丹参提取物764-3对新生大鼠高氧所致急性肺损伤的保护作用

目的 探讨丹参提取物764-3对高氧暴露所致新生大鼠急性肺损伤的保护作用,并将其作用与超氧化物歧化酶(SOD)进行比较.方法 采用新生Sprague Dawley大鼠置于≥90%O2中7 d以建立高氧急性肺损伤模型,分别用SCD和764-3进行干预,对比肺系数、丙二醛(MDA)含量、SOD活性、辐射状肺泡计数(RAC)和病理形态学变化,并采用脱氧核糖核酸转移酶介导的细胞凋亡标记技术法(TUNEL)检测肺细胞凋亡情况.结果 SOD干预组和764-3干预组在高氧暴露7 d时的MDA含量和凋亡细胞数均低于高氧对照组(P<0.05或P<0.01),病理形态学改变要轻于高氧对照组,RAC及SOD活性则要高于高氧对照组(P<0.05或P<0.01),且两种抗氧化剂作用近似(P>0.05).但764-3干预组的肺水肿与高氧对照组差异无显著性(P>0.05).结论 764-3对新生大鼠高氧所致的急性肺损伤有一定的保护作用.     

大黄对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良的影响

目的 探讨大黄对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良（BPD）的影响。方法 将64只生后4 d大鼠随机分成空气对照组、大黄对照组、高氧模型组和高氧+大黄组（n=16）。大鼠暴露于60%氧浓度中构建BPD模型。造模同时,两个大黄干预组每天给予600 mg/kg大黄提取物混悬液灌胃1次。各组大鼠于生后14 d、21 d,苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织形态学改变;分光光度计法检测丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性;RT-PCR、Western blot法检测肺组织中TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白表达水平。结果 高氧模型组大鼠肺组织出现肺泡数目减少、体积增大、结构简单化等发育受阻的表现,并随高氧暴露时间的延长损伤加重;高氧+大黄组大鼠肺组织病理改变明显减轻。大鼠生后14 d及21 d,与两对照组相比,高氧模型组放射状肺泡计数（RAC）明显减少,肺组织中SOD活性降低,MDA水平、TNF-α mRNA及蛋白水平、IL-6 mRNA及蛋白水平均升高（P < 0.05）。与高氧模型组相比,高氧+大黄组RAC明显增加,肺组织中SOD活性升高,MDA水平、TNF-α mRNA及蛋白水平、IL-6 mRNA及蛋白水平均降低（P < 0.05）。结论 大黄可能通过抑制炎症和氧化应激反应对高氧致新生大鼠BPD发挥保护作用。     

依达拉奉对新生鼠高氧肺损伤的影响

【摘要】目的探讨自由基清除剂依达拉奉 (edaravone)对新生鼠高氧肺损伤的治疗作用,为临床防治新生儿高氧肺损伤提供理论依据。方法96只新生鼠随机分组后分别进行高浓度氧(氧 体积分数>0.90,简称高氧)、高氧＋依达拉奉处理,并设相应对照。于实验3d、7d后检测各组新生鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)活性、TNF α及肺核因子 κB(NF κB)水平的变化,,并观察肺组织病理改变 。结果高氧3d后BALF中MDA、TNF α含量明显高于正常对照组(P均<0.01),SOD活性下降(P<0.01),肺组织NF κB活性上升(P<0.01),病理切片 见明显炎性表现;高氧7d后,上述改变进一步加重。依达拉奉干预高氧损伤3d、7d时BALF中MDA、TNF α含量和肺NF κB染色强度均显著降低 (P均<0.05),SOD活性上升(P<0.05),肺组织炎性表现较轻。结论高氧可导致新生鼠的急性肺损伤,其机制可能与机体氧化/抗氧化失衡和炎症 反应有关。依达拉奉对新生鼠高氧肺损伤发挥积极的保护作用。     

