（F=11.895,40.424,均 P<0.001）。与存活组比较,死亡组患者血清 miR-143水平（0.30±0.06 vs 0.37±0.12）降低, HMGA2水平（316.81±80.03mg/ml vs 244.57±79.09mg/ml）升高,差异具有统计学意义（t=3.493,4.781,均 P<0.05）。sICH患者血清 miR-143水平与 NIHSS,mRS评分呈负相关（r=-0.423,-0.498,均 P<0.001）,与 GCS评分呈正相关（r=0.546,P<0.001）。HMGA2水平与 NIHSS,mRS评分呈正相关（r=0.875,0.863,均 P<0.001）,与 GCS评分呈负相关（r=-0.659,P<0.001）。血清 miR-143,HMGA2及二者联合预测 sICH患者预后不良的曲线下面积分别为 0.733,0.811,0.856,NIHSS评分高 [OR（95%CI）=1.968（1.108~3.495）]、 GCS评分低 [OR（95%CI）=1.923（1.043~3.545）]、mRS评分高 [OR（95%CI）=2.130（1.204~3.768）]、血清 miR-143水平低 [OR（95%CI）=2.013（1.120~3.617）]和 HMGA2水平高 [OR（95%CI）=2.330（1.325~4.097）]是 sICH患者预后不良的危险因素（均 P<0.05）。结论 sICH患者血清 miR-143和 HMGA2异常表达与患者出血体积及预后有关,可作为 sICH患者病情评估和预后评估的辅助指标。     

高迁移率族蛋白1—雷帕霉素靶蛋白通路活化树突状细胞在系统性红斑狼疮中的作用及机制

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种常见的严重危害人类健康的累及多器官的自身免疫性疾病,多见于育龄妇女。其发病机制是自身抗原暴露,自身抗体产生,抗原抗体免疫复合物沉积于全身各组织器官,T淋巴细胞、B淋巴细胞组织渗透,中性粒细胞、巨噬细胞促进组织炎症损伤的恶性循环[1]。虽然适应性免疫,如自身抗体形成、异常T细胞激活在SLE发病机制中的作用已被注意到,但固有免疫在其中所扮演的角色及其特点还不清楚。     

RNA干扰抑制高迁移率族蛋白1表达对子宫内膜癌细胞株HEC-1A的增殖抑制作用及对细胞周期和细胞凋亡的影响

目的探讨通过RNA干扰阻滞高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达水平对子宫内膜癌(EC)细胞株HEC-1A中的细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法将细胞分为以下三组:空白对照组(HEC-1A细胞未感染)、阴性对照组(HEC-1A细胞感染无关序列)、干预组(慢病毒转染HEC-1A细胞)。通过Western blot法对三组HEC-1A细胞中的HMGB1蛋白表达水平进行检测,并采用实时荧光定量PCR对HMGB1 mRNA相对表达量进行检测。采用MTT法对HEC-1A细胞增殖情况进行检测,用流式细胞术对HEC-1A细胞周期变化进行检测,同时用Annexin VFITC/PI法对HEC-1A细胞凋亡情况进行检测。采用Western blot法对转染HMGB1-siRNA后细胞cyclin D1、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)及磷酸化Akt(p Akt)蛋白表达进行检测。结果相比空白对照组与阴性对照组,干预组HEC-1A细胞中HMGB1蛋白表达水平显著下降(P 0. 01)。经实时荧光定量PCR检测结果可知相比空白对照组与阴性对照组,干预组HEC-1A细胞中HMGB1 mRNA相对表达量显著下降(P 0. 01)。相比空白对照组、阴性对照组,干预组cyclin D1和p Akt蛋白表达显著下降(P 0. 01);而三组Akt蛋白表达水平的比较,并无显著差异(P 0. 05)。相比空白对照组、阴性对照组,干预组HEC-1A细胞在570 nm波长处的吸光度值显著下降(P 0. 01)。干预组HEC-1A细胞G0/G1期比率在整个细胞周期分布中的比率最高,其较空白对照组、阴性对照组显著升高(P 0. 01);干预组HEC-1A细胞S期比率、G2/M期比率较空白对照组、阴性对照组显著下降(P 0. 01)。干预组HEC-1A细胞凋亡比率较空白对照组、阴性对照组显著升高(P 0. 01)。结论 HMGB1表达降低可有效阻滞EC细胞株HEC-1A的增殖,使得细胞于G0/G1期受阻,同时可有效促进细胞凋亡,其作用机制可能在于降低cyclin D1蛋白表达和干扰磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路。     

