高效液相色谱法测定西酞普兰血药浓度

 目的建立高效液相色谱法测定西酞普兰血药浓度。方法采用液-液萃取法,用正己烷-异戊醇(98:2)提取血浆中西酞普兰,选用普萘洛尔为内标。色谱柱为NucleodurCN(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-30mmol·L^-1KH₂PO₄缓冲液(0.1%三乙胺,pH5.0)(40:60),激发波长:236nm,发射波长:306nm,流速:1.3ml·min^-1,柱温:室温。结果本法线性范围在1-75μg·L^-1(r=0.9996)。平均方法回收率为(96.8±5.0)%(n=15),日内RSD≤8.6%,日间RSD≤9.6%。结论本法简单、快速、准确,可用于临床血药浓度监测及人体药动学研究。     

HPLC测定人血浆中山莨菪碱的浓度

 目的建立高效液相色谱法测定人血浆中山莨菪碱的血药浓度。方法色谱柱为Diamonsil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-10 mmol·L^-1磷酸二氢钾溶液(pH3.0,内含10 mmol·L^-1高氯酸)(20∶80);柱温:室温;流速:1.0mL·min^-1;检测波长:214 nm。结果标准曲线的线性范围为0.5～50 mg·L^-1(r=0.999 7,n=7),低、中、高3种浓度的平均回收率为(87.2±2.2)%,(92.5±1.0)%,(89.3±2.1)%,日内RSD≤2.5%,日间RSD≤5.2%。山莨菪碱的最低检出量为0.1 mg·L^-1。结论本方法简单、灵敏、重现性好,适用于山莨菪碱临床血药浓度测定及人体药动学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中艾地苯醌浓度

 目的:建立人血浆中艾地苯醌浓度高效液相色谱测定方法?方法:色谱条件:色谱柱为C₁₈反相柱,流动相为甲醇-水(70∶30),紫外检测波长为280nm?血浆样品加盐酸后用乙醚萃取,浓缩后进样?并测定2名健康受试者口服艾地苯醌后的血浆药物浓度?结果:标准曲线范围为20～1600ng·ml^-1,线性良好?最低定量浓度为5ng·ml^-1?40,200,800ng·ml^-13种浓度的平均回收率(n=5)分别为73.86%,83.72%和76.17%?日内、日间RSD≤5.38%(n=5)?结论:本方法操作简便,结果准确可靠,适用于临床血药浓度监测和人体生物利用度研究?     

静脉注射后吉西他滨及其代谢产物在人体内的药动学研究

 目的研究吉西他滨及其代谢产物(dFdU)在我国恶性肿瘤病人体内的药动学过程。方法8位病人按吉西他滨1000 mg·m^-2体表面积单一给药,采用HPLC测定给药后不同时间点的吉西他滨及其代谢产物的血药浓度,血药浓度-时间数据经PKS软件处理,拟合药动学模型,得出吉西他滨及其代谢产物(dFdU)的药动学参数,并比较药动学参数在性别上的差异及国外文献报道的差异。结果吉西他滨及其代谢产物(dFdU)在我国病人血浆中的药动学过程符合二室模型拟合,其药动学参数分别为:吉西他滨ρ_max(11.29±2.4)mg·L^-1,t_1/2β(25.29±7.85)min,CL(7 410±820)mL·min^-1,V_d(270.13±53.36)L,AUC(2.23±0.34)mg·h·L^-1;代谢产物ρ_max(48.47±6.73)mg·L^-1,t_1/2β(8.04±3.66)h,CL(102.98±24.8)mL·min^-1,V_d(66.08±23.8)L,AUC (170.05±39.44)mg·h·L^-1)。结论吉西他滨按1 000 mg·m^-2体表面积给药,在我国病人体内吉西他滨和代谢产物(dFdU)药动学符合二室模型拟合。吉西他滨的AUC和CL与文献报道不一致,吉西他滨的其余药动学参数和代谢产物(dFdU)药动学参数与文献报道的基本一致。吉西他滨的t_1/2β,AUC和CL可能存在性别上的差异。     

