选择性雌激素受体调节剂在绝经后骨质疏松症治疗中作用的研究进展

选择性雌激素受体调节剂（SERMs）是一类结构不同的化合物，能与靶器官细胞内的雌激素受体结合而发挥雌激素受体激动剂和拮抗剂的作用。他莫昔芬目前临床上用于进展型乳腺癌的治疗，它还能抑制骨丢失；雷诺昔芬是惟一在世界范围内被用于预防和治疗绝经后骨质疏松症及椎体骨折的药物；尽管如此，SERMs有潜在的副作用。拉索昔芬是一类新的SERM分子，与过去的SERMs相比具有更潜在的效用，目前在Ⅲ期临床研究阶段。     

选择性雌激素受体调节剂对骨关节炎作用的研究进展

目的综述选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulators,SERMs)对骨关节炎(osteoarthritis,OA)作用的研究进展。方法广泛查阅国内外有关雌激素和SERMs对OA作用效果及作用机制的有关文献,并进行综述。结果SERMs阻止OA软骨和软骨下骨破坏,减轻滑膜炎,维持关节健康,并在一定程度上改善OA样关节退变,延缓OA关节的破坏。结论 SERMs对OA关节具有保护作用,有望成为OA调修药的候选药物,但仍需完善相关的基础和临床研究,明确SERMs对OA的作用机制。     

雌激素受体β1在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中高表达对雷诺昔芬抗肿瘤作用的影响

目的探究雷诺昔芬（RAL）对乳腺癌中过表达雌激素受体（ER）β1的MDA-MB-231细胞的抑制作用。 方法用含ERβ1基因的HIV慢病毒转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,获得稳定表达ERβ1的乳腺癌细胞株。采用RT-PCR法检测转染细胞中ERβ1 mRNA的表达水平,Western blotting法检测细胞中ERβ1蛋白的表达水平;各细胞亚型分别于0、1、10 μmol/L的RAL共培养48 h,观察RAL对ERβ1高表达细胞株及对照细胞株治疗作用的差异。 结果HIV慢病毒转染后细胞绿色荧光表达效率达到90%以上;RT-PCR检测显示阳性转染组MDA-MB-231/ERβ1细胞中ERβ1 mRNA水平较阴性转染组提高了12.9倍（P<0.05）;阳性转染组细胞中ERβ1蛋白水平也相应提高;细胞实验表明高浓度（10 μmol/L）的RAL对MDA-MB-231细胞有明显的增殖抑制作用,特别是对ERβ1高表达细胞株的抑制作用更加明显（F=9.273,P=0.015）。 结论在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,ERβ1高表达可以使细胞对RAL更加敏感。     

胰腺癌中雌激素受体α与β的表达

目的：检测胰腺癌中雌激素受体α、β（ERα、ERβ）蛋白和mRNA的表达。方法：采用免疫组化和RT-PCR检测50例胰腺癌和20例乳腺癌患者ERα、ERβ蛋白的表达以及ERα、ERβ mRNA的表达情况。结果：胰腺癌ERα蛋白的阳性率为32%,ERβ蛋白的阳性率为38%。胰腺癌ERα mRNA/ERβ mRNA的比值明显低于ER（ ）和ER（-）的乳腺癌。结论：ERβ在胰腺癌的发生、发展中可能起重要的作用。     

补肾壮骨颗粒对去势大鼠骨质疏松症骨组织计量学的影响

目的观察补肾壮骨颗粒对骨质疏松症雄性与雌性大鼠的骨组织计量学的影响;探讨该药对不同性别大鼠骨质疏松症疗效差异的机制。方法雄性大鼠54例,雌性大鼠58例,各设假手术组、模型组、阳性药组、补肾壮骨颗粒高剂量组、补肾壮骨颗粒低剂量组,采用去势方法造成雄雌性大鼠骨质疏松模型,给药13w,观察不同性别各组大鼠骨组织计量学指标的变化。结果与模型组对照,补肾壮骨颗粒高剂量组雌性大鼠骨小梁面积百分比有增加趋势(P>0.05),骨小梁数目明显增加(P<0.05),分离度明显减少(P<0.05);而高剂量组雄性大鼠各指标均未见明显的改变(P>0.05)。结论补肾壮骨颗粒可改善去势造成的骨质疏松雌性大鼠模型的骨组织计量学指标,对雄性大鼠则无明显作用。     

