卵磷脂-胆固醇酰基转移酶缺乏肾病1例

患者女性,36岁.因反复浮肿14余年,复发伴加重1个月入院.近14年来反复出现对称凹陷性颜面及双下肢浮肿,偶有面部红斑,角膜稍混浊,无瘙痒及光过敏.辅助检查:尿蛋白(),尿隐血(+),白蛋白29.4 g/L,尿酸455 μmol/L,24 h尿蛋白定量2.16 g/L.动脉硬化风险指数4.94.自身抗体谱、乙肝标记物阴性.患者于B超引导下行肾脏穿刺活检术.     

卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)的基因突变与LCAT缺陷综合征

卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (lecithin :cholesterolacyltransferase ,LCAT)是体内脂蛋白代谢的关键酶之一 ,它主要参与HDL的成熟过程和胆固醇逆转运过程。LCAT基因突变导致LCAT缺乏及活性下降 ,可引起 2种疾病 :家族性LCAT缺乏征 (familiarLCATdeficiency ,FLD)和鱼眼病 (fish eyedisease,FED)。目前 ,对于LCAT的活性及功能已经有了较深入的研究 ,但对于LCAT的结构 (尤其是三维结构 )及其基因调控与突变研究的不多 ,本文除了对人LCAT的结构和功能做基本介绍外 ,着重阐述LCAT基因表达及其突变方面的研究进展     

卵磷脂胆固醇酰基转移酶基因单核苷酸多态性与冠心病脂代谢易感性的关联研究

目的：检测卵磷脂胆固醇酰基转移酶（lecithin cholesterol acyltransferase,LCAT）基因3个编码区单核苷酸多态位点在中国人群中的分布频率，并初步探讨它们与脂代谢和冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary atherosclerotic heart disease,CHD）易感性的关系。方法：采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性方法，分析209名正常人和203例CHD患者中608C／T、911T／C和1188C／T（参照序列：NM_000229）3个位点的多态性。结果：608C和608T等位基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。CHD患者组608T频率显著低于正常人群（P＝0．034）。与无608T CHD患者相比，具有608T的CHD患者的血浆高密度脂蛋白胆固醇显著升高（P＝0．015）。911T／C和1188C/T在两组中均未检出。结论：LCAT基因608T等位基因与CHD患者较高的血浆高密度脂蛋白胆固醇水平相关联，可能与中国人CHD相关。911T／C和1188C／T在中国人群中非常罕见。     

卵磷脂胆固醇酰基转移酶基因608C/T多态性与动脉粥样硬化性脑梗塞的关联研究

目的探讨卵磷脂胆固醇酰基转移酶（lecithin-cholesterol acyltransferase，LCAT）的基因LCAT 608C／T多态性在中国汉族人群中的分布及其与动脉粥样硬化性脑梗塞（atherosclerotic cerbral infarction，ACI）的关联。方法应用聚合酶链反应、单链构象多态性技术联合限制性片段长度多态性技术检测150例ACI患者和122名年龄、性别相匹配的正常对照者的LCAT 608C／T多态性。结果LCAT 608C/T位点基因型分布在ACI和对照组均符合Hardy-Weinberg平衡定律。ACI组CT基因型频率（14．0％）、T等位基因频率（7．0％）均显著高于对照组（P〈0.05）。ACI和对照组中608CC亚组HDL-C水平均高于同组内608CT亚组（P〈0．05）。结论LCAT 608C／T多态性可能为中国人群ACI易感因素，T等位基因可能与HDL-C代谢有关。     

测定卵磷脂:胆固醇脂酰转移酶的一种理想方法

卵磷脂:胆固醇脂酰转移酶(LCAT)系由肝脏分泌至血浆。它主要作用于高密度脂蛋白(HDL),催化卵磷脂中的脂肪酸转移给游离胆固醇,形成胆固醇酯和溶血卵磷脂。新形成的胆固醇酯可以从HDL转移给低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白     

酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶1反义寡核苷酸对泡沫细胞形成的影响

目的：观察酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶1（ACAT1）反义寡核苷酸对泡沫细胞（FC）形成的影响。 方法： 体外培养人THP-1单核细胞系，由佛波酯（PMA）作用使其分化为巨噬细胞；并建立过表达ACAT1基因的THP-1单核细胞系。在脂质体的介导下将针对ACAT1基因序列的反义和错义寡核苷酸分别作用于上述细胞6 h后加入Ac-LDL进行脂质负荷，以Western blotting法检测ACAT1蛋白表达，放射性同位素标记底物法检测ACAT酶活性的变化，油红O染色法观察泡沫细胞的形成情况。 结果： ACAT1反义寡核苷酸可明显抑制巨噬细胞和过表达ACAT1基因的THP-1单核细胞内的ACAT酶活性，而且可明显抑制Ac-LDL负荷后泡沫细胞的形成；错义寡核苷酸则无此作用。 结论： ACAT1反义寡核苷酸可抑制ACAT的生物学活性及泡沫细胞的形成。     