诺孕酯的主要代谢物在大鼠体内的药动学研究

 目的研究诺孕酯的主要代谢物norelgestromin(NGMN)血药浓度的高效液相色谱-紫外检测方法及其在大鼠体内的药动学。方法采用Spherisob C₁₈色谱柱;以甲醇-水-乙酸乙酯(5∶4∶2)为流动相;流速为1.0mL·min^-1;紫外检测波长254nm。大鼠按诺孕酯0.3mg·kg^-1单剂量灌胃后,采用高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)法测定给药后不同时间血清中NGMN的浓度。用3P87程序计算药动学参数。结果NGMN是诺孕酯在大鼠体内的主要代谢物。其血药浓度与峰面积直线相关,r=0.9996,线性范围10～50μg·L^-1。NGMN的最低检测浓度为2μg·L^-1。回收率为89.6%～90.1%,日内及日间RSD均小于5%。NGMN的血药浓度-时间曲线符合一级吸收二室模型,t_1/2α为(2.77±0.14)h,t_1/2β为(31.07±1.42)h,t_max为(2.54±0.65)h,ρ_max为(24.8±5.56)μg·L^-1,AUC为(98.08±6.25)μg·h·L^-1。结论此方法简便、准确、稳定,可用于NGMN的药动学研究。     

LC-ESI-MS/MS快速测定人血浆中艾司西酞普兰的浓度

 目的建立测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾法(LC-ESI-MS/MS)。方法以Agilent C₁₈反相柱(Agilent C₁₈ column,2.1 mm×30 mm,3.5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(75∶25),流速为0.4mL·min^-1,柱温:25℃,以正己烷-异戊醇(95∶5)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对艾司西酞普兰(m/z 325→109)和内标利培酮(m/z 411→191)进行测定。并用此法测定40例患者稳态血药浓度。结果艾司西酞普兰的高、中、低(25,10,0.5μg·L^-1)3个浓度的平均回收率分别为99.16%、99.94%和92.28%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于10%;分析方法的最低定量限为0.2μg·L^-1。线性范围为:0.2～50μg·L^-1,回归方程为Y=0.394 2ρ+0.020 5,r=0.999 4(n=8)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

RP-HPLC测定西洛他唑的血药浓度及药动学研究

 目的建立RP-HPLC测定人血浆中西洛他唑含量,并研究西洛他唑片在健康人体内的药动学。方法色谱柱为HypersilODS-2(4.6 mm×150 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-水(45∶55),流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长254 nm。结果西洛他唑在25～2 000μg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 2),血浆最低检测浓度为10μg·L^-1,日内及日间RSD均小于6%,在3种不同浓度下,平均回收率分别为102.71%,102.03%和99.01%。人体药动学研究表明,药-时曲线符合二房室模型,主要药动学参数t_max 3.7 h,ρ_max749.2μg·L^-1,AUC_0～48 10 088.5μg·h·L^-1,t_1/2α 2.5 h,t_1/2β11.9 h。结论此法简便、灵敏、准确、稳定,可用于药物分析,其药动学参数可为临床合理用药提供理论依据。     

固相萃取结合HPLC-MS测定人血浆中奥美沙坦的药物质量浓度

 目的建立人血浆中奥美沙坦质量浓度的HPLC-MS测定法。方法血浆样品用OASIS HLB 3cc固相萃取小柱萃取,在Diamonsil C₁₈(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱上分离,流动相为甲醇-水(含体积分数为0.2%醋酸)(70∶30),流速0.5 mL·min^-1。LC-ESI/MS选择离子检测,正离子模式,用于定量分析的离子分别为m/z 447.2(奥美沙坦),m/z515.3(内标,替米沙坦)。结果奥美沙坦血药质量浓度在1～3 000μg·L^-1内的线性关系良好(r=0.999 9),血浆中低、中、高3种质量浓度(3,100,2 400μg·L^-1)的相对回收率在97.6%～100.9%之间,日内RSD≤5.2%,日间RSD≤13.3%。结论本法操作简便、准确、灵敏,适用于临床药动学研究。     

人血浆中霉酚酸浓度测定方法研究及药物监测应用

 目的建立用高效液相色谱快速测定人血浆中霉酚酸浓度的方法,对我院肾移植病人霉酚酸血药浓度进行监测。方法血浆样品加20μLH₃PO₄酸化,乙醚提取,萘啶酸为内标,采用Kromasil 100-5C₈(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.05 mol·L^-1 KH₂PO₄(用磷酸调pH2.8)(12∶38∶50)为流动相,流速0.5 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长254 nm。结果霉酚酸在0.191～24.45 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.191 mg·L^-1(S/N=10)。高、中、低3个质控样品的平均方法学回收率为89.7%～101.5%,提取回收率大于85%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。监测肾移植患者环孢霉素或他克莫司的谷浓度同时,测定其MPA血药浓度,82.3%的患者MPA浓度小于2 mg·L^-1,低于有效治疗谷浓度。结论本法简便、灵敏、重现性好,可用于肾移植病人服用霉酚酸酯后霉酚酸血药浓度监测和霉酚酸酯药动学研究。     

