造血干细胞动员中外周血CD34+细胞的变化趋势及其对采集的影响

目的 探讨外周血造血干细胞动员过程中外周血CD34+细胞的变化趋势及其对采集时机和采集结果的影响.方法 2010年4月至2011年12月外周血造血干细胞动员及采集27例,其中自体13例,采用化疗联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF) 10μg· kg-1·d-1动员方案;健康供者14例,单独应用G-SCF 7.5μg· kg-1·d-1动员方案.监测外周血CD34+细胞数,并与采集产物中获得的单个核细胞(MNC)及CD34+细胞量进行相关性分析.结果 健康供者中获得MNC(5.84±1.48)×108/kg,CD34+细胞(3.93±2.16)×106/kg.自体动员共获得MNC(6.58±3.72)×108/kg,CD34+细胞(3.98±3.06)×106/kg,仅1例自体动员、采集失败.自体动员外周血CD34+细胞在第4天达峰值,健康供者第5天仍处于上升阶段.外周血CD34+细胞百分比和绝对值与采集产物CD34+细胞呈明显正相关.采集当天CD34+细胞绝对值≥20/μ1时,单次采集获得CD34+细胞≥2×106/kg者的比例达76.2％(16/21).结论 外周血CD34+细胞计数是造血干细胞采集过程中的重要监测指标,对于把握采集时机和预测采集效果具有重要意义,CD34+细胞绝对值≥20/μ1可作为采集阈值.     

肾脏移植临床免疫耐受诱导最佳方案的研究进展

传统肾移植的成功主要依赖于免疫抑制剂的长期使用.为了减轻患者的经济负担及减少免疫抑制剂所带来的不良反应,各种免疫耐受的诱导方案不断被探索.动物实验和临床研究结果表明,肾脏移植联合造血干细胞输注可能可以诱导受体的免疫耐受,使移植物长期存活于受体.其中CD-34细胞可能与诱导嵌合体形成及免疫耐受有重要关系.     

肾脏移植临床免疫耐受诱导最佳方案的研究进展

传统肾移植的成功主要依赖于免疫抑制剂的长期使用.为了减轻患者的经济负担及减少免疫抑制剂所带来的不良反应,各种免疫耐受的诱导方案不断被探索.动物实验和临床研究结果表明,肾脏移植联合造血干细胞输注可能可以诱导受体的免疫耐受,使移植物长期存活于受体.其中CD-34细胞可能与诱导嵌合体形成及免疫耐受有重要关系.     

异基因脐血造血干细胞移植

脐血是指胎儿娩出并断脐后保留在脐带和胎盘近胎儿一侧血管内的血液。脐血中富含造血干细胞，脐血造血干细胞则以其独特的生物学特性、资源优势以及临床适应证的广泛性等弥补了骨髓移植(BMT)和外周造血干细胞移植的不足。脐血造血干细胞移植(CBSCT)正日益受到人们的重视，已成为近几年来造血干细胞移植领域的重大进展之一。     

异基因造血干细胞移植临床应用及进展异基因造血干细胞移植适应证及疗效

异基因造血干细胞移植(allogeneic henaatopoietic stem cell transplant，Allo-HSCT)是治疗造血系统疾病最有效的方法。根据国际骨髓移植登记处(international bone marrow transplant registry，IBMTR)的统计，从1970～2004年，在IBWTR登记的Allo-KSCT病例数已接近5万例，而且每年以近3000例的数量增加；而IBMTR并不包括全世界所有完成的Allo-HSCT病例。我国自上世纪80年代后期由少数几家移植中心开始Allo-HSCT工作到目前除西藏以外所有省、市、自治区均可开展Allo-HSCT工作；在不少地区，该项技术向县、市级医疗机构延伸；随着完成的病例数逐渐增加，远期疗效也逐渐提高。     

异基因造血干细胞移植研究进展

异基因造血干细胞移植已成为治愈血液系统恶性肿瘤、骨髓衰竭性疾病、某些先天性及代谢性疾病等的重要方法。本文就外周血干细胞移植（PBSCT）、脐血造血干细胞移植（CBSCT）、非清髓性干细胞移植（NST）、移植物抗宿主病（GVHD）与移植物抗白血病（GVL）效应以及间充质干细胞（MSC）在异基因造血干细胞移植中的应用等方面的新进展进行介绍。     

