生存素和端粒酶逆转录酶在皮肤肿瘤中的表达

目的 研究皮肤肿瘤凋亡抑制基因生存素与人端粒酶逆转录酶(hTERT)的表达及相互关系.方法 免疫组化SP法检测17例鳞状细胞癌(鳞癌)、21例基底细胞癌(基癌)、19例鲍恩病、25例脂溢性角化病和13例正常人皮肤组织中生存素表达水平;原位杂交法检测上述组织中hTERT mRNA的表达水平;分析皮肤肿瘤中生存素与hTERT mRNA表达的相关性.结果 ①在鳞癌、基癌、鲍恩病中生存素及hTERT mRNA表达的阳性率均较正常人皮肤中显著增加;②脂溢性角化病中生存素表达的阳性率与正常人皮肤组织中比较差异有统计学意义,但hTERT mRNA表达的阳性率与正常人皮肤组织中比较差异无统计学意义;③鳞癌、基癌、鲍恩病中生存素阳性率及hTERT mRNA阳性率之间均呈显著正相关,脂溢性角化病中两者阳性率之间无显著相关性.结论 生存素与皮肤肿瘤发病关系密切,在鳞癌、基癌、鲍恩病中生存素与hTERT mRNA的表达具有一定的相关性.     

尖锐湿疣和外阴鳞状细胞癌中hTERT mRNA和survivin的表达及其相互关系

目的:探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)及凋亡抑制基因生存素(survivin)在尖锐湿疣(CA)及外阴鳞状细胞癌(VSCC)组织中的表达及其临床意义。方法:SP免疫组化染色检测48例CA、31例VSCC及13例正常皮肤组织中survivin蛋白表达水平;原位杂交技术检测上述组织中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达水平。结果:CA组hTERT mRNA表达的阳性率与正常对照组比较差异无显著性,与VSCC组比较差异有显著性;CA组、VSCC组及正常对照组中survivin蛋白表达的阳性率差异均有显著性;VSCC组中hTERT mRNA表达与survivin蛋白表达的阳性率呈明显的正相关(P<0.05)。结论:survivin与CA及VSCC的发生发展密切相关;hTERT可作为鉴别良性和恶性肿瘤的辅助指标,但不能反映良性肿瘤的增殖情况;hTERT与survivin在VSCC中的表达具有一定的协同性。     

端粒酶逆转录酶在皮肤肿瘤原位表达水平的比较

目的　研究端粒酶在皮肤恶性肿瘤发病机制中的作用。方法　采用人端粒酶逆转录酶 (hTERT)cRNA探针与石蜡标本进行原位杂交的方法检测 3 0例皮肤基底细胞癌、15例皮肤鳞状细胞癌、19例脂溢性角化、14例正常皮肤中hTERTmRNA的表达水平 ,并进行比较。结果　hTERT阳性率基底细胞癌为 73 .3 5 %(2 2 /3 0 ) ,鳞状细胞癌为80 .0 0 %(12 /15 ) ,均明显高于脂溢性角化 3 6.84%(7/19)和正常皮肤 2 8.5 7%(4 /14 ) ,并具有统计学意义。结论　hTERT在恶性皮肤肿瘤中的阳性表达率明显高于良性肿瘤和正常皮肤 ,提示端粒酶在皮肤恶性肿瘤发病机制中起着重要作用。原位杂交检测hTERT表达水平的方法有可能成为鉴别皮肤良恶性肿瘤的辅助检查手段。     

