干姜醇提物的毒性研究

小鼠灌服干姜醇提物的ＬＤ５为１０８．９ｇ／ｋｇ;大鼠长毒试验结果表明,干姜醇提物中,小剂量１８ｇ／ｋｇ、１０ｇ／ｋｇ灌服２个月,对大鼠体重增加,血液学,血液生化学指标,各脏器病理学检查均无异常,因此干姜醇提物１８ｇ／ｋｇ、１０ｇ／ｋｇ是安全剂量。     

灯台叶醇提物体外抗肿瘤作用研究

目的研究灯台叶醇提物对体外肿瘤细胞增殖和凋亡的影响,以及对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用。方法采用MTT法检测灯台叶醇提物对体外培养肿瘤细胞(人卵巢癌细胞C200、人乳腺癌细胞MNK-7、人肝癌细胞SNU-398)的抗肿瘤作用;以PI/Annexin-V染色检测灯台叶醇提物对人乳腺癌细胞MNK-7凋亡的影响;以鸡胚尿囊膜血管生成(CAM)实验,研究灯台叶醇提物对新生血管生成的抑制作用。结果灯台叶醇提物在0.1～2.0 mg/mL对各肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用,2.0 mg/mL灯台叶醇提物对人乳腺癌细胞增殖抑制率达到83.6%;2.0 mg/mL灯台叶醇提物作用后人乳腺癌细胞凋亡率达到62.5%;灯台叶醇提物在1～1000μg/mL对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用,给药鸡胚的新生血管数减少,其中10μg/mL抑制率最高,一级血管抑制率为52.1%,二级血管抑制率为48.3%。结论在实验给药浓度下,灯台叶醇提物对受试肿瘤细胞的增殖具有较强抑制作用,对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用。     

冬凌草醇提物腹腔注射给药急性毒性试验

目的:研究冬凌草醇提物单次腹腔注射给药的急性毒性。方法:按Bliss法设计试验,对小鼠进行单次腹腔注射,观察14 d内小鼠的毒性反应和死亡情况,以小鼠急性死亡率为指标,测定冬凌草醇提物对小鼠半数致死量(LD50)和LD50的95%的可信限。结果:冬凌草醇提物单次腹腔注射给药的LD50为148.71μg/g,LD50的95%的可信限为130.56~169.47μg/g;死亡小鼠心、肝、肾、肺、脑、脾、胸腺等重要器官无明显异常发现,部分动物十二指肠充血。结论:冬凌草醇提物具有一定的毒性。     

欧牛至挥发油、醇提物和水提物对醋酸铅致小鼠毒性的抑制作用

铅中毒时伴有多器官脂质过氧化明显增加、内源性抗氧化剂水平明显降低、部分脏器功能异常、遗传毒性和免疫抑制等。作者通过血清和尿生化分析、肝和肾组织病理学观察及遗传毒性分析等，研究欧牛至Origanum majorana L．不同提取物对醋酸铅所致小鼠肝一肾毒性和遗传毒性的作用。     

壁虎醇提物体外诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡及机制研究

目的:研究壁虎醇提物(GAE)体外诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡作用及其可能机制,为激素非依赖性前列腺癌的治疗提供理论依据。方法:以前列腺癌PC-3细胞为研究对象,MTT法检测3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L~(-1)GAE作用细胞24,48,72 h后对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用;3.5,4.0,5.0 g·L~(-1)的GAE作用48 h后,另设空白组,Hoeehst33342荧光染色法,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,SP免疫组化法检测细胞内半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)和Fas的表达情况并做统计学处理。结果:3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L~(-1)GAE作用细胞24,48,72 h后能显著抑制PC-3细胞的生长且呈剂量和时间依赖性;与空白组比较,3.5,4.0,5.0 g·L~(-1)的GAE作用48 h后Hoeehst33342荧光染色发现部分PC-3细胞发生典型的凋亡形态学改变;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测显示3.5,4.0,5.0 g·L~(-1)的GAE作用48 h后,早期凋亡细胞分别占6.51%,12.48%和22.81%,且免疫组化显示细胞内蛋白Caspase-3和Fas的表达均上调且呈浓度依赖性(P0.05)。结论:GAE能够诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡,其作用机制可能与死亡受体介导的信号通路有关。     

