MMP-9对缺血再灌注治疗后早期心功能的评价

目的探讨血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）对冠心病患者缺血再灌注治疗后早期心功能评价的价值。方法用夹心酶联免疫吸附法检测81例均行冠状动脉造影术（CAG）检查的冠心病患者术前1d,术后1d、3d、5d血清MMP-9、N-BNP水平,其中单纯CAG组30例（对照组）,择期PCI组25例,急诊PCI组26例（均为AMI）;心脏超声定量测定心脏结构以及功能指标。结果各组间比较,急诊PCI组血清MMP-9水平在术前1d、术后1d和3d与对照组比较明显升高;择期PCI组血清MMP-9水平在术后1d、术后3d与对照组比较明显升高;急诊PCI组血清MMP-9水平在术后3d与择期PCI组比较明显升高。急诊PCI组内各时间点比较,术后3d血清MMP-9、N．BNP水平较术前1d明显升高。上述差异均有统计学意义（P〈0．05）。急诊PCI组术后3d血清MMP-9与△VE存在负相关（r=-0．555,P=0．04）,与N-BNP存在正相关（r=0．56,P=0．04）,差异有统计学意义。结论血清MMP-9与N—BNP、AVE有良好的相关性,可以作为冠心病缺血再灌注治疗中对早期心功能进行评价的指标。     

p38MAPK对大鼠肾缺血再灌注损伤早期MMP-9表达的调控

目的 探讨p38MAPK对大鼠肾缺血再灌注后MMP-9表达的调控情况及它们在肾缺血再灌注损伤中的作用.方法 48只健康雄性SD大鼠,分组建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,测定各组实验大鼠血清肌酐水平的变化,应用免疫组化二步法检测p38MAPK、MMP-9表达的变化.结果 与假手术组比较,缺血再灌注各组血清肌酐水平升高,缺血45min再灌注,24h达高峰(P＜0.01).MMP-9蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血45min再灌注6h有少量表达,再灌注12、24h及72h呈阳性表达,在24h达高峰(P＜0.01);p38MAPK蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血45 min,再灌注6、12h及24 h呈阳性表达,12h达高峰(P＜0.01).p38MAPK,MMP-9蛋白的表达与血清肌酐水平的变化呈显著正相关.结论 肾缺血再灌注可激活p38MAPK,活化的p38MAPK可以上调MMP-9蛋白的表达,可能促进了肾缺血再灌注损伤的发生和发展.     

MMP-2、MMP-9在大鼠肾缺血再灌注损伤早期的表达及意义

目的探讨大鼠肾缺血再灌注后肾组织中MMP-2、MMP-9的表达及在肾缺血再灌注损伤中的作用机制。方法48只健康雄性SD大鼠,分组建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,应用免疫组化二步法检测MMP-2、MMP-9表达的变化,测定肾组织髓过氧化物酶(MPO)活性及血清肌酐(Scr)水平,以反映中性粒细胞浸润及肾功能损害的程度变化。结果MMP-2、MMP-9蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血45min再灌注6h有少量表达,再灌注12、24、72h呈阳性表达,以24h达高峰(P<0.05),多表达在皮质深层近曲小管及髓质区。与假手术组比较,缺血再灌注各组Scr水平和MPO的活性升高,且随再灌注时间延长而进一步升高,24h达高峰(P<0.01)。MMP-2和MMP-9蛋白的表达变化与Scr水平呈显著性正相关关系(r分别为0.763和0.874,P<0.01);与MPO活性也呈显著性正相关关系(r分别为0.752和0.693,P<0.01)。结论肾缺血再灌注后肾组织中MMP-2、MMP-9表达增加,提示MMP-2、MMP-9可能与早期肾缺血再灌注后损伤及加重有关。     

缺血再灌注损伤大鼠脑组织MMP-2、MMP-9动态变化与脑水肿改变

[摘要]目的探讨发生脑缺血再灌注损伤时MMP-2、MMP-9表达和活性的变化规律及应用强力霉素后脑水肿的变化。方法大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,根据再灌注时间不同分为再灌注3、6、12、24、72、120 h组及假手术组。应用干湿重法测定强力霉素干预后缺血侧脑半球含水量的变化,应用蛋白质印迹法检测缺血侧脑组织MMP-2和MMP-9蛋白表达变化,应用明胶酶谱法检测缺血侧脑组织MMP-2和MMP-9活性变化。结果MMP-2在脑缺血再灌注3 h和120 h表达和活性升高(P<0.01);MMP-9在脑缺血再灌注6 h表达和活性开始升高(P<0.01),到再灌注24 h达到峰值,再灌注120 h降至正常水平(P>0.05);脑缺血再灌注大鼠各时间点缺血侧脑半球含水量与假手术组相比皆升高,并且随着再灌注时间延长持续升高;应用强力霉素大鼠缺血侧脑半球含水量与同时间点生理盐水组相比降低(P<0.05或P<0.01)。结论MMP-2和MMP-9降解细胞外基质引发血管源性脑水肿,MMP-2和MMP-9的表达及其活性在脑缺血再灌注120 h内的交替变化可能会影响脑水肿的发展。     