高迁移率族蛋白B1对人脐血造血干细胞增殖分化的影响

目的 观察辐射后骨髓基质细胞(MSC)高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)的释放,研究HMGB1对人脐血造血干细胞(HSC)增殖分化的影响.方法 体外培养人骨髓MSC,利用ELISA方法 检测经12 Gy γ射线照射后培养上清中HMGB1含量的变化.HMGB1与CD34~+的人脐血HSC体外液体共培养6 d,通过流式细胞术检测CD34~+细胞分化指标(CD13、CD14、CD11c、CD41、CD71)的变化.集落形成实验观察HMGB1对HSC增殖分化的影响.结果辐射后,骨髓MSC培养上清中HMGBl含量为(4.3±0.9)ng/ml,较对照组HMGB1含量[(0.4±0.2)ng/ml]明显升高(P＜0.01).脐血CD34~+细胞表面表达HMGB1受体RAGE、TLR2和TLR4.HSC与HMGB1共培养6d后,与对照组比较,红系(CD71)和粒单系(CD13、CD14、CD11c)标记的表达明显增强,分别为CD13(18.4±3.8)%和(32.6±5.9)%、CD14(12.6±2.7)%和(25.4±4.4)%、CD11c(9.8±2.1)%和(20.3±3.9)%、CD71(26.6±4.6)%和(47.1±7.4)%,而巨核系标记CD41的表达[(1.1±0.4)%和(1.3±0.5)%]无明显变化.集落形成实验示共培养14 d后,红系集落、粒-巨噬细胞集落和总集落的生成较对照组明显增多(P＜0.05),联用抗-TLR2和抗-TLR4抗体可部分抑制这一作用.结论 辐射促进骨髓MSC释放HMGB1,胞外HMGB1可以促进HSC的增殖分化.辐射后,骨髓MSC释放的HMGB1与造血恢复或造血重建的关系值得进一步研究.     

miR-4465靶向KPNA2调控宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究

目的 探讨微小RNA-4465(miR-4465)靶向核转运蛋白基因α2(KPNA2)调控宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测宫颈癌组织、癌旁组织中miR-4465、KPNA2的表达量;双荧光素酶报告检测miR-4...     

脓毒症患者血清miR-205和HMGB1的表达关系及意义

目的:检测脓毒症患者血清miR-205、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平,并探讨二者在脓毒症中的关系及意义。方法:随机选取2017-03-12—2019-09-20期间于本院就诊的55例脓毒症患者为观察组,根据患者21 d时的生存情况分为存活组和死亡组,同期选取于本院进行体检的50例健康人群为对照组,采用qRT-PCR法检测各组血清miR-205水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中HMGB1的表达水平,采用Pearson法分析血清miR-205、HMGB1水平与反映疾病严重程度的急性生理学和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分、多器官功能障碍综合征(MODS)评分的相关性,采用ROC曲线分析血清miR-205、HMGB1及APACHEⅡ评分对脓毒症患者不良预后的预测价值。结果:观察组血清miR-205表达水平显著低于对照组,血清HMGB1水平显著高于对照组(P0.05);死亡组APACHEⅡ评分、MODS评分及血清HMGB1水平均显著高于存活组,血清miR-205水平显著低于存活组(P0.05);Pearson法分析结果显示,脓毒症患者血清miR-205与HMGB1、APACHEⅡ评分均呈负相关(P0.05),HMGB1与APACHEⅡ评分呈正相关(P0.05),血清miR-205、HMGB1与MODS评分均无相关性(P0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-205预测脓毒症患者不良预后的曲线下面积为0.851,敏感度为67.30%,特异度为92.00%;血清HMGB1预测不良预后的曲线下面积为0.888,敏感度为76.40%,特异度为94.00%;APACHEⅡ评分预测不良预后的曲线下面积为0.908,敏感度为83.30%,特异度为88.90%。结论:脓毒症患者血清miR-205水平降低,血清HMGB1水平升高,对患者不良预后有一定预测价值。     

HMGB1基因-一个重要的肿瘤调节基因

高迁移率族蛋白1（high-mobility group box-1，HMGBl）是新发现的一种“晚期炎症介质”，而且高表达于多种肿瘤组织，与其相应受体结合参与调节肿瘤细胞的发生、发展。有研究证实HMGB1的拮抗剂能有效抑制肿瘤细胞的增殖，因而HMGB1有望成为抗肿瘤治疗的一种新的靶分子。     

miR-153对肺腺癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及机制研究

目的 探讨miR-153对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响及其相关作用机制。方法 构建SRC-3’UTR-WT和SRC-3’UTR-MUT载体,分别与miR-153 mimic,mimic control共转染至肺腺癌A549细胞,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-153与SRC的靶向关系。构建miR-153过表达、敲低miR-153和SRC表达的A549细胞系,采用Western Blot检测miR-153对SRC蛋白表达的影响。通过CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验及流式细胞仪分别检测miR-153,SRC及miR-153+SRC共转染对A549细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。结果 双荧光素酶报告基因实验证实SRC是miR-153的靶基因。25例临床肺腺癌组织中miR-153表达水平（13.251±4.256）较癌旁正常组织（25.312±6.527）显著降低（t=7.739,P <0.001）,SRC表达水平（28.574±6.438）较癌旁正常组织（15.206±5.117）显著升高,差异有统计学意义(t=8.128,P <0.001...     

