日本血吸虫感染小鼠外周血CD4+T细胞亚群动态变化的研究

目的 了解日本血吸虫感染小鼠外周血CD4⁺T细胞亚群水平的动态变化情况,探讨感染进程中CD4⁺T细胞亚群的免疫调控作用。方法 通过日本血吸虫尾蚴腹贴法建立日本血吸虫感染小鼠模型,将18只6周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分成正常对照组和日本血吸虫感染组,每组9只。 通过流式细胞染色计数的方法检测感染3周、5周及8周后小鼠外周血CD4⁺T细胞亚群中Th1、Th2、Th17、Treg细胞变化情况。结果 随着日本血吸虫感染进程,与正常对照小鼠相比,感染小鼠外周血CD4⁺T细胞亚群中Th1、Th2、Th17、Treg细胞比例均显著增加。不同细胞亚群比例增加的趋势不尽相同,其中Th1细胞在感染第3周占比较高但其增长较为缓慢,而感染前3周Th2、Treg细胞占比较低但其增加幅度较大,在第8周达到峰值;Th17细胞比例在感染前3周基本无变化,随后显著增加。结论 日本血吸虫感染引起宿主CD4⁺T细胞亚群比例发生变化,本研究发现感染显著增加小鼠外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞比例,感染后3周内小鼠外周血CD4⁺T细胞亚群以Th1细胞为主,5周后Th2、Th17、Treg细胞逐渐占主导地位。本结果为研究日本血吸虫病免疫病理机制和特征提供基础。     

HBV慢性感染者肝脏组织中CD4+T、CD8+T和FoxP3+Tregs细胞的表达水平

?目的:计数慢性乙型肝炎病毒( HBV)感染者肝脏组织中CD4⁺T、CD8⁺T和FoxP3⁺Tregs细胞,观察不同免疫状态下的肝脏组织中CD4⁺T和CD8⁺T细胞表达水平之间的差异,探索其临床意义。方法: 选取慢性HBV感染者68例,健康对照组(非HBV感染组)30例,运用免疫组织化学的方法进行检测。结果:慢性HBV感染组的CD4⁺T、CD8⁺T和FoxP3⁺Tregs细胞表达水平明显升高,与非HBV感染组相比,P均<0.001;在HBV感染组中,CD4⁺T和CD8⁺T细胞在免疫耐受期患者肝脏组织中的表达水平最低,CD4⁺T、CD8⁺T细胞在免疫清除期、再活动期中的表达水平与二者在免疫耐受期相比,均有增高趋势,然而CD4⁺T、CD8⁺T细胞的表达水平在免疫耐受期、免疫清除期、低复制期及再活动期任意两期之间比较,P均>0.05。结论:CD4⁺T和CD8⁺T细胞在免疫耐受期、免疫清除期、低复制期及再活动期患者肝脏组织中表达水平的变化趋势在一定程度上反应了各期肝脏的免疫状态;FoxP3⁺ Tregs细胞可能与HBV感染慢性化有关。     

芡茎多糖通过诱导CD4+T、CD8+T和NK细胞的浸润促进小鼠肺癌LLC细胞凋亡

目的 探究芡茎多糖(EFPP)对肺癌LLC细胞异位移植瘤模型的影响。方法 40只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为空白对照组(Control)、芡茎多糖低、高剂量组(100、200 mg·kg^-1)、5-氟脲嘧啶组(5-Fu 20 mg·kg^-1),每组10只;建立异位移植瘤模型后,空白对照组灌胃PBS,每日1次,给药组灌胃芡茎多糖,每日1次,阳性药3 d注射1次,总共给药15 d,最后1次给药第2天处死全部小鼠。取各组肿瘤样品,称量体积与瘤质量;采用苏木精-伊红(HE)染色、流式细胞术、TUNEL凋亡染色以及Western blot法对芡茎多糖进行药效学检测。结果 与空白对照相比,芡茎多糖可以抑制LLC细胞的体内增殖,增加CD3⁺CD4⁺T、CD3⁺CD8⁺T和CD3^-NK1.1⁺细胞水平。同时,芡茎多糖上调活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase3)、B细胞白血病-淋巴瘤-2相关...     