MMP-2及MMP-9在缺血再灌注大鼠脑中的表达及意义

目的研究短暂的MCAO诱导局灶脑缺血后MMP-2及MMP-9在不同时相的表达及细胞分布情况,进一步评估MMP-2及MMP-9与缺血脑组织损伤的关系。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术组,缺血90分钟,再灌注6小时、12小时、24小时、48小时、2天、5天、7天组。采用栓线法制备大鼠大脑中动脉,短暂缺血再灌注不同时点模型。利用免疫组化染色方法,观察MMP-2及MMP-9表达情况。观察结果以-χ±s形式表示,统计处理用方差分析及t检验。结果(1)在阴性对照组中发现MMP-9和MMP-2免疫阳性细胞;(2)在缺血对侧没有MMP-9和MMP-2表达;(3)MMP-9在小胶质细胞、缺血神经元、内皮细胞、嗜中粒细胞中表达;(4)MMP-2在星形细胞、巨噬细胞中表达;(5)MMP-9阳性表达细胞数与对照组比较在缺血再灌注6小时没有明显差别。在缺血再灌注12小时、24小时2天、5天、7天均显著增加,其中2天为高峰期,5天、7天渐下降;(6)MMP-2阳性表达细胞数与对照组比较在缺血再灌注6小时没有明显差别。在缺血再灌注12小时、24小时、2天、5天、7天增加显著,其中5天为高峰期,7天渐下降。结论在MCAO/R后MMP-2及MMP-9表达是上调的,且两者的细胞分布及时间表达不同,两者表达有时间依赖性,提示MMP-2与再灌注早期BBB的开放及组织损伤修复即血管生成、神经胶质增生及坏死区细胞碎屑的清除有关。MMP-9在中风后引起基膜下ECM成分蛋白水解伴随血管通透性增加及血管完整性丧失,以致BBB破坏导致出血及水肿。     

缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤后早期细胞增殖的影响

目的　研究缺血预处理 (IP)对肝缺血再灌注 (IR)损伤后早期细胞增殖的影响。　方法　 5 4只SD大鼠随机分成IR组和IP组。利用肝原位部分IR模型 ,于复灌后 0 ,1,2 ,4h取材 ,制备单细胞悬液 ,应用流式细胞仪 ,以Ki 6 7抗原作为细胞增殖的定量分析方法 ,检测肝IR损伤后早期细胞增殖的变化 ,并观察IP对其影响。　结果　与IR组相比 ,在复灌后 0 ,1h ,IP组肝细胞Ki 6 7表达率明显增高 [(2 8 86± 6 34)vs (19 4 0± 5 35 ) ,(4 6 82± 9 80 )vs (2 2 4 0± 5 0 8) ,P <0 0 5 ],复灌后 2 ,4hIP组肝细胞Ki 6 7表达率变化不显著 [(35 77± 6 87)vs (34 2 1± 6 34) ,(4 2 0 8± 10 75 )vs (4 3 87± 10 77) ,P >0 0 5 ) ]。　结论　IP可促进肝细胞在IR损伤后早期细胞增殖 ,可能是其对IR损伤起到保护作用的机制之一。     

芬太尼对大鼠全心缺血再灌注心功能的影响

目的 观察芬太尼对离体大鼠全心缺血再灌注心功能的影响。方法 ３０只ＳＤ大鼠分为３组，麻醉后开胸取心，经主动脉插管行Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ恒压灌注。平衡１５ｍｉｎ后，对照组灌注Ｋ－Ｈ液，两芬太尼组灌注含芬太尼１０或３０μｇ／Ｌ的Ｋ－Ｈ液１０ｍｉｎ，全心缺血２５ｍｉｎ，复灌３０ｍｉｎ，实验过程中测左室发展压（ＬＶＤＰ），左室舒张末期压（ＬＶＥＤＰ），左室收缩及舒张速率（＋ｄＰ／ｄｔ，－ｄＰ／ｄｔ）及冠     