移植前铁过载对重型再生障碍性贫血异基因造血干细胞移植疗效的影响

目的  研究移植前铁过载对重型再生障碍性贫血（SAA）患者异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）疗效的影响。方法  回顾性分析行首次allo-HSCT的80例SAA受者临床资料。根据有否铁过载,将受者分为铁过载组（20例）和无铁过载组（60例）。比较两组间受者移植后植入率、并发症发生情况及预后情况;采用Cox比例风险回归模型分析受者2年总生存率（OS）和180 d移植相关病死率（TRM）的影响因素。结果  无铁过载组的中性粒细胞植入率为98%（59/60）,明显高于铁过载组的75%（15/20）（P < 0.05）。无铁过载组的血小板植入率为90%（54/60）,明显高于铁过载组的65%（13/20）（P < 0.05）。无铁过载组血流感染发生率为23%（14/60）,明显低于铁过载组的40%（8/20）（P < 0.05）。无铁过载组受者术后180 d TRM为17%,明显低于铁过载组的45%（P < 0.05）。无铁过载组受者术后1、2年OS分别为82%、80%,均高于铁过载组的50%、44%（均为P < 0.05）。是否有铁过载是受者的OS和TRM的独立危险因素（均为P < 0.05）。结论  铁过载可影响SAA患者allo-HSCT移植后的OS和TRM。     

肾细胞癌的异基因造血干细胞移植治疗进展

近年来研究发现,异基因造血干细胞移植后可以产生抗肿瘤作用,这种作用对耐细胞因子的肾细胞癌也有很好的疗效,为肾细胞癌的治疗提供了一种新的方法。本文就异基因造血干细胞移植治疗肾细胞癌的研究进展作一综述。     

异基因造血干细胞移植亲缘供者的护理

针对61例捐献造血干细胞供者的特点，进行心理疏导和术前做好身体和皮肤准备；术中保持静脉通路通畅，严格无菌操作，行全程心电监护；术毕防止穿刺点出血和感染等健康指导，结果均顺利完成造血干细胞采集，无1例发生并发症。住院4～10d出院。提示供者捐献造血干细胞是安全的。     

用于异基因移植的造血干细胞来源

造血干细胞移植(hcmatopoiedc stem cell transplantation，HSCT)的临床应用已有近50年的历史，目前已成为治疗多种良恶性血液病、实体肿瘤、遗传性疾病和重症自身免疫性疾病等的有效手段。本文试就异基因造血干细胞移植中应用的不同来源造血干细胞(hematopoietic stemcell，HSC)的特点及其对移植效果的影响作一评述。     

Higher dose of CD34+ peripheral blood stem cells is associated with better survival after haploidentical stem cell transplantation in pediatric patients

Haploidentical stem cell transplantation (SCT) is increasingly used to treat pediatric patients with malignant or nonmalignant hematological disorders. The CD34+ dose of bone marrow or peripheral blood stem cells (PBSCs) has been shown to be an important determinant of the transplant outcome in adults under various preparative regimens. However, knowledge of the effect of the CD34+ dose in pediatric haploidentical SCT is limited. We analyzed the data of 348 pediatric patients (aged 2‐18 years) with acute or chronic leukemia, myelodysplastic syndrome (MDS), and other hematological disorders that received a transplant between 2002 and 2012. The results of multivariate analysis showed that PBSC CD34+ counts greater than 1.01 × 10⁶ kg^?1 improved platelet engraftment, improved overall survival, and reduced nonrelapse mortality. In contrast, a higher PBSC CD34+ dose did not affect the incidence of acute or chronic graft‐versus‐host disease, including engraftment syndrome. These data suggest that a PBSC CD34+ dose greater than 1.01 × 10⁶ kg^?1 is optimal for pediatric haploidentical SCT.     

