振动性骨骼肌损伤的研究进展

职业性手臂振动病（HAVD）指作业工人长期从事手传振动作业而引起的职业性疾患，主要包括手臂部的循环、神经及骨骼肌功能的损伤。目前，振动对骨骼肌功能的影响越来越受到重视，研究振动性骨骼肌损伤（VSMI）发病机制是防治职业性HAVD的重要内容。本文结合国内外相关文献，对VSMI的病理改变、电生理研究、发生机制、临床诊断与防治以及研究方向等进行简要分析。     

IGF-1增加脓毒症大鼠骨骼肌葡萄糖载体及其表达

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对脓毒症大鼠血浆应激激素及骨骼肌葡萄糖载体-4(GLUT-4)和mRNA表达的影响.方法:将SD大鼠采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立腹腔感染及颈静脉置管肠外营养(PN)模型后,随机分为脓毒症组(n=10)、PN组(n=10)和IGF-1组(n=10),另设正常组(n=10)仅行颈静脉置管输液.正常组和脓毒症组给予等渗盐水,自由进食和饮水,PN组给予营养支持,IGF-1组为PN IGF-1静脉注射,连续5d.第6 d测定血糖、胰岛素、高血糖素和IGF-1水平;免疫组化法测定骨骼肌GLUT-4及Real-Time PCR法测定GLUT-4 mRNA表达.结果:脓毒症大鼠血浆葡萄糖、胰岛素、高血糖素明显升高,IGF-1明显下降(P＜0.01).IGF-1组前三者较脓毒症组和PN组明显降低,IGF-1则明显升高(P＜0.05).脓毒症组骨骼肌GLUT-4及mRNA表达明显降低(P＜0.01);IGF-1组GLUT-4及mRNA表达较脓毒症组和PN组明显增加(P＜0.01).结论:IGF-1可改善应激激素之间的平衡,明显增加脓毒血症大鼠骨骼肌GLUT-4蛋白和mRNA的表达.     

不同训练负荷大鼠骨骼肌肌浆网钙转运能力的变化

目的观察不同训练负荷条件下大鼠骨骼肌肌浆网钙转运能力的变化,为武警官兵科学训练提供实验依据。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组(n=8),在笼内自由活动;有氧运动组(n=8),在跑台上每天定时进行递增速度运动,运动强度为64%~76%VO2max;无氧运动组(n=8),在跑台上每天定时进行高速间歇运动,强度80%VO2max。上述各组4周后处死取样,采用高速离心机提取骨骼肌肌浆网,采用紫外分光光度计检测钙转运能力的变化。结果有氧运动组大鼠骨骼肌肌浆网Ca2+最大摄取量和最大释放量分别为(57.17±4.62)和(33.54±4.97)nmol/mgprot,均明显高于无氧运动组〔(33.18±3.90)、(16.17±2.89)nmol/mgprot,P0.05〕和正常对照组〔(34.67±4.25)、(24.81±3.75)nmol/mgprot,P0.05〕,3组间骨骼肌肌浆网Ca2+最大摄取速度和最大释放速度的差异也呈同上趋势(P0.05)。结论有氧运动更有利于提升骨骼肌肌浆网对Ca2+的转运功能。     

铬对糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4基因表达的影响

目的:探讨补铬对糖尿病大鼠糖代谢相关基因表达的影响。方法:对前期研究分离到的与补铬200μg/(kgbw?d)有关的糖尿病大鼠差异显示的基因片段进行克隆、测序及同源性分析,根据待检测的基因序列进行引物设计,进行RT-PCR检测。以激光密度扫描仪进行光密度扫描分析,以目的基因与参考基因的灰度比值反映其表达水平。结果:差显片段Cr-3的碱基序列与GLUT4同源性为98%。各组大鼠骨骼肌组织中GLUT4mRNA的表达:糖尿病补铬组GLUT4表达量低于正常对照组(P<0.05),高于糖尿病对照组(P<0.05)。结论:给糖尿病大鼠补充微量元素铬可以上调骨骼肌组织中GLUT4mRNA的表达,进而使骨骼肌组织中GLUT4含量增加,这可能是铬改善糖尿病大鼠糖、脂代谢紊乱的分子机制之一。     