蛹虫草水提物体外促进小鼠骨髓诱导的树突状细胞的成熟作用

蛹虫草Cordycepsmilitaris长期用于肿瘤病人,已证明具有免疫调节作用和抗肿瘤活性,但其作用机制尚不清楚,作者研究了蛹虫草水提物(WE)体外促进小鼠骨髓(BM)诱导的树突状细胞(DC)成熟作用。小鼠BM细胞在添加GM-CSF和IL-4各20ng/mL的RPMI培养基中培养7d,在不同浓度的WE中保存24h,     

茵陈醇提物抗游离脂肪酸脂对体外培养HepG2细胞的毒性作用及机制研究

目的：研究中药茵陈醇提物对游离脂肪酸刺激HepG2细胞所致肝脂毒性的抑制作用及机制。方法：制备大鼠的正常血清和药物血清,在经毒性试验确定无药物毒性浓度的前提下,分设正常组、模型组和茵陈醇提物组(10%,1%,0.1% 3个剂量),以相应浓度的正常血清和药物血清培养HepG2细胞,同时添加长链游离脂肪酸(FFA)刺激HepG2细胞24 h。观察：①细胞上清肿瘤坏死因子(TNF-α)含量(ELISA法);②细胞内甘油三酯(TG)含量、细胞脂肪油红O染色;③细胞内磷酸化κB抑制蛋白(P-IκB)、组织蛋白酶B(ctsb)、凋亡抑制基因相关X蛋白(Bax)蛋白表达(Western Blotting法);④细胞TNF-α,ctsb和Bax基因表达(real-time PCR);⑤细胞内ctsb的表达和分布(免疫荧光法)。结果：模型组细胞内TG及上清TNF-α含量显著升高,分别达(590±186) mg·g^-1、(77±11) pg·mgprot^-1,细胞内ctsb、P-IκB的蛋白表达以及ctsb、TNF-α的mRNA表达显著增强;而10%茵陈醇提物组细胞内TG和上清TNF-α含量较模型组显著降低,仅为(335±54) mg·g^-1、(55±7) pg·mgprot^-1,且显著抑制细胞内ctsb、P-IκB的蛋白表达以及ctsb、TNF-α的mRNA表达。结论：茵陈醇提物对FFA诱导的HepG2细胞脂肪变性、TNF-α分泌有显著的抑制作用,其作用与抑制ctsb等基因和蛋白表达有关。     

茵陈醇提物抗游离脂肪酸对体外培养HepG2细胞脂毒性的作用及机制研究

目的:研究茵陈醇提物对游离脂肪酸刺激HepG2细胞所致肝脂毒性的抑制作用及机制.方法:制备大鼠的正常血清和药物血清,在经毒性试验确定无药物毒性的前提下,分设正常组、模型组和茵陈醇提物组(10%,1%,0.1%3个剂量),以相应浓度的正常血清和药物血清培养HepC2细胞,同时添加长链游离脂肪酸(FFA)刺激HepG2细胞24 h.观察:①细胞上清肿瘤坏死因子(TNF-α)含量(ELISA法);②细胞内甘油三酯(TG)含量、细胞脂肪油红O染色;③细胞内磷酸化κB抑制蛋白(P-IκB)、组织蛋白酶B(ctsb)、凋亡抑制基因相关X蛋白(Bax蛋白表达(westem Blotting法);④细胞TNF-α,ctsb和Bax基因表达(real-time PCR);⑤细胞内ctsb,的表达和分布(免疫荧光法).结果:模型组细胞内TG及上清TNF-α含量显著升高,分别达(590±186)mg·g~(-1),(77±11)pg·mg~(-1),细胞内ctsb,P-IκB的蛋白表达以及ctsb,TNF-α的mRNA表达显著增强;而10%茵陈醇提物组细胞内TG和上清TNF-α含量较模型组显著降低,仅为(335±54)mg·g~(-1),(55±7)pg·mg~(-1),且显著抑制细胞内ctsb,P-IκB的蛋白表达以及ctsb,TNF-α的mRNA表达.结论:茵陈醇提物对FFA诱导的HepG2细胞脂肪变性,TNF-α分泌有显著的抑制作用,其作用与抑制ctsb等基因和蛋白表达有关.     