miR-203及其下游靶基因p63、生存素在银屑病皮损中的表达北大核心CSCD

目的 检测寻常性银屑病皮损中miR-203及其下游靶基因p63、生存素的表达水平.方法 实时PCR法检测30例寻常性银屑病患者皮损及30例健康对照皮肤中miR-203、p63、生存素mRNA的表达水平,miR-203以U6为内参照,p63和生存素以GAPDH为内参照;Western印迹法检测靶基因p63、生存素蛋白表达水平,两组间比较采用t检验,寻常性银屑病皮损中miR-203与生存素、p63表达的相关性采用Pearson相关分析.结果 与健康对照皮肤相比,寻常性银屑病皮损中miR-203 mRNA表达量为对照组的（0.41±0.11）倍,表达明显下调（t=3.16,P＜0.05）;其靶基因p63、生存素mRNA表达量分别为对照组的（4.79±0.63）和（3.43±0.46）倍,表达水平明显上调（t值分别为4.72、4.35,均P＜0.05）;靶基因p63、生存素蛋白表达量分别为对照组的（2.40±0.23）,（3.49±0.14）倍,表达水平也明显上调（t值分别为3.87、4.36,均P＜0.05）.寻常性银屑病皮损中miR-203mRNA与生存素mRNA呈负相关（r=-0.36,P＜0.05）,与p63 mRNA呈负相关（r=-0.43,P＜0.05）.结论 miR-203及其下游靶基因p63、生存素可能参与了银屑病的发病过程.     

HPV16E7靶向小干扰RNA对SiHa细胞增殖凋亡及6种抑癌基因的影响

目的：探讨HPV16E7在SiHa细胞株中对抑癌基因（MT1G、NMES1、RRAD、SFRP1、SPARC、TFPI2）的表达及细胞增殖能力和凋亡水平的影响。方法 SiHa细胞转染E7SiRNA 48 h后,qPCR检测E7及6种抑癌基因mRNA水平变化,CCK?8检测细胞增殖能力改变,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果 SiHa细胞转染后48 h,qPCR结果显示实验组E7 mRNA显著降低（0.25±0.036,P<0.05）;6种抑癌基因的mRNA水平均显著增加（MT1G 1.403±0.190、NMES11.720±0.060、RRAD 1.390±0.160、SFRP11.493±0.120、SPARC 2.157±0.144、TFPI22.060±0.122,P<0.05）。细胞增殖结果显示,与阴性对照组及空白组比较,实验组细胞增殖能力显著降低（0.554±0.130,P<0.05）,阴性对照组和空白组之间差异无统计学意义（P>0.05）。细胞凋亡结果提示,实验组细胞凋亡细胞频率为9.222%较阴性对照组（0.246%）及空白组（0.123%）明显增加（P<0.05）,空白组与阴性对照组差异无统计学意义（P>0.05）。结论 HPV16导致细胞恶性转化过程中,E7可能通过抑制（MT1G、NMES1、RRAD、SFRP1、SPAR、TFPI2）6种抑癌基因的表达参与作用。     

神经生长因子及受体在非黑素性皮肤癌中的表达

目的：探讨神经生长因子（NGF）及受体P75在非黑素性皮肤癌中的表达情况。方法：用原位杂交的方法对15例鳞状细胞癌（SCC）、12例基底细胞癌（BCC）、13例正常上皮（NS）中NGF及受体P75 mRNA进行了检测。结果：与正常皮肤组织比较,NGF mRNA在基底细胞癌组织中的表达明显增高（t=30.06,P〈0.01）,在鳞状细胞癌组织中的表达明显下降（t=19.62,P〈0.01）,鳞状细胞癌组织与基底细胞癌组织相比差异有统计学意义（t=57.36,P〈0.01）。P75mRNA在皮肤正常组、基底细胞癌组、鳞状细胞癌组中的表达呈逐渐降低趋势,组与组之间两两比较差异均有统计学意义：鳞状细胞癌组与正常皮肤组（t=42.69,P〈0.01）,基底细胞癌组与正常皮肤组（t=30.37,P〈0.05）,鳞状细胞癌组与基底细胞癌组（t=18.49,P〈0.05）。结论：NGF及受体P75可能在非黑素性皮肤癌发生及浸润中起一定作用。     

