博莱霉素诱导小鼠肺间质纤维化造模方式的选择

目的:建立博莱霉素导致肺间质纤维化小鼠动物模型,比较不同给药方式的成模差异。方法:利用8周龄雄性ICR小鼠,①随机分为腹腔给药组(P组)、气管内给药组(I组)、阴性对照组(C组),分别经腹腔注射BLM 40 mg/kg 5次、气管内滴入BLM 5 mg/kg 1次或气管内滴入生理盐水50μl。分别于14、28、40天处死,②小鼠随机分为4组,分别经腹腔注射BLM 40mg/kg3、4、5次或经腹腔给予生理盐水200μl。分别于28、40天处死。观察小鼠体重、咳嗽、挠鼻症状、肺系数及肺组织病理改变。结果:给予博莱霉素后①小鼠的体重均下降并出现咳嗽及挠鼻等呼吸障碍症状;处置后第14、28及40天处死小鼠,计算肺系数,P组较I组肺系数高;处死小鼠后,P组和I组小鼠均形成广泛、稳定的间质纤维化病理改变,P组主要分布在胸膜下及血管周围,而I组主要分布在肺门和支气管周围。P组较I组肺纤维化病理评分高。②不同腹腔给药次数模型小鼠体重变化以5次给药对体重影响最大;计算肺系数以给药5次肺系数变化最大。上述模型均成功建立。通过比较生存率、呼吸困难症状、组织病理变化等指标,选出腹腔给药5次相对于给药3次及4次为更好的造模方式。结论:利用BLM腹腔注射和气管内滴入制备了肺间质纤维化动物模型,纤维化形成的部位存在着一定的差异,腹腔给药5次方法制备肺间质纤维化模型的成功率更佳。     

维甲酸治疗博莱霉素诱发大鼠肺间质纤维化

观察维甲酸（RA）的抗纤维化作用并初步探讨其作用机理。RA治疗博莱霉所致肺纤维化大鼠28天后,病理观察及形态定量分析示肺纤维化程度明显减轻,肺组织胶原蛋白含量较同期纤维化对照组（BLM组）减少（113．86±13．86mg/glung;152．40±11．00mg／glung,P＜0．01）。RA组支气管肺泡灌洗液中转化因子β1（TGF-β1）含量在第7、14天时则较同期BLM组显著下降（P均＜0.01）。RA治疗后,肺组织原胶原α1（Ⅰ）．（Ⅲ）及TGF-β1．mRNA水平也有明显的降低。RA能有效阻止实验性肺间质纤维化的发生和发展。RA抑制肺组织TGFβ1的表达是其抗纤维化作用的重要机制之一。     

川芎嗪对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠端粒酶表达的影响

目的:研究川芎嗪对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠端粒酶表达的影响.方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物对照组及川芎嗪组.分别于给药14、28 d后取肺组织,冷冻切片,原位杂交法检测端粒酶的表达.结果:与模型组相比,川芎嗪在14d和28 d均可下调端粒酶的表达,而且川芎嗪组端粒酶的表达14d较28 d高.结论:川芎嗪通过抑制端粒酶的活性,对特发性肺纤维化起到防治作用.     

维甲酸治疗搏莱霉素诱发大鼠肺间质纤维化

观察维甲酸（ＲＡ）的抗纤维化作用并初步探讨其作用机理。ＲＡ治疗搏莱霉所致肺纤维化大鼠２８天后,病理观察及形态定量分析示肺纤维化程度明显减轻,肺组织胶原蛋白含量较同期纤维化对照组（ＢＬＭ组）减少（１１３．８６±１３．８６ｍｇ／ｇ ｌｕｎｇ;１５２．４０±１１．００ｍｇ／ｇ ｌｕｎｇ,Ｐ〈０．０１）。ＲＡ组支气民灌洗液中转化因子β１（ＴＧＦ－β１）含量在第７、１４天时则较同期ＢＬＭ组显著下降（Ｐ均〈０     

当归抗大鼠肺间质纤维化的实验研究

目的探讨当归抗肺间质纤维化的作用机制和应用价值。方法48只大鼠随机分为空白对照组、肺纤维化模型组、氢化可的松治疗组和当归治疗组。气管内注入博莱霉素造成动物模型后，于当天开始每天给药．分别于第7、28d处死，取肺组织进行免疫病理学检查、血浆黏度、全血黏度、血栓素检测。结果转换生长因子β1（TGF-β1）在肺组织中的表达，激素组和当归组均弱于模型组，第7d激素组和当归组无差异，但第28d当归组TGF-β1的表达弱于激素组；模型组全血黏度、血浆黏度、血栓素大多高于空白组；第28d，当归组的全血黏度、血浆黏度低于激素组，而且部分指标低于模型组，激素组则高于模型组；当归组TXB2的含量明显低于激素组和模型组，激素组与模型组无差异。结论当归通过抑制TXB2血小板活化、TGF-β1，达到抗肺间质纤维化的作用：同时可改善肺间质纤维化形成中的高凝状态而改善肺内微循环，避免激素使用时引起的血液黏度增高，其抗肺间质纤维化作用途径较激素多，某些作用强与激素。     