HPLC-UV测定球花石斛中滨蒿内酯和泽兰内酯含量

 目的建立高效液相色谱-紫外检测器测定球花石斛中滨蒿内酯和泽兰内酯含量的方法。方法采用ODS C₁₈色谱柱(4.6 mmⅹ250 mm,5μm,MetaChem),以甲醇-四氢呋喃-1%醋酸水溶液(15∶5∶80)为流动相,流速为1 mL·min^-1,检测波长为342 nm,柱温为40℃。结果球花石斛中滨蒿内酯的线性范围为0.004 64～0.464 00μg(r=0.999 9),平均回收率(n=6)为97.66%(RSD=0.27%);泽兰内酯的线性范围为0.004 24～1.060 00μg(r=0.999 9),平均回收率(n=6)为97.92%(RSD=0.89%)。结论本方法简便、准确、重复性好,可为评价不同产地的球花石斛质量提供一定依据。     

HPLC荧光法测定盐酸曲马多及其片剂人体生物等效性

 目的建立HPLC荧光检测法测定曲马多及活性代谢物O-去甲基曲马多在血浆中的浓度,研究曲马多片在健康人体中的药动学及生物等效性。方法采用随机交叉自身对照试验设计,20名健康男性受试者单次po 100 mg曲马多口腔崩解片和曲马多片后,按规定时间采集肘静脉血,血样经液.液萃取处理,以0.03 mol·L^-1四硼酸钠(含0.5%三乙胺,磷酸调pH至4.0)-甲醇(75:25)为流动相,色谱柱为Diamonsil C₁₈柱(4.6 mm×200mm,5μm),流速1.0 mL·min^-1,柱温50℃,荧光检测的激发波长275 nm,发射波长304 nm,测定曲马多和O-去甲基曲马多的血药浓度,并计算两制剂的主要药动学参数及相对生物利用度。结果测定血浆中曲马多和O-去甲基曲马多的最低检测限均为1.0μg·L^-1,曲马多和O-去甲基曲马多分别在1.0～600.0和1.0～300.0μg·L^-1内线性关系良好;血药浓度测定的日内、日间精密度RSD均小于5%;测得曲马多口腔崩解片和曲马多片的血样中曲马多的主要药动学参数为:t_max(2.2±1.0)和(1.9±0.9)h,ρ_max (350.4±66.0)和(339.0±73.2)μg·L^-1,t_1/2(6.9±1.8)和(6.8±1.8)h,AUC_0-t(3 953±1 550)和(3 703±1 310)μg·h·L^-1;血样中O-去甲基曲马多的主要药动学参数为:t_max(3.4±1.7)和(3.0±1.5)h,ρ_max(51.5±20.7)和(50.2±19.4)μg·L^-1,t_1/2(7.8±2.0)和(7.5±1.8)h,AUC_0-t(744±200)和(691±141)μg·h·L^-1;曲马多口腔崩解片的相对生物利用度以曲马多计算为(106.4±16.4)%,以O-去甲基曲马多计算为(107.5±17.2)%。结论建立的HPLC荧光法灵敏、准确;测定结果经统计学分析曲马多口腔崩解片和曲马多片为生物等效制剂。     

LC-MS/MS测定盐酸他利克索与美多芭联合用药的人体药动学

 目的建立液相色谱-串联质谱法研究盐酸他利克索与关多芭联合用药在健康志愿者体内的药动学行为。方法以盐酸克仑特罗为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取,Lichrospher C_6H_6柱分离后电喷雾正离子化选择性反应检测。12名健康志愿者(男女各半)按随机双交叉试验设计,研究单剂量口服盐酸他利克索片(0.4 mg)及与美多芭片(0.25 g)联合用药后的药动学。结果盐酸他利克索在0.10～10.0μg·L^-1内呈现良好线性,方法回收率为80.8%～86.2%。日内、日间精密度的RSD分别为0.5%～4.8%和2.4%～8.6%。两种服药方式后盐酸他利克索的主要药动学参数ρ_max,t_max,t_1/2,MRT,AUC_0-36,AUC_0-∞,CL/F和V_d/F分别为(0.96±0.12)和(0.89±0.16)μg·L^-1,(1.4±0.9)和(1.4±0.9)h,(11.37±1.99)和(11.61±1.80)h,(15.90±2.95)和(16.35±2.60)h,(9.66±1.33)和(9.36±1.58)μg·h·L^-1,(11.07±1.72)和(10.82±1.98)μg·h·L^-1,(37.9±7.50)和(40.5±10.0)L·h^-1,(650±186)和(601±167)L。经单因素方差分析及独立样本t检验分析单剂量口服盐酸他利克索片及与美多芭片联合用药后的主要药动学参数均无显著性差异。结论建立的LC-MS/MS测定法准确、灵敏,专属。美多芭对盐酸他利克索的药动学行为没有明显影响。     