孢子丝菌病患者皮损中Toll样受体2、4及髓样分化因子88的表达

【摘要】 目的 通过观察孢子丝菌病患者皮损中Toll样受体2、4（TLR2、TLR4）以及髓样分化因子88（MyD88）的表达情况,探讨其在孢子丝菌病免疫识别及免疫介导中的作用。 方法 选择孢子丝菌病患者19例及健康人对照12例,应用免疫组化法分别检测患者组皮损及对照组皮肤组织中TLR4及MyD88的表达情况,同时应用实时荧光定量PCR技术检测TLR2及MyD88 mRNA的表达情况。所有结果数据以■ ± s表示,采用SPSS17.0统计软件进行数据分析,两组间比较采用独立样本t检验,P ＜ 0.05认为差异有统计学意义。 结果 免疫组化分析：孢子丝菌病患者皮损中TLR4、MyD88的表达部位主要是除角质层外的表皮全层和真皮及皮下组织中的浆细胞和淋巴细胞。对照组皮肤几乎不表达TLR4,MyD88于真皮及皮下组织呈弱表达。孢子丝菌病组TLR4表达水平（63.767 ± 3.829）高于对照组（5.167 ± 3.246）,差异有统计学意义（t = 4.82,P ＜ 0.05）;MyD88表达水平（57.236 ± 4.744）亦高于对照组（10.588 ± 1.640）,差异有统计学意义（t = 3.30,P ＜ 0.05）。实时荧光定量PCR分析：孢子丝菌病患者皮损TLR2 mRNA和MyD88 mRNA的相对表达水平分别为1.974 ± 1.452和2.028 ± 2.061,均显著高于对照组（分别为1.430 ± 1.073和0.688 ± 0.422）,均P ＜ 0.05。 结论 孢子丝菌病发病可能与真菌通过Toll样受体途径作用于机体免疫系统有关。     

皮肤恶性黑素瘤凋亡相关基因Survivin Bax表达及其与端粒酶的关系

目的探讨凋亡相关基因Survivin,Bax及人端粒酶逆转录酶(hTERT)在皮肤恶性黑素瘤中的表达及其临床意义。方法SP免疫组化染色检测63例皮肤恶性黑素瘤和21例色素痣组织中Survivin,Bax蛋白水平;原位杂交技术检测上述组织中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA水平。结果①凋亡相关蛋白Survivin在皮肤恶性黑素瘤中的表达明显强于其在色素痣中的表达,Bax在二者中的表达无明显差异,hTERTmRNA表达与Survivin相似;②Survivin蛋白和hTERTmRNA表达均与恶性黑素瘤病理学类型、淋巴结转移、浸润深度及预后相关,Bax表达与之无相关;③hTERTmRNA在黑素瘤中的表达水平与Survivin呈高度正相关,与Bax表达无关,Survivin与Bax表达水平无明显相关性。结论皮肤恶性黑素瘤形成和发展与肿瘤细胞抗凋亡(Survivin)和促进增殖(hTERT)均密切相关;Survivin和hTERT对皮肤恶性黑素瘤的辅助诊断及预后评估具有重要的临床意义;Bax表达与皮肤恶性黑素瘤的发生发展无明显相关性。     

白癜风患者CLEC2B mRNA差异表达与临床相关性研究

【摘要】 目的 探讨CLEC2B（ C-type lectin domain family 2, member B）基因在白癜风发病中的作用。方法 实时荧光定量PCR方法检测白癜风患者皮损区及外周血中CLEC2B mRNA表达,比较不同临床类型、病期、病程CLEC2B mRNA的差异表达。结果 白癜风患者组皮损中,CLEC2B mRNA表达量高于健康对照组（两组表达量分别为1.21 ± 0.03,1.00）,差异有统计学意义（t = 4.432,P < 0.05）。白癜风患者与健康对照组外周血CLEC2B mRNA表达量比较,差异无统计学意义（两组表达量分别为1.02 ± 0.05,1.00;t = 1.435,P > 0.05）。寻常型白癜风皮损组中,CLEC2B mRNA表达量高于节段型白癜风组（1.21 ± 0.03,1.02 ± 0.01）,差异有统计学意义（t = 5.330,P < 0.05）。不同病程白癜风患者皮损中,CLEC2B mRNA表达量比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。进展期白癜风患者组皮损中CLEC2B mRNA表达量高于稳定期患者组（1.25 ± 0.05比1.08 ± 0.03）,差异有统计学意义（t = 3.046,P < 0.05）。结论 CLEC2B mRNA的差异表达可能参与白癜风的发病。 【关键词】 白癜风; CLEC2B mRNA; 基因表达     