雌激素缺乏上调TNF-α促发卵巢切除大鼠骨细胞程序性坏死

目的探讨雌激素缺乏对去卵巢骨质疏松大鼠骨细胞程序性坏死的影响及其发生机制。方法 60只雌性SD大鼠随机分为Control组(12只)和OVX组(48只),分别行假手术或OVX术;再将48只OVX大鼠分为OVX+vehicle、OVX+Nec-1、OVX+Z-VAD和OVX+E2组,每组12只。Micro-CT扫描评价胫骨近端骨量改变;免疫组化法测定骨细胞TNF-α、RIP1、RIP3的表达情况,并计算各组阳性细胞百分率;用透射电镜鉴定细胞形态学变化;Western blot检测程序性坏死下游信号通路蛋白MLKL、Drp1的表达情况。结果 OVX+vehicle组大鼠胫骨近端出现明显的骨量丢失,即OVX+vehicle组Tb.Th、BV/TV、Tb.N小于Control组(P0.01);而OVX+vehicle组Tb.Sp大于Control组(P0.01)。TNF-α、RIP1、RIP3蛋白在骨细胞胞浆中均有表达;在OVX+vehicle组,TNF-α、RIP1、RIP3阳性骨细胞百分率较Control组显著增多(P0.01),在OVX+vehicle组可见大量坏死样结构的骨细胞。应用Nec-1治疗后可有效抑制RIP1蛋白表达,而Z-VAD对RIP1、RIP3蛋白表达无影响,在OVX+Nec-1组未见到坏死样结构的骨细胞。在OVX+vehicle组,Western blot结果显示MLKL、Drp1蛋白表达较Control组显著增多(P0.01),应用Nec-1治疗后可有效抑制MLKL、Drp1蛋白表达,而Z-VAD对MLKL、Drp1蛋白表达无影响。结论雌激素缺乏可能是通过上调TNF-α表达而促发骨细胞发生程序性坏死的,MLKL、Drp1可能是骨细胞程序性坏死的下游关键信号分子。     

大黄酸-雌酮对去卵巢大鼠子宫及骨组织 ERα和 ERβmRNA 表达的影响

目的：研究骨靶向雌激素大黄酸-雌酮（ LC）对去卵巢大鼠骨组织中的ERα和ERβmRNA表达的影响。方法72只6月龄雌性未孕Wistar大鼠，分为6组：假手术组（ Sham）、去卵巢模型组（ OVX）、雌酚酮组（ E，OVX＋雌酚酮1.0 mg/kg· d）、大黄酸-雌酮高（ H-LC， OVX＋LC 1.0 mg/kg· d）、中（ M-LC，OVX＋LC 0.5 mg/kg· d）、低（ L-LC，OVX＋LC 0.25 mg/kg· d）剂量组，除假手术组外其余各组均行双侧卵巢切除。给药24周后，采用放射免疫方法测定血中雌二醇水平，采用RT-PCR法测定子宫及骨组织ERα和ERβmRNA水平。结果与Sham组比较，OVX组雌二醇水平明显降低，与OVX组比较，E组和H-LC、M-LC组大鼠血清雌二醇明显升高，L-LC组与OVX组无明显差别。 Sham组胫骨近端ERαmRNA和ERβmRNA均有表达，OVX组ERβmRNA表达水平与Sham组相比降低，未检出ERαmRNA。 E组ERαmRNA和ERβmRNA水平均与Sham组无差异，大黄酸-雌酮各组均未检出ERαmRNA，ERβmRNA相对表达量高于OVX组，大黄酸-雌酮各剂量组之间ERβmRNA无明显差异。Sham组大鼠子宫组织有ERαmRNA和ERβmRNA表达，OVX组ERαmRNA表达量明显降低，未检出ERβmRNA。 E组大鼠子宫组织ERαmRNA和ERβmRNA均较OVX组上调。大黄酸-雌酮各剂量组之间ERαmRNA无明显差异，但均低于E和Sham组。结论大黄酸-雌酮在骨及子宫均能选择性上调ERβmRNA表达，而对ERαmRNA无影响，雌酚酮对两种亚型无选择性，这可能是大黄酸-雌酮对骨具有保护作用而对子宫并无雌激素样刺激作用的原因之一。     

