三种藻胆蛋白对人乳腺癌Bcap-37细胞的光动力杀伤效果

从高等红藻坛紫菜中提取R-藻红蛋白(R-PE)、R-藻蓝蛋白(R-PC),从低等蓝藻钝顶螺旋藻中提取C-藻蓝蛋白(C-PC).研究10、25、50和100 μg/mL的R-PE、R-PC和C-PC介导的光动力效应对乳腺癌细胞Bcap-37的生存率的影响,MTT法测定结果,探讨这三种藻胆蛋白对癌细胞的光动力杀伤效应与其光敏性质差异的相关性.三种藻胆蛋白的光动力作用对Bcap-37细胞具有显著杀伤并显示出剂量效应,质量浓度在25 μg/mL以上时,杀伤效果依次为:R-PE＞R-PC＞C-PC;仅用激光处理(497 nm,632.8 nm),Bcap-37细胞的生存率达到88.6%和91.3%;仅用藻胆蛋白处理,培养24 h后,R-PE＜25 μg/mL,R-PC、C-PC＜50 μg/mL时,对Bcap-37细胞具有一定的促进生长作用,R-PE≥25 μg/mL,R-PC、C-PC≥50 μg/mL时,抑制细胞生长.     

层理鞭枝藻藻蓝蛋白β亚基的体内重组

为研究藻蓝蛋白β亚基的生物合成途径，通过构建相容的3种重组质粒pET—cpcB（C155Ⅰ）、pCDFDuet—cpeS和pACYCDuet—hol—pcyA，将裂合酶基因cpeS、血红素氧化酶基因hol、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和藻监蛋白β脱辅基蛋白基因cpcB（C155Ⅰ）共同转入大肠杆菌．通过色素蛋白锌电泳和光谱检测，结果表明产生了有生物活性的CpcB（C155Ⅰ）-PCB．而在裂合酶基因cpeS不转入大肠杆菌的情况下，大肠杆菌内只有7．6％的CpcB（C155Ⅰ）-PCB产生．实现了大肠杆菌内藻蓝蛋白β亚基84位半胱氨酸残基与PCB连接，为进一步在大肠杆菌内合成天然的藻蓝蛋白奠定了基础．     

蛋白A-藻蓝蛋白β亚基融合蛋白的性质及应用

PCR扩增金黄色葡萄球菌蛋白A基因spa,通过酶切位点的转换构建重组质粒pET-spa,进一步成功构建能表达融合蛋白SPA-CpcB的质粒pET-spa-cpcB.将重组质粒pET-spa-cpcB与在大肠杆菌内生成藻胆色素必需的质粒,以及藻胆蛋白裂合酶质粒,共同转入大肠杆菌BL21(DE3)内,进行体内重组,生物合成融合色素蛋白.蛋白质电泳以及锌染色结果表明,体内重组分别获得了融合色素蛋白SPA-CpcB-PCB或SPA-CpcB-PEB.吸收光谱与荧光光谱结果表明,融合色素蛋白SPA-CpcB-PCB或SPA-CpcB-PEB具有与CpcB-PCB或CpcB-PEB相同的光谱特征.将SPA-CpcB-PEB与生物素标记的兔抗体进行荧光免疫反应,通过多功能微孔板荧光检测仪检测,结果表明融合色素蛋白SPA-CpcB-PEB具有SPA能与多种哺乳动物血清中的IgG的Fc段结合的特点.利用SPA-CpcB-PEB来检测包被于聚苯乙烯微量反应板的基因编码为all5292的蛋白,证实了该融合色素蛋白可用于免疫检测.     

层理鞭枝藻的藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白α-亚基及其色素肽的光化学与光谱性质

用紫外可见吸收和圆二色光谱研究了层理鞭枝藻的藻蓝蛋白α－亚基色素肽和藻红蓝蛋白α－亚基色素肽的可逆光化学，这些研究表明藻蓝蛋白α－亚基色素肽和藻红蓝蛋白α－亚基色素肽分别相应于藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白的辅基色素结构域．藻蓝蛋白α－亚基色素肽的光谱性质和可逆光化学与藻蓝蛋白α－亚基的相应性质很相似，藻红蓝蛋白α－亚基色素肽的光谱性质和可逆光化学与藻红蓝蛋白α－亚基的相应性质相似，不过藻红蓝蛋白α－亚基色素肽还具有一种新的可逆光化学性质，本文中称为类型Ⅲ可逆光化学，藻红蓝蛋白α－亚基在１ｍｏｌ／Ｌ硫氰化钾和４ｍｏｌ／Ｌ尿素中也具有该类型Ⅲ可逆光化学．     

微波对蚕豆根尖细胞的遗传损伤

以蚕豆(Vcia faba L.)根尖为实验材料,研究微波辐射对蚕豆根尖细胞的损伤效应.采用蚕豆根尖微核试验和染色体畸变试验方法,以不同处理时间(0～30s)的微波辐射为诱变剂,测定蚕豆根尖细胞的微核率、有丝分裂指数及染色体畸变率等指标.结果表明:6个时间微波处理组的微核率、染色体畸变率均明显高于阴性对照组(P<0.001).而6个时间微波处理组的有丝分裂指数却明显低于阴性对照组(P<0.001).在本实验处理时间范围内,3个指标均具有一定的时间效应.即随着微波处理时间的延长,微核率及染色体畸变率逐渐升高,而有丝分裂指数则逐渐降低.结论是在该实验微波剂量及处理时间下,微波对蚕豆根尖细胞具有明显的损伤效应.