HIV感染者外周血CXCR5+CD4+T细胞水平与HIV病毒载量相关性

目的 研究外周血CXCR5+CD4⁺滤泡辅助性T细胞（follicular helper T,TFH）水平与HIV感染者血浆HIV病毒载量的相关性。方法 纳入2019年1月—2020年12月期间青海省第四人民医院收治的100例HIV感染者,根据CD4⁺T淋巴细胞计数分为A组（CD4⁺T淋巴细胞计数<200/ μL）23例和B组（CD4⁺T淋巴细胞计数200~<500/ μL）77例,以同期行健康体检80名健康者为对照组。分别检测HIV感染者外周血中HIV病毒载量、CD4⁺T淋巴细胞计数和TFH水平以及健康对照组CD4⁺T淋巴细胞计数以及TFH水平,并进行相关性分析。结果 A组血浆HIV病毒载量为（4.70±1.13） log /mL显著高于B组（2.74±0.74）log/mL（P<0.05）。A、B和健康对照组CD4⁺T淋巴细胞计数分别为（113.64±23.44）/μL、（334.10±31.52） / μL和（995.41±49.23） /μL,三者比较差异有统计学意义（P<0.05）。A、B和健康对照组TFH细胞计数绝对值分别为（18.63±5.67） /μL、（59.35±13.73） /μL和(194.85±25.78) /μL,A、B组均低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;A、B和健康对照组TFH细胞百分比分别为（15.83±4.05）%、（17.57±5.08）% 和（19.59±4.25）%,A、B组均低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关性分析显示,HIV病毒载量与CD4⁺T淋巴细胞计数以及TFH细胞计数呈负相关（P<0.05）。结论 HIV感染者外周血CD4⁺T淋巴细胞计数和TFH计数与HIV病毒载量呈负相关,且TFH计数可作为病情诊断和预后评估的重要指标,并有望成为HIV感染免疫治疗的新靶标。     

CD4+、CD8+T细胞监测在ICU重症患者并发获得性真菌感染临床评估中的价值分析

目的:探讨重症监护室(intensive care unit,ICU)内的重症患者获得性真菌感染的特点,以及分化簇(cluster of differentiation,CD)4⁺、CD8⁺T细胞免疫功能对获得性真菌感染临床评估中的价值。方法:纳入2017年1月至2019年12月入住重庆医科大学附属第一医院重症医学科并送检标本培养出真菌阳性的患者。根据诊断标准分为真菌感染组(49例)与定植组(37例)。记录并分析急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)评分,ICU住院时间,是否合并脓毒症、进行深静脉置管、机械通气、使用激素及广谱抗生素。收集标本取样48 h内患者体温、呼吸频率、脉率等生命体征,CD4⁺T细胞百分比、CD8⁺T细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺比值等T细胞检测值。采用二元logistic回归进行感染危险因素分析并建立预测模型,同时获得预测概...     

IL-35表达对小鼠脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群分化的影响

目的 构建小鼠白细胞介素(IL)-35基因表达质粒,探讨IL-35表达对小鼠脾脏中CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞亚群分化的影响。方法 采用PCR法扩增获得小鼠IL-35基因全长片段,将该片段连入鼠干细胞病毒载体(pMSCV-GFP)多克隆位点区,获得携带IL-35基因的质粒载体pMSCV-IL-35-GFP。将9只雄性C57BL/6J小鼠分为3组：PBS组、pMSCV组和pMSCV-IL-35组,分别向3组小鼠尾静脉注射PBS、pMSCV-GFP空载质粒和pMSCV-IL-35-GFP质粒。72 h后分离小鼠脾脏,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测IL-35亚基EB病毒诱导基因3(Ebi3)和IL-12a mRNA相对表达水平;采用流式细胞术检测CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞亚群百分比,并进一步检测CD8⁺T淋巴细胞免疫功能分子颗粒酶B(Gzmb)和调节性T淋巴细胞(Tregs)细胞特异转录因子叉头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA相对表达水平。结果 RT...     

西北燥证对糖尿病大鼠AQP1、AQP3和CD4+T、CD8+T细胞表达的影响

目的 探讨西北燥证对糖尿病大鼠水通道蛋白-1(Aquaporin-1,AQP1)、水通道蛋白-3(Aquaporin-3,AQP3)和CD4⁺T、CD8⁺T细胞表达的影响。方法 选取16只正常大鼠,建立2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus, T2DM)大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为正常环境T2DM组、西北燥证T2DM组,每组8只。另选正常大鼠8只设为正常对照组。观察各组大鼠的一般情况,检测大鼠空腹血糖(Fasting blood glucose, FBG)、空腹血清胰岛素(Fasting serum insulin, FINS)、胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment for insulin resistance, HOMA-IR)的变化,比较各组大鼠AQP1、AQP3、CD4⁺T、CD8⁺T细胞的表达水平,分析血清CD4⁺、CD8⁺与AQP1、AQP3表达水平的相关性。结果 与正常对照组比较,...     

