Nrf2和Keap1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 大量研究表明核因子E2相关因子2(Nrf2)和Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1(Keap1)与肿瘤发生发展相关。本研究旨在检测食管鳞状细胞癌中Nrf2、Keap1蛋白的表达及其与临床病理参数之间的关系,探讨其在食管癌发生、发展中的意义。 方法 选择2010年7月-2016年11月期间在新疆医科大学第一附属医院经手术治疗的食管癌患者174例,取食管癌组织标本及癌旁组织,使用免疫组织化学法,分别检测其中Nrf2及Keap1蛋白的表达水平并进行统计学分析,所有数据采用SPSS 17.0统计软件进行分析。 结果 ①Nrf2在食管鳞状细胞癌的表达水平显著高于癌旁正常组织(χ2=21.259,P<0.001),Keap1在食管鳞状细胞癌的表达水平显著低于癌旁正常组织(χ2=34.863,P<0.001)。②新疆不同民族之间Nrf2、Keap1的表达差异有统计学意义(Nrf2:χ2=12.674,P=0.020;Keap1:χ2=11.237,P=0.004)。③Nrf2的阳性表达与肿瘤淋巴结转移相关(χ2=5.040,P=0.036),与食管癌组织分化程度也相关(χ2=10.187,P=0.020)。Keap1阳性表达与肿瘤淋巴结转移相关(χ2=6.916,P=0.010)和食管癌组织分化程度相关(χ2=15.432,P<0.001)。④食管鳞状细胞癌中Nrf2和Keap1的表达具有相关性(相关系数r=0.219,P=0.031)。 结论 食管鳞状细胞癌的发生、发展和转移是多因素共同作用的结果,Nrf2、keap1蛋白参与食管鳞状细胞癌发生、发展过程,对临床进一步研究食管癌的预防和临床治疗及判断预后提供一定的新思路。      

肺癌组织中Nrf2、Keap1和NQO1蛋白的表达

目的:研究肺癌组织中Nrf2、Keap1和NQO1蛋白表达的情况。方法:采用免疫组化法检测67例肺癌患者的肺癌组织及癌旁正常组织中Nrf2、Keap1和NQO1蛋白的表达,并分析Keap1、Nrf2和NQO1蛋白的表达与肺癌临床病理特征的关系。结果:Keap1蛋白在肺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期鳞癌和Ⅲ期、Ⅳ期腺癌中的表达高于癌旁正常组织(P<0.05);Nrf2蛋白在肺Ⅰ期鳞癌和Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期腺癌中的表达低于癌旁正常组织(P<0.05);NQO1蛋白在肺Ⅰ期鳞癌中的表达低于癌旁正常组织(P<0.05),在Ⅱ期腺癌中的表达高于癌旁正常组织(P<0.05)。3种蛋白的表达与肺癌患者的临床分期和是否侵及胸膜有关(P<0.05)。结论:肺癌组织中Keap1、Nrf2、NQO1蛋白表达异常,提示Keap1-Nrf2/ARE通路在肺癌的发生发展中可能发挥重要的作用。     