青少年特发性脊柱侧凸患者骨组织中雌激素受体的表达

目的:探讨青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者骨组织中雌激素受体的表达情况。方法:28例志愿者分为两组,其中AIS组患者18例,男3例,女15例,年龄12～18岁,平均(14.4±1.4)岁,Cobb角40°～125°,平均60.1°;先天性脊柱侧凸(CS)组患者10例,男6例,女4例,年龄11～19岁,平均(15.4±2.6)岁,Cobb角37°～120°,平均63.3°。术中取髂骨,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨组织中雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)的表达情况。结果:AIS组和CS组患者骨组织中ERα mRNA和ERβ mRNA的阳性表达率均无显著性差异(P>0.05);AIS组中ERα mRNA和ERβ mRNA表达阳性患者中的相对含量分别为1.24±0.08和1.07±0.10,CS组为1.24±0.09和1.08±0.10,两组比较无显著性差异(P>0.05);但两组患者ERβ mRNA的阳性表达率与其Cobb角大小呈明显负相关(AIS组r=-0.613,P=0.007;CS组r=-0.648,P=0.043)、与Risser分级无关,ERα mRNA的阳性表达率与Cobb角、Risser分级无关,AIS患者的ERα mRNA和ERβ mRNA的阳性表达率与其Lenke分型无关。结论:AIS患者骨组织中ERα mRNA和ERβ mRNA的表达可能不是引起AIS的主要原因,但ERβ mRNA的表达可能对骨生长的调控作用较大,值得进一步研究。     

TNF-α对人软骨细胞中ChM-Ⅰ表达的影响

目的 研究肿瘤坏死因子α(tumor neerosis factor alpha,TNF-α)对人软骨细胞中软骨调节素-Ⅰ (chondromodulin-Ⅰ,ChM-Ⅰ)表达的影响.方法 用浓度为5 ng/mL、10 ng/mL和20 ng/mL的TNF-α处理细胞24 h、48 h和72h,荧光实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(western blot)方法检测细胞中ChM-Ⅰ在mRNA和蛋白水平的表达量.结果 TNF-α处理后,各浓度组在各时间点均可下调ChM-Ⅰ的表达(P＜0.05),且随浓度和时间的增加,下调作用增强,以20 ng/mL处理72 h时下调作用最强,下调37％;western blot结果与RT-qPCR相一致.结论 肿瘤坏死因子-α可下调人软骨细胞中ChM-Ⅰ的表达.     