5种中药醇提物体外抑制2种革兰阳性菌的活性

目的:研究丹参、丁香、厚朴、金银花、大黄这5种中药醇提物对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活力,进而通过正交试验考察不同配比对这2种革兰阳性菌的抑菌作用.方法:丹参、丁香、厚朴、金银花、大黄醇提物浓缩至0.2g·mL-1,通过测量抑菌圈直径考察不同中药醇提物与醇提物配伍后对这2种细菌的抑菌效果.结果:痤疮丙酸杆菌对丹参醇提物为高度敏感,抑菌圈直径为(23.27±3.68) mm,对丁香、厚朴醇提物为中度敏感,为(18.82±2.27),(17.78±1.88) mm;金黄色葡萄球菌对丁香和厚朴醇提物为高度敏感,抑菌圈直径分别为(21.94±0.74),(19.52士1.09)mm,对大黄和丹参为中度敏感,抑菌圈直径为(14.43±2.24),(16.01±0.88) mm.丹参、厚朴、丁香醇提物最佳复配比例为1∶1∶1,其对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为(20.07±1.26),(20.57±0.38) mm.结论:丹参、厚朴、丁香的醇提物对这2种菌的抑菌活力均为高度敏感,抑菌作用最佳.丹参、厚朴、丁香的醇提物对2种菌抑菌活性的最佳配比为1∶1∶1.     

桑叶水提物及醇提物抗菌作用的研究

目的：研究桑叶水提物及不同浓度醇提物的体外抑菌和杀菌作用。方法：测定桑叶水提物及50％，70％，85％，95％醇提物的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果：桑叶水提物及醇提物均对金黄色葡萄球菌有较明显抑菌及杀菌作用，对变形杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌也有一定的抑菌或杀菌效果．95%醇提物对绿脓杆菌和大肠杆菌未显示明显抗菌作用。结论：桑叶具有一定抗菌保健作用，在功能性食品、美容保健用品等的制备方面具有开发及应用价值。     

茜草醇提物对大鼠肝、肾及结肠的毒性

目的:观察茜草70%乙醇提取物长期给药对大鼠肝、肾及结肠毒性的影响,为临床合理用药提供一定的依据。方法:在SPF级实验条件下,将48只Wistar大鼠随机分为空白组和茜草高、中、低剂量(30,10,5 g·kg~(-1),分别相当于临床人拟定剂量的36,12,6倍)组,每组12只,雌雄各半。空白组给予等体积蒸馏水,连续灌胃给药60 d。给药期间,观察记录大鼠的一般情况(行为活动,精神状态,饮食量,毛色光泽,大小便颜色);停止给药后,观察动物的血液生化指标、脏器系数及病理组织学变化等。结果:与空白组比较,茜草各剂量组大鼠肝,肾及脾脏器指数明显增大(P0.05);丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平显著升高(P0.01);雄性大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)和胱抑素C(Cys-C)明显升高(P0.05,P0.01),雌性大鼠仅茜草高剂量组β2-MG显著升高(P0.01),胱抑素C(Cys-C)与空白组比较无统计学差异。茜草各剂量组尿素氮(BUN)与空白组比较无统计学差异,茜草各组肝、肾组织形态与空白组比较没有明显的病理改变。茜草各剂量组雌雄大鼠的结肠组织形态、结肠黑色素染色和结肠上皮细胞凋亡率与空白组比较均无明显变化。结论:茜草70%乙醇提取物长期给药剂量≥5 g·kg~(-1),具有轻微的肝、肾毒性;对结肠无毒性作用,不能导致大鼠结肠黑变病的发生。     