抑制miR-128-3p表达对油酸致大鼠肺损伤的保护作用研究

目的 探讨抑制miR-128-3p表达对油酸致大鼠肺损伤的保护作用及可能机制.方法 随机将100只SD大鼠分成5组:假手术组(sham组)、模型组(Model组)、antagomir NC组(NC组)、miR-128-3p antagomir组(antagomir组)和miR-128-3p antagomir+ Nrf2抑制剂ML385组(antagomir+ML385组),每组20只.采用尾静脉注射油酸(0.15 ml/kg)的方法建立肺损伤大鼠模型,术前1h给予miR-128-3p an-tagomir或ML385进行干预.造模成功24 h后,测定动脉血氧分压(PaO2)、氧合指数(OI)及肺组织湿/干重比(W/D);苏木精-伊红染色法(HE)观察肺组织病理学改变并评分;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)含量;比色法测定肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)水平;反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)检测肺组织中miR-128-3p表达水平以及E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶-1(HO-1)的mRNA水平;蛋白质印迹免疫(Western blot)检测肺组织中Nrf2和HO-1的蛋白表达水平;荧光素酶报告基因实验验证miR-128-3p与Nrf2的靶向作用关系.结果 与sham组比较,Model组大鼠肺组织损伤严重,肺组织病理评分、W/D值、BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6含量,肺组织中ROS和MDA水平以及miR-128-3p表达水平增加(P＜0.01),而PaO2、OI值和SOD活性以及Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达水平均降低(P＜0.01);与Model组比较,an-tagomir组大鼠肺组织损伤程度得到明显改善,肺组织病理评分、W/D值、BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6含量,肺组织中ROS和MDA水平以及miR-128-3p表达水平下降(P＜0.01),而PaO2、OI值和SOD活性以及Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达水平均上升(P＜0.01),而NC组大鼠以上各指标差异无统计学意义(P＞0.05);与antagomir组比较,an-tagomir+ ML385组大鼠以上各指标变化趋势又发生逆转(均P＜0.01).荧光素酶报告基因实验证实,miR-128-3p能靶向调控Nrf2的表达.结论 抑制miR-128-3p表达可显著减轻模型大鼠的肺损伤,其作用机制可能与通过靶向调控Nrf2表达,抑制肺组织炎症反应有关.     

姜黄素对百草枯中毒大鼠急性肾氧化损伤的干预作用

目的：探讨姜黄素对百草枯（PQ）中毒大鼠急性肾氧化损伤的干预和可能机制。方法：将60只SD大鼠随机分为正常对照组15只、姜黄素对照组（姜黄素50 mg/kg）15只、PQ染毒组（PQ 100 mg/kg）15只、姜黄素干预组（PQ染毒后15 min、24 h、48 h,腹腔注射姜黄素50 mg/kg）15只。大鼠经处理后第1、第3、第7天取肾组织,化学比色法检测肾组织匀浆液丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）含量,超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活力;ELISA法检测血红素氧合酶-l（HO-1)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活力;RT-PCR法检测核转录相关因子2（Nrf2）mRNA表达,Western Blot法检测Nrf2蛋白表达。光学显微镜下观察肾组织的病理变化。结果：与正常对照组比较,PQ染毒组和姜黄素干预组各时间点MDA含量均升高,GSH、SOD、CAT活力均降低,iNOS活力升高,Nrf2 mRNA和蛋白表达均升高,第1、第3天HO-l活力升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;与同时间点PQ染毒组比较,姜黄素干预组各时间点MDA含量明显降低,GSH、SOD、CAT明显升高,iNOS活力下降,Nrf2 mRNA和蛋白表达明显升高,第1、第3天HO-1活力升高（P＜0.05）;PQ染毒组肾小球球囊间隙增大,排列紊乱,随时间延长,肾小管上皮细胞出现玻璃样变性及空泡样变性,姜黄素干预组病理表现较PQ染毒组明显减轻。结论：姜黄素对PQ中毒大鼠急性肾氧化损伤有保护作用,其机制可能是通过诱导肾组织Nrf2表达,上调HO-1、SOD等抗氧化酶水平,提高肾组织抗氧化应激能力。     