寻常型银屑病中DUSP1和DUSP4的表达

目的：检测DUSP1和DUSP4在寻常型银屑病患者皮损的表达水平。方法：Real-time PCR和Western Blot分别检测18例寻常型银屑病皮肤组织和15名正常对照皮肤组织中DUSP1和DUSP4 mRNA及相关蛋白的表达情况。结果：银屑病组DUSP1 mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.0939±0.0048和0.5165±0.0254,低于正常对照组的0.2486±0.0060和1.2432±0.3260,差异有统计学意义（Ps＜0.05）。银屑病组DUSP4 mRNA和蛋白的相对表达量为0.3718±0.0370和0.8018±0.0770,与正常对照组比较（0.3645±0.0286和1.3677±0.2287）,差异无统计学意义（Ps＞0.05）。结论：DUSP1表达水平降低可能与寻常型银屑病发生发展有关。     

磷酸化Stat3和磷酸化Akt及磷酸化ERK1/2在表皮良恶性肿瘤中的表达

目的 探讨磷酸化细胞信号传导与转录活化因子3(p-Stat3)和磷酸化Akt(p-Akt)及磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)在表皮良恶性肿瘤中的表达.方法 采用免疫组化的方法检测脂溢性角化病,光线性角化病,鲍恩样丘疹病,基底细胞上皮瘤,鲍恩病,鳞状细胞癌中p-Stat3,p-Akt及p-ERK1/2的表达.结果 p-Stat3,p-Akt及p-ERK1/2阳性表达率在表皮恶性肿瘤中明显高于良性肿瘤(P均<0.05).p-Stat3和p-Akt的阳性表达率在表皮恶性肿瘤中从高到低依次为鳞状细胞癌>鲍恩病>基底细胞上皮瘤,而p-ERK1/2的阳性表达率无差异(P>0.05).在表皮恶性肿瘤中,p-Stat3和p-Akt的阳性表达呈显著正相关(P<0.05).而p-ERK1/2的阳性表达与p-Star3、p-Akt的阳性表达之间无相关性(P>0.05).结论 p-Stat3,p-AKT和p-ERK1/2参与表皮恶性肿瘤的发病.     

SGK1在日光性角化病、基底细胞癌及鳞状细胞癌中的表达

目的：检测SGK1在日光性角化病（AK）、基底细胞癌（BCC）及鳞状细胞癌（SCC）中的表达。方法：采用免疫组化SABC法检测SGK1在25例正常皮肤(NS)、25例AK、28例BCC、28例皮肤鳞状细胞癌标本中的表达。结果：NS、AK、BCC和SCC标本中,SGK1阳性细胞率分别为（40.03±14.42）%,（36.63±14.28）%,（52.82±18.73）%和（52.58±20.13）%。BCC组和SCC组分别与NS组比较,差异均有统计学意义（Ps<0.05）。各组SGK1染色阳性细胞率>50%的标本分别为6例（24%）,3例（12%）,16例（57.14%）和14例（50%）,BCC组和SCC组分别与NS组比较,差异均有统计学意义（Ps<0.05）。结论：SGK1的高表达可能与基底细胞癌及鳞状细胞癌的发病有关。     