补骨脂素对去势雌鼠E2、ERβ、TNF-α、IL-17的影响

目的观察补骨脂素对去势雌鼠E_2、ER_β、TNF-α、IL-17的影响,探讨补骨脂素防治绝经后骨质疏松的机理。方法选取3月龄雌性SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇对照组、壮骨止痛胶囊对照组、补骨脂素高剂量组、补骨脂素低剂量组,每组12只。除假手术组外,其它大鼠造成双侧去卵巢骨质疏松症病理模型,术后5d拆线后开始给药,连续13周。最后一次给药后次日取血标本采用ELISA检测血清中雌激素(E_2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)的含量。提取左股骨组织mRNA样本进行RT-PCR反应检测骨组织TNF-α、ER_β、IL-17基因的表达。取右股骨脱钙切片免疫组化检测ER_β表达。结果模型组去势雌鼠血清E_2水平显著低于假手术组(P0.01)。壮骨止痛胶囊显著升高血清E_2水平(P0.01),补骨脂素高剂量组血清E_2水平显著高于模型组(P0.01),补骨脂素低剂量组血清E_2水平与模型组相比无统计学差异(P0.05)。模型组血清TNF-α、IL-17水平及股骨TNF-α、IL-17mRNA表达显著高于假手术组(P0.01),股骨ER_β显著低于假手术组(P0.05)。戊酸雌二醇组血清TNF-α、IL-17水平及股骨TNF-α、IL-17mRNA表达显著低于模型组,股骨ER_β显著高于模型组(P0.05)。壮骨止痛胶囊组血清TNF-α、IL-17水平显著低于模型组(P0.05),股骨TNF-α、IL-17mRNA表达非常显著低于模型组(P0.01),而股骨ER_β显著高于模型组(P0.05)。补骨脂素高剂量组血清TNF-α水平及股骨TNF-αmRNA表达显著低于模型组(P0.05),而血清IL-17水平及股骨IL-17mRNA表达非常显著低于模型组(P0.01),股骨ER_β显著高于模型组(P0.05)。补骨脂素低剂量组血清TNF-α水平显著低于模型组(P0.05),但其股骨TNF-αmRNA表达与模型组相比无统计学差异,而血清IL-17水平及股骨IL-17mRNA表达显著低于模型组(P0.05),股骨ER_β与模型组相比没有统计学差异。结论补骨脂素可通过提高去势雌鼠血清E_2水平和股骨ER_β水平,降低去势雌鼠骨组织TNF-α、IL-17基因表达和血清TNF-α、IL-17水平发挥抗绝经后骨质疏松症作用。     

Akt/PKB对大鼠脊髓损伤后TNF-α表达的影响

[目的]研究蛋白激酶B(Protein kinase B,Akt/PKB)被阻断后脊髓损伤的大鼠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的变化。[方法]参照Nystrom′s压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,随机分为空白对照组8只、损伤组32只、Akt/PKB阻断组32只。免疫组化检测各组大鼠TNF-α蛋白的表达,RT-PCR检测各组大鼠TNF-αmRNA的表达。[结果]免疫组化结果显示:损伤组与Akt/PKB阻断组TNF-α阳性产物的平均光密度值(mean optic density,MOD)显著高于正常对照组(P0.01);而Akt/PKB阻断组与损伤组相比MOD值明显降低(P0.01);RT-PCR结果显示:与正常对照组比较,损伤组与Akt/PKB阻断组TNF-αmRNA的MOD与内参照MOD的比值明显升高(P0.01),而Akt/PKB阻断组则明显低于损伤组(P0.01)。[结论]Akt/PKB可能通过下调TNF-α的表达参与脊髓继发性损伤。     

红景天对高原去势大鼠骨质疏松症的血清IL-6、TNF-α和尿DPD影响

目的:探讨高原高寒地区低氧环境去势大鼠骨质疏松症与血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和尿脱氧吡啶酚(DPD)的关系及红景天预防骨质疏松的作用。方法:选用Wistar雌性大白鼠75只,分别摘除卵巢或假性去卵巢。分为A组(假手术组),B组(切除卵巢组),C组(切除卵巢 尼尔雌醇组),D组(切除卵巢 红景天混合饲料组),E组(切除卵巢 红景天浸液组)。每组15只,术后在海拔3100m青海海北州地区饲养,术后3个月处死,应用放免方法测定血清IL-6、TNF-α和化学发光法测定尿中DPD含量。结果:B组血清IL-6、TNF-α和尿DPD含量显著高于A、C、D、E组。C、D、E组血清IL-6、TNF-α和尿DPD含量与A组比较差异无显著性统计学意义。结论:红景天的抗高原骨质疏松症的作用可能与降低血清IL-6、TNF-α含量和尿中DPD浓度有关。     