HPLC-MS/ESI测定人血浆中米格列醇

 目的　建立高效液相色谱 质谱联用测定人血浆中米格列醇浓度的方法,并用于健康人体内米格列醇药物动力学研究。方法　采用MACHEREY NAGELCN色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm),柱温50℃,以乙腈甲醇0.02%盐酸水溶液为流动相,流速0.80mL·min^-1;质谱采用电喷雾电离源正源(ESI⁺),定量分析采用选择离子监测(SIR),质荷比为准分子离子峰;血浆样品用乙腈沉淀后,将乙腈挥干,残渣用氯仿-异丙醇提取杂质,磷酸液提取药物,外标法定量。结果　米格列醇浓度在32～32.00ng·mL^-1内线性关系良好,相关系数为0.9997,最低检测浓度5ng·mL^-1(S/N =3)。批内、批间RSD符合方法学要求,单次服用10.0mg米格列醇片后药动学参数AUC_0～12 ,AUC_0～∞,c_max,t_max,t_1/2 分别为(7592.7±4207.4)ng·h·mL^-1,(7957.6±4425.7)ng·h·mL^-1,(1883.9±912.3)ng·mL^-1,(2.4±0.6)h,(2.5±0.9)h。结论　该方法稳定、灵敏度高、操作简单 ,适用于米格列醇血药浓度测定及药动学研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布含量及其药动学研究

 目的建立测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布浓度的LC-MS/MS方法,进行依折麦布片po给药的药动学研究。方法22名志愿者血样经叔丁基甲醚萃取吹干重组后进样测定依折麦布浓度,另取血样经β-葡萄糖苷酸酶水解后叔丁基醚萃取吹干重组后进样测定总的依折麦布浓度。分析柱:Capcell C₁₈柱(2mm×50mm,5μm),内标(IS)¹³C6-依折麦布。流动相:5mmol·L^-1醋酸铵水溶液(A泵)和乙腈(B泵)组成,梯度洗脱。采用电喷雾去质子化三重四极杆二级串联质谱,多反应监测方式(MRM)测定样品浓度,依折麦布的监测离子对为m/z408.5→m/z270.8,内标为m/z414.5→m/z276.8。结果依折麦布在0.020～20μg·L^-1内线性关系良好,相关系数r=0.9994(n=9)。总的依折麦布在0.25～250μg·L^-1内线性关系良好,相关系数r=0.9998(n=9)。最低定量线(LLOQ)、低、中、高浓度的依折麦布和总的依折麦布质控样品的日内、日间精密度均小于12%,方法回收率在97%～104%内。志愿者口服10mg依折麦布后采血72h,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数分别为AUC_0-inf(121.9±41.7)和(536.8±182.7)μg·h·L^-1;AUC_0-t(102.1±31.4)和(478.8±170.0)μg·h·L^-1;ρ_max(4.9±1.6)和(48.46±17.3)μg·L^-1;t_max(5.2±6.4)和(1.5±0.9)h;t_1/2(26.4±28.8)和(22.5±11.0)h;MRT(23.6±3.8)和(19.7±3.8)h。结论该方法符合生物样品分析要求,可用于依折麦布血浆浓度的测定,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数与文献相近。     

反相高效液相色谱法测定犬血浆中维生素E烟酸酯

 目的建立反相高效液相色谱检测法测定比格犬血浆中维生素E烟酸酯。方法色谱柱采用Hypersil ODS2 C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温为室温,流动相为甲醇,流速为1.5 mL·mim^-1,外标法,检测波长为264 nm。结果维生素E烟酸酯在50～2500μg·L^-1内线性关系良好,相关系数为0.9979(n=8),血浆中检测限为5.3μg·L^-1(S/N=3),高、中、低3个浓度的血浆标准样品的绝对回收率为76.48%～80.38%,相对回收率在92.69%～103.39%之间,日内及日间RSD均小于11%。结论本法准确、灵敏、专属性强、重现性好,可用于维生素E烟酸酯药动学研究。     