泽泻醇提物对大鼠肾毒性及其分子机制的探究实验

泽泻醇提物长期喂养大鼠,探究其对大鼠的肾毒性作用,并研究其肾毒性的可能的分子机制。60只雌性大鼠随机分为空白组,雷公藤对照组,庆大霉素对照组,泽泻高、中、低剂量组,连续给药6个月。利用高效液相色谱仪(HPLC)对泽泻提取物成分进行分析,同时采用HE染色检测肾脏病理变化,通过Western blot法、免疫组织化学和q-PCR法检测Kim-1,clusterin,LCN2,osteopontin,ceruloplasmin和TIMP1蛋白和m RNA水平。HPLC解析出泽泻醇提物中的8个成分(环氧泽泻烯,泽泻醇F,泽泻醇A,24-乙酰泽泻醇F,泽泻醇A-24-醋酸酯,泽泻醇B,23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C)。HE染色结果显示,高、中剂量的大鼠肾脏间质炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞水肿且形态发生变化。与空白组相比,雷公藤和庆大霉素对照组大鼠肾脏Kim-1,clusterin,LCN2,osteopontin和TIMP1蛋白和m RNA水平显著地提高,而ceruloplasmin蛋白和m RNA水平显著地降低;给予泽泻高、中剂量6个月后,大鼠肾脏Kim-1,clusterin,LCN2,osteopontin和TIMP1蛋白和m RNA水平也有显著地提高,而ceruloplasmin蛋白和m RNA水平显著地降低。长期大剂量服用泽泻醇提物可导致雌性大鼠产生肾毒性,其分子机制可能是通过调节Kim-1,ceruloplasmin,clusterin,LCN2,osteopontin和TIMP1等蛋白的表达来实现。     

核桃仁醇提物抑制癌细胞生长的实验研究

目的:观察核桃仁醇提物对骨肉瘤、乳腺癌、卵巢癌和肺癌细胞株生长的影响,研究核桃仁的抗癌作用。方法:用MTT法检测核桃仁醇提物对癌细胞生长抑制的剂量-效应和时间-效应关系。结果:核桃仁醇提物对培养的骨肉瘤、乳腺癌、卵巢癌和肺癌细胞生长具有不同程度的抑制作用,并呈剂量依赖关系;其中,对骨肉瘤的生长抑制最强,乳腺癌次之,肺癌最弱。显微镜下,用核桃仁醇提物处理的癌细胞与对照组细胞相比,数量明显减少,形态发生改变。对骨肉瘤、乳腺癌、卵巢癌和肺癌细胞在半数抑制浓度情况下,对癌细胞的生长抑制效果随时间增加而增强,呈时间-效应依赖关系;对各癌细胞生长抑制在48 h达到高峰,48 h后抑制作用较为缓和,其中在36 h内对骨肉瘤细胞抑制效果随时间增加最快,抑制增长速度依次为骨肉瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌细胞。结论:核桃仁醇提物对多个癌细胞株具有抑制其生长的作用,有作为新的抗癌药物开发研究的潜力。     

桑叶水提液的急性毒性和遗传毒性研究

目的初步评价桑叶水提液安全性。方法通过小鼠急性毒性试验、鼠伤寒沙门氏菌试验(Ames试验)、中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,考察桑叶水提液急性毒性和遗传毒性。结果桑叶水提液40 g/kg小鼠灌胃给药未出现死亡,体质量与正常对照组比较无明显差异(P>0.05)。经Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验、小鼠微核试验,桑叶水提液的结果均为阴性。结论本实验条件下,桑叶水提液的小鼠灌胃给药最大给药剂量为40 g/kg,且未表现出遗传毒性。     

诃子醇提物抗HBV的体外实施研究

目的:体外观察诃子抗HBV的作用。方法:以2.2.15细胞为靶细胞,实验共进行11天。采用酶联免疫吸附试验测定诃子对培养上清液HBsAg、HBeAg的抑制作用。结果:诃子醇提物浓度为6.25mg/ml地,对HBsAg、HBeAg抑制率分别为99.67％、71.40％。同一浓度下诃子对细胞的破坏率为30.65％。以HBsAg、HBeAg为指标,治疗指数分别为208.33、3.42。结论:在无毒浓度下,诃子醇提物在2.2.15细胞上有显著的体外抗HBV作用。     

诃子醇提物抗HBV的体外实验研究

目的：体外观察诃子抗HBV的作用。方法：以2．2．15细胞为靶细胞，实验共进行11天。采用酶联免疫吸附试验测定诃子对培养上清液HBsAg、HBeAg的抑制作用。结果：诃子醇提物浓度为6.25mg/ml地，对HBsAg、HBeAg抑制率分别为99．67％、71．40％。同一浓度下诃子对细胞的破坏率为30．65％。以HBsAg、HBeAg为指标，治疗指数分别为208．33、3．42。结论：在无毒浓度下，诃子醇提物在2．2．15细胞上有显著的体外抗HBV作用。     

