HPLC-MS/MS法测定人血浆中左乙拉西坦浓度的不确定度分析

目的 对高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中左乙拉西坦浓度的不确定度进行评定。方法 用HPLC-MS/MS法测定人血浆中左乙拉西坦浓度,对测试过程进行分析,对各个影响因素,包括测定精密度、标准曲线拟合、称量、标准溶液的配制、含药血浆的配制、提取回收率、基质效应、仪器等进行分析评定,计算合成不确定度和扩展不确定度。结果 血浆中低(0.100 2 mg·L-1)、中(2.004 mg·L-1)、高(30.06 mg·L-1)左乙拉西坦浓度测定的合成不确定度为0.010 50、0.123 3、1.958 0 mg·L-1,扩展不确定度分别为0.021 00、0.246 6、3.916 0 mg·L-1。结论 HPLC-MS/MS法测定人血浆中左乙拉西坦浓度的不确定度主要由标准曲线拟合(低浓度) 、仪器误差、标准溶液的配制和含药血浆的配制引入。     

人血浆中左乙拉西坦和卡马西平同时测定方法的建立

目的 建立同时测定人血浆中左乙拉西坦和卡马西平浓度的方法.方法 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以卡马西平-D10为内标,采用高效液相色谱-串联质谱法测定其中左乙拉西坦和卡马西平的浓度.以XBridge BEH C18为色谱柱,以甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,柱温为40℃,进样量为...     

左乙拉西坦血药浓度与剂量以及疗效分析

目的探讨左乙拉西坦(LEV)与其他抗癫痫药物的相互作用及对癫痫发作频率的影响、不同年龄组LEV效果,分析LEV血药浓度与剂量疗效的关系。方法对收集的200病例进行分组,对所得的数据进行卡方检验、方差分析与相关性分析。结果各组疗效无明显差异,单药LEV服药剂量与血药浓度明显相关(r=0.832,P<0.05),对LEV血药浓度的有影响是LTG/CBZ/PB,影响不明显的是TPM/OXC/VPA。结论 LEV的血药浓度与服药剂量、联合用药、患者的个体差异均有关系,在治疗的过程中需要对LEV进行治疗药物监测以便更好的控制癫痫。     

同位素稀释-HPLC-ESI-MS/MS法同时测定癫痫患儿血浆中左乙拉西坦、奥卡西平活性代谢物和拉莫三嗪的药物浓度

目的：建立基于高效液相色谱串联质谱技术（HPLC-ESI-MS/MS）同时测定癫痫患儿血浆中左乙拉西坦（levetiracetam,LEV）、奥卡西平活性代谢物10-羟基卡马西平（monohydroxy-carbazepine,MHD）和拉莫三嗪（lamotrigine,LTG）浓度的方法。方法：样品经沉淀蛋白法进行前期处理,分别以LEV-D6、奥卡西平-D4、LTG-¹³C3-D3为内标,采用Phenomenex Kinetex^®EVO C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,26 μm）,以0.07%甲酸-1 mmoL乙酸铵-水（A）和甲醇（B）为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1。质谱检测采用电喷雾离子源正离子模式,多离子反应监测模式扫描。考察该方法的专属性、定量下限（LLOQ）、标准曲线、残留和稀释效应、准确度精密度、基质效应和稳定性。结果：LEV和MHD的血药浓度在0.1~50 μg·mL^-1内线性关系良好（r>0.999 1）,LLOQ均为0.1 μg·mL^-1;LTG的血药浓度在0.05~25 μg·mL^-1内线性关系良好（r>0.999 2）,LLOQ为0.05 μg·mL^-1。批内和批间精密度RSD ≤ 7.0%,稳定性良好,不受正常血浆和溶血血浆（溶血程度≤ 5%）基质的影响,方法学验证均符合《中国药典》2020年版规定。结论：本方法快速、简便、稳定、经济,可应用于左乙拉西坦、奥卡西平和拉莫三嗪儿童治疗药物监测和药动学研究。     