依普拉芬与17α-炔雌醇合用对去卵巢大鼠子宫和骨的影响

目的观察依普拉芬能否抑制17α-炔雌醇刺激子宫副作用,及对炔雌醇抗骨质疏松作用的影响。方法52只4月龄SD雌性大鼠随机分为6组:①假手术组;②去卵巢组;③高炔雌醇组(30μg·kg-1·d-1);④低炔雌醇组(6μg·kg-1·d-1);⑤依普拉芬(200mg·kg-1·d-1);⑥联合用药组(炔雌醇6μg·kg-1·d-1+依普拉芬200mg·kg-1·d-1)。实验12周,通过测量子宫内膜厚度及子宫湿重分析用药对子宫的刺激作用,测量骨小梁面积百分率(%Tb.Ar)、荧光周长百分数(%L.Pm)及破骨细胞数量(Oc.N分别反映骨量、骨形成及骨吸收的变化)。结果高、低炔雌醇组与去卵巢组比,%Tb.Ar增加,%L.Pm、Oc.N减少,子宫湿重及内膜厚度都显著增加。依普拉芬组与去卵巢组比,子宫湿重及内膜厚度、%Tb.Ar、%L.Pm无显著性差异,Oc.N减少。联合用药组与去卵巢组比,%Tb.Ar增加;与低炔雌醇组比,子宫重量、内膜厚度显著降低,联合用药组与正常对照组的子宫内膜厚度无显著性差异。结论依普拉芬可有效抑制炔雌醇对大鼠子宫刺激作用,与炔雌醇合用可有效防治骨质疏松。     

补肾健脾化瘀方对去势大鼠股骨骨髓ERRα和PGC-1α mRNA表达的影响

目的 探讨补肾健脾化瘀方对去势大鼠股骨骨髓组织中雌激素相关受体α（ERRα）和过氧化物酶体增殖物活化受体γ协同刺激因子-1α（PGC-1α） mRNA表达的影响。方法 40只7月龄SD雌性大鼠随机分成假手术组、模型组、中药组（补肾健脾化瘀方）、阿伦磷酸钠组。治疗12周后,小动物双能X线检测左侧股骨骨密度,HE染色观察胫骨近端骨形态,QPCR检测骨髓组织中ERRα、PGC-1α mRNA表达水平检测。结果 模型组骨密度低于假手术组（P＜0.05）;中药组与阿伦磷酸钠组骨密度高于模型组（P＜0.05）,而假手术组、中药组与阿伦磷酸钠组之间无统计学差异。与假手术组相比,模型组骨髓组织中ERRα mRNA表达水平上升（P＜0.05）,PGC-1α mRNA表达水平下降（P＜0.05）。予以药物干预后,与模型组相比,中药组骨髓组织中ERRα mRNA表达水平下降（P＜0.05）,PGC-1α mRNA表达水平上升（P＜0.05）;而阿伦磷酸钠组骨髓组织中ERRα mRNA表达水平下降（P＜0.01）,PGC-1α mRNA表达水平虽呈现增高的趋势,但无统计学差异（P＞0.05）。结论 补肾健脾化瘀方可能是通过提高骨髓组织中PGC-1α mRNA表达水平,降低ERRα mRNA表达水平,从而提高去势大鼠骨密度。     

雌激素对去卵巢小鼠肿瘤坏死因子-α、白细胞介素6水平的影响

补充雌激素可预防绝经后女性多种疾病，如骨质疏松、冠心病、阿尔茨海默病等，说明雌激素（E2）缺乏是上述疾病产生的重要因素。而E2缺乏导致绝经女性相关疾病的具体机制仍未完全阐明。文献报道可能与E2下降，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）水平异常升高有关。本     