结肠癌组织Nrf2和Keap1表达及其与增殖指数的关系

目的检测结肠癌(CRC)组织核因子E2相关因子2(Nrf2)和Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1(Keap1)表达,分析二者与增殖细胞核抗原(PCNA)的关系。方法 96例CRC术后肿瘤组织作为观察组,选择距肿物边缘3cm正常结肠黏膜组织作为对照组。应用免疫组化法、Western Blot法检测两组组织标本Nrf2、Keap1蛋白表达,应用荧光实时定量PCR法检测两组组织标本Nrf2、Keap1 mRNA表达。应用相关分析探讨Nrf2、Keap1与PCNA的关系。结果免疫组化方法显示,两组组织标本Nrf2和Keap1蛋白阳性率比较,差异有统计学意义[Nrf2:52.08%比16.67%;41.67%比89.58%,P均0.05];观察组Nrf2和Keap1表达阳性率在不同肿物最大径、浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期亚组比较,差异有统计学意义[Nrf2:34.88%比66.03%,35.71%比75.00%,44.73%比80.00%,22.22%比70.00%,36.84%比74.35%;Keap1:62.79%比24.53%,53.57%比25.00%,47.37%比20.00%,75.00%比21.67%,54.38%比23.08%,P均0.05],Nrf2和Keap1表达阳性率在不同性别、年龄和分化程度分组比较,差异无统计学意义(P0.05);观察组Nrf2和Keap1表达与预后相关(P0.05)。观察组Nrf2表达和PCNA呈正相关性(r=0.52,P0.05),Keap1表达和PCNA呈负相关性(r=-0.51,P0.05)。Western Blot法显示,两组组织标本Nrf2 mRNA和Keap1 mRNA半定量表达差异有统计学意义[Nrf2:(1.01±0.13)比(0.49±0.11);Keap1:(0.59±0.15)比(1.08±0.10),P均0.05]。荧光PCR法显示,两组组织标本Nrf2和Keap1 mRNA表达差异有统计学意义[Nrf2:(1.01±0.21)比(0.82±0.19);Keap1:(0.83±0.15)比(1.20±0.25),P均0.05]。结论 Nrf2高表达、Keap1低表达在CRC的形成和进展有重要作用。Nrf2/Keap1可能通过对细胞增殖的调节起协同作用,术后检测肿瘤组织Nrf2和Keap1表达对判断预后有一定价值。     

缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肾脏转录因子Nrf2表达的影响

目的:研究缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肾脏转录因子红细胞系-2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨Nrf2在缺血-再灌注中的作用及其意义。方法:SD大鼠30只分三组:假手术C组、缺血-再灌注(I-R)组、缺血后处理(IPO)组。于再灌注2h处死大鼠,取血检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及胱抑素C(Cys C)的水平,并测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。应用RT-PCR及Western-blot方法定量分析Nrf2,血红素氧合酶1(H0-1),y-谷氨酞半肤氨酸合成酶(-GCS)蛋白在肾组织中的表达。结果:IPO组肾组织Cr,BUN,Cys C及MDA水平显著低于缺血再灌注组,SOD活性显著高于缺血再灌注组,Nrf2,H0-1,γ-GCS蛋白在肾组织中的表达明显增多。结论:缺血后处理可能通过提高Nrf2在肾组织中的表达增多避免加重肾缺血再灌注损伤。     

Nrf2、NQO1在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的 探讨核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor,Nrf2)、醌氧化还原酶(triphosphopyridine nucleotide quinine oxidoreductase,NQO1)在肾透明细胞癌中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学法检测52例肾透明细胞癌及正常肾组织(癌旁＞ 4cm处正常肾组织,病理学检测证实)Nrf2、NQO1蛋白的表达,采用逆转录聚合酶链反应法检测36例肾透明细胞癌及正常肾组织Nrf2、NQO1mRNA的表达.结果 肾透明细胞癌组织Nrf2、NQO1蛋白及mRNA的表达明显高于正常肾组织(P＜0.05).同时Nrf2蛋白表达与NQO1蛋白表达呈正相关(rs=0.594,P＜0.05).结论 Nrf2与NQO1在肾透明细胞癌中表达升高,可能成为评价肾透明细胞癌发生、发展的生物学指标.     