高效液相色谱法测定癫痫患儿血清中左乙拉西坦的浓度

目的建立测定癫痫患儿血清中左乙拉西坦药物浓度的高效液相色谱(HPLC)法。方法用乙酸乙酯从血清中按液液萃取法提取左乙拉西坦和内标α-溴苯乙酮,经氮气恒流吹干富集浓缩,流动相复溶后20μL进样,0.4%磷酸-乙腈(92:8,V/V)为流动相,流速:1.0 mL·min~(-1),柱温35℃,以RP-C_(18)色谱分析柱(150 mm×3.9 mm,5μm)在210 nm波长处测定,记录左乙拉西坦与内标的峰面积比值并拟合浓度工作曲线。结果左乙拉西坦和内标峰面积比与左乙拉西坦浓度在0.234.～60.00 mg·L~(-1)的范围内线性关系良好,Y=0.065 14 X-0.004 7,r=0.999 5,最低定量限为0.234 mg·L~(-1)(S/N=4.8)。方法平均绝对回收率为(89.18±3.57)%,日间和日内RSD分别为(5.84±2.15)%和(5.48±2.61)%,冻融稳定性RSD<5%。该方法能完全分离临床可能合并所用药物的干扰(分离度R均大于1.5),采用单盲法对方法学质量控制结果RSD<4%。结论该方法经方法学验证符合血清样品的测定要求,可用于临床血药浓度测定和药动学研究。     

左乙拉西坦治疗药物监测的研究进展

左乙拉西坦（LEV）是第二代广谱抗癫痫药物,具有起效快、半衰期短、疗效确切、耐受性好、药物相互作用少等优点。为提高LEV的临床效果,减少不良反应的发生,应对儿童、妊娠期妇女、老年人、肾功能不全等特殊人群予以治疗药物监测（TDM）。临床上LEV监测样本常选择血浆或血清,监测方法多选择免疫分析法或色谱分析法。LEV的有效浓度范围目前尚无统一意见,血药浓度与不良反应的相关性也不明确。影响LEV血药浓度的因素主要有年龄、妊娠及患者用药依从性等。如何解读TDM结果并根据结果调整给药剂量是今后工作的重点。     

左乙拉西坦临床应用研究进展

目的探讨左乙拉西坦的临床应用,为其临床合理用药和推广提供参考。方法对左乙拉西坦的给药途径、治疗癫痫的特点、机制和在非癫痫领域的作用进行了综述。结果与结论左乙拉西坦可单一用药或配合其他药物治疗癫痫,在非癫痫领域疗效显著。左乙拉西坦的临床应用广泛。     

左乙拉西坦的合成

目的：研究左乙拉西坦的合成方法。方法：采用后闭环路线，优化氨解反应的工艺条件。结果：该路线的反应条件温和，副反应少，产品质量得到提高，总收率达46％左右。结论：该工艺路线适合于工业化大规模生产。     

左乙拉西坦及其衍生物的合成

目的:探讨左乙拉西坦及其衍生物的制备方法。方法:以2-吡咯烷酮为起始原料,经成盐和取代得外消旋中间体(±)-α-乙基-(2-氧-1-吡咯烷基)乙酸(1),再以R-α-苯乙胺为拆分剂,得中间体(S)-α-乙基-(2-氧-1-吡咯烷基)乙酸(3),3分别与相应的氨、胺或醇发生酰化反应,得到左乙拉西坦及其衍生物。结果:得到左乙拉西坦及其9个衍生物,8个作者未见文献报道。经红外光谱1、HNMR或元素分析认定结构正确。结论:本合成工艺有助于工业化生产,9个目标化合物对提高药物促智作用,降低不良反应能起到积极作用。     

LC-MS/MS法测定血清样品中甘胆酸的浓度

目的 建立一种测定人血清中甘胆酸的液质联用方法.方法 以d-5甘胆酸作为内标,血清样品离心处理,经ZORBAX SB C18(2.1 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱进行分离,流动相为乙腈-0.1％的甲酸水溶液(95:5),流速为0.25 mL·min-1,用电喷雾电离源(ESI),负离子方式,扫描方式为多反应监...     