大鼠肺间质纤维化支气管肺泡灌洗液透明质酸含量的变化

经单次气管内灌注博莱霉素Ａ５复制大鼠肺间质纤维化模型，在不同时间收集大鼠气管肺泡灌洗液。用放射免疫分析测定气管肺泡灌洗液中的透明质酸。结果发现，经博莱霉素处理后气管肺泡灌洗液中的透明质酸于３天和７天明显升高。透明质酸的升高与粒细胞数和蛋白质浓度的改变呈平行关系，提示透明质酸的升高与博莱霉素所致的急性肺泡炎有关。     

博莱霉素A5诱发大鼠肺间质纤维化的实验病理研究

用博莱霉素A_5诱发大鼠肺间质纤维化,动态观察其病理形态及肺间质内Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化,所用方法包括光镜、电镜及间接免疫荧光法。结果表明,实验第1周内动物以肺泡炎病变为主并有肺泡“腔内芽”形成,第2周起则以间质纤维化病变为主;Ⅰ、Ⅲ型胶原显著增多分别主要发生于实验晚期和早期。本研究提示,“腔内芽”可能参与了纤维化的形成过程,该过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原呈动态变化。     

水飞蓟素对大鼠肾小管间质纤维化的影响及其作用机制探讨

目的:探讨水飞蓟素对大鼠肾间质纤维化的作用及对内皮素-1(ET-1)及内皮素A受体(ETaR)表达的影响.方法:72只SD大鼠随机分为三组, 即假手术组、模型组、水飞蓟素治疗组.以单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型.治疗组给予水飞蓟素每日30 mg/kg灌胃, 模型组和假手术组给予生理盐水灌胃.各组分别于实验第7、14、21天各收获大鼠8只, 进行肾组织病理学观察.用免疫组化方法检测肾组织ET-1及ETaR的表达.结果:治疗组肾小管间质积分较模型组明显减轻;肾组织表达ET-1及ETaR在治疗组也较模型组明显减少.结论:水飞蓟素可能是通过下调ET-1及ETaR表达而抑制纤维化的发生, 从而起到对肾脏的保护作用.     

清热解毒液对高脂血症大鼠内皮素影响的研究

目的和方法：应用内皮细胞铺片和免疫组化技术相结合的方法,在高脂血症大鼠主动脉内皮细胞铺片上,定量分析内皮素（ＥＴ）的合成和释放与动脉内皮损伤的关系,观察具有抗蛇毒作用的清热解毒液对血管内皮是否有保护作用。结果：高脂血症大鼠血浆ＥＴ水平均明显升高,内皮细胞释放内皮素增多。内皮细胞铺片显示：内皮细胞排列紊乱,细胞数量增多,胞核大小不一、染色深浅不一;ＩgＧ、ＥＴ阳性率均高于正常对照组。可见高脂血症造成     

RNA干扰沉默Smad3基因对百草枯致小鼠肺间质纤维化的治疗作用

目的通过RNA干扰技术沉默小鼠肺组织中Smad3基因,观察其对百草枯(PQ)所致肺间质纤维化是否具有保护作用。方法利用小鼠L929成纤维细胞,体外验证抑制Smad3基因表达的有效shRNA,并进一步将其合成进重组腺病毒。实验小鼠分为三组,在小鼠染毒后2h,气管内分别注入PBS、非靶向重组腺病毒和靶向重组腺病毒。不同时间点(0d,7d,28d)对每组6只小鼠进行处理,留取肺组织标本。提取肺组织中总RNA,Real time PCR检测肺组织中Smad3、I型前胶原mRNA表达,Western Blot检测肺组织细胞核中Smad3蛋白表达,羟脯氨酸检测试剂盒分析肺组织中羟脯氨酸的含量以及肺组织HE染色后观察组织病理学变化。结果同PBS组、非靶向重组腺病毒组相比,靶向重组腺病毒有效抑制了肺组织内Smad3 mRNA和蛋白表达。重组腺病毒介导的shRNA转染进一步抑制了肺组织中I型前胶原mRNA表达和羟脯氨酸的产生,减轻了PQ所致的肺间质纤维化的形成。结论Smad3对百草枯引起的肺间质纤维化有重要作用,RNA干扰抑制肺组织Smad3基因表达可能是一种有效的治疗该病的方法。     

Pathogenesis of Idiopathic Interstitial Pulmonary Fibrosis

The histopathology and ultrastructure of idiopathic interstitial pulmonary fibrosis is described and illustrated. There is evidence that proliferating type II pneumocytes in regenerating alveolar epithelium are implicated in the pathogenesis of this disorder.     