紫外线对光化性角化病和正常皮肤p53、基质金属蛋白酶2、9表达的影响

目的 探讨不同剂量紫外线对光化性角化病（AK）与正常皮肤组织中增殖与凋亡、及p53、基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP9表达的影响。方法 AK与正常皮肤组织分别分为4个组,对照组（照射剂量为0 J/cm2）、5 J/cm2组、10 J/cm2组、20 J/cm2组。每块组织连续照射4 d,继续培养24 h后取材。TUNEL检测细胞凋亡、Ki-67检测细胞增殖情况,定量PCR及免疫组化法检测p53、MMP2及MMP9表达。 结果 紫外线照射后,与对照组相比,凋亡细胞百分比在正常皮肤组织 10、20 J/cm2组（46.8 ± 2.1,56.7 ± 2.4）增加,在AK 20 J/cm2（43.5 ± 1.5）组增加,正常皮肤组织10、20 J/cm2组比AK同剂量组增加（P < 0.05）;Ki-67阳性细胞百分比在正常皮肤组织20 J/cm2组（3.34 ± 0.76）表达减少（P < 0.05）,在AK中无明显变化（P > 0.05）;p53 mRNA（5 J/cm2：1.106 ± 0.025;10 J/cm2：1.259 ± 0.045;20 J/cm2：1.425 ± 0.053）及蛋白（10 J/cm2：0.1169 ± 0.0032;20 J/cm2：0.1454 ± 0.0047）在正常皮肤组织中表达增加,在AK中,mRNA（10 J/cm2：0.611 ± 0.050;20 J/cm2：0.578 ± 0.070）及蛋白（20 J/cm2：0.0404 ± 0.0027）表达减少（P < 0.05）;正常皮肤组织中MMP2 mRNA及蛋白（10 J/cm2：1.086 ± 0.013,0.0843 ± 0.0024;20 J/cm2：1.417 ± 0.036,0.1236 ± 0.0042）、MMP9 mRNA及蛋白（20 J/cm2：1.395 ± 0.026,0.3065 ± 0.0162）表达增加,AK中MMP2 mRNA及蛋白（20 J/cm2：1.296 ± 0.028,0.0744 ± 0.0032）、MMP9 mRNA及蛋白（10 J/cm2：1.298 ± 0.035,0.0992 ± 0.0053;20 J/cm2：1.286 ± 0.032,0.1010 ± 0.0063）表达增加（P < 0.05）。结论 紫外线促进AK进展可能与其下调p53表达,上调MMP2和MMP9有关。     

光线性角化病和鳞状细胞癌表皮生长因子受体与MAPK信号通路的研究

目的 探讨磷酸化ERK1/2、JNK和p38MAPK与其上游因子表皮生长因子受体（EGFR）及下游转录因子Elk-1在光线性角化病（AK）和皮肤鳞状细胞癌（SCC）中的表达。 方法 收集确诊为AK和高、中、低分化SCC患者各30例的病变组织,同时收集30例非癌患者正常皮肤组织作为正常对照组。采用免疫组化及Western印迹法分别检测p-EGFR、p-ERK1/2、p-JNK、p-p38MAPK及p-Elk-1蛋白在AK和不同分化程度SCC中的表达情况。 结果 p-EGFR在SCC组中的表达高于AK组及正常对照组（P < 0.05）,AK组与正常对照组表达差异无统计学意义;p-ERK1/2、p-JNK、p-p38MAPK及p-Elk-1在SCC的表达均高于AK组及正常对照组（P < 0.05）,且在AK中的表达又均高于正常对照组（P < 0.05）。除p-EGFR和p-Elk-1在高分化和中分化SCC中的表达差异无统计学意义,p-ERK1/2、p-JNK、p-p38MAPK随着SCC分化程度的降低,其表达逐渐增高（P < 0.05）。相关性分析显示,在SCC中p-EGFR的表达与p-ERK1/2、p-JNK、p-p38MAPK的表达强度呈正相关（r = 0.843、0.819、0.902,均P < 0.01）,且p-Elk-1的表达与p-ERK1/2、p-JNK、p-p38MAPK的表达强度亦呈正相关（r = 0.874、0.843、0.893,均P < 0.01）;在AK中p-EGFR的表达仅与p-p38MAPK的表达强度呈正相关（r =0.707,P = 0.022）。 结论 p-EGFR、p-ERK1/2、p-JNK、p-p38MAPK及p- Elk-1蛋白在皮肤SCC中的表达与其病理分级有关。磷酸化EGFR→ERK1/2、JNK、p38MAPK→Elk-1信号转导途径可能在AK和SCC的发生发展中起作用。     

