藏药湿生扁蕾提取物对人结肠癌SW480细胞增殖和周期的影响

目的：探讨藏药湿生扁蕾提取物（GPM）对人结肠癌细胞SW480增殖和周期的作用机制。方法：采用MTT比色法测定GPM对SW480细胞体外细胞毒活性,采用流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：GPM对结肠癌SW480细胞的增殖具有抑制作用,且这种抑制作用具有明显的量效关系;用GPM处理后,SW480细胞表现出明显的G1期周期阻滞。结论：GPM能够抑制人结肠癌细胞SW480细胞的生长,并可改变细胞周期分布。     

藏药湿生扁蕾及扁蕾的相关本草考证

就扁蕾和藏药湿生扁蕾两药从文献记载、植物形态、生境分布、化学成分等方面进行考释,以期今后更好地开发应用本种或本属植物资源。     

藏药湿生扁蕾的化学成分研究

 目的对湿生扁蕾全草进行化学成分研究。方法用柱色谱法分离化学成分,波谱法鉴定其结构。结果分离得到8 个化合物,分别为三十烷醇(Ⅰ),齐墩果酸(Ⅱ),熊果酸(Ⅲ),1-羟基齐墩果酸(Ⅳ),kaneric acid(V),木犀草素(Ⅵ),木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ),7,8-二羟基-3-甲氧基(?)酮-1-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅷ)。结论化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅶ,Ⅷ为首次从该植物中分离得到,其中化合物Ⅷ为首次从扁蕾属植物中分离得到,Ⅴ为首次从龙胆科植物中分离得到,Ⅳ为首次从天然产物中分离得到。     

藏药湿生扁蕾的抑菌作用研究

目的探讨湿生扁的体外抑菌作用。方法用K-B纸片扩散法和生长速率分别研究了湿生扁蕾对细菌和真菌的抑制作用。结果湿生扁蕾的提取物和各部位对供试菌都有一定的抑制作用,其中对辣椒疫霉的抑制作用最强;氯仿部位的抑菌作用则最好。结论湿生扁蕾在体外有明显的抑菌作用。     

藏药湿生扁蕾的化学成分研究Ⅰ

目的 :对湿生扁蕾全草进行化学成分研究。方法 :用常压硅胶柱和薄层色谱法分离 ,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果 :分离得到了 6个化合物 ,鉴定为 1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮 (Ⅰ ) ,1-羟基-3,7,8-三甲氧基酮 (Ⅱ ) ,1,8-二羟基-3,7-二甲氧基酮 (Ⅲ ) ,1-羟基-3,7-二甲氧基酮 (Ⅳ ) ,β-谷甾醇 (Ⅴ ) ,胡萝卜苷(Ⅵ )。结论 :化合物Ⅲ～Ⅵ为首次从该植物中分离得到。     

藏药湿生扁蕾提取物的止泻作用及其急性毒性研究

目的 研究湿生扁蕾提取物(GTP)的止泻作用及其急性毒性,为湿生扁蕾的开发利用提供理论依据.方法 采用番泻叶诱导的小鼠腹泻模型,以腹泻潜伏期和湿便总数为指标评价GTP的止泻作用;用Bliss法测定小鼠灌胃GTP的半数致死量(LD50).结果 GTP各剂量均有止泻作用;GTP的半数致死量为127.4g/kg.结论 GTP对番泻叶所致的小鼠腹泻有明显的对抗作用,表现在腹泻潜伏期延长和在相同时间内累积腹泻次数减少,且具有剂量依赖性;小鼠灌胃GTP的LD50 95％可信限为(116.6～139.4)g/kg,其急性毒性较低.     