Impact of vitamin D receptor gene polymorphisms on clinical outcomes of HLA-matched sibling hematopoietic stem cell transplantation

We hypothesized that polymorphisms of the vitamin D receptor (VDR) gene might affect clinical outcomes of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). Three VDR gene polymorphisms (BsmI G>A, ApaI G>T, and TaqI T>C) were genotyped in 147 patients who underwent HLA-matched sibling allogeneic HSCT. Frequencies of infection, graft-vs.-host disease (GVHD), overall survival (OS), and disease-free survival (DFS) were compared according to genotypes and haplotypes. Infection and acute GVHD had trends to be less frequent in patients with ApaI TT genotype than non-TT genotypes (p = 0.061 and p = 0.059, respectively). For TaqI genotypes, there were no statistical differences in frequency of infection and acute GVHD (p = 0.84 and p = 0.30, respectively), but TC genotype was associated with longer OS and DFS than TT genotype (p = 0.022 and p = 0.038, respectively). In the ApaI-TaqI haplotype analysis, patients with TC haplotype had significantly longer OS and DFS than those without TC haplotype (p = 0.022 and p = 0.038, respectively). In multivariable analysis, TaqI genotype and ApaI-TaqI haplotype of recipients were independent prognostic factors for both OS and DFS. This study suggests that the genotype and haplotype of VDR in recipient might be associated with clinical outcome of sibling HLA-matched HSCT.     

Long-term follow-up of peripheral blood stem cell transplantation from mismatched related and unrelated donors

Allogeneic stem cell transplantation (SCT) is best performed with an HLA-identical sibling donor (matched related donor, MRD) to reduce the risk of early complications such as acute graft-vs.-host disease (aGvHD). However, as only about 30% of recipients have an MRD for this potentially curative approach, the use of family donors with one or two mismatches in the HLA-antigens (mismatch related donor, MMRD) or fully matched unrelated donors (MUD) ('alternative donors') has been introduced in the allogeneic SCT setting in recent years. To evaluate the feasibility of allogeneic SCT from alternative donors by using peripheral blood stem cells (PBSC) we initiated a prospective, phase II study in 1996. From April 1996 to July 1998, 18 patients with various hematological malignancies underwent allogeneic SCT from alternative donors (two patients with MUD and 16 patients with MMRD). All patients received stable engraftment and none of the patients had graft rejection. The rate of aGvHD (grades II-IV) and the relapse rate at last follow-up (seven to nine yr after SCT) were with 40% and 24%, respectively, comparable with those found in patients receiving allogeneic SCT from MRD. However, five yr after allogeneic SCT only 17% were alive, which was mainly due to the treatment-related mortality (TRM) rate of 59%. We conclude that allogeneic PBSC transplantation by using alternative donors is associated with an unsatisfying long-term TRM rate. The significance of TRM and particular late deaths has to be evaluated further in this transplantation setting.     

HLA单倍体相合与全相合外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病的疗效比较

目的 观察和比较亲属间人类白细胞抗原(HLA)单倍体相合与全相合外周血造血干细胞移植(PBSCT)治疗恶性血液病的临床疗效.方法 2004年5月至2009年2月,共111例恶性血液病患者进行了异基因PBSCT(allo-PBSCT),其中单倍体相合移植受者51例(单倍体组),同期全相合移植受者60例(全相合组).两组的预处理方案均为清髓性;两组预防移植物抗宿主病(GVHD)均以经典环孢素A加短程甲氨蝶呤作为基础方案,HLA 1个抗原不合时,加用吗替麦考酚酯,HLA 2～3个抗原不合时,再加用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)及抗CD25单克隆抗体.移植物为经粒细胞集落刺激因子动员的、未进行体外去除T淋巴细胞的外周血造血干细胞(PBSC).结果 111例受者均获得完全、持久供者干细胞植入.单倍体组和全相合组受者中性粒细胞≥0.5×10~9/L的中位时间分别为14 d和12 d,血小板≥20×10~9/L的中位时间分别为15 d和13 d.单倍体组有25例受者发生急性GVHD(aGVHD),其中Ⅰ度20例,Ⅱ度5例;有33例发生慢性GVHD(cGVHD),其中局限型30例,广泛型3例;4年累积发病率为70.4%;无白血病存活40例,3年预期总无白血病存活率(LFS)为74.5%,其中标危型77.3%,高危型68.2%.全相合组有14例发生aGVHD,其中Ⅰ度10例,Ⅱ度2例,Ⅲ度2例;有37例发生cGVHD,其中局限型32例,广泛型5例;4年累积发病率为58.1%.无白血病存活46例,3年预期总LFS为72.1%,其中标危型77.6%,高危型52.7%.单倍体组受者移植后aGVHD发生率高于全相合组,差异有统计学意义(P<0.05);但cGVHD、原发病复发率和LFS差异均无统计学意义(P>0.05).结论 应用清髓性预处理联合多种免疫抑制剂进行非体外去T淋巴细胞的、亲属间HLA单倍体相合与全相合PBSCT均为治疗恶性血液病安全有效的方案.     