金丝桃苷通过激活Keap1/Nrf2/HO-1通路保护小鼠GC-2细胞的氧化损伤

目的 从Keap1/Nrf2/HO-1通路角度研究金丝桃苷（Hyp）对H2O2所诱导的小鼠精母细胞（GC-2）氧化损伤的保护作用。方法 将GC-2细胞随机分为正常组、模型组、氮乙酰半胱氨酸组（阳性组,NAC,2.5 mmol/L)以及金丝桃苷组（50、100、200 μmol/L）,各组按剂量孵育48 h后,除正常组外其余各组细胞加入H2O（2 150 μmol/L）处理2 h,正常组给予等容量培养基。采用CCK-8法检测细胞的活力,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,酶联免疫法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）活力以及丙二醛（MDA）含量,Western blot和RT-qPCR检测Nrf2、Keap1、HO-1蛋白及mRNA的相对表达水平,免疫荧光法检测Nrf2核转位水平。结果 150 μmol/L H2O2干预2 h可制备GC-2细胞氧化损伤模型。与正常组比较,模型组GC-2细胞增殖率以及SOD、GSH、CAT活力显著降低,MDA含量、细胞凋亡率,Keap1和Nrf2 mRNA表达显著升高（P<0.05）以及Keap1蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,NAC组和金丝桃苷200 μmol/L组细胞增殖率和SOD、GSH-PX、CAT活力显著升高,MDA含量、细胞凋亡率显著下降（P<0.05）;金丝桃苷200 μmol/L组Keap1 mRNA表达显著下降,HO-1 mRNA表达显著升高（P<0.01）;金丝桃苷200 μmol/L组Nrf2核蛋白（NEs-Nrf2）以及HO-1的蛋白表达显著升高（P<0.05）,Keap1蛋白表达显著下降（P<0.01）;金丝桃苷组出现了明显的核转位现象（P<0.05）。结论 金丝桃苷可能通过激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,对H2O2诱导的GC-2细胞氧化损伤具有保护作用。     

萝卜硫素通过Nrf2/ARE信号通路对急性肺损伤小鼠的保护作用研究

目的 探讨萝卜硫素(SF)能否通过上调转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2),起到抗炎和抗氧化应激作用减轻小鼠急性肺损伤(ALI)。 方法 将36只健康小鼠随机分成4组:对照组(C组),急性肺损伤组(ALI组),SF溶剂组和SF组。SF组于腹腔注射SF 20 mg/kg,SF溶剂组于腹腔注射同等量的SF载体溶剂,2次/d,连续3 d。第4天时,ALI组、SF溶剂组和SF组腹腔注射脂多糖(LPS)10 mg/kg制备内毒素诱发急性肺损伤模型,C组则腹腔内注射同等容量的生理盐水。注射LPS或生理盐水6 h后,麻醉开腹,从下腔静脉取静脉血,通过ELISA法检测血清中IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。光镜下观察肺组织病理学结果,并进行肺损伤评分。检测并计算小鼠肺湿重/干重比,并采用Western blotting法测定肺组织内Nrf2核蛋白表达,比色法检测肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、一氧化氮合酶(iNOS)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量。 结果 与C组比较,ALI组和SF溶剂组肺损伤评分、IL-6、TNF-α、MPO、iNOS升高,SOD和湿重/干重比值降低,Nrf2蛋白表达上调(均P<0.05)。与ALI组比较,SF组肺损伤评分、IL-6、TNF-α、MPO、iNOS降低,SOD、湿重/干重比值升高,Nrf2蛋白表达上调(均P<0.05),而SF溶剂组各项指标与ALI组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。 结论 SF可通过诱导Nrf2的表达,减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤的严重程度,使血清促炎症介质浓度降低,使组织中氧化应激损伤指标降低,Nrf2转录因子对ALI的保护作用与其抗炎和抗氧化作用有关。      