饮食控制对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌中糖原合成酶激酶-3表达的影响

目的 观察饮食控制对高脂高糖饮食诱导的胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌中糖原合成酶激酶-3（GSK-3）表达的影响。方法 将30只Wistar大鼠随机分为正常组、胰岛素抵抗组和饮食治疗组，每组10只。正常组以常规饲料喂养，胰岛素抵抗组和饮食治疗组均以高糖高脂饲料喂养，4周后饮食治疗组大鼠改以常规饲料喂养，持续6周。采用Western blotting法检测各组大鼠骨骼肌中GSK-3的表达，于实验第1、5和11周分别检测其体质量、血甘油三脂和胆固醇、空腹血糖和胰岛素水平，并计算胰岛素敏感指数。结果 胰岛素抵抗组大鼠骨骼肌GSK-3的表达量较正常组增高70％（P〈0．01），饮食控制6周后饮食治疗组大鼠骨骼肌中GSK．3的表达量较胰岛素抵抗组减少23％（P〈0．01），较正常组增高31％（P〈0．05）。而饮食治疗组的胰岛素敏感指数与胰岛素抵抗组相比明显上升（P〈0．05）。结论 饮食控制可降低胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞GSK-3表达水平，从而加强葡萄糖的摄取和利用，改善胰岛素抵抗。     

自由基在骨骼肌缺血再灌注损伤中作用的实验性研究

目的　研究自由基在骨骼肌缺血再灌注损伤中的作用。方法　用 3 2kg重物挤压家兔双后肢大腿和臀部 4h或 5h制作骨骼肌缺血再灌注损伤的动物模型 ,分别测定实验动物的血浆、组织自由基及细胞损伤的变化。结果　两挤压伤组在解压后 2h内平均动脉压明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ,血浆丙二醛 (MDA)、一氧化氮 (NO)含量和N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酸酶 (NAG)活性在解压后 2 4h均高于对照组 (P <0 0 5或 <0 0 1) ;两挤压伤组比较 :压伤 5h组平均动脉压在解压后 2h内低于压伤 4h组 (P <0 0 5 ) ,而血浆MDA、NO、NAG及组织MDA、NO也高于压伤 4h组 (P <0 0 5 )。结论　骨骼肌缺血时可产生大量的自由基 ,从而造成骨骼肌缺血再灌注损伤     

虾青素对大强度运动致大鼠骨骼肌氧化应激损伤及细胞凋亡的影响

目的探讨虾青素(astaxanthin)调控核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2通路相关蛋白质表达改善大强度运动大鼠骨骼肌氧化应激及细胞凋亡水平的作用机制。方法 40只Wistar大鼠随机分为安静组(C,n=10)、大强度运动组(HI,n=15)和虾青素+大强度运动组(AHI,n=15)。C组不进行运动,HI组、AHI组进行6 w递增负荷跑台训练(起始:速度10 m/min,时间10 min,坡度10°;终止:速度40 m/min,时间180 min,坡度10°)。训练期间AHI组以20 mg/kg、5 ml/kg虾青素灌胃,C组、HI组灌以等体积大豆油。6 w训练结束24 h后取材(血液及比目鱼肌),放射免疫法检测血清睾酮(testosterone,T)与皮质酮(corticosterone,Cor)含量,全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)与乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性;HE染色观察骨骼肌形态,Tunel染色检测骨骼肌细胞凋亡水平,免疫组织化学法检测骨骼肌B淋巴细胞瘤-2(B-celllymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(bcl-2 associated X protein,Bax)、Nrf2与血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白质表达,Elisa法检测骨骼肌超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果与C组相比,HI组骨骼肌产生炎性改变,血清T/Cor显著降低(P0.01),CK、LDH显著升高(P0.01),骨骼肌Bcl-2、Bcl-2/Bax、SOD、Nrf2、HO-1显著降低(P0.01),细胞凋亡水平及Bax、MDA显著升高(P0.01);与HI组相比,AHI组骨骼肌炎性细胞浸润较轻,血清T/Cor显著升高(P0.01),CK、LDH显著降低(P0.01),骨骼肌Bcl-2、Bcl-2/Bax、SOD、Nrf2、HO-1显著升高(P0.01或P0.05),细胞凋亡水平及Bax、MDA显著降低(P0.01)。结论 6w递增负荷训练诱发大鼠出现过度训练综合症,骨骼肌氧化应激及凋亡加剧,功能/结构出现损伤性变化。虾青素可通过调控Nrf2信号通路相关蛋白质表达,增强下游抗氧化酶活性,缓解氧化应激及细胞凋亡,保护骨骼肌功能/结构。[营养学报,2021,43(3):274-278]     

碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子在糖尿病骨骼肌病变中的变化及意义

目的 探讨糖尿病骨骼肌碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及血管内皮生长因子（VEGF）表达的变化及其在糖尿病骨骼肌病变中的作用。方法 选用Wistar大鼠，随机分成4组：正常对照组、单纯后肢缺血组、糖尿病组和糖尿病后肢缺血组。以四氧嘧啶50mg／kg尾静脉注射制造糖尿病模型。糖尿病造模后2周结扎右股动脉制造缺血模型。10周后，观察腓肠肌病理形态学改变，同时采用免疫组化方法检测bFGF和VEGF蛋白表达情况。结果 糖尿病组骨骼肌表现为普遍性肌萎缩，肌纤维变性坏死。单纯缺血组和糖尿病组bFGF蛋白表达减弱（表达阳性率分别为53．66％和35．51％），糖尿病后肢缺血组bFGF的阳性率为25．42％，下降明显（P〈0．01）。糖尿病缺血组VEGF表达阳性率为20．68％，低于单纯缺血组（54．04％，P〈0．01）。结论 高血糖和缺血引起肌肉中bFGF及VEGF等生长因子的变化可能是糖尿病骨骼肌萎缩的重要原因之一。     

HSP60与高脂饮食诱导的小鼠骨骼肌内质网应激的相关性研究

目的:探讨热激蛋白60在高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠骨骼肌内质网应激的表达机制.方法:4周龄C57BL/6J小鼠随机分组为正常和高脂饮食组.高脂饮食组给予高脂饮食16周,建立胰岛素抵抗小鼠模型.采用Western blot方法检测HSP60及内质网应激因子CHOP等蛋白表达.结果:与正常饮食组比较,高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠体重明显增加,葡萄糖耐量降低.骨骼肌中HSP60、CHOP、ClpP表达显著性升高(P<0.05).结论:高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠骨骼肌中HSP60表达水平升高,这可能与内质网应激发生有关.     

铬对糖尿病大鼠骨骼肌组织基因表达的调控作用

目的　研究铬对糖尿病大鼠代谢相关基因表达的调控作用。方法　雄性Wistar大鼠随机分成 3组 :正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病补铬组。糖尿病补铬组每日以 2 0 0 μg kgbw的铬连续灌胃 6 0天。采用mRNA差异显示技术、基因片段的克隆、测序、同源性分析等观察各组大鼠之间骨骼肌中基因表达的变化。结果　分离到糖尿病补铬组与糖尿病对照组之间出现明显差异的 4 0 0bp以上的cDNA片段 11条 ,其中在糖尿病补铬组中高表达的cDNA片段 4条 ;在糖尿病对照组中高表达的cDNA片段 7条。同源性比较结果显示Cr 3与GLUT4 (葡萄糖转运体 4 )的同源性为 98% ;Cr 5与IRS 1(胰岛素受体底物 1)的同源性为 10 0 % ,RT PCR验证结果显示GLUT4表达量在糖尿病补铬组高于糖尿病对照组。结论　铬可诱导糖尿病大鼠骨骼肌中GLUT4mRMA的表达 ,这可能是铬改善糖尿病糖、脂代谢紊乱的分子机制之一。     