血管紧张素Ⅱ对动力性肺动脉高压左室心肌细胞凋亡及纤维化的影响

目的观察先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）合并肺动脉高压（PAH）患儿心肌细胞凋亡、心肌纤维化及与血浆血管紧张素Ⅱ含量的关系。方法根据有无合并肺动脉高压将20例CHD患儿分为2组，CHD组（n=8）和CHD合并PAH组（n=12），对照组（n=5）为单纯缺血缺氧性脑病患儿。采用TUNEL标记法检测心肌组织中的凋亡细胞，用免疫组化法检测左室心肌细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达，采用放射免疫法测定血浆血管紧张素Ⅱ浓度。结果CHD组和CHD合并PAH组心肌细胞凋亡指数明显高于对照组，两组左室心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白呈强阳性表达，与对照组相比差异有统计学意义；CHD及CHD合并PAH组血浆AngⅡ水平均显著高于对照组，CHD合并PAH组高于CHD组，且两组相比较有统计学意义。血浆AngⅡ与心肌细胞凋亡指数和Ⅲ型胶原蛋白表达量呈正相关关系，而肺动脉压与心肌细胞凋亡指数和Ⅲ型胶原蛋白表达量及Ⅰ型胶原蛋白表达量无相关关系。结论在CHD患儿左室心肌细胞凋亡和纤维化的过程中，AngⅡ可能比肺动脉压力发挥着更重要的作用，所以应用ACEⅠ阻断肾素-血管紧张素加以降低肺动脉压对提高降低病死率有重要意义。     

Metformin Reduces Bleomycin-induced Pulmonary Fibrosis in Mice

Metformin has anti-inflammatory and anti-fibrotic effects. We investigated whether metformin has an inhibitory effect on bleomycin (BLM)-induced pulmonary fibrosis in a murine model. A total of 62 mice were divided into 5 groups: control, metformin (100 mg/kg), BLM, and BLM with metformin (50 mg/kg or 100 mg/kg). Metformin was administered to the mice orally once a day from day 1. We sacrificed half of the mice on day 10 and collected the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) from their left lungs. The remaining mice were sacrificed and analyzed on day 21. The right lungs were harvested for histological analyses. The messenger RNA (mRNA) levels of epithelial-mesenchymal transition markers were determined via analysis of the harvested lungs on day 21. The mice treated with BLM and metformin (50 mg/kg or 100 mg/kg) showed significantly lower levels of inflammatory cells in the BALF compared with the BLM-only mice on days 10 and 21. The histological examination revealed that the metformin treatment led to a greater reduction in inflammation than the treatment with BLM alone. The mRNA levels of collagen, collagen-1, procollagen, fibronectin, and transforming growth factor-β in the metformin-treated mice were lower than those in the BLM-only mice on day 21, although statistical significance was observed only in the case of procollagen due to the small number of live mice in the BLM-only group. Additionally, treatment with metformin reduced fibrosis to a greater extent than treatment with BLM alone. Metformin suppresses the inflammatory and fibrotic processes of BLM-induced pulmonary fibrosis in a murine model.     

肺巨噬细胞在小鼠肺纤维化发生中的作用

本文以博莱霉素注入小鼠气管内诱发肺泡炎导致肺纤维化。对肺泡灌洗液（ＢＡＬ）内细胞进行分类，检测了ＢＡＬ中及肺泡巨噬细胞（ＰＭ）培养上清液内酸性酶活性，并检测了ＰＭ培养上清液对成纤维增殖的影响。结果表明，实验组ＢＡＬ中ＰＭ数增加，酸性酸酶活性上升，并与肺胶原蛋白含量相关，ＰＭ培养上清使肺成纤维细胞＾３Ｈ－Ｔdisplay status     

Cell Proliferation during the Process of Bleomycin-induced Pulmonary Fibrosis in Rats

To elucidate the relationship between cell proliferation and structural remodeling in pulmonary fibrosis, light and electron microscopy with immunohistochemistry for bromo-deoxyuridine (BrdU) and morphometry for BrdU positive cells were performed following a single intratracheal instillation of bleomycin in rats. The results showed that terminal bronchiolar epithelial cells, Type II alveolar epithelial cells and interstitial cells began to proliferate 2 days after the injury. Then each cell type showed a different style of proliferation. Interstitial cells which were located in the interstitium and migrated into intraalveolar spaces proliferated, then produced intra-alveolar fibrosis. Terminal bronchiolar epithelial cells proliferated rapidly and formed alveolar bronchiolization with squamous metaplasia in areas where alveoli were severely damaged and intraalveolar fibrosis was formed, and thereafter the proliferation ceased within 2 weeks. The degree of proliferation of type II alveolar epithelial cells and interstitial cells was rather slight, but continued constantly untill the later stage. In addition, intraalveolar macrophages were BrdU positive from an early stage. Endothelial cell proliferation was observed in small vessels and alveolar capillaries at 1 week after bleomycin instillation. Rapidly proliferating bronchiolar epithelial cells which formed alveolar bronchiolization with squamous metaplasia were important in preventing the progress of intraalveolar fibrosis, because the proliferation of type II alveolar epithelial cells was limited.     

Directed Gp130-Mediated Signaling Dissociates Inflammation from Fibrosis in Bleomycin Induced Lung Injury

Inflammation Research -