结肠癌中Nrf2和Keap1的表达及与增殖指数的关系

目的 检测结肠癌(Colorectal carcinoma, CRC)中核因子E2相关因子2(Nrf2)和Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1(Keap1)的表达,分析二者与增殖细胞核抗原(PCNA)的关系。方法 本实验以96例CRC术后的肿瘤组织作为观察组,选择距肿物边缘>3厘米正常结肠粘膜组织作为对照组。应用免疫组化法、Western Blot法检测二组中Nrf2、Keap1蛋白的表达,应用荧光实时定量PCR法检测二组中Nrf2、Keap1 mRNA的表达。应用相关分析观察Nrf2与PCNA、Keap1与PCNA的关系。结果 免疫组化方法显示二组中Nrf2和Keap1蛋白的阳性率差别有统计学意义(P<0.05)。观察组中Nrf2和Keap1的阳性率在不同肿物最大径、浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期分组中的表达差别有统计学意义(P<0.05),Nrf2和Keap1的阳性率在不同性别、年龄和分化程度分组中的表达差别无统计学意义(P>0.05),观察组中Nrf2和Keap1的表达与预后有关(P<0.05)。观察组中Nrf2和PCNA之间具有正相关性(P<0.05),Keap1和PCNA之间具有负相关性(P<0.05)。Western Blot法显示二组中Nrf2和Keap1的半定量表达差别有统计学意义(P<0.05)。荧光PCR法显示二组中Nrf2和Keap1 mRNA的表达差别有统计学意义(P<0.05)。结论 Nrf2高表达、Keap1低表达在CRC的形成和进展有重要作用。Nrf2/Keap1的协同作用可能通过对细胞增殖的调节起作用,术后检测Nrf2和Keap1的表达对判断预后有一定价值。     

急性脑梗死患者外周血Keap1-Nrf2/ARE信号通路变化与预后的相关性分析

目的 分析急性脑梗死(ACI)患者外周血Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路变化与预后的相关性。方法 选取2020年6月—2022年3月安徽医科大学附属巢湖医院神经内科诊治ACI患者110例作为研究对象,根据溶栓后3个月的改良Rankin量表(mRs)评分分为近期预后良好组与近期预后不良组,随访1年ACI是否复发分为远期预后良好组与远期预后不良组,比较不同近远期预后组溶栓前、溶栓后7 d、溶栓后3个月外周血Keap1、醌氧化还原酶1(NQO1)、Nrf2、ARE蛋白相对表达量、神经功能缺损(NIHSS)评分,分析各蛋白与NIHSS评分的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)评价各蛋白对预后的预测价值。结果 110例ACI患者,近期预后良好患者78例,近期预后不良患者32例;随访1年,失访6例,远期预后良好患者83例,远期预后不良患者21例。近远期预后不良组溶栓后7 d、3个月Keap1蛋白相对表达量、NIHSS评分高于近远期预后良好组,NQO1、Nrf2、ARE蛋白相对表达量低于近远期预后良好组(P均<...     

亚低温在抑制小鼠脓毒症相关急性肾损伤中铁死亡的作用探究

目的：探讨亚低温是否通过激活核因子-E2相关因子2(Nrf2)抑制小鼠脓毒症相关急性肾损伤（S-AKI）中的铁死亡，从而发挥保护作用。方法：选择15只SPF级C57BL/6小鼠随机分为假手术组（S组）、脓毒症常温组（N组）、脓毒症亚低温组（H组），每组5只。盲肠结扎穿孔术建立小鼠脓毒症模型，分别对3组进行相应处理。苏木精—伊红（HE）染色观察小鼠肾组织损伤情况，酶标仪法测定血清尿素氮（BUN）及肌酐（Cr）水平、肾组织还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量，蛋白免疫印迹法（western blotting）和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定肾组织酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、Nrf2及其下游因子血红素氧合酶1(HO-1)的蛋白及mRNA表达水平。结果：与S组比较，N组和H组肾组织病理有不同程度损伤，BUN、Cr水平升高，GSH含量减少，MDA含量增加，ACSL4蛋白及mRNA表达升高、GPX4蛋白及mRNA表达降低、Nrf2和HO-1蛋白及mRNA表达显著升高（均P<0.05）;H组与N组比较，病理损伤减轻，BUN、...     