丹参对高体积分数氧致新生大鼠支气管肺发育不良的影响

目的 探讨丹参对高体积分数氧(高氧)致新生大鼠慢性支气管肺发育不良(BPD)的影响.方法 出生2 d的新生SD大鼠随机分为空气加9 g/L盐水组(Ⅰ组)、空气加丹参组(Ⅱ组)、高氧加9 g/L盐水组(Ⅲ组)、高氧加丹参组(Ⅳ组).Ⅲ和Ⅳ组持续暴露于高氧中,Ⅱ和Ⅳ组予腹腔注射丹参10 mg/(kg·d),Ⅰ和Ⅲ组腹腔注射同等体积的9 g/L盐水,生后14 d对各组大鼠行肺组织病理学检查,分别采用硫代巴比妥酸法、亚硝酸盐法、二硝基苯甲酸法检测辐射状肺泡计数(RAC),检测各组大鼠肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平.采用SPSS 11.5软件进行组间t检验.结果 1.Ⅲ、Ⅳ组显示明显的肺泡发育受阻,肺纤维化明显,RAC值较Ⅰ、Ⅱ组均减少(Pa＜0.05),但Ⅳ组RAC(8.6±0.2)较Ⅲ组(7.2±0.5)显著增加(P＜0.05).2.Ⅲ、Ⅳ组肺湿质量/干质量重(W/D)均高于Ⅰ、Ⅱ组(Pa＜0.05),提示高氧组肺纤维化、肺水肿均较空气组严重,使用丹参后肺W/D显著下降(P＜0.05).3.Ⅲ、Ⅳ组MDA水平显著高于Ⅰ、Ⅱ组(Pa＜0.05),Ⅳ组MDA水平较Ⅲ组明显下降(P＜0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组SOD、GSH-Px比较无明显差异,使用丹参后其水平上升,与Ⅲ组比较有统计学差异(P＜0.05).结论 丹参可部分抑制高氧所致的慢性BPD,其机制可能是通过抗氧自由基、减轻肺部炎性反应而发挥作用.     

�����������������������˵�Ӱ��

目的探讨自由基清除剂依达拉奉(edaravone)对新生鼠高氧肺损伤的治疗作用,为临床防治新生儿高氧肺损伤提供理论依据。方法96只新生鼠随机分组后分别进行高浓度氧(氧体积分数>0.90,简称高氧)、高氧+依达拉奉处理,并设相应对照。于实验3d、7d后检测各组新生鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavagefluid,BALF)中丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)活性、TNF-α及肺核因子-κB(NF-κB)水平的变化,,并观察肺组织病理改变。结果高氧3d后BALF中MDA、TNF-α含量明显高于正常对照组(P均<0.01),SOD活性下降(P<0.01),肺组织NF-κB活性上升(P<0.01),病理切片见明显炎性表现;高氧7d后,上述改变进一步加重。依达拉奉干预高氧损伤3d、7d时BALF中MDA、TNF-α含量和肺NF-κB染色强度均显著降低(P均<0.05),SOD活性上升(P<0.05),肺组织炎性表现较轻。结论高氧可导致新生鼠的急性肺损伤,其机制可能与机体氧化/抗氧化失衡和炎症反应有关。依达拉奉对新生鼠高氧肺损伤发挥积极的保护作用。     

激素对新生鼠高氧肺损伤及血清前列腺素E2、白三烯B4的影响

目的研究产前与产后激素应用对新生鼠高氧肺损伤及血清前列腺素E2、白三烯B4的影响。方法将新生鼠分为产前激素+高氧组、生后激素+高氧组、高氧对照组与空气对照组,每组14只,分别置高氧或空气中14 d。观察指标包括新生鼠病死率、体质量、肺系数、辐射状肺泡计数(RAC)、组织病理变化。原位末端标记法(TUNEL)检测肺泡细胞凋亡指数(AI),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中PGE2、LTB4值。结果三组置高氧中新生鼠存活率与体质量均明显低于空气对照组(P均<0.05),肺系数则明显高于空气对照组(P<0.05),但三组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。置高氧中三组新生鼠肺组织病理变化明显。空气对照组的RAC最高,两组激素组RAC高于高氧对照组(P<0.05),而使用激素的两组间差异无统计学意义(P>0.05)。空气对照组肺组织中可见少数凋亡细胞,AI低于其余各组(P<0.05)。高氧对照组AI高于激素组(P<0.05),激素组间两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。四组中空气对照组的PGE2最低(P<0.05),高氧三组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。空气对照组LTB4也最低(P<0.05)...     