骨肉瘤组织RRBP1表达及其对细胞生物学特征的影响

目的 探讨骨肉瘤组织中核糖体结合蛋白1(RRBP1)的表达,分析RRBP1基因对骨肉瘤U-2OS细胞生物学特征的影响。方法 选取2014年6月—2020年6月在南阳市第二人民医院和郑州大学第一附属医院行手术治疗的骨肉瘤患者91例,收集骨肉瘤组织;选取行骨科手术且排除骨肿瘤的患者45例,收集正常骨组织。采用免疫组化法检测骨肉瘤组织和正常骨组织中RRBP1蛋白。对骨肉瘤患者进行术后随访,随访至2021年12月,记录患者生存情况。选取人骨肉瘤细胞系U-2OS,根据转染序列的不同分为si-RRBP1组（转染RRBP1干扰序列）、si-NC组（转染阴性对照序列）和空白对照组（仅加入转染试剂）,以常规培养的U-2OS细胞作为对照。检测各组RRBP1 mRNA和蛋白表达,并检测各组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力。结果 骨肉瘤组织RRBP1蛋白阳性表达率高于正常骨组织（P<0.001）。Enneking分期ⅡB～Ⅲ期、有远隔转移的骨肉瘤患者RRBP1蛋白阳性率分别高于Enneking分期ⅡA期、无远隔转移的患者（P<0.05）。不同性别、年龄、肿瘤部位、组织学类型和肿瘤大小的骨肉瘤患者RRB...     

胃癌中高表达的miR-21对胃癌细胞生物学行为的影响

目的:研究miR-21在胃癌中的表达情况及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:通过实时荧光定量PCR检测30例胃癌手术切除组织和周围正常组织中以及10株胃癌细胞中miR-21的表达情况。通过CCK8法、Annexin-Ⅴ+PI、流式细胞仪检测、划痕实验,观察过表达miR-21对胃癌细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移等生物学行为的影响。结果:定量real-time PCR结果显示miR-21在胃癌组织中高表达(P0.05),miR-21过表达细胞株增殖能力增强,与阴性对照组和空白对照组对比差别具有统计学意义(P<0.01),miR-21转染细胞划痕愈合速度较对照组快。结论:miR-21在胃癌中呈高表达,过表达miR-21可以促进BGC-823胃癌细胞的增殖能力和迁移能力,但对凋亡和细胞周期影响不明显。     

下调lncRNA RUSC1-AS1靶向miR-142以改善肺癌细胞A549恶性表型的实验研究

目的 研究下调lncRNA RUSC1-AS1靶向miR-142对肺癌细胞A549恶性表型的影响.方法 将肺癌细胞A549分成对照组、si-NC组(转染对照siRNA)、si-RUSC1-AS1组(转染RUSC1-AS1 siRNA)、si-RUSC1-AS1+anti-miR-NC组(共转染RUSC1-AS1 siR...     

lncRNA RPL34-AS1调控miR-670-5p/SMAD4对胃癌细胞生物学行为的影响

目的探讨lncRNA RPL34-AS1对胃癌细胞生物学行为的影响及其对miR-670-5p/SMAD4分子轴的调控作用。方法回顾性收集2018年5月至2019年6月期间临沂市肿瘤医院收治的33例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织标本。QRT-PCR检测RPL34-AS1、miR-670-5p的表达量,蛋白质印迹法检测SMAD4表达。体外培养人胃癌细胞HGC-27,实验分组:pc DNA组(转染RPL34-AS1过表达载体的阴性对照)、pc DNA-RPL34-AS1组(转染RPL34-AS1过表达载体)、anti-miR-NC组(转染miR-670-5p特异性寡核苷酸抑制剂的阴性对照)、anti-miR-670-5p组(转染miR-670-5p特异性寡核苷酸抑制剂)、pc DNA-RPL34-AS1+miR-NC组(共转染pc DNA-RPL34-AS1与阴性对照mimic NC序列)、pc DNA-RPL34-AS1+miR-670-5p组(共转染pc DNA-RPL34-AS1与miR-670-5p寡核苷酸模拟物)。MTT与平板克隆形成实验检测细胞增殖与克隆形成数,流式细胞术检测细胞凋...