前列腺癌和癌旁组织中雌激素受体α和β的表达及意义

目的 通过测定前列腺癌中癌组织、癌旁组织和良性前列腺增生组织中雌激素受体(estrogen receptor,ER)α和β的表达水平,探讨ER在前列腺腺癌发生、发展中的变化和作用机制.方法 采用超高敏链酶亲合素-过氧化物酶法检测28例前列腺腺癌标本中癌和癌旁组织以及29例良性前列腺增生组织中ERα和ERβ的表达水平,对比其在各组之间表达的差异,分析ERα和ERβ的表达水平与前列腺癌患者的Gleason评分、临床分期、年龄和TPSA的关系.结果 前列腺癌组织中ERα主要在间质细胞表达.ERα在前列腺癌组织、癌旁组织和良性前列腺增生组织上皮细胞的表达阳性率分别为0%、14%、24%,间质细胞阳性率分别为57%、68%、31%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).前列腺癌上皮细胞和间质细胞均有ERβ的表达且差异无统计学意义(P＞0.05).ERβ在前列腺癌组织、癌旁组织和良性前列腺增生组织上皮细胞的表达阳性率分别为39%、64%、29%;间质细胞阳性率分别为50%、75%、79%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).ERβ在不同Gleason评分前列腺癌组织中表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 前列腺癌中ERα主要在间质细胞表达;ERβ在上皮细胞和间质细胞均有表达.ERα和ERβ的表达水平在前列腺癌组织、癌旁组织和良性前列腺增生组织均存在差异.ER口与前列腺癌变发生和恶性程度相关.

Abstract：

Objective To investigate the expression of estrogen receptor (ER) α and β in human prostate cancer (PC), peri-cancer tissue and benign prostatic hyperplasia (BPH) tissue, and to discuss the role of estrogen receptor in prostate cancer. Methods The expression of ERα and ERβ in PC (n=28), peri-cancer tissue (n=28) and BPH (n=29) were detected by immunohistochemistry with En vision method. The ERα and ERβ expression were compared among different tissues by chisquare. The relationship between ER expression and related clinicopathologic features was statistically analyzed by spearman rank collection. Results ERα was localized dominantly in the stromal cell of PC. There were significant differences of the expression of ERα in PC, peri-cancer tissue and BPH tissue (epithelial cell 0%, 14%, 24%, P＜0. 05; stromal cell 57%, 68%, 31%,P＜0. 05). ERβ was localized in both epithelial and stromal cell of PC. There were significant differences of the expression of ERβ in PC, peri-cancer tissue and BPH tissue (epithelial cell 39%, 64%, 29%, P＜0.01; stromal cell 50%, 75%, 79%, P＜0.05). There was a significant difference of the expression of ERβ in different Gleason scores of PC tissue. Conclusions ERα is localized in the stromal cell of PC tissue.ERβ is localized in both epithelial and stromal cell of PC tissue. The ERβ might be related to the tumor differentiation of PC.     

TNF-α单克隆抗体对急性胰腺炎胰腺组织中ICAM-1的表达的影响

目的 探讨急性胰腺炎(AP)胰腺组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达与炎症发生发展的关系，以及肿瘤坏死因子-α单克隆抗体(TNF-αMCAb)预处理后的影响。方法 采用免疫组化技术结合多媒体图像分析系统检测AP大鼠胰腺组织中ICAM-1的表达与炎症轻重程度的关系，以及应用TNF-αMCAb对ICAM-1的表达的影响。结果 正常胰腺组织仅少量ICAM-1阳性表达，随着炎症程度的加重，ICAM-1表达逐渐升高，与炎症程度呈正相关。应用TNF-αMCAb预处理后胰腺组织ICAM-1表达明显减弱，炎症程度明显减轻。结论 急性胰腺炎ICAM-1的表达在炎症的发生发展中起着重要的作用，TNF-αMCAb通过抑制ICAM-1的表达，减轻了胰腺组织炎症反应，对胰腺组织有明显的保护作用。     