紧密连接蛋白Claudin-1、7在日光性角化病和皮肤鳞状细胞癌中的表达

目的：检测紧密连接蛋白Claudin-1、7在日光性角化病(AK)和皮肤鳞状细胞癌（SCC）中的表达水平。方法：收集2014年11月至2016年11月我院病理科AK和SCC组织标本各30例,选取癌旁正常皮肤组织30例作为对照组,采用免疫组化方法检测癌旁正常表皮、AK和SCC组织中Claudin-1、7蛋白的表达。结果：对照组、AK和SCC组织中Claudin-1蛋白细胞阳性率分别为100%,53.33%和13.33%,三组两两比较,差异均有统计学意义(Ps<0.05)。Claudin-7在癌旁正常表皮、AK和SCC组织中均呈阴性表达。结论：Claudin-1蛋白在癌旁正常表皮、AK和SCC组织中表达水平逐渐下降,Claudin-1蛋白表达下调可能与表皮肿瘤的恶性转化有关。     

桥粒芯糖蛋白1在不同表皮肿瘤中表达的研究

目的：了解桥粒芯糖蛋白1与表皮肿瘤的病理及生物学行为之间的关系。方法：采用过氧化物酶标记的链霉卵白素免疫组织化学染色方法，检测了桥粒芯糖蛋白1(Dsgl)在鳞状细胞癌、基底细胞癌、Bowen病、日光角化病、角化棘皮瘤、脂溢性角化病及正常皮肤中的表达。结果：Dsgl在正常表皮中显著表达；在鳞状细胞癌和基底细胞癌的肿瘤组织中表达显著减弱或消失；在Bowen病和日光角化病细胞间变区域无表达；在绝大多数角化棘皮瘤、脂溢性角化病中的表达为强而连续的胞膜染色，与正常表皮中的表达相似。结论：皮肤恶性肿瘤中Dsgl的表达显著减弱或消失，可能与肿瘤的侵袭性和转移有关，Dsgl可能对表皮良、恶性肿瘤的鉴别诊断具有一定价值。     

Immunohistochemical study of cyclooxygenase-2 and p53 expression in skin tumors

Overexpression of cyclooxygenase-2 (COX-2) has been demonstrated in various cancers, including experimentally promoted tumors, gastrointestinal cancers, breast tumors and skin tumors. The mechanism that controls COX-2 expression is not yet clear. Currently, it is reported that COX-2 expression is frequently associated with mutated p53 genes. The goal of this study was to evaluate the expression patterns of COX-2 and p53 in several skin tumors and their correlation. An immunohistochemical method was used to investigate the expression of COX-2 and p53 proteins on formalin-fixed, paraffin-embedded tissue specimens of squamous cell carcinomas (SCC), basal cell carcinomas (BCC), Bowen's disease (BD), actinic keratosis (AK) and porokeratosis. The expression of COX-2 increased in 50% (5/10) of SCC, 80% (8/10) of BCC, 40% (4/10) of BD, 50% (5/10) of AK, and 20% (2/10) of porokeratosis cases. The expression of p53 increased in 90% (9/10) of SCC, 70% (7/10) of BCC, 70% (7/10) of BD, 50% (5/10) of AK, and 40% (4/10) of porokeratosis cases. COX-2 positivity rates of the p53-positive skin tumors were 56%, 100%, 57%, 80% and 25% in SCC, BCC, BD, AK and porokeratosis, respectively. However, the correlation between p53 and COX-2 expression in skin tumors was not statistically significant ( P  > 0.05). Our results indicate that skin COX-2 and p53 may play roles in skin tumors, but that there is no apparent correlation between the two markers.     

埃兹蛋白在皮肤鳞癌、基底细胞癌中的表达及相关研究

目的 探讨埃兹（Ezrin）蛋白在皮肤基底细胞癌（BCC）和鳞状细胞癌（SCC）中的表达及在肿瘤侵袭转移过程中的作用.方法 采用免疫组化SP法检测Ezrin蛋白在皮肤BCC（30例）、SCC（32例）及正常皮肤对照组（10例）中的表达情况.结果 Ezrin蛋白在BCC、SCC及正常皮肤对照组中阳性表达率分别为60.0％、84.4％和10％.Ezrin蛋白在各组之间表达差异有统计学意义（P＜0.05）.Ezrin蛋白阳性表达与SCC的分化程度和淋巴结转移密切相关,各组间表达差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 Ezrin蛋白的检测可能成为预测皮肤恶性肿瘤转移和预后的一项指标.