铁对肥胖大鼠骨骼肌解偶联蛋白基因表达的影响

目的 :　探讨铁对肥胖大鼠骨骼肌中 UCP2、3基因表达的影响。方法 :　利用高脂肪饲料诱导大鼠肥胖模型后 ,观察铁对肥胖大鼠的影响 ,采用放射免疫法检测甲状腺激素水平 ,并应用 RT- PCR方法测定骨骼肌中 UCP2、3m RNA表达水平。结果 :　 1 .适量补铁可改善机体甲状腺素水平 ,而过量补铁对其无影响。2 .缺铁肥胖大鼠 UCP2、3m RNA表达水平明显降低。3.补铁可使肥胖大鼠骨骼肌中 UCP2、3m RNA表达水平增强、体脂含量降低 ,其中以 2 5.51 mg· kg bw-1· d-1剂量铁组 UCP3m RNA表达水平最强 ,约是基础饲料组大鼠的 2倍。高脂饲料诱导的肥胖大鼠骨骼肌中 UCP3 m RNA表达水平较基础饲料组大鼠呈下降趋势。结论 :　适量补铁能改善机体甲状腺素水平 ,促进肥胖大鼠骨骼肌中 UCP2、3 m RNA表达 ,有利于脂肪动员 ,增加能量消耗     

早期大剂量维生素C在骨骼肌拉伤中的应用

目的探讨短期大剂量维生素C作为辅助药物,对骨骼肌拉伤患者减轻拉伤导致的过氧化损伤,促使损伤肌肉恢复的效果。方法门诊骨骼肌拉伤患者90例,随机分成两组。对照组45人,实验组为45人。实验组通过静脉滴注大剂量维生素C,对骨骼肌拉伤患者进行早期治疗,并与传统治疗手段进行对比分析。结果实验组与对照组相比,在肿胀及皮下溢血消退时间、功能恢复时间等方面优于对照组,有明显的差异（p〈0．01）。结论早期大剂量维生素C对骨骼肌拉伤患者有促使肌肉恢复的作用。     

2型糖尿病大鼠氧化应激介导肝脏和骨骼肌细胞内脂肪堆积的差异

目的观察2型糖尿病大鼠高脂饮食后肝脏和骨骼肌氧化应激及脂质堆积的差异。方法10只雄性Goto Kakisaki（GK）大鼠随机分为两组：糖尿病对照组和糖尿病硫辛酸治疗组（α-硫辛酸35mg／kg隔天腹腔内注射1次），健康Wistar大鼠4只为正常对照组，高脂饮食12周。测定各组大鼠肝、骨骼肌匀浆中的GSH、SOD和MDA及脂质谱水平，以及观察其组织病理形态学改变。结果糖尿病对照组肝组织GSH、SOD和MDA及脂质谱水平较正常对照组明显异常，经α-硫辛酸治疗后有明显改善，且GSH、SOD和MDA水平与甘油三酯水平相关；骨骼肌组织中除SOD外，GSH和MDA以及脂质谱水平在3组之间的变化，差异无统计学意义（P〉0．05）。糖尿病对照组有明显的肝细胞脂肪变性、坏死及炎性细胞浸润，硫辛酸治疗后有明显改善，而骨骼肌组织病理形态学无明显变化。结论12周高脂饮食可导致明显的氧化应激状态和细胞内脂肪堆积，但肝脏和骨骼肌两者之间存在一定差异，α-硫辛酸通过改善氧化应激状态而对细胞脂质代谢异常有明显的缓解作用。     