补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨组织TNF-α表达的影响

目的观察复方中药补肾健脾活血方对绝经后骨质疏松症大鼠模型骨组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响.方法将84只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、中药对照组、西药对照组、补肾健脾活血方大、小剂量组共7组,采用卵巢切除的方法建造绝经后骨质疏松症动物模型,灌药90 d后取腰椎骨用免疫组化的方法检测TNF-α的表达.结果补肾健脾活血方能明显减少TNF-α表达的阳性细胞数,其作用强于单纯补肾中药和西药治疗,并且与剂量呈正相关.结论补肾健脾活血方通过影响细胞因子TNF-α的表达来减少骨吸收.     

肾上腺髓质素对大鼠肾脏损伤早期肿瘤坏死因子及其受体表达的影响

目的 探讨外源性肾上腺髓质素(ADM)对肾脏机械性损伤早期肿瘤坏死因子(TNF-α、TNF-β)及TNF受体(TNFR)表达的影响.方法 健康成年普通级Wistar大鼠104只,随机分为4组:正常对照组(8只)、单纯创伤组(32只)、伤前给药组(32只)和伤后给药组(32只);后3组采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾机械性损伤模型.两给药组分别于创伤前、后10min腹腔注射ADM(0.1 nmol/kg).3组肾损伤大鼠平均分为4批分别于创伤后1、6、12和24 h,采用快速心脏采血法处死.迅速解剖动物提取肾脏标本,10%甲醛固定.免疫组织化学染色,观察肿瘤坏死因子TNF-α、TNF-β、TNFR在组织中的表达,并进行统计学分析.结果 TNF-α表达:单纯创伤组在创伤早期(1、6 h)高于正常对照组;伤前给药组创伤后6 h,伤后给药组创伤后1 h均低于同时相点单纯创伤组,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).TNF-β表达:单纯创伤组于伤后1、6 h均低于正常对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);伤后给药组伤后1、6 h均高于单纯创伤组同时相点,差异均具有统计学意义(P<0.01).TNFR表达:单纯创伤组于创伤后6 h低于正常对照组(P<0.01);伤前给药组伤后1、6 h高于同时相点单纯创伤组,差异均具有统计学意义(P<0.01).结论 TNFR对TNF-α与TNF-β具有动态调节作用且以TNF-α为主.TNF-β在肾脏损伤中主要参与的是抗损伤过程.ADM能降低TNF-α的分泌,在肾损伤早期可以上调TNF-β和TNFR.     

雌激素受体α对膀胱癌细胞增殖和转移影响的实验研究

目的 探讨雌激素受体α(ERα)对膀胱癌细胞增殖和侵袭力的影响机制. 方法 建立ERα过表达的膀胱癌细胞T24ERα模型,对照组为膀胱癌细胞株T24V空质粒组.应用四甲基偶氮唑比色法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,Transwell和细胞划痕实验检测膀胱癌细胞的侵袭能力,蛋白质印迹法检测ERα调节膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的信号通路. 结果 与空质粒对照组相比,实验组在96 h和144 h细胞抑制率分别为18.85％、37.21％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组细胞凋亡率为(18.93±1.41)％,对照组为(9.91±1.08)％,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组穿越基质胶的细胞比例为(10.00±2.00)％,显著低于对照组(26.00±3.61)％,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫印迹显示与对照组相比,T24ERα细胞内整合素β1、磷酸化FAK、磷酸化Src和Src蛋白表达明显减低. 结论 ERα通过下调整合素β1-FAK/Src信号通路抑制膀胱癌细胞的生长和转移,同时促进膀胱癌细胞的凋亡.