甘草酸对大鼠肝星状细胞氧化应激抑制作用的机制研究

目的 探讨甘草酸对大鼠肝星状细胞(HSC)的氧化应激及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶(HO)-1信号通路的影响.方法 体外培养HSC细胞,将细胞分为5组:空白对照组、次氮基三乙酸铁(Fe-NTA)处理组、Fe-NTA+5 μmol/L甘草酸组、Fe-NTA+10 μmol/L甘草酸组及Fe-NTA+20 μmol/L甘草酸组;给药24 h后收集细胞,采用相关试剂盒检测HSC细胞中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽(GSH)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;RT-PCR和Western blot方法分别检测Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白表达水平.结果 Fe-NTA处理组中MDA、NO含量明显升高,而GSH水平显著降低,SOD酶活性也显著降低;而甘草酸处理的3组细胞中MDA、NO含量显著降低,GSH水平显著升高,SOD酶活性也显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05).Fe-NTA处理组中Nrf2和HO-1mRNA及蛋白表达水平与空白对照组比较显著降低,而甘草酸处理的3组细胞中Nrf2和HO-1mRNA及蛋白表达水平相对于Fe-NTA处理组显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 甘草酸有抗HSC细胞氧化应激损伤的作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关.     

Nrf2/NQO1信号通路在胃癌干细胞氧化应激反应中的作用机制

目的：观察核因子E2相关因子2(Nrf2)、醌氧化还原酶(NQO1)在胃癌干细胞和正常胃黏膜组织中的表达,探讨Nrf2/NQO1信号通路在胃癌干细胞氧化应激反应中的作用机制。方法：采用肿瘤球悬浮分选法从60例胃癌组织标本中分选胃癌干细胞,干细胞随机分为干细胞初分组和激活组。30例正常胃黏膜组织作为对照。采用Western blotting法检测各组Nrf2、NQO1蛋白表达水平和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性。结果：与正常对照组比较,干细胞初分组和激活组Nrf2、NQO1的表达水平升高(P<0.05),SOD活性显著降低,MDA活性则显著升高(P<0.05);与干细胞初分组比较,激活组Nrf2、NQO1的表达水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著增强,MDA活性显著下降(P<0.05)。结论：激活Nrf2/NQO1通路可以调节胃黏膜组织中SOD和MDA的活性,增强细胞对氧化应激的耐受性,发挥保护细胞的作用。     

荔枝核皂苷对糖调节受损大鼠胰腺组织氧化应激的改善作用及其机制

目的：研究荔枝核皂苷（SL）对糖调节受损（IGR）大鼠氧化应激及核转录因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶1（HO-1）信号通路的作用,阐明其相关机制。方法：采用高脂饲料喂养制备IGR大鼠模型,随机分为模型组、二甲双胍组（0.20 g·kg^-1）、低剂量SL组（0.05 g·kg^-1）、中剂量SL组（0.10 g·kg^-1）和高剂量SL组（0.20 g·kg^-1）,同时设正常对照组,每组12只,连续给药6周。观察SL对实验大鼠糖脂代谢的影响,采用实时荧光定量（Real-time PCR）法检测大鼠胰腺组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和HO-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测大鼠胰腺组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达水平,采用SOD和MDA试剂盒检测大鼠胰腺组织中SOD活性和MDA水平。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠空腹血糖（FBG）和血脂水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平降低（P<0.01）,MDA水平和mRNA表达水平升高（P<0.01）,胞核和胞质中Nrf2蛋白表达水平和核转位率升高（P<0.01）,HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较,二甲双胍组和中、高剂量SL组大鼠FBG和血清甘油三酯（TG）水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平升高（P<0.05或P<0.01）,MDA水平和mRNA表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,胞质中Nrf2表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,胞核中Nrf2表达水平和核转位率升高（P<0.05或P<0.01）,HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。结论：SL具有改善糖脂代谢和增强抗氧化应激作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路、促进Nrf2核转位及增强下游抗氧化基因HO-1表达有关。     