应用L-15N亮氨酸测定大鼠骨骼肌蛋白质合成

目的:建立稳定同位素L-15N亮氨酸测定大鼠骨骼肌蛋白质合成率的方法.方法:分别测定静脉注射相同剂量L-15N亮氨酸不同时相的大鼠骨骼肌15N丰度及不同剂量L-15N亮氨酸同一时相的大鼠骨骼肌15N丰度.结果:大鼠骨骼肌游离氨基酸池中15N同位素丰度在注射后30 min内呈线性上升并达高峰,维持4 h后缓慢下降,骨骼肌蛋白质中的15N丰度30 min至12 h基本维持不变;随着注射剂量的增加,大鼠骨骼肌蛋白质分数合成率亦增加,当L-15N亮氨酸剂量＞1.0 mmol/kg,分数合成率并不随施加L-15N亮氨酸剂量的加大而增加.结论:在进行大鼠骨骼肌蛋白质合成率测定时,一次性静脉注射的测量最佳时限为30 min,剂量为1.0 mmol/kg.     

溴苯腈急性中毒小鼠骨骼肌能量代谢变化及二巯丙磺钠的干预作用

目的探讨溴苯腈急性中毒对骨骼肌能量代谢的影响及二巯丙磺钠(Na-DMPS)的保护效应。方法选取ICR小鼠78只,随机分成3组:正常对照组(6只)、急性中毒组(36只)和Na-DMPS保护组(36只);后两组均分为高剂量组和低剂量组两组,取中毒后0.5、3.0、6.0 h等各点检测骨骼肌腺苷酸水平变化(6只),并进行统计分析。结果①急性中毒组中,低剂量组小鼠骨骼肌一磷酸腺苷(AMP)在中毒后0.5 h高于正常对照组;高剂量组二磷酸腺苷(ADP)在中毒后0.5、3.0、6.0 h高于正常对照组,AMP在中毒后6.0 h高于正常对照组(P<0.05)。②Na-DMPS保护组中,低剂量组小鼠骨骼肌ADP低于急性中毒组,AMP低于急性中毒组(P<0.05);高剂量组小鼠骨骼肌三磷酸腺苷(ATP)高于急性中毒组,ADP低于急性中毒组,AMP低于急性中毒组(P<0.01)。结论①溴苯腈急性中毒可影响骨骼肌能量代谢,但并不是其骨骼肌损伤的主要原因;②Na-DMPS保护可改善骨骼肌能量代谢。     

铬对糖尿病大鼠糖、脂代谢及骨骼肌组织基因表达的影响

目的 :　研究铬对糖尿病大鼠糖、脂代谢及骨骼肌组织中相关基因表达的影响。方法 :　Wistar大鼠 3 2只 ,随机分成 3组 :正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病补铬组。补铬组每日以2 0 0 μg/kg bw的铬灌胃 ,连续 6 0 d。补铬前后检测空腹血糖、血清胰岛素及血脂 ;采用 m RNA差异显示技术观察各组大鼠之间骨骼肌中基因表达的变化。结果 :　补铬组大鼠血糖水平较实验前明显降低 ;血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、动脉硬化指数明显低于糖尿病对照组 ,高密度脂蛋白胆固醇高于糖尿病对照组 ;血清胰岛素水平未见明显改善。分离到补铬组与糖尿病对照组之间出现明显差异的 40 0 bp以上的 c DNA片段 1 1条 ,其中在补铬组中高表达 ,糖尿病对照组中低表达或无表达的 c DNA片段 4条 ;在补铬组中低表达或无表达 ,糖尿病对照组中高表达的 c DNA片段 7条。结论 :　铬对糖尿病大鼠糖、脂代谢紊乱具有一定的改善作用 ;铬对骨骼肌组织中某些基因的表达产生了诱导或抑制作用。推测铬对糖尿病大鼠代谢紊乱的调节作用可能与这些基因表达水平的变化有关。     

实验性运动性骨骼肌损伤形态学观察

本文采用高电压低电流间歇刺激的方法,造成兔实验性力竭运动后骨骼肌损伤动物模型,并用 HE 染色、PTH 横纹染色、酶组化染色及透射电镜等技术对运动后骨骼肌形态进行动态观察。结果提示,力竭运动后48小时内兔后肢骨骼肌持续处于代谢障碍,糖原消失,线粒体肿胀,灶性肌纤维坏死等改变。72小时至1周后病变才趋于稳定并逐渐恢复正常。     