湿生扁蕾药理作用研究进展

湿生扁蕾具有悠久的民族用药历史,临床主要用于消化系统疾病。近年来,关于湿生扁蕾在化学组分、药理药效方面的研究越来越多,且临床在抗肠纤维化中疗效确切,但未有其有效成分在肺纤维化方面的研究。通过查阅文献,整理湿生扁蕾从活性成分、药理药效、民间用药等方面的研究并展开综述,为其在肺纤维化的防治方面提供先导。     

DADS对人结肠癌SW480细胞凋亡的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（diallyl disulfide,DADS）诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用。方法：采用MTT、细胞计数法,观察不同浓度和作用时间DADS对SW480细胞的生长抑制作用;施用流式细胞术检测不同浓度DADS对SW480细胞的凋亡率。结果：MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞生长增殖,呈浓度和时间依赖性,细胞生长增殖速度明显减慢。细胞计数表明,当DADS浓度增加时,SW480细胞群体倍增时间延长,与对照组比较,差异有显著性意义（P〈0．05）。流式细胞仪分析显示,随着DADS处理浓度增加,使SW480细胞凋亡率逐渐增高,差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：DADS具有诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用。     

基于Bcl-2/Bax信号通路探讨湿生扁蕾乙酸乙酯提取物治疗溃疡性结肠炎作用机制

目目的的：探讨藏族医药湿生扁蕾乙酸乙酯提取物通过B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白（Bax）介导的凋亡通路防治复发型大鼠大肠湿热型溃疡性结肠炎（UC）的作用机制。方法：采用“病证结合”法构建复发型大鼠大肠湿热UC模型,将70只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、湿生扁蕾乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组（150、75、37.5 mg·kg-1）及美沙拉嗪组（135 mg·kg-1）,连续灌胃给药14 d,记录大鼠一般状态,观察大鼠结肠长度及肠黏膜损伤情况,测定结肠湿质量指数,计算肝脏、脾脏、胸腺脏器系数。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平,苏木素-伊红（HE）染色观察结肠病理变化,原位末端标记法（TUNEL）检测结肠上皮细胞的凋亡情况,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织中Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、闭锁连接蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白3(Claudin3)、闭合蛋白（Occludin）的表达,...     

藏药湿生扁蕾提取物治疗小鼠溃疡性结肠炎的研究

目的:观察藏药湿生扁蕾提取物(GTP)对小鼠实验性溃疡性结肠炎的治疗作用。方法:用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠制作小鼠实验性溃疡性结肠炎(UC)模型,小鼠ig给予GTP(1.07,2.14,4.28 g.kg-1),连续14 d,观察对小鼠体质量变化、腹泻、结肠黏膜组织形态学及脾脏指数的影响。结果:湿生扁蕾提取物可不同程度地改善由TNBS的乙醇溶液所致UC小鼠体质量下降及腹泻症状,显著降低UC小鼠大体形态学损伤的肠黏膜粘连及其溃疡分值,明显抑制UC小鼠脾脏肿大。结论:湿生扁蕾提取物对小鼠溃疡性结肠炎有较好的改善作用,能减轻结肠局部的病理性损伤。     

皂角刺含药血清诱导直肠癌细胞SW-480凋亡 及其对Bcl-2/Bax mRNA表达的影响

目的: 采用血清药理学方法探讨皂角刺含药血清诱导肠癌细胞凋亡的作用机制。方法: 制备皂角刺药液,50只健康SD大鼠分为皂角刺高中低剂量组(每1 mL分别含有生药2 000,1 000, 500 mg),环磷酰胺阳性对照组(50 mg·kg^-1)和生理盐水空白对照组5个组,按20 mL·kg^-1大鼠体质量给药,以制备含药血清。取含药血清培养液在体外作用于SW-480细胞(密度为1×10⁶/mL),分别在24, 48, 72 h后,采用MTT法检测含药血清对SW-480增殖的影响;加入药物血清培养液处理细胞24 h后,采用流式细胞仪检测SW-480凋亡率,RT-PCR检测各组含药血清对细胞B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)/Bel-2相关x蛋白(Bax)基因表达的影响。结果: 与空白对照组比较,皂角刺含药血清培养液作用细胞的吸光度(A)在20,40,60 h均明显低于空白组(0.370±0.005)%,(0.624±008)%,(1.078±0.038)%( P<0.01);皂角刺高、中、低剂量含药血清培养液诱导SW-480凋亡依次为(37.386±0.163)%,(35.834±0.092 3)%,(27.572±1.193)%显著高于空白对照(5.036±0.378)%(P<0.01);皂角刺含药血清培养液对SW-480细胞的Bcl-2表达(0.258±0.037, 0.442±0.024和0.652±0.072)明显低于空白对照组(0.936±0.047)(P<0.01),随灌胃给药的药物剂量增加Bcl-2表达而增加,而Bax表达(1.946±0.017,1.810±0.023和1.810±0.023)明显高于空白对照组(1.260±0.029)(P<0.01), Bax表达反而减少。结论: 皂角刺含药血清对能抑制SW-480生长和诱导其凋亡,Bcl-2 mRNA基因表达减少与Bax mRNA基因表达增多可能是皂角刺诱导肠癌细胞凋亡的机制之一。     