MiR-497、CD3+、CD4+T淋巴细胞在三阴乳腺癌中表达的相关研究

目的:研究三阴乳腺癌(TNBC)中miR-497、CD3⁺、CD4⁺ T淋巴细胞的表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系。方法:选取2020年1月-2021年1月包头市肿瘤医院收治的60例TNBC和60例非TNBC患者,取癌组织及癌旁正常组织,应用RT-PCR方法检测miR-497相应表达量,免疫组织化学SP法检测CD3⁺、CD4⁺T淋巴细胞表达情况,并分析miR-497、CD3⁺、CD4⁺T淋巴细胞表达在两组中的差异性及三者与TNBC患者临床病理特征的关系。结果:TNBC癌组织中miR-497表达量低于癌旁正常组织;两组的miR-497表达量差异无统计学意义;TNBC癌组织中miR-497表达量与年龄大小、是否绝经、肿瘤大小无明显关系(P>0.05);而与淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05)。两组CD3⁺T淋巴细胞数量差异无统计学意义(P>0.05);TNBC组中CD4⁺T淋巴细胞...     

正常人外周血中CD8+CD25+T细胞亚群的数量及其细胞因子表达的初步研究

目的:研究正常人外周血CD8 CD25 T细胞亚群的数量及其表达IFN-γ、IL-10和TGF-β的细胞数量情况,以期得到一组该亚群细胞正常数值范围,为研究CD8 CD25 T细胞亚群在自身免疫性疾病、过敏性疾病和器官移植中的变化及其临床意义提供参考.方法:分离正常人外周血单个核细胞,利用三色流式细胞术分别检测CD3 T细胞中CD8 CD25 、CD8 CD25-、CD8-CD25 和CD8-CD25-亚群的比例,并计算其细胞数量;并对经过或未经过离子霉素(ionomycin)、佛波醇乙酯(PMA)联合刺激5 h的CD8 CD25 T细胞检测表达IFN-γ、IL-1O及TGF-β的细胞数量情况.结果:正常人外周血CD3 T细胞中CD8 CD25 细胞亚群约为2.52%.数量达37.09×106/L,经离子霉素、佛波醇乙酯联合刺激培养5 h后其比例、数量均略有降低;CD8 CD25 T细胞表面TGF-β阳性率达到93.8%,刺激对其表达无明显影响;但刺激后IFN-γ T细胞明显增多,而IL-10 的T细胞未见明显升高.结论:正常人外周血CD3 T细胞中存在少量的CD8 CD25 细胞亚群,该细胞表面稳定地高表达TGF-β,可对刺激呈现IFN-γ反应,但不对刺激产生增殖反应.     

小鼠CD4+ T细胞活化后4种microRNAs的表达分析

目的: 研究小鼠脾脏CD4⁺ T淋巴细胞活化后微小RNA(microRNA,miRNA)的表达水平。方法: 采用CD3/CD28 免疫磁珠法刺激培养小鼠脾脏CD4⁺T细胞24 h,应用流式细胞术检测刺激前后CD4⁺T细胞的活化率,使用实时荧光定量PCR技术分别检测培养0 h,6 h,12 h以及24 h后的CD4⁺T细胞中miR-181d、miR-342-3p、miR-9、miR-122-3p的表达水平。结果： CD3/CD28 免疫磁珠法刺激培养24 h后CD4⁺ T细胞活化率由5.2%升高至60.9%,差异有统计学意义（t=22.01,P <0.01）。与培养0 h相比,miR-181d和miR-342-3p在经刺激培养6 h,12 h和24 h后的CD4⁺T细胞中的表达水平均明显降低（P <0.05）,而miR-9和miR-122-3p的表达各组间的差异无统计学意义（P>0.05）。结论： 小鼠脾脏CD4+T细胞活化后,miR-181d和miR-342-3p的表达明显下调。     