重组多顺反子逆转录病毒介导的人载脂蛋白AI 与卵磷脂胆固醇脂酰基转移酶在肌源性细胞的表达

目的 :载脂蛋白ＡＩ(ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ,ａｐｏＡＩ)与卵磷脂胆固醇脂酰基转移酶 (ｌｅｃｉｔｈｉｎ :ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｃｙｌｔｒａｎｓ ｆｅｒａｓｅ ,ＬＣＡＴ)作为高密度脂蛋白 (ｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ,ＨＤＬ)的主要组分 ,在胆固醇由周围组织向肝脏的运输、排泄过程即胆固醇逆转运 (ｒｅｖｅｒｓｅｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｔｒａｎｓｐｏｒｔ,ＲＣＴ)过程中起关键作用。近年研究进一步证实 ,ＡｐｏＡＩ与ＬＣＡＴ的转基因动物能纠正由于遗传缺陷所致的低ＨＤＬ血症并有效抵抗高脂食物引起…     

溶血卵磷脂对巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响

目的：探讨溶血卵磷脂（LPC）对巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响，为动脉粥样硬化（AS）的防治研究提供理论依据。方法：分离培养小鼠腹腔巨噬细胞，密度梯度超速离心法分离人血浆低密度脂蛋白（LDL），乙酰化后形成乙酰化低密度蛋白（AcLDL),用AcLDL负载巨噬细胞使之形成巨噬泡沫细胞模型。用酶学荧光法检测细胞胆固醇外流，用乳酸脱氢酶（LDH）检测试剂盒检测培养基中LDH活性来反映LPC的细胞毒性。结果：LPC处理巨噬泡沫细胞24h后，培养基中胆固醇含量明显高于对照组（1．7－4倍），细胞内胆固醇含量明显低于对照组。且LPC引起细胞胆固醇外流增加同时，培养基中LDH活性并没有明显差异。结论：在10－80μmol/L剂量范围内，LPC可以剂量依赖性地促进巨噬泡沫细胞胆固醇外流，且这一效应与LPC的细胞毒性之间没有关系。     

溶血卵磷脂对巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响

目的:探讨溶血卵磷脂(LPC)对巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响,为动脉粥样硬化(AS)的防治研究提供理论依据。方法:分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,密度梯度超速离心法分离人血浆低密度脂蛋白(LDL),乙酰化后形成乙酰化低密度脂蛋白(AcLDL),用AcLDL负载巨噬细胞使之形成巨噬泡沫细胞模型。用酶学荧光法检测细胞胆固醇外流,用乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测培养基中LDH活性来反映LPC的细胞毒性。结果:LPC处理巨噬泡沫细胞24h后,培养基中胆固醇含量明显高于对照组(1.7-4倍),细胞内胆固醇含量明显低于对照组。且LPC引起细胞胆固醇外流增加同时,培养基中LDH活性并没有明显差异。结论:在10-80μmol/L剂量范围内,LPC可以剂量依赖性地促进巨噬泡沫细胞胆固醇外流,且这一效应与LPC的细胞毒性之间没有关系。     

氧化低密度脂蛋白及溶血卵磷脂对巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响

目的:观察氧化低密度脂蛋白(OxLDL)及其成分溶血卵磷脂(LPC)对小鼠腹腔巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响及其机制的初步探讨。方法:(1)以载脂蛋白AI(apoAI)分别诱导OxLDL和乙酰化低密度脂蛋白(AcLDL)负载小鼠腹腔巨噬细胞所形成的巨噬泡沫细胞, 观察其胆固醇外流情况。(2)分离正常及apoE基因缺陷(E⁰)小鼠腹腔巨噬细胞, 以AcLDL负载形成巨噬泡沫细胞, 分别以LPC及apoAI作为诱导物, 观察其胆固醇外流情况。结果:(1)apoAI能引起AcLDL组巨噬泡沫细胞胆固醇大量外流, 而OxLDL组外流明显受阻。(2)LPC能引起正常组小鼠腹腔巨噬泡沫细胞胆固醇外流, 且呈剂量效应关系, 但E⁰组未见明显外流;apoAI能引起两组的胆固醇外流, 且外流量显著高于LPC。结论:(1)OxLDL能造成胆固醇外流途径受阻。(2)LPC能促进巨噬泡沫细胞胆固醇外流, 可能主要通过apoE途径来进行。     