HPLC法测定人血清中左乙拉西坦的浓度

目的:建立测定人血清中左乙拉西坦浓度的方法。方法:血样经甲醇去蛋白处理后,采用高效液相色谱法进样测定。色谱柱为SunFire C18,流动相为50 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH4.5)-乙腈(93.5∶6.5),流速为1.0ml/min,检测波长为205nm。结果:左乙拉西坦血药浓度在2.0～60.0mg/L范围内线性关系良好(r=0.9997),最低检测限为0.5mg/L;低、中、高3种质量浓度血样平均回收率为97.72%、97.67%、97.82%,日内RSD为2.74%、1.86%、1.63%,日间RSD为4.21%、1.88%、2.24%。18例患儿[给药量:左乙拉西坦片30～60mg(/kg·d)]血药浓度测得值为2.8～20.1mg/L,平均为(9.53±6.12)mg/L,个体差异大。结论:本方法精密、准确、特异性强、回收率高。     

左乙拉西坦治疗癫痫的临床应用

无发作是癫痫治疗的主要目标,实现无发作能降低癫痫患者病死率,改善生活质量.新型抗癫痫药物左乙拉西坦,辅助或单药治疗均可降低癫痫部分性发作,安全性好,不良反应少,长期治疗未见肝、肾功能异常及血液和生化指标改变,不产生耐药性,对认知功能无不良影响,临床值得推荐.     

左乙拉西坦致皮疹2例

2例女性癫痫患者(例1 15岁,例2 54岁),服用传统抗癫痫药物效果不佳,给予口服左乙拉西坦0.25 g2,次/d,分别在治疗第75、天,四肢及躯干部皮肤出现红色斑疹伴瘙痒。考虑皮疹与左乙拉西坦有关。例1停用左乙拉西坦后3 d皮疹消褪。例2停用左乙拉西坦并接受氯雷他定10 mg、1次/d治疗,1周后皮疹消褪。     

LC-MS/MS法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定健康人血浆中麦考酚酸浓度的方法,并对受试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法20名健康受试者单剂量口服麦考酚吗乙酯胶囊,以兰索拉唑砜为内标,血浆样品经蛋白沉淀处理后,采用CAPCELL PAK C_(18)(50 mm×2.1 mm,3.5μm,No:AKIE01045)分离。样品经电喷雾离子源(ESI)离子化后,通过三级四极杆串联质谱仪,采用多反应离子检测方式测定麦考酚酸(m/z 319.1/191.1)和内标兰索拉唑砜(m/z 384.0/180.0)的浓度,计算主要药动学参数及相对生物利用度。结果麦考酚酸在0.1～20mg·L~(-1)内线性良好,定量下限为0.1 mg·L~(-1)。方法的相对回收率在85%～115%之间,批内、批间RSD均<15%。受试制剂与参比制剂的t_(1/2)分别为(12.45±5.30)、(14.26±7.47)h,t_(max)分别为(0.74±0.36)、(0.75±0.58)h,ρ_(max)缸分别为(10.29±3.29)、(11.43±4.83)mg·L~(-1)。结论建立的LC-MS/MS法专属性强、灵敏度高,操作简便、快速。受试制剂与参比制剂生物等效。     