糖皮质激素对高氧诱导新生大鼠肺组织RAGE-NF-κB通路的影响

目的探讨RAGE-NF-κB信号通路在新生大鼠高氧肺损伤过程中的变化,以及糖皮质激素对其的影响。方法 24只新生大鼠随机分为空气对照组、高氧模型组和激素干预组。模型组新生大鼠于生后即暴露于95%氧气浓度环境中1周,空气对照组大鼠生后仅暴露于同室内空气中饲养7 d,激素干预组于造模后行尾静脉注射地塞米松(1 mg/kg),隔天1次,共3次。日龄13 d时处死全部大鼠,RT-PCR检测各组肺组织RAGE m RNA及NF-κB m RNA的表达;Western blot检测RAGE及NF-κB蛋白水平;ELISA法检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和s RAGE含量;苏木精-伊红染色后行肺组织病理学评估。结果与对照组和激素干预组相比,高氧模型组肺组织RAGE、NF-κB的m RNA和蛋白表达水平均明显增高(均P0.05),血清中s RAGE含量明显升高(P0.01),BALF中s RAGE含量下降(P0.01);与对照组相比,激素干预组肺组织RAGE、NF-κB的m RNA和蛋白表达水平明显升高(P0.05),血清中s RAGE含量明显升高(P0.05),而BALF中s RAGE含量明显下降(P0.05)。结论 RAGE-NF-κB通路在高氧诱导的新生大鼠肺损伤中活化增强,糖皮质激素可能通过下调RAGE-NF-κB信号通路对高氧肺损伤发挥保护作用。     

角质细胞生长因子对吸入高体积分数氧新生大鼠肺组织的影响

目的 研究角质细胞生长因子(KGF)对高体积分数氧(高氧)暴露下新生大鼠肺组织结构的影响.方法 将新生的108只SD大鼠随机分为空气组、高氧组和KGF干预组,每组36只.每组又分为3d、7d、14d3个亚组.高氧组、KGF干预组大鼠持续暴露于氧体积分数＞950mL·L-1氧箱中,KGF干预组于吸氧同时背部皮下注射重组人角质细胞生长因子(rhKGF)1mg·d-1,连用3d后改为0.5mg·d-1直至实验结束.空气组和高氧组给予等量9g·L-1盐水.空气组大鼠呼吸空气.3d、7d、14d亚组在相应时间点取肺组织,通过肉眼及光镜下观察其肺组织病理学变化,并作肺泡辐射状计数(RAC).结果 空气组7d时出现肺泡化,14d时肺泡化成熟.高氧组时小血管扩张充血,肺间质细胞增多,7d时肺间隔变厚,肺泡腔大小不一,肺泡数减少,14d时肺泡数明显减少,肺泡大小不等,出现明显纤维化.KGF干预组7d时可见肺泡结构较完整,14d时少数肺泡融合,间质细胞增生不严重.高氧组3d时RAC与空气组相比差异无统计学意义(P＞0.05),7d、14d时RAC与空气组相比差异均有统计学意义(Pa＞0.01).KGF干预组各时间点RAC与空气组比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).结论 长时间暴露于高氧环境,可导致新生大鼠肺组织发育障碍,但KGF能促进肺泡的发育,减轻纤维化,可有效减轻高氧吸入对新生大鼠肺组织的损伤.     