金莲花醇提物体内抗病毒作用的实验研究

金莲花Trollius chinensis Bunge为毛茛科多年生草本植物，以花入药，有清热解毒、抗菌消炎作用。民间用以治疗扁桃体炎、急性中耳炎、急性结膜炎、急性淋巴管炎等。近代药理研究表明，金莲花对绿脓杆菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌等均有明显的抑制作用。本实验研究金莲花醇提物对流感病毒感染小鼠的保护作用，观察金莲花醇提物的体内抗病毒作用。     

仙茅醇提取物大鼠长期毒性试验研究

目的:研究仙茅乙醇提取物重复给药对大鼠所产生的毒性作用和靶器官,毒性损害的可逆性,剂量-反应(效应)关系,并探讨可能的毒性作用机制。方法:设仙茅醇提物120g生药/kg、60g生药/kg3、0g生药/kg和空白对照组(等容量蒸馏水),每日灌胃给药1次,连续给药30天、90天以及停药恢复性观察15天。观察一般症状和体征、血液细胞学、血液生化学及肉眼、光镜和电镜病理学观察。结果:仙茅乙醇提取物灌胃给药30天后,未见明显异常;90天后1,20g/kg组血清BUN高于对照组(p<0.05)1,20、60、30g/kg组CREA高于对照组(p<0.01),1206、0g/kg组ALT高于对照组(p<0.05～0.01)。高、中、低剂量组雌、雄大鼠肝脏和肾脏器系数高于对照组(p<0.01),高、中剂量组雄性大鼠睾丸脏器指数高于对照组(p<0.05),中剂量组子宫脏器指数低于对照组(p<0.05)。光镜下仙茅醇提物大剂量组大鼠的主要脏器无明显改变,透射电镜下观察发现给药高剂量组大鼠肝、肾无明显改变,而雄性大鼠的睾丸及雌性大鼠的卵巢均呈现线粒体肿胀,空泡等病理改变。停药15天后观察,上述各项指标与对照组比较无显著差异。结论:仙茅乙醇提取物120g/kg长期反复给药,可能引起血清BUN、CREA及ALT升高,肝脏、肾脏、睾丸和卵巢系数增加,透射电镜可见睾丸和卵巢主要表现为线粒体肿胀,空泡变性等超微结构病理学改变。     

浙产山茱萸水醇提取物毒性、药效比较研究

目的:对浙产山茱萸水提物与醇提物的毒性和部分药理作用进行初步的比较研究,考察二者的毒效差异。方法:毒性试验采用小鼠急性毒性观察法;药效研究包括对小鼠阈下剂量戊巴比妥钠催眠作用的影响、对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响、对肾上腺素引起小鼠高血糖的影响及对四氧嘧啶致大鼠糖尿病模型的影响等。结果:水提物与醇提物同样59.26g/kg剂量一次灌胃给药致小鼠的死亡率分别为20%和50%(P<0.01);醇提物对小鼠阈下剂量戊巴比妥钠具有明显催眠作用;二者对二甲苯致小鼠耳肿胀具有抑制作用,作用强度无明显差异;两种提取物对肾上腺素引起的小鼠高血糖均有明显降低作用;二者均能降低四氧嘧啶致大鼠糖尿病模型的高血糖,并能提高该型大鼠的SOD、降低MDA。结论:浙产山茱萸水提物与醇提物的毒性具有显著差异,其药理活性也存在一定的差异。     

半枝莲醇提物抗肿瘤活性的研究

目的　研究中药半枝莲醇提物的抗肿瘤活性。方法　采用小鼠腋下接种肿瘤细胞法测定了半枝莲醇提物的抗肿瘤活性 ;采用MTT法测定了半枝莲醇提物对小鼠脾细胞的增殖活性。结果　半枝莲醇提物对移植性肿瘤 (肉瘤S180 和肝癌H2 2 )具有显著的抑制作用 ,而对小鼠脾细胞的增殖具有促进作用 ,并有较好的剂量依赖关系。结论　中药半枝莲有可能通过增强机体的免疫力来实现其抗肿瘤活性