睾丸间质干细胞分化和移植

睾丸间质细胞是男性体内合成雄激素的主要细胞,胚胎发育期中肾胚的间质细胞及生精小管周成纤维样细胞可能是睾丸间质细胞的干细胞。在胚胎期间质干细胞分化为胎儿型间质细胞;出生后间质干细胞经间质祖细胞、未成熟间质细胞分化为成熟间质细胞。老年期间质细胞数量可能不变,但雄激素合成下降。间充质干细胞及脂肪干细胞等干细胞经诱导可分化为分泌雄激素的睾丸间质细胞,因此,间质干细胞移植可望成为治疗男性性腺功能不全和中老年雄激素缺乏的创新方法,本文对睾丸间质干细胞的分化及移植方面研究进行综述。     

非清髓预处理后自体外周血造血干细胞移植治疗难治性重症肌无力远期疗效观察

目的观察体外纯化的自体外周血CD34+细胞移植于经非清髓预处理方案治疗的难治性重症肌无力(MG)患者的远期疗效。方法回顾性分析浙江中医药大学附属第一医院血液科2005年2月至2010年2月期间经纯化的自体外周血CD34+细胞移植治疗5例难治性MG患者资料。采用FAC预处理方案:磷酸氟达拉滨30mg·m-2·d-1,共4d;抗胸腺细胞球蛋白2.5mg·kg-1·d-1或抗淋巴细胞球蛋白30mg·kg-1·d-1,共4d;环磷酰胺50～60mg·kg-1·d-1,共2d。结果 5例患者均获造血、免疫重建,无移植相关死亡。全部患者均随访至2012年2月,中位随访时间44(24～84)个月,其中肌力正常,恢复正常生活、工作,脱离药物治疗4例,另1例移植后12个月因疾病复发而再次应用小剂量泼尼松、溴吡斯的明维持治疗患者目前肌无力症状控制良好,生活自理。结论 FAC预处理方案应用于纯化的自体外周血CD34+细胞移植治疗难治性MG远期疗效较好,患者的耐受性良好,值得进一步临床研究。+     

Hepatitis B virus vaccination of recipients and donors of allogeneic peripheral blood stem cell transplantation

Abstract: Background: The aim of this study was to determine the role of hepatitis B virus (HBV) vaccination as defined by the seroconversion to hepatitis B surface antibody (anti‐HBs) positivity in peripheral blood stem cell transplants. Methods: A total of 65 recipients and their donors were enrolled in this study. Recipients were divided into four distinct groups. Group 1 consisted of individuals who were vaccinated, group 2 consisted of individuals who were naturally immunized, group 3 consisted of individuals who were HBs‐Ag positive, and group 4 consisted of individuals who were HBV naïve and not vaccinated. Results: Eighty‐eight percent of the HBV‐vaccinated recipients (14 of 16), who had vaccinated‐donors, seroconverted to anti‐HBs positivity. Eighty‐three percent of HBV‐naïve recipients (five of six), who received stem cells from HBV‐immune donors, seroconverted to anti‐HBs positivity. Two of the four HBs‐Ag positive recipients with HBV‐immune donors seroconverted to anti‐HBs positivity after transplantation. Fifty‐seven percent of previously vaccinated‐recipients (eight of 14) lost detectable anti‐HBs antibody following transplantation. Finally, 31% of HBV‐naïve recipients with HBV‐naïve donors acquired a de novo HBV infection. Conclusions: (i) Hepatitis B virus immunization of recipients of allogeneic hematopoietic cell transplantation results in an effective antibody response. (ii) The HBV‐immune status of the donor plays an important role in post‐transplantation HBs‐Ab on seroconversion. (iii) Systematic re‐immunization of recipients will be necessary to maintain HBV immunity in long‐term serving recipients.     