中药复方脏毒清体外诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的影响

目的:探讨中药复方脏毒清对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用及机制。方法:体外培养人结肠癌细胞株SW480,用不同质量浓度的脏毒清(0.05,0.10,0.15,0.20,0.25 g·m L-1)进行干预12,24,36,48 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率。用不同质量浓度脏毒清(0.10,0.15,0.20 g·m L-1)作用SW480细胞24 h后,另设空白组,采用用荧光染色技术和流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法测定半胱天冬酶-3(Caspase-3),Caspase-9的酶活性,Western blot技术检测凋亡蛋白Bax,Bcl-2蛋白的表达情况。结果:MTT结果显示脏毒清对其有明显的增殖抑制作用,并呈现时间和剂量依赖性;与空白组比较,脏毒清0.10,0.15,0.20 g·m L-1组能明显诱导SW480细胞凋亡,Caspase-3及Caspase-9酶活性明显升高,促凋亡蛋白Bax表达明显升高,抗凋亡蛋白Bal-2表达明显降低,均具有统计学意义(P0.01)。结论:脏毒清具有促进人结肠癌SW480细胞凋亡的作用,并通过线粒体凋亡途径发挥作用。     

天花粉蛋白对卵巢癌HO8910细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表达的影响

目的:探讨天花粉蛋白(TCS)对卵巢癌细胞株HO8910增殖效应并探讨其机制。方法:采用MTT法检测不同浓度(20、40、80μmol/L)对细胞HO8910增殖的影响;通过流式细胞仪观察细胞(20μmol/L)凋亡过程中细胞周期的变化;Western Blot检测不同浓度(20、40、80μmol/L)72hTCS对HO8910凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果:随着TCS浓度的升高,作用时间的延长,TCS对HO8910生长抑制率逐渐增高(P<0.05),呈一定的时间,剂量依赖性。流式细胞仪检测随着天花粉蛋白浓度的增加,Bax基因的表达增加而Bcl-2的表达减少。结论:TCS对卵巢癌细胞HO8910细胞增殖抑制作用,该作用可能与其下调Bcl-2及上调Bax蛋白表达有关。     

巴豆生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bax,Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究巴豆生物碱(croton seed alkaloid,CA)对人肝癌SMMC-7721细胞的诱导凋亡作用并探讨其对凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响。方法:不同浓度CA分别处理SMMC-7721细胞24～48 h后,MTT法检测细胞的生长活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的表达。结果:10～200 mg.L-1 CA均能抑制SMMC-7721细胞增殖(P<0.05),其抑制率与作用时间及浓度相关;CA作用SMMC-7721细胞24 h后,对照组凋亡率为(0.26±0.14)%,10,50,100,200 mg.L-1 CA组细胞凋亡率分别为(5.85±0.47)%,(17.70±1.23)%,(33.25±2.08)%,(49.52±1.85)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果提示经CA作用24 h后,随着药物浓度的增加,Bax的表达逐渐增加,而Bcl-2的表达逐渐减少。结论:CA能抑制SMMC-7721细胞的生长并促进其凋亡,其发生与Bcl-2蛋白的减少和Bax蛋白表达增多有关。     