人工生物膜加强胆固醇逆向转运及其与动脉粥样硬化关系

用大豆磷脂做成人工生物膜(脂质体),不包药。实验分二大组,一大组又分为:(1)正常食对照组(N=8)。(2)进食高脂对照组(N=8):在进食高脂第8日取血后静注盐水10ml/只,2小时后再取血,测TC     

Ghrelin对THP-1细胞泡沫化过程中酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶1表达的影响

目的： 研究单核/巨噬细胞分化成为泡沫细胞过程中ghrelin对人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)表达以及细胞内胆固醇酯的影响。方法: 体外培养人源单核细胞系（THP-1）,由佛波酯（PMA）作用使其分化为巨噬细胞,后者可在氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）存在条件下进一步转变为泡沫细胞。巨噬细胞加入不同浓度的ghrelin预孵2 h后再加入ox-LDL,油红O染色法观察细胞内脂滴含量,运用RT-PCR法检测ACAT-1 mRNA水平,Western blotting法检测ACAT-1蛋白表达,采用酶法,通过荧光分光光度计检测细胞内胆固醇酯含量。结果: Ghrelin可明显减少THP-1源性泡沫细胞内脂滴的形成,显著降低细胞内胆固醇酯含量,并能显著降低单核/巨噬细胞泡沫化过程中ACAT-1 mRNA 水平和蛋白表达,且此干预作用呈浓度依赖性。结论: Ghrelin可能通过ACAT-1转录翻译水平的下调延缓动脉粥样硬化的发生。     

酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1对BCG诱导巨噬细胞自噬的调控作用

目的探讨酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)对卡介苗(BCG)感染巨噬细胞后胞内胆固醇水平及细胞自噬的调控作用。方法 BCG感染RAW264.7巨噬细胞不同时间后,采用qRT-PCR法检测ATAC1基因mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法检测ATAC1及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1的表达水平,胆固醇定量检测试剂盒检测胞内胆固醇及胆固醇酯的变化,油红O染色法检测细胞内脂滴的含量,以感染0 h的细胞为对照组。结果在BCG感染巨噬细胞后,与对照组相比,ACAT1基因mRNA的表达在感染后2、6、12 h逐渐下降,12 h达到最低,差异极显著(P0.01);ACAT1蛋白的表达量随感染时间先降后升,在感染后12 h表达量最低,感染2 h、24 h与对照组相比差异显著(P0.05),感染6 h、12 h与对照组相比差异极显著(P0.01);胞内游离胆固醇含量在感染后2、6、12 h逐渐升高,与对照组相比差异极显著(P0.01);胆固醇酯含量逐渐下降,至12 h最低,6、12、24 h与对照组相比差异极显著(P0.01);胞内脂滴的数量随感染时间先降后升,且感染后12 h胞内脂滴数量最少。结论结核分枝杆菌感染巨噬细胞后,ACAT1表达下调,使胞内胆固醇酯合成量下降,胆固醇积累,激活细胞自噬。     

鸭血清卵磷酯-胆固醇-酰基转移酶的提取、纯化与鉴定

卵磷酯—胆固醇—酰基转移酶(LCAT)是酯化高密度脂蛋白(HDL)胆固醇的关键酶,在血浆脂蛋白代谢中起着重要作用。最近几个实验室已将此酶从人和一些哺乳动物的血浆中纯化成单体。鸭血清脂蛋白的HDL含量很高,是研究HDL中胆固醇酯化的较好的模型。为了研究血清脂蛋白的代谢机制,我们从鸭血清中提取纯化了LCAT。方法、结果如下:取新鲜鸭血清,先对Ⅰ=0.1的磷酸盐缓冲液透析,再用硫酸葡聚糖和CaCl_2(终浓度分别为1.4％和0.1M)沉     

