癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为97.4%～108.9%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.     

黄曲霉毒素B1的高灵敏时间分辨荧光免疫分析

采用时间分辨荧光技术建立了高灵敏的黄曲霉毒素B1(AFB1)间接竞争免疫分析法(AFB1-TRFIA).以AFB1-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗AFB1抗体;AFB1与辣根过氧化酶的联结物(AFB1-HRP)包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1共同竞争有限的抗AFB1抗体;用稀土离子Eu3 标记的羊抗兔抗体进行示踪.该方法的灵敏度为0.01μg/L,测量范围为0.01-100μg/L,批内和批间变异分别为4.1%和6.8%,平均回收率为97.2%,与黄曲霉毒素B2的平均交叉反应为10%左右;黄曲霉毒素G2、赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B及HRP基本不干扰本方法对AFB1的检测.8条不同时间进行的AFB1-TRFIA的效应点值ED80、ED50、ED20分别为(0.07±0.01)μg/L、(0.63±0.02)μg/L和(12.5±0.47)μg/L.比较AFB1-TRFIA和AFB1-ELISA检测AFB1,两者的相关系数为0.917.研究表明,AFB1-TRFIA是目前报导的AFB1检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景.     

癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为97.4%～108.9%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.     

癌胚抗原（CEA）酶联免疫分析试剂盒的研制

以一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,制备了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为99.4%～108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用.     

癌胚抗原(CEA)酶联免疫分析试剂盒的研制

以一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,制备了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为99.4%～108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用.     

人心肌酸性铁蛋白与肝癌关系的研究

从人心肌组织中提纯了酸性铁蛋白,免疫家兔产生抗血清,氯胺-T法制备了~(125)I-酸性铁蛋白和~(125)I-抗酸性铁蛋白H亚基单抗。分别采用平衡法和顺序饱和法建立了酸性铁蛋白放射免疫分析和酸性铁蛋白H亚基免疫放射测量分析。它们的批内CV分别为1.65％和2.44％,批间CV为9.71％和10.16％,回收率为102％和92.29％,ED_(50)为27.50μg/L和23.05μg/L。前者的可测范围为7.0～369.6μg/L,后者的灵敏度为0.736μg/L。两方法     

CA_(125)时间分辨荧光免疫分析

以CA12 5单克隆抗体固相包被 ,用平衡饱和法与CA12 5、Eu3+标异硫氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 -CA12 5单抗形成三层夹心 ,以 β -二酮体为增强液 ,建立CA12 5的时间分辨荧光免疫分析法。数据采用Logit-Log函数和四参数Logistic函数数据处理程序处理。方法的批内和批间CV分别为 4 .5%和 4 .0 % ,平均回收率 96.7% ,灵敏度 3.3μg L ,可测范围为 16— 2 0 62 μg L。本法与CEA无交叉 ,与AFP有 4 .6%交叉 ,与 β -HCG有 12 .4 %交叉。测定结果与进口IRMA试剂盒相比较 ,相关系数为 0 .999,结果呈高度相关。     

CA125时间分辨荧光免疫分析

以CA125单克隆抗体固相包被,用平衡饱和法与CA125、Eu^3 标异硫氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸－CA125单抗形成三层夹心,以β－二酮体为增强液,建立CA125的时间分辨荧光免疫分析法。数据采用Logit-Log函数和四参数Logistic函数数据处理程序处理。方法的批内和批间CV分别为4．5％和4．0％,平均回收率96．7％,灵敏度3．3μg/L,可测范围为16－2062μg／L。本法与CEA无交叉,与AFP有4．6％交叉,与β－HCG有12．4％交叉。测定结果与进口IRMA试剂盒相比较,相关系数为0．999,结果呈高度相关。     

人促甲状腺激素酶联免疫吸附分析试剂盒的研制

TSH多抗用于固相包被，一株TSH单抗与辣根过氧化物酶偶联制备TSH标记物，以四甲基联苯胺（TMB）为底物，采用二步法，建立了TSH酶联免疫吸附分析法（ELISA）。本方法灵敏度为0.06mIU/L，批内CV≤5.9%(n=8)，批间CV≤9.1%(n=7)。回收率为（98．4－101．4）％。77例正常人血清的TSH均值为1.96mIU/L，用本法与IRMA法同时23例病人血样，两者相关方程为Y＝1．01X－0．47，相关系数r=0.992。本方法具有简便，快速和准确的特点，适于临床检测和科研应用。     

蛋白C系统的放射免疫分析

蛋白C系统是机体重要的凝血反应调节系统,该文组合生化和免疫化学技术分别从人尿中提纯了血栓调节素和从利凡诺去白蛋白人血浆中纯化了蛋白C、蛋白S和蛋白C抑制物。免疫家兔产生抗血清。用氯胺T法制备了~(125)Ⅰ-蛋白C和~(125)Ⅰ-蛋白S,Iodogen法制备了~(125)Ⅰ-蛋白C抑制物,Bolton-Hunter法制备了~(125)Ⅰ-血栓调节素。采用平衡法分别建立了上述四种化合物的放射免疫分析。蛋白C、蛋白S、蛋白C抑制物和血栓调节素的分析灵敏度分别为3.94μg/L、9.87μg/L、2.58μg/L和6.16μg/L;批内和批间CV为4.40％和9.68％、4.99％和13.14％、2.73％和8.62％、5.10％和10.94％;平均回收率为104.28％、94.30％、101.89％和105.22％;工作范围为6.25～1024μg/L、21～700μg/L、4.8～1024μg/L和8.1～560μg/L。四种方法与其检测的相似化合物均无交叉。初步应用效果满意,该方法可为血栓栓塞性疾病的诊疗提供有效手段。