左乙拉西坦基础研究进展

目的 介绍新型抗癫痫药物左乙拉西坦(LEV)基础动物实验研究方面的进展。方法 通过查阅近年来的报道,概括了LEV作用于癫痫动物模型的机制、以及与癫痫耐药相关蛋白、脑保护的关系。结果 LEV具有与既往抗癫痫药物不同的作用机制,不仅有抗癫痫作用,还具有抑制癫痫源产生和发展的作用。多数报道LEV不是常见耐药蛋白如P-gp和MRP1/2,MDR1的底物,在难治性癫痫的治疗中具有理论基础,同时LEV在神经保护方面急性期多具积极作用,而在慢性期效果不明显。结论 大量动物实验证明LEV具有全新的作用机制,对于临床癫痫的治疗具有重要指导意义,但在不同癫痫模型及组织中结果不尽相同,值得进一步探讨,为开发新的抗癫痫药物提供借鉴。     

左乙拉西坦片在健康人体的药代动力学

目的研究中国健康志愿者口服不同剂量左乙拉西坦片(抗癫痫药)的药代动力学。方法 24名中国健康志愿者随机分为低,中,高3个剂量组,单次口服左乙拉西坦片(500,l000,1500 mg)。用高效液相色谱法测定血药浓度,用DAS 2.1.1软件计算药代动力学参数。结果左乙拉西坦片低,中,高剂量组的主要药代动力学参数分别如下:Cmax为(14.42±3.51),(26.73±6.22),(38.44±8.75)μg.L-1;Tmax为(1.31±0.58),(1.44±0.61),(1.19±0.51)h;t1/2为(6.19±1.18),(5.75±1.22),(5.87±1.55)h;AUC0-t为(130.43±23.43),(220.63±42.82),(316.93±76.58)μg.h.L-1。结论血浆中左乙拉西坦的Cmax和AUC显示线性药代动力学特征。受试者服用左乙拉西坦片500,l000,1500 mg后,药代动力学参数经单因素方差分析显示无性别差异。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

HPLC法检查左乙拉西坦缓释片的有关物质

目的:建立检查左乙拉西坦缓释片有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Wondasil C18,流动相为缓冲液(含磷酸二氢钾、庚烷磺酸钠,pH 2.8)-乙腈(950∶50),流速为1.0 ml/min,检测波长为200 nm,进样量为10μl。以外标法计算杂质量。结果:左乙拉西坦酸检测质量浓度线性范围为0.168 7⁶.714μg/ml(r=1.000);低、中、高质量浓度的回收率分别为90.3%、101.7%、103.3%,RSD分别为0.17%、1.08%、0.43%(n=3);左乙拉西坦酸定量限为76.51 ng/ml。结论:建立的方法简便、准确、专属性好,可以用于左乙拉西坦缓释片中的有关物质检查。     

左乙拉西坦的杂质研究及控制

目的利用HPLC法同时测定左乙拉西坦中工艺杂质、降解杂质及中间体。方法采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以体积分数为0.1%三乙胺水溶液(用磷酸调节p H值至5.5)-乙腈(体积比为9∶1)为流动相,检测波长为205 nm,流速为1.0 m L·min-1,柱温为35℃。结果 8个杂质在考察的质量浓度范围内与峰面积之间呈良好的线性关系(r≥0.999 9);检测限均在7~240μg·L-1内;平均回收率均在99.2%~107.3%内,RSD均小于3.0%(n=9)。结论本方法简便、准确、专属性强、灵敏度高,可用于左乙拉西坦的质量控制。     

高效液相色谱法测定左乙拉西坦血药浓度

目的:建立左乙拉西坦HPLC方法学.方法:100 μL血清加入内标后二氯甲烷去蛋白处理,色谱柱为Attima硅胶柱(5 μm,4.6 mm×150 mm);流动相为磷酸盐缓冲液(50 mmol, pH 4.5)和乙腈(96∶ 4,V/V),流速1 mL/min;检测波长210 nm,检测灵敏度0.0001 AUFS;柱温37 ℃;进样量10 μL.结果:左乙拉西坦在4.5 min出峰,内标在6.5 min出峰,无干扰;线性关系良好,相关系数R=0.9999,线性范围1.25～160 μg/mL.结论:该方法准确,可用于临床LEV血清浓度的常规检测,促进临床合理用药以及个体化治疗.