苦参碱抑制Akt信号通路诱导结肠癌SW480细胞凋亡

目的:研究苦参碱对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用及其可能的分子机制。方法:噻唑蓝比色法(MTT)测定苦参碱对SW480细胞株增殖的影响;Hoechst33258染色检测苦参碱对SW480细胞凋亡的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测苦参碱对SW480细胞中总蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的干预作用。结果:苦参碱(0.25,0.5,1.0,1.5,2.0 g·L~(-1))能浓度和时间依赖性地抑制SW480细胞增殖。作用24,48,72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为1.72,1.08,0.67 g·L~(-1),Hochest33258染色和流式细胞术结果显示苦参碱能显著诱导细胞凋亡(P0.01),随着药物质量浓度的提高,细胞凋亡率逐渐上升。Western blot检测显示,SW480细胞加入苦参碱后,胞内总Akt的含量无显著变化,但p-Akt的生成被显著抑制,凋亡抑制性蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增高(P0.05)。结论:苦参碱能够诱导SW480细胞凋亡,该药理作用可能与苦参碱对Akt信号通路的抑制有关。     

三氧化砷对大鼠生精细胞凋亡及其相关基因表达的影响

目的:观察不同剂量的染砷(As2O3)大鼠生精细胞凋亡及其相关基因表达的影响.方法:40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375 mg/kg、0.75 mg/kg、1.5 mg/kg 3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药16周,采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡,免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2/Bax的表达.结果:①与对照组相比,中剂量组(0.75 mg/kg)和高剂量组(1.5 mg/kg)生精细胞凋亡指数(AI)显著升高(P＜0.01).生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低(P＜0.01),Bpax表达明显升高(P＜0.01);②每日精子生成量与生精细胞凋亡呈负相关(r=-0.563,P＜0.01);③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关(r=-0.825.P＜0.01),与Bax表达呈正相关(r=0.710,P＜0.01),结论:一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的袁达,诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少,产生雄性生殖毒性.     

清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎淋巴细胞凋亡调控蛋白Bcl-2及Bax表达的影响

目的:探讨清肠栓治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:SD大鼠48只随机分为正常组、模型组(空白组)、西药组(SASP组)、中药组(清肠栓组)共4组,正常组6只,其余每组14只。用5%2,4,6三硝基苯璜酸100mg.kg-1灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型,第3天开始,除正常组外,各组分别给予生理盐水、柳氮磺胺吡啶、清肠栓处理,至7天后处死动物。运用电镜、TUNEL染色法、Bcl-2及Bax蛋白免疫组化染色,分别检测溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果:与各对照组相比,模型组结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡减慢;其结肠黏膜固有层淋巴细胞上Bcl-2的表达率增加,而Bax的表达率下降(P<0.01)。结论:清肠栓可能通过调节Bcl-2及Bax二者之间的比例变化,诱导淋巴细胞凋亡,发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。     

益气强心饮对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达影响的实验研究

[目的]本实验旨在通过动物实验观测中药益气强心饮对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达的影响。[方法]采用腹主动脉缩窄法结合皮质激素造模法建立慢性心衰阳虚水泛证大鼠模型,随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、假手术组,用药8周后,观察各组大鼠的心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达。[结果]益气强心饮能明显下调慢性心衰大鼠心肌组织Bax基因蛋白表达、上调Bcl-2基因蛋白表达,疗效等同西药对照组。[结论]益气强心饮可调控慢性心衰大鼠的心肌细胞凋亡,具有治疗及延缓心衰发展等作用。     

苦参碱对HT29人结肠癌细胞凋亡及Bax和BcL-2蛋白表达的影响

目的 研究苦参碱对人结肠癌HT29细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.方法 取HT29人结肠癌细胞体外培养,加苦参碱处理24～48 h.采用MTT法检测细胞增殖,使用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,采用Western Blot法检测Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 在2～16 mg/mL苦参碱作用下,HT29细胞增殖被明显抑制,且呈剂量和时间依赖性（P＜ 0.05或P＜0.01）;给予4、8和16 mg/mL苦参碱作用HT29细胞24 h后,细胞凋亡率分别为（14.84±2.35）％、（37.80±2.49）％和（54.10±1.60）％,均明显高于对照组（4.36±0.23）％（P＜0.05）;经苦参碱作用24 h后,细胞Bax蛋白表达增加,而BcL-2表达减少,呈剂量依赖性.结论 苦参碱能抑制HT29细胞增殖,并促进其凋亡,其机制可能与抑制BcL-2和促进Bax蛋白表达有关.