改良脾-肺固定联合外周血干细胞移植治疗门静脉高压症上消化道出血的疗效分析

目的探讨改良脾-肺固定联合外周血干细胞移植（APBSCT）治疗门静脉高压症上消化道出血的疗效。 方法收集2010年3月至2014年12月在郑州大学第一附属医院就诊且随访资料完善的门静脉高压症上消化道出血患者资料,其中行改良脾-肺固定术的31例患者设为对照组,联合应用APBSCT的17例患者为试验组。对比分析两组患者术后3、6个月时天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）水平,应用超声多普勒检测术后3个月时脾-肺之间侧支循环形成情况,采用Kaplan-Meier生存曲线和Log-rank检验比较两组患者再出血时间差异。 结果两组患者术后3、6个月时AST、TBIL水平比较,差异无统计学意义;但试验组ALB水平均高于同期对照组,差异有统计学意义（t=-2.399、2.152,P=0.021、0.037）。术后3个月时,对照组中11例无明显侧支循环形成,未形成率为35.48%（11/31）,显著高于试验组的5.88%（1/17）,两组比较差异有统计学意义（χ²=5.131,P=0.024）。试验组中1例于术后12个月时发生消化道再出血,对照组中10例发生消化道再出血,其中3例于术后3个月内出现,两组再出血时间比较差异有统计学意义（χ²=4.362,P=0.037）。 结论外周血干细胞移植能够促进改良脾-肺固定术后脾-肺之间侧支循环的建立,减少再出血风险,改善肝脏合成功能,值得进一步推广应用。     

ABO血型不合对同胞异基因外周血干细胞移植的影响

目的探讨HLA配型相合但ABO血型不合的同胞异基因外周血干细胞移植(allo- PBSCT)治疗血液恶性肿瘤的疗效。方法对2001年6月至2005年9月的68例HLA配型相合的血液恶性肿瘤患者进行同胞allo-PBSCT,其中ABO血型不合30例(血型不合组),ABO血型相合38例(血型相合组)。急性髓细胞白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)和慢性粒细胞白血病(CML)患者采用马利兰(BU)/环磷酰胺(CY)预处理方案；急性淋巴细胞白血病(ALL)和非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)患者采用全身照射(TBI)/CY方案；多发性骨髓瘤(MM)患者采用TBI/CY/马法兰方案。移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用霉酚酸酯(MMF)、环孢素A(CsA)和短程甲氨喋呤(MTX)三联方案。结果(1)除1例植入失败外,其余67例患者全部造血重建。中性粒细胞绝对值≥0．5×10~9/L和血小板数≥20×10~9/L的平均时间为移植后+12(+9～+15)d和+21(+15～+40)d,血型不合组与血型相合组植入的时间差异无统计学意义(P＞0．05)。(2)血型不合组均未出现急性溶血反应,但与血型相合组比较,红系造血延迟,在供/受者血型为A/O的7例患者中有3例(42．9%)发生纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)。血型不合组于移植后60d(24～153 d)血型成功转变为供者型。(3)随访至2005年9月30日,血型不合组急性GVHD发生率(20．0%)比血型相合组(2．6%)高(P=0．019),但慢性GVHD发生率、肝静脉栓塞综合征(VOD)发生率、巨细胞病毒(CMV)感染发生率、出血性膀胱炎(HC)发生率、疾病复发率及死亡率与血型相合组比较,差异无统计学意义(P＞0．05)。(4)用Kaplan-Meier生存分析发现,血型相合组和血型不合组患者之间预期4年的生存率差异无统计学意义(P＞0．05)。结论ABO血型不合可以进行allo-PBSCT,并且不影响干细胞移植的植活,虽然急性GVHD的发生率较血型相合组高,但其对复发率、死亡率及生存率无显著影响。