单剂量口服多潘立酮片剂在健康人体的药动学研究

 目的建立多潘立酮(DMP)人体内血药浓度的测定方法,并对口服DMP片剂后健康人体内的药动学过程进行研究。方法10名健康男性受试者单剂量poDMP 30 mg,分别于服药前及服药后0.25,0.5,1,1.5,2,3,4,6,8,12,24及48 h采集血样。用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定血清中DMP的浓度,并采用3P97药动学软件对试验数据进行处理,计算有关药动学参数。结果单剂量po DMP片剂后,其药-时曲线经拟合符合二室模型,主要药动学参数:ρ_max为(23.53±12.82)μg·L^-1;t_max为(1.03±0.63)h;t_1/2β为(8.40±1.41)h;AUC_0～48为(273.97±84.77)μg·h·L^-1;AUC_0～∞为(302.20±105.91)μg·h·L^-1。10名健康受试者均未出现不良反应。结论试验建立的DMP人体内血药浓度测定方法简便、可靠。     

RP-HPLC测定盐酸青藤碱不同给药途径的血药浓度及药动学研究

 目的　采用RP HPLC测定盐酸青藤碱灌胃和皮肤给药后不同时间大鼠体内血清浓度 ,计算出灌胃和皮肤给药途径主要药动学参数。方法　采用RP HPLC以乙腈0.01mol·L^-1磷酸二氢钠溶液-四甲基二乙胺 (46∶54∶0.22)为流动相,磷酸调至pH6.9,C₁₈ODS柱(4.6mm×25.0mm,5μm),紫外检测波长为26.3nm。 结果　盐酸青藤碱在 0.25～10.0μg·mL^-1范围内呈良好线性关系(r=0.9995),方法的平均回收率达98.5%,RSD=13%。计算出灌胃给药途径主要药动学参数:Ke0.31h-1,AUC18.07μg·h·mL^-1,t_{1/22.24h,cmax6.26μg·mL^-1,tmax0.75h ;皮肤给药途径主要药动学参数:Ke0.92h^-1,AUC32.4μg·h·mL^-1,t1/2 0.75h,cmax1.17μg·mL-1,tmax1h。结论　本法分离效果好 ,分析速度快 ,方法稳定 ,结果准确。}     

盐酸曲美他嗪片的人体生物等效性研究

 目的研究盐酸曲美他嗪片的人体相对生物利用度和生物等效性。方法健康志愿者20名,随机双交叉单剂量国产盐酸曲美他嗪片(受试制剂)和进口盐酸曲美他嗪片(参比制剂),剂量分别为40mg,剂间间隔为1周。分别于服药后24h内多点抽取静脉血;用高效液相色谱法测定血浆中曲美他嗪的浓度。用DAS药动学程序计算相对生物利用度并评价两种制剂生物等效性。AUC_0-24,AUC_0-inf和ρ_max经方差分析和双单侧t检验,t_max进行秩和检验。结果单剂量口服盐酸曲美他嗪片受试和参比制剂后,血浆的曲美他嗪的ρ_max分别为(122.78±11.60)和(115.12±10.98)μg·L^-1;t_max分别为(2.08±0.34)和(2.13±0.39)h;AUC_0-24分别为(962.56±122.03)和(914.53±86.16)μg·h·L^-1;AUC_0-inf分别为(1004.71±125.94)和(966.40±99.53)μg·h·L^-1。AUC_0-24的90%可信区间为100.4%～109.5%,AUC_0-inf的90%可信区间为99.1%～108.4%,ρ_max的90%可信区间为102.6%～110.8%。结论两制剂的人体相对生物利用度为(105.41±11.22)%,两者具有生物等效性。     

反相高效液相色谱法分离测定来氟米特3-甲基异构体及有关物质

 目的　建立高效液相色谱法分离测定来氟米特3-甲基异构体及有关物质的方法。方法采用HypersilODS₂(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-甲醇-0.01mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(25∶25∶50);流速:1.0mL·min^-1;检测波长为261nm;进样量20μL。 结果来氟米特中的3-甲基异构体能很好地被分离。3-甲基异构体在0.264～1.32μg·mL^-1浓度内,峰面积与浓度线性关系良好,相关系数r=0.9995;平均回收率为99.3%(n =9),RSD为0.9%。来氟米特与有关物质能完全分离。结论本方法简便、准确、专属性强,可用于来氟米特3-甲基异构体及有关物质的测定。