EPO对大鼠脑缺血再灌注后脑水肿及MMP-9的影响

目的观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠脑缺血再灌注后神经功能缺损评分、脑水肿及MMP-9影响。方法将健康SD大鼠150只分为假手术组、缺血组及EPO组,线栓法复制大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2 h后,缺血组于再灌注开始前10 min经腹腔注入生理盐水2 ml,EPO组注射重组人红细胞生成素(3 000 U/kg)+生理盐水2 ml,再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d及10 d,采用Zea Longa法测定大鼠神经功能缺损评分后,断头取脑,按Elliot公式计算脑组织含水量,免疫组织化学法测定相应时间点MMP-9免疫阳性细胞数。结果缺血组再灌注6 h出现神经功能障碍,48h最严重,72 h开始恢复;缺血组脑含水量在再灌注6 h轻度升高,24-48 h时达高峰;缺血组再灌注6 h有少量表达MMP-9的免疫阳性细胞,12 h开始增多,48 h达到高峰,72 h后有所下降,7 d、10 d明显降低。EPO治疗组与缺血组相比,神经功能缺损评分降低、脑含水量和MMP-9免疫阳性细胞数明显减少(P<0.05)。结论 EPO对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制可能与降低MMP-9表达有关。     

硬膜外注射吗啡对兔急性缺血再灌注后左心功能的影响

目的在兔急性心梗再灌注模型中通过硬膜外给予吗啡,探讨其对兔心肌急性缺血再灌注损伤的保护作用。方法采取开胸结扎LAD(left anterior descending,左前降支)的急性心肌梗死模型,结扎冠状动脉LAD 30min后,松开结扎线,再灌注4 h。新西兰兔22只随机分成2组:①硬膜外吗啡组:经硬膜外注入吗啡(0.25 mg/kg,配成0.5 mL溶液);②对照组:经硬膜外注入生理盐水0.5 mL。缺血再灌注后逐层关胸,4周后行超声心动图检查。结果缺血再灌注后4周,两组LVEDD和LVESD均明显增大,但以对照组为甚,组间比较差异有显著性(P<0.05);而LVEF和LVFS,在缺血再灌注后4周硬膜外吗啡组分别降低了9.36%和8.24%,对照组分别降低了13.53%和12.18%,对照组比硬膜外组更显著(P<0.05),左室心功能硬膜外吗啡组好于对照组(LVEF:69.73%vs.62.99%;LVFS:31.39%vs.26.59%;LVEDD:14.35 vs.16.96;LVESD:9.52 vs.12.01),差异有统计学意义(P<0.05)。结论硬膜外注射吗啡能改善缺血再灌注后左心功能,并对缺血再灌注心肌有明显的保护作用。     

黄连素预处理对缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响

目的观察黄连素预处理对缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响。方法60只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、黄连素预处理组和辛伐他汀预处理组,给药组连续腹腔注射7天,假手术组和缺血再灌注组腹腔注射等量生理盐水。在左冠状动脉前降支中上1／3处结扎,1h后剪开结扎线,用止血钳夹闭胸腔,再灌注2h,测量左室收缩压（LVSP）,左室舒张末压（LVEDP）及左室最大压力上升及下降速率（&#177;dp／dtmax）。结果与缺血再灌注组比较,黄连素预处理组、辛伐他汀预处理组均能显著增加LVSP（P〈0．01）,显著减少LVEDP（P〈0．01）,显著增加&#177;dp／dtmax的绝对值（P〈0．01）。黄连素组与辛伐他汀组比较,LVSP和＋dp／dtmax明显增加（P〈0．05）。结论黄连素预处理能够改善缺血再灌注损伤大鼠的心功能。     

利多卡因对缺血再灌注离体大鼠心功能的影响

目的：探讨利多卡因对缺血再灌注离体大鼠心功能的影响及其可能机制。方法：40只健康成龄雌性Wistar大鼠,随机分为5组（n=8）,建立Langendorff模型。缺血再灌注组（A）：灌注Krebs—Henseleit（K—H）缓冲液;利多卡因1mg／L组（B）：灌注含1mg／L利多卡因的K—H液;利多卡因2．5mg／L组（C）：灌注含2．5mg／L利多卡因K—H液;利多卡因5mg／L组（D）：灌注含5mg／L利多卡因的K—H液;利多卡因＋格列苯脲组（E）：灌注含2．5mg／L利多卡因和10Ixmol／L格列苯脲的K—H液。各组分别缺血前灌注相应灌流液20min,全心缺血30min,再灌注60min。记录缺血前5min及再灌注30min和60min的心率（HR）、左心室形成压（LVDP）、左室内压上升最大速率（＋dp／dtmax）、左室内压下降最大速率（-dp／dtmax）等心功能参数。结果：与A组比较,再灌注30min和60min时,C组的HR、LVDP、-＋dp／dtmax均升高（P〈0．05）,B、D两组上述参数变化无统计学意义（P〉0．05）。与C组比较,再灌注30min和60min时,E组各项参数均降低（P〈0．05）。结论：含2．5mg／L利多卡因的K—H液可显著改善缺血再灌注离体大鼠心功能,部分机制可能与心肌细胞和线粒体ATP敏感性钾通道有关。     