高氧对新生大鼠肺血管发育及肺组织血管生成素1表达的影响

目的 观察持续吸入85％氧气对新生大鼠肺血管发育和肺组织血管生成素1(Ang-1)表达的影响,探讨高氧肺损伤新生大鼠的肺血管发育情况及可能的发生机制.方法 将96只新生SD大鼠在生后6h内,随机分为高氧组和空气组,高氧组将大鼠置于自制密闭氧箱,FiO2=0.85.在实验3、7、14d每组各随机取16只处死,采集标本.采用HE染色进行肺组织形态学分析,放射状肺泡计数评价肺泡化程度,肺动脉钡剂造影及肺动脉密度检测评价肺血管的发育,免疫组织化学法检测肺组织Ang-1的表达,荧光定量PCR和Western blot技术检测肺组织Ang-1的mRNA和蛋白表达水平.结果 (1)新生大鼠高氧暴露14 d,肺组织的病理表现与早产儿支气管肺发育不良(BPD)的病理表现相似.(2)高氧组7 d RAC值显著低于空气组[(10.55±0.13):(11.74 ±0.19),P＜0.05],在14d时差异更显著[(12.47±0.05):( 15.03±0.16),P＜0.01].(3)肺动脉钡剂造影显示,高氧组14 d大鼠肺动脉主干变细,肺小动脉显影减少,肺动脉密度显著低于空气组[(3.55±0.09):(6.03±0.16),P＜0.05].(4)免疫组化染色显示,高氧组7d和14 d,肺组织Ang-1的表达均显著低于同时间点空气组[ (4.27±0.34):(3.10 ±0.29),P＜0.05,(5.65±0.49)∶(3.21±0.28),P＜0.01].(5)荧光定量PCR及Western blot结果显示,高氧组7d和14 d,Ang-1的mRNA水平显著低于空气组[(0.85±0.14)∶(0.44±0.21),P＜0.05,(0.87±0.24)∶(0.24±0.05),P＜0.01],Ang-1的蛋白水平也显著低于空气组[(0.88±0.31)∶(0.41 ±0.12),P＜0.05,(0.90 ±0.29):(0.21 ±0.06),P＜0.01].结论 持续吸入高浓度氧导致新生大鼠的肺血管发育障碍,Ang-1的表达下调可能参与了早产儿BPD血管发育受阻的发生机制.     

高温相关丝氨酸蛋白酶A2抑制剂I对早产鼠高体积分数氧肺损伤的保护作用

目的 研究高温相关丝氨酸蛋白酶A2(Omi/HtrA2)特异性抑制剂(Ucf-101)对早产鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤的保护作用.方法 72只新生早产Wistar大鼠在出生12 h随机分为对照组、高氧组、高氧+Ucg101组,每组24只.高氧+Ucf-101组新生大鼠高氧暴露前10 min,按1.5μmol·kg-1腹腔注射Ucf-101,对照组和高氧组新生大鼠在相同时点注射等量的9g·L-1盐水;高氧组和高氧+ Ucf-101组新生大鼠持续暴露于950 mL·L-1氧气中,对照组新生大鼠置于同一室内常压空气中.分别于暴露1d、3d、7 d时,每组取动物8只,留取肺组织标本.左肺制作石蜡切片,采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测Omi/HtrA2、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)在各组肺组织的表达;采用原位末端标记法检测肺细胞凋亡情况.右肺制作冷冻切片,采用间接免疫荧光双染色法,在激光共聚焦显微镜下观察Omi/HtrA2在细胞内的转位.结果 1.高氧组和高氧+ Ucf-101组肺组织Omi/HtrA2、Caspase-9随着高氧暴露时间延长表达量呈增高趋势,与对照组比较差异有统计学意义(Pa＜0.05);高氧+ Ucf-101组与高氧组比较,Omi/HtrA2、Caspase-9在同一时间点表达量明显降低,差异均有统计学意义(Pa＜0.01).高氧组和高氧+ Ucf-101组XIAP较对照组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.01);高氧+Ucf-101组各时间点XIAP的表达量均显著高于高氧组,差异有统计学意义(P＜0.01).2.与对照组比较,高氧组和高氧+ Ucf-101组肺组织细胞凋亡率明显增加(P＜0.01);高氧+ Ucf-101组与高氧组比较,同一时间点凋亡率显著减低(P＜0.01).3.高氧组和高氧+Ucf-101组肺组织Omi/HtrA2胞内转位率明显高于对照组(P＜0.0t),高氧+Ucf-101组肺组织Omi/HtrA2转位率较同一时间点的高氧组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 Ucf-101可能通过减少Omi/HtrA2在肺细胞胞质中的表达和线粒体的转位而抑制肺细胞凋亡,减轻早产鼠高氧肺损伤.