2175例新发现HIV感染者治疗前CD4+T细胞计数分析

目的 分析江苏省新发现HIV感染者CD4⁺T淋巴细胞计数水平,了解其免疫状态和疾病进程,为全省艾滋病防控策略提供科学依据。方法 使用流式细胞仪对2020年新确证且尚未治疗的HIV感染者进行CD4⁺T细胞绝对计数检测,利用多因素Logistic回归分析影响CD4⁺T细胞计数结果的因素。结果 2020年江苏省新发现HIV感染者2 175例,其中<30岁、同性传播、未婚、大专及以上学历、学生、检测咨询和流动人口CD4⁺T细胞绝对计数水平较高(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥30岁、医疗机构确诊人群更容易出现晚发现情况(P<0.05)。结论 江苏省近几年对男男性行为人群(MSM)的干预策略效果明显,今后应对≥30岁、已婚或离异、异性传播、高中及以下学历、农民或民工或离退人员及医疗机构就诊人群加强关注,推进全省医务人员主动提供艾滋病检测咨询(PITC)服务,加大宣传、干预力度,尽早检测。     

SIVmac239病毒经不同途径感染恒河猴急性期CD4+T细胞数量与其细胞表面CD95表达量的变化关系

目的研究SIVmac239病毒分别通过直肠(rectal infection:IR)及静脉(intravenous infection:IV)感染恒河猴,在感染急性期外周血CD4+T细胞数量与其细胞表面的死亡受体(CD95)表达量之间的变化关系。方法将SIVmac239经直肠及静脉途径各感染14只恒河猴。监测病毒载量、CD4+T淋巴细胞数量及CD4+/CD8+比值的变化,从而明确感染。同时,在感染急性期内9个时间点采集静脉血,并利用流式细胞术分析CD4+T细胞表面CD95的表达量。结果静脉组恒河猴CD95表达量于第2天开始升高,第7天达到最高,同时CD4+T淋巴细胞数降到最低。直肠组恒河猴也于感染后第2天开始升高,但第10天才达到最高值,CD4+T淋巴细胞数于第17天降到最低。同静脉组相比,直肠组CD95表达量增高及CD4+T细胞数降低均较晚出现,且其CD4+T细胞数量降至最低晚于CD95表达量达到峰值一周后出现。结论 SIVmac239经直肠及静脉感染恒河猴后,伴随CD4+T细胞表面CD95表达的升高,CD4+T细胞数量逐渐下降。但不同感染途径对CD4+T细胞表面CD95的表达量与CD4+T淋巴细胞数的变化不尽相同,这可能由于不同感染途径造成CD95在感染急性期CD4+T细胞数量降低中发挥的作用不同。     

利奈唑胺联合环丝氨酸胶囊对肺结核患者CD4+、 CD8+T细胞水平及肺功能的影响

目的：探究利奈唑胺联合环丝氨酸胶囊对肺结核患者CD4⁺、CD8⁺T细胞水平及肺功能的影响。方法：选择我科2019年3月—2021年3月期间接诊的96例肺结核患者,按照随机抽签法分为对照组和观察组,各48例。其中,对照组予以环丝氨酸胶囊口服,观察组予以利奈唑胺、环丝氨酸胶囊联合口服,为期6个月,对比两组临床疗效(总有效率和CD4⁺、CD8⁺T细胞水平及肺功能、用药安全性、实验室相关指标等)。结果：用药6个月后,观察组总有效率较对照组高(P<0.05);观察组实验室相关指标水平较对照组低(P<0.05);观察组CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺水平较对照组改善明显(P<0.05);观察组肺功能较对照组改善程度高(P<0.05);用药安全性方面：两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：利奈唑胺、环丝氨酸胶囊的联合使用可获取较好效果,且安全可靠,有利于控制肺结核...     

活动性肺结核患者LAG-3的表达及其对CD4+T细胞的影响

目的 探讨淋巴细胞活化基因3(LAG-3)在活动性肺结核患者CD4⁺T细胞中的表达情况及其对CD4⁺T细胞功能的影响。方法 纳入2020年5月-2021年5月就诊于苏州大学附属传染病医院的25例初治活动性肺结核患者作为病例组,20名健康体检者作为对照组,流式细胞术检测外周血和支气管肺泡灌洗液中LAG-3⁺CD4⁺T细胞的比例;体外用结核分枝杆菌特异性抗原早期分泌靶抗原6 000 Mr与培养滤过蛋白10 000 Mr(ESAT-6/CFP10)刺激结核患者的外周血单个核细胞(PBMC),分为ESAT-6/CFP组和不加ESAT-6/CFP蛋白的Control组,探究LAG-3在结核特异性CD4⁺T细胞上的表达;用可溶性LAG-3(sLAG-3)蛋白抑制LAG-3分子信号通路,作为sLAG-3组,探究LAG-3对CD4⁺T细胞功能的影响。结果 病例组患者PBMC和支气管肺泡灌洗液(BALF)中LAG-3+CD4⁺T细胞比例升高,治疗后下降...     