AIM2炎性小体在早期非小细胞肺癌组织中的表达及其作用探讨

目的：观察黑素瘤缺乏因子2(AIM2)炎性小体在早期非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系，探讨AIM2炎性小体在早期NSCLC发病中的作用及潜在机制。方法：收集57例早期NSCLC的癌组织及其癌旁组织石蜡标本，其中腺癌33例，鳞癌24例，采用免疫组织化学法检测肺癌及癌旁组织中AIM2炎性小体组分AIM2、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1的蛋白表达，并检测其下游细胞因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18的蛋白表达，分析其与临床病理特征的关系，探讨各蛋白表达之间的相关性。结果：NSCLC癌组织中炎性小体组分AIM2、ASC、caspase-1及IL-1β、IL-18的阳性表达率均明显高于癌旁组织(P<0.01)。AIM2、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18在腺癌中的阳性表达率均高于鳞癌(P<0.05～P<0.01);在低分化、伴有淋巴结转移癌组织中的阳性表达率均分别高于高中分化、无淋巴结转移的癌组织(P<0.05～P<0.01);不同性别、年龄、肿瘤直径癌组织中AIM2、ASC、caspase-1、I...     

核因子E2相关因子2抗氧化反应元件通路在血管中的表达

核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)信号通路由转录因子Nrf2、调控蛋白Keap1以及抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)组成,调节ARE下游包括氧化还原蛋白、二相解毒酶、转运蛋白等超过200种基因的表达,是介导抗氧化反应的关键信号途径。近年来,研究发现Nrf2通路有血管保护作用,文中就其在血管中的表达及意义进行综述。     

非小细胞肺癌组织中FGF9、SMAD2表达与临床病理特征及预后的关系

目的 分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者癌组织中成纤维细胞生长因子9（FGF9）、SMAD2表达与临床病理特征以及预后的相关性。方法 选取本院2018年1月-2020年12月收治的75例NSCLC患者作为研究对象,收集患者手术切除癌组织与癌旁组织,免疫组化法比较癌组织与癌旁组织FGF9、SMAD2蛋白表达情况,根据患者癌组织FGF9、SMAD2表达情况将患者分为FGF9阴性表达组、FGF9阳性表达组,SMAD2阴性表达组、SMAD2阳性表达组,比较组间临床病理特征差异;采用Spearman法分析FGF9与SMAD2表达相关性;构建KM曲线,分析患者FGF9、SMAD2表达与生存期的关联;通过COX法分析影响NSCLC患者预后不良的危险因素。结果 与癌旁组织相比,NSCLC组织中FGF9表达阳性率、SMAD2表达阳性率升高（P<0.05）;是否发生淋巴结转移、TNM I+II期与TNM III期NSCLC患者FGF9阳性表达率比较差异有统计学意义（P<0.05）;是否淋巴结转移、TNM I+II期与TNM III期、中高分化与低分化NSCLC患者SMAD2阳性表达率比较差异有统计学意义（P<0.05）;NSCLC组织中蛋白FGF9、SMAD2表达呈正相关（P<0.05）;随访期间FGF9阳性表达组患者累积生存率（20.8%）低于阴性表达组（77.3%）,SMAD2阳性表达组患者累积生存率（25.9%）低于阴性表达组（76.5%）,组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;FGF9阳性表达组患者无进展生存率（9.4%）低于阴性表达组（63.6%）,SMAD2阳性表达组患者无进展生存率（15.5%）低于阴性表达组（58.8%）,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NSCLC组织FGF9、SMAD2阳性表达升高,均与患者临床病理特征及预后相关,FGF9、SMAD2可能共同参与NSCLC的癌进展     