大鼠脑缺血再灌注后MMP-9、MMP-2表达与脑水肿的关系

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的动态变化规律及其与脑水肿的关系。方法:将80只SD大鼠分为假手术组(n=10)和实验组(再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d和10 d组,n=10)。线栓法复制大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d和10 d测定大鼠神经功能缺损评分;断头取脑,按Elliot公式计算脑组织含水量,免疫组织化学法测定相应时间点MMP-2、MMP-9免疫阳性细胞数。结果:实验组再灌注后6 h出现神经功能障碍,48 h最严重,10 d仍未完全恢复,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注6 h出现脑水肿,48 h最严重,7 d时脑水肿仍存在,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注6 h有少量的MMP-9免疫阳性细胞,12 h开始增多,48 h达到高峰,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注24 h见少量MMP-2免疫阳性细胞,48 h逐渐增多,72 h最多,7 d和10 d仍有较多表达,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑缺血再灌注后MMP-2和MMP-9均升高,两者表达方式的不同,提示MMP-9主要参与脑缺血再灌注后脑水肿形成,MMP-2可能与组织修复和神经再生有关。     

肠缺血-再灌注对大鼠左心功能的影响

目的观察肠缺血-再灌注大鼠左心功能的变化并就其改变的发生机制进行探讨.方法健康雄性SD大鼠120只,按缺血前、缺血后1小时、再灌注1小时、2小时、3小时、4小时6个时间点随机分为6大组(20只/大组).各大组再随机分为假手术对照组(SC组,n=10)和肠缺血-再灌注组(IIR组,n=10).通过4道生理记录仪分别观察记录缺血前、缺血后1小时和再灌注后不同时间SC组和IIR组大鼠左心功能的变化,并检测各组大鼠心肌组织超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、黄嘌吟氧化酶(XO)活性和丙二醛(MDA)含量,同时对心肌组织行光镜检查.结果缺血前,IIR组和SC组两组大鼠左心室功能各指标均无显著差异;缺血1小时,与SC组比较,IIR组LVSP、LV dp/dtmax、MAP明显下降(P＜0.05,P＜0.01),LVEDP明显升高(P＜0.01);再灌注后,以上变化更为显著.同一时间IIR组和SC组大鼠心肌组的SOD、GSH-PX、XO活性和MDA含量比较,均无显著性差异,心肌组织光镜下均未见明显的形态学异常改变.结论大鼠肠缺血-再灌注可造成左心室功能的下降.     

竹叶总黄酮对缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响

目的:探讨竹叶总黄酮对缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响。方法:采用左冠状动脉结扎的方法复制大鼠缺血再灌注损伤模型。分别测定假手术组、模型组、辛伐他汀组和竹叶总黄酮组的左室收缩压(LVSP),左室舒张末压(LVEDP)及左室最大压力上升及下降速率(±dp/dtm ax)并记录心律失常发生的类型和频率。结果:与模型组比较,竹叶总黄酮组、辛伐他汀组LVSP和+dp/dtm ax均显著升高(P<0.01),LVEDP和心律失常的发生均减少(P<0.01,P<0.05);竹叶总黄酮组+dp/dtm ax显著高于辛伐他汀组(P<0.05)。结论:竹叶总黄酮能够保护缺血再灌注损伤大鼠的心功能。     

肠缺血再灌注后肺损伤治疗进展

肠缺血再灌注 (ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓｃｈｅｍｉａ -ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ,ＩＩＲ)可因急性失血、休克、ＤＩＣ、肠梗阻、严重多发性创伤等因素引起。ＩＩＲ不仅引起肠道的损伤 ,尚可导致远隔器官的损伤 ,甚至多系统器官功能衰竭 (ｍｕｌｔｉｐｌｅｓｙｓｔｅｍｏｒｇａｎｆａｉｌｕｒｅＭＳＯＦ) ,其中以肺损伤引起的急性呼吸窘迫综合征 (ａｃｕｔｅｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｔｒｅｓｓｓｙｎ ｄｒｏｍｅ ,ＡＲＤＳ)最为突出。研究表明 ,自由基、钙超载在缺血再灌注损伤发病中起着重要的作用。而自由基的大量产生与黄嘌呤氧化酶…     