原发性免疫性血小板减少症中CD4+T细胞的免疫异常

原发性免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia, ITP)是一种获得性自身免疫性疾病,CD4⁺T细胞异常是ITP发病机制中的重要环节。CD4⁺T细胞可协调免疫应答;分泌多种免疫调节因子;激活B细胞产生抗体。研究发现,ITP患者CD4⁺T细胞亚群数量和功能异常,这些CD4⁺T细胞可促进B细胞产生血小板特异性抗体。ITP发病时触发CD4⁺T细胞异常的因素有待进一步的研究。基于CD4⁺T细胞异常的新疗法能进一步提高原发性免疫性血小板减少症患者的治疗效果。     

免疫抑制治疗对小儿重型再生障碍性贫血CD4+CD25+T细胞及相关细胞因子表达的影响

目的 探讨免疫抑制治疗对小儿重型再生障碍性贫血CD4+CD25+T细胞及相关细胞因子表达的影响.方法 选取2017年1月至2019年4月本院收治的重型再生障碍性贫血患儿74例,采用随机数字表法分为对照组和研究组,每组37例.对照组采用环孢素A(CsA)治疗,研究组在对照组基础上采用抗淋巴细胞球蛋白(ALG)治疗,比较两组CD4+CD25+T细胞和T淋巴细胞亚群表达,血清IL-10、IL-35、TGF-β水平及治疗效果.结果 研究组CD4+T、CD25+T、CD4+CD25+T、CD4+CD25+T/CD4+T均低于对照组,血清IL-10、IL-35、TGF-β水平均低于对照组(P<0.05);研究组总有效率高于对照组(P<0.05).结论 在对小儿重型再生障碍性贫血进行治疗的过程中,免疫抑制治疗效果较为理想,对相关细胞因子的表达以及CD4+CD25+T细胞具有一定的影响,值得临床推广应用.     

电针与艾灸对佐剂性关节炎大鼠脾脏CD4+T细胞影响的对比研究

目的 对比观察电针和艾灸对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, AA)大鼠足跖容积测量、关节炎指数评分及分化簇4淋巴细胞(cluster of differentiation-4+T-cell, CD4⁺T)水平的影响,评价两种干预措施治疗AA的效应机制。方法 选取健康雄性大鼠24只,随机分为空白组、模型组、电针组和艾灸组,每组6只。艾灸组予以双侧“足三里”“关元”“阿是穴”悬灸20 min;电针组左侧足三里与关元配穴,右侧足三里与同侧阿是穴配穴,干预20 min。于干预第21天进行足跖容积测量及关节炎指数评分,隔天于无菌操作台进行脾脏取材,采用流式细胞术检测脾脏CD4⁺T淋巴细胞。结果 与空白组相比,模型组的足跖容积、关节炎指数评分、CD4⁺T淋巴细胞数量均明显增多(P<0.01);与模型组相比,电针组、艾灸组的足跖容积、关节炎指数评分、CD4⁺T淋巴细胞数量均明显减少(P<0.05或P<0.01);与电针组相比,艾灸组的足跖容积、关节炎指数评分、CD4^...     

人初始CD4+CD25+调节性T细胞的功能分析

目的:分离人CD4 CD25 Treg细胞,并进行功能分析。方法:应用免疫磁珠分离正常人外周血中CD4 CD25 Treg细胞,流式细胞仪检测细胞内因子IL-4、IFN-γ和IL-10表达,与CD4 CD25-T细胞共同培养,加或不加入中和抗体抗IL-10和抗TGF-β,检测其抑制功能。结果:CD4 CD25 Treg细胞约占正常外周血中CD4 T细胞的6%(2.4%￣18.9%,n=15),主要合成IL-10,能够以依赖剂量和非依赖IL-10和TGF-β方式抑制CD4 CD25-T细胞的增殖。结论:CD4 CD25 Treg细胞是一群具有免疫抑制功能的T细胞亚群细胞。