中药骨康对骨质疏松大鼠骨骼肌自由基代谢的影响

目的研究中药对骨质疏松大鼠骨骼肌自由基代谢的影响。方法SD雌性大鼠去势后,分为正常对照组(SHAM)、去卵巢手术组(OVX)、雌激素对照组(OVX+ES)、中药组(OVX+TCD),SHAM组、OVX组予蒸馏水,OVX+TCD组予骨康灌胃给药,OVX+ES组给予尼尔雌醇灌胃,其余隔天给予蒸馏水灌胃。治疗3个月后取右侧骨直肌检测。结果2种治疗方法能不同程度提高去势大鼠骨骼蛋白含量,但OVX+ES组相对于OVX+TCD组其作用更加明显,不过OVX+ES组与OVX+TCD组的骨骼肌蛋白水平都未能达到SHAM组水平。OVX组骨骼肌的SOD活力明显低于其余各组,OVX+ES组的骨骼肌SOD活力最高,与其它各组比较存在显著性差异(P<0.05)。骨骼肌的GSH-PX活力OVX+ES组最高,与其它各组相比较存在明显的差异。中药治疗后去势大鼠的GSH-PX活力也有明显提高(P<0.01)。OVX组大鼠骨骼肌中的MDA含量明显高于SHAM组和其它治疗组(P<0.05),激素治疗与中药治疗比较均存在明显差异(P<0.05),OVX+TCD组MDA较正常组高。结论中药骨康能够提高骨骼肌素质,但其作用较雌激素弱。     

罗格列酮及饮食干预对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌GLUT4转位的影响

目的　探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白 4(GLUT4)转位的影响。方法　利用高脂饲料喂养 ,使Sprague -Dawley(SD)大鼠产生胰岛素抵抗 ,用罗格列酮及饮食干预治疗 4周后 ,取骨骼肌组织 ,应用Western -bloting印迹法分析骨骼细胞膜GLUT4表达量。结果　在胰岛素刺激下 ,胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞膜GLUT4表达较正常大鼠下降 5 2 72 %(P <0 0 0 1) ,罗格列酮及饮食干预组 ,细胞膜GLUT4表达较未干预胰岛素抵抗大鼠分别增加 49 5 3 %、5 0 3 4%(P <0 0 0 1)。结论　罗格列酮可促进胰岛素刺激的GLUT4转位 ,从而改善高脂喂养所引起的骨骼肌组织胰岛素抵抗     

复合营养素对寒冷暴露大鼠骨骼肌功能的保护作用

目的观察复合营养素对寒冷暴露大鼠骨骼肌功能的保护作用。方法雄性SD大鼠32只,按体重随机平均分为饮用水灌胃室温对照组(n=8)、复合营养素灌胃室温对照组(n=8)、饮用水灌胃寒冷暴露组(n=8)和复合营养素灌胃寒冷暴露组(n=8)。灌胃3周后进行急性寒冷暴露,暴露温度-15℃,时间6h。观察每组大鼠骨骼肌细胞ATP含量变化及细胞超微结构的改变。结果①寒冷暴露使大鼠骨骼肌细胞ATP含量下降(1.353±0.873μmol/L),明显低于室温对照组(6.594±0.421μmol/L)(P0.01),电镜结果显示:细胞线粒体肿胀、易位,肌浆网肿胀,Z线紊乱。②复合营养素可以明显增加寒冷暴露大鼠骨骼肌细胞ATP含量(5.887±0.385μmol/L),与室温对照组(6.594±0.421μmol/L)相比差异无统计学意义(P0.05),电镜结果显示:骨骼肌细胞超微结构正常,线粒体形态完整、排列整齐。结论复合营养素对寒冷暴露大鼠骨骼肌功能有很好的保护作用。