生物膜脂类在紫外光照下产生的自由基

膜脂的光分解作用一般认为主要是磷脂中脂肪酸产生过氧光氧化反应曾报导说在反应中有自由基生成,但其性质及转化等尚不清楚。本文作者用15种化合物,包括天然的卵磷脂,人工合成的磷脂酰胆碱及其类似物,某些模型化合物如三羧酸甘油脂、氨基醇,胆碱,饱和脂肪酸等,用电子自旋共振谱(ESR)研究其紫外光照下生成的自由基。饱和脂肪酸在紫外光照下检出有自由基RCH-CH_2生成、估计是由于-CH_2-COOH键断裂的结果。RCH_2CH_2-COOHR-CH_2-CH+COOH但用硬脂酸及辛酸试验时,未找到COOH基,料想羧自由基进一步按下式分解:     

正常中国人及内源性高甘油三酯血症患者酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶基因多态性的研究

目的 研究酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl-coenzyme A:cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)基因rs1044925多态性是否与正常汉族中国人及内源性高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia,HTG)患者血脂及载脂蛋白水平存在关联.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法,对成都地区372名汉族人(267名正常人和105例内源性高甘油三酯血症患者)ACAT1基因rs1044925多态位点进行分析.结果 中国人ACAT1基因rs1044925多态位点C等位基因频率为0.137,显著低于中部和南部欧洲人的0.354(P＜0.05);HTG组和对照组C等位基因频率分别为0.153和0.137,两者之间差异无统计学意义.对照组AA基因型携带者血清低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-high density lipoprotein cholesterol,nHDL-C)水平均较C等位基因携带者(Ac和CC基因型者)显著升高[(3.25±0.68)mmol/L vs(3.03±0.87)mmol/L,P＜0.05;(3.80±0.71)mmol/L vs(3.23±0.82)mmol/L,P＜0.05],HTG组AA基因型携带者血清高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-c)水平较C等位基因携带者显著升高[(1.00±0.28)mmol/L vs(0.87±0.17)mmoL/L,P＜0.05].结论 ACAT1 基因rs1044925多态性不仅与正常中国成都地区汉族人血清LDL-C、nHDL-C含量有关,而且还与内源性高甘油三酯血症患者血清HDL-C水平相关联.     

人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1基因P7启动子调控的报告基因载体的构建及鉴定

应用PCR方法从人单核细胞系THP-1基因组DNA扩增人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl coenzyme A: cholesterol acyltransferase1, ACAT1)基因 P7启动子全长片段,进行TA克隆,经双酶切、测序鉴定阳性克隆.将该基因亚克隆至荧光素酶报告基因载体pGL3-Enhancer,用DEAE-葡聚糖(DEAE-dextran)法将重组质粒pGL3E-P7瞬时转染入单核细胞THP-1,检测其活性,证明pGL3E-P7能在体外表达荧光素酶.人ACAT1基因P7启动子调控的荧光素酶报告基因表达载体的成功构建,为研究动脉粥样硬化过程中ACAT1基因的转录调控机制提供新手段.     

寒冷对生物膜的影响

寒冷对生物膜的影响吉宏龙（中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所北京１０００５０）寒冷作为最常见的生态因素，可导致各种整体性低温损伤。如冻结性冻伤、非冻结性冻伤（冻疮、浸渍足或战壕足），重者表现为低体温或冻僵￣［１～３］。此外，对寒带及从事低温作业...     

不对称二甲基精氨酸对单核/巨噬细胞分化为泡沫细胞过程中酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1表达的影响

 [摘要] 目的 观察不对称二甲基精氨酸（ADMA）对单核/巨噬细胞分化为泡沫细胞过程中酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1（ACAT-1）表达的影响。 方法 （1）THP-1单核细胞与160nmol/L佛波酯（PMA）孵育48h后,再与80mg/L氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育24h,用油红O染色在光镜下鉴定细胞形态及变化。（2） 将THP-1单核细胞、巨噬细胞、泡沫细胞分别用20μmol/L ADMA干预24h,酶法测泡沫细胞内胆固醇酯的含量,RT-PCR方法检测ACAT-1mRNA表达,Western blot方法检测其蛋白表达。 结果 （1）ADMA可显著增加泡沫细胞内胆固醇酯的含量。（2）与THP-1单核细胞相比,巨噬细胞（p<0.05）、泡沫细胞（p<0.01）中ACAT-1mRNA及蛋白表达增加;而与巨噬细胞相比,泡沫细胞中ACAT-1mRNA及蛋白表达增加但无显著性差异。（3）与各自的对照组相比,经ADMA作用后3种细胞中ACAT-1mRNA及蛋白表达水平均增加（p<0.01）。结论 ADMA增加泡沫细胞内胆固醇酯的含量可能是通过上调ACAT-1的mRNA及蛋白表达来实现的。