评价早期肺缺血再灌注损伤敏感性的细胞因子探讨

[目的]探讨敏感反映早期肺缺血再灌注损伤的细胞因子.[方法]复制兔早期在体肺缺血再灌注模损伤模型,分别于左肺门阻断2h和恢复灌注1h后采取动脉血液标本行血气分析和采用酶联免疫吸附法测定动脉血白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α);摘取左肺行病理学检查和测定湿、干质量及湿干重比.并与缺氧对照组比较,动态观察细胞因子的水平变化.[结果]成功制作兔早期在体肺缺血再灌注损伤模型,在实验全过程中,两组外周血的IL-6和IL-8含量均无明显变化(P>0.05);恢复灌注1h后,缺血再灌注组的IL-1β和TNF-α含量明显高于对照组和灌注前(P<0.01).[结论]细胞因子IL-1β和TNF-α是评价兔早期肺缺血再灌注损伤敏感性的细胞因子.     

强力霉素抑制MMP-9对大鼠局灶性缺血再灌注脑损伤的保护作用

目的观察强力霉素对脑缺血再灌注MMP-9活性的影响,探讨其对神经元的保护作用。方法利用大脑中动脉线栓法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)制备局灶性脑缺血再灌注模型,SD大鼠分为假手术组、生理盐水组、强力霉素组,每组18只。激光多普勒血流仪分别检测大鼠手术前、MCAO时、再灌注24 h大脑中动脉脑血流;再灌注24 h时应用TTC染色法观察大鼠脑梗死体积;明胶酶谱法检测缺血区脑组织MMP-9活性变化;透射电镜观察缺血区脑组织神经元超微结构。结果生理盐水组与强力霉素组大鼠在再灌注24 h时脑血流[分别为基础值的(57.98±4.20)%、(59.23±3.30)%]与MCAO时[分别为基础值的(22.94±3.16)%、(21.63±3.46)%]差异显著(P<0.01),但在同一时间点两组间无显著差异(P>0.05);强力霉素组大鼠脑梗死体积[(9.77±2.68)%]与生理盐水组[(33.44±4.50)%]相比显著减少(P<0.01);生理盐水组大鼠MMP-9活性(5.95±0.73)与假手术组(1.21±0.15)相比显著升高(P<0.01),应用强力霉素后MMP...     

亚低温对缺血再灌注鼠脑LN与MMP-9表达的影响及意义

目的 研究亚低温与常温条件下层粘连蛋白(Laminin, LN)与明胶酶-B(MMP-9)表达的差异性,为进一步探讨亚低温的脑保护机制提供实验依据.方法 制备大鼠脑缺血再灌注模型,随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组和亚低温条件下缺血再灌注组;缺血2h后依照再灌注时间点的不同分为3h、6h、12h、24h、72h与7d 6组,共14组.免疫组织化学法观察脑组织LN与MMP-9的表达变化.结果 LN在微血管的表达于再灌注12h明显减少,24h达最低,72h开始回升;在同一时相(72h, 7d除外),与常温组比,亚低温组LN的表达显著增多.LN在神经元的表达于再灌注3h明显增多,6h明显减少,12h和24h呈阴性,72h开始回升,7d开始下降.在同一时相(72h除外),与常温组比,亚低温组LN的表达显著增多.MMP-9的表达于再灌注6h开始增加,12h开始减少,72h达最低,呈阴性,7d又回升.与常温组比,3h、6h组,亚低温组MMP-9的表达显著减少;12h、24h、72h组, 亚低温组MMP-9的表达显著增多;7d组,亚低温组MMP-9的表达显著减少.结论 LN与MMP-9可能参与了缺血再灌注血管源性脑水肿的形成与发展.再灌注早期亚低温通过增加LN的表达,减少MMP-9的表达而对缺血再灌注脑有保护作用.     

缺血后适应对缺血再灌注脑组织的保护作用

缺血后适应可显著减轻脑缺血再灌注损伤、缩小脑梗死体积、改善脑梗死后神经功能。脑缺血后适应具有缺血预适应等同效应,临床可操作性强,更具潜在的实际应用价值,尤其在急性脑梗死早期实施溶栓治疗或经皮血管内介入治疗时,适时予以脑缺血后适应干预,可有效地赢得溶栓时间窗、减轻缺血再灌注损伤程度。本文旨在简述缺血后适应在缺血再灌注脑组织的保护作用、相关机制和临床应用,为急性脑梗死的临床治疗提供新的策略。