芍药苷通过激活Nrf2/Keap1信号通路改善脓毒症急性肺损伤的研究

  目的  探讨芍药苷（paeoniflorin, PF）对脓毒症所致急性肺损伤的影响及其与转录因子NF-E2相关因子2（nuclear factor erythyroid 2-related factor 2, Nrf2）/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）信号通路的关系。  方法  采用盲肠结扎穿孔（CLP）术诱导建立脓毒症大鼠模型。将大鼠随机分成假手术组（Sham）、模型组（Model）、低剂量PF组（L-PF,50 mg/kg）、高剂量PF组（H-PF,150 mg/kg）及高剂量PF+Nrf2抑制剂组（H-PF+ML385,150 mg/kg PF+30 mg/kg ML385）,每组10只。采用改良的脓毒症严重程度评分标准对大鼠脓毒症严重程度进行评分;HE染色观察大鼠肺组织病理变化;黄嘌呤氧化酶法测定大鼠肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性;硫代巴比妥酸法测定大鼠肺组织丙二醛（MDA）含量;ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白介素（IL）-1β和IL-6水平;Western blot和qRT-PCR分别检测肺组织中Nrf2、Keap1、血红素氧合酶1（HO-1）蛋白和mRNA的表达水平。  结果  与Sham组比较,Model组大鼠出现严重的脓毒症;肺组织出现严重炎症浸润,出现大量巨噬细胞,肺间质肿大;肺组织中促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6及氧化指标MDA含量均上升（P<0.05）,而抗氧化指标SOD含量下降（P<0.05）;Nrf2及HO-1蛋白和mRNA表达均降低（P<0.05）,Keap1蛋白和mRNA表达增加（P<0.05）。与Model组比较,PF给药组大鼠脓毒症程度均降低,肺组织损伤均得到改善,肺组织中IL-1β、TNF-α、IL-6及MDA含量均下降（P<0.05）,SOD活性均增加（P<0.05）;Nrf2及HO-1蛋白和mRNA表达均增加（P<0.05）,Keap1蛋白和mRNA表达降低（P<0.05）。与H-PF组比较,Nrf2抑制剂ML385干预后可抑制PF对脓毒症大鼠上述指标的改善。  结论  PF通过激活Nrf2/Keap1信号通路,降低组织氧化应激与炎症水平,改善脓毒症所致的急性肺损伤。     

P-gp、MRP、LRP、P53及c-erbB-2在非小细胞肺癌中的表达

目的:探讨P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、P53蛋白及c-erbB-2蛋白在术前未经治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及相互间的关系.方法:采用免疫组化法检测78例NSCLC癌组织及15例癌旁肺组织(距癌灶5 cm)中P-gp、MRP、LRP、P53及c-erbB-2的蛋白表达情况.结果:免疫组化显示P-gp、MRP、LRP、P53及c-erbB-2在肺癌组织中的阳性表达率分别是65.4%(51/78)、39.7%(31/78)、56.4%(44/78)、53.8%(42/78)及43.6%(34/78),均显著高于癌旁肺组织中的表达水平(P<0.05);MRP和LRP蛋白表达在不同病理类型(腺癌、鳞癌及大细胞癌)之间比较均具有显著性差异(P分别为0.008和<0.001),LRP及P53蛋白表达在不同病理分化程度之间具有显著性差异(P分别为0.025和0.026);c-erbB-2表达与P-gp、MRP、LRP、P53均有相关性(Spearman相关系数分别为0.317、0.401、0.519和0.341,P值分别为0.005、<0.001、<0.001和0.002),P53与MRP之间(Spearman相关系数为=0.260,P=0.022)以及LRP与MRP之间(Spearman相关系数为0.371,P=0.001)有相关性.结论:P-gp、MRP、LRP、P53及c-erbB-2这些蛋白的表达在NSCLC的多药耐药形成及肿瘤的发生发展中可能具有一定的协同作用.