胰腺癌组织miRNA let-7a与HMGA2的表达及血清miRNA let-7a水平对胰腺癌的诊断价值

  目的  探讨胰腺癌组织中miRNA let-7a、高迁移率族蛋白2（high mobility group A2,HMGA2）的表达情况及血清miRNA let-7a水平在胰腺癌中的诊断价值。  方法  回顾性收集我科2014年1月?2019月1月行手术治疗的60例胰腺癌患者术中获得的新鲜胰腺导管腺癌组织及癌旁正常胰腺组织,同时收集胰腺癌患者手术前后血清标本,并收集同期于我院体检的60例体检结果正常者的血清标本作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测健康体检者及患者血清标本miRNA let-7a表达,癌组织、癌旁正常组织miRNA let-7a和HMGA 2 mRNA表达,Western blot法检测患者癌组织、癌旁正常组织HMGA2蛋白的表达。分析血清miRNA let-7a水平,癌组织miRNA let-7a、HMGA2 mRNA 表达与胰腺癌临床病理特征的关联,并用受试者工作特征曲线分析术前血清miRNA let-7a水平对胰腺癌的诊断价值。  结果  与癌旁正常组织相比,胰腺癌组织中miRNA let-7a表达水平下降（t=20.291,P<0.01）,HMGA2 mRNA表达上升（t=46.681,P<0.01）;癌组织HMGA2蛋白表达较癌旁正常组织增高（t=22.973,P<0.01）。miRNA let-7a在胰腺癌患者血清中的表达较健康对照者降低（t=24.854,P<0.01）;在胰腺癌患者术后1周血清中miRNA let-7a相对表达量较术前下降（t=6.885,P<0.01）;癌组织与术前血清中miRNA let-7a表达量呈正相关（r=0.411,P=0.000）。胰腺癌中miRNA let-7a、HMGA2 mRNA水平在不同TNM分期及有无淋巴结转移间差异均有统计学意义(P<0.05)。以术前血清miRNA let-7a诊断胰腺癌的曲线下面积为0.823,95%置信区间为0.665~0.917,取0.614为最佳临界值,对应的灵敏度为82.3%,特异度为74.1%。  结论  胰腺癌组织和血清miRNA let-7a均出现下调,可能通过调控HMGA2的表达参与肿瘤的侵袭和转移;血清miRNA let-7a水平可为胰腺癌的诊断及术后病情监测提供一定的参考。     

细胞周期蛋白25A在非小细胞肺癌中的表达及与Let-7关系

目的 明确细胞周期蛋白25A（CDC25A）在NSCLC组织中的表达及与临床病理特征的关系,并探讨其与miRNA let-7a1、let-7c表达的相关性。方法 收集53例肺组织手术标本,其中包括NSCLC组织44例,收集其癌组织和癌旁正常组织（病理证实）,和良性肺疾病组织9例。免疫组化Elivision法检测CDC25A蛋白的表达;用Trizol法提取总RNA,采用荧光定量RT-PCR检测CDC25A mRNA的表达,加尾法荧光定量RT-PCR检测let-7a1和let-7c mRNA的表达。结果 CDC25A蛋白表达的阳性率在NSCLC组织明显高于癌旁正常组织和良性肺疾病组织（P<0.05）。NSCLC组织中CDC25A蛋白的表达与年龄、性别、病理类型、肿瘤分化程度、临床分期无关（P>0.05）,与吸烟、淋巴结转移相关（P<0.05）。CDC25A mRNA在NSCLC组织中的表达量明显高于癌旁正常组织和良性肺疾病组织（F=6.33,P<0.05）,在癌旁正常组织和良性肺疾病组织中表达无明显差异（P>0.05）。Pearson 相关分析显示CDC25A与let-7c在NSCLC组织和癌旁正常组织中表达均呈明显负相关（r 癌组织=-0.42,r 癌旁正常组织=-0.40）,与let-7a1之间无明显相关。结论 CDC25A在NSCLC组织表达水平明显增高,且与let-7c表达呈明显负相关,推测CDC25A可能是let-7c的下游靶基因。     

microRNA let-7在COPD稳定期男性患者血清中的表达及临床意义

目的：探讨microRNA let-7在慢性阻塞性肺疾病（COPD）稳定期男性患者血清中的表达及其临床意义。方法：选取160例COPD稳定期患者和100例健康志愿者,收集一般临床资料,采集血浆样本并4℃离心提取血清;qPCR检测各组血清中let-7a、let-7c、let-7d相对表达水平;对let-7与肺通气功能进行相关性分析;ROC曲线分析let-7对COPD的诊断价值。结果：COPD患者血清let-7a、let-7c、let-7d表达量明显低于不吸烟对照组和吸烟对照组（P<0.05）;GOLD分组之间血清let-7表达量无明显差异（P>0.05）;吸烟对照组血清let-7的表达量低于不吸烟对照组,但差异无统计学意义（P>0.05）。经Pearson分析,血清let-7表达量与FEV1/FVC、MEF75%pred、MEF50%pred、MEF25%pred、MMEF75/25%pred均呈正相关（P<0.05）,其中let-7与MMEF75/25%pred的相关性最强;let-7c与FEV1%pred呈正相关（P<0.05）,而let-7a、let-...     

let-7和HMGA2在肺癌发生发展中作用的Meta分析

目的：采用Meta分析方法评价let-7低表达在肺癌预后中的作用及高迁移率旋蛋白A2（HMGA2）表达与肺癌关系的临床意义。方法：计算机检索PubMed、Web of Science、Medline、Cochrane Library、Google、Scholar、CNKI、CBM、万方和维普等数据库,收集关于let-7低表达与肺癌预后及HMGA2与肺癌发生发展的关联性研究,采用StataSE12.0软件进行Meta分析。结果：共纳入10篇关于let-7低表达与肺癌预后关系的文献用于Meta分析,均为非小细胞肺癌患者。let-7低表达预示着肺癌患者较差的总生存率,风险比（HR）的合并值为1.55（95% CI：1.16~2.09,P<0.05）。共纳入9篇关于HMGA2表达与非小细胞肺癌发生发展关系的病例对照研究用于Meta分析,肺癌组织中HMGA2表达阳性率明显高于癌旁正常组织（OR=5.92,95% CI：3.96~8.85,P=0.000）。HMGA2在肺癌组织的表达与肺癌TNM分期、有无淋巴结转移有明显关联（OR=0.26,95% CI：0.16~0.41,P<0.05;OR=0.29,95% CI：0.12~0.71,P<0.05）。结论：肺癌患者中let-7低表达是肺癌患者预后的危险因素。HMGA2表达阳性率越高,肺癌发生的概率就越高,越具有侵袭性。     

PR-SET7 在食管癌中表达及其临床意义

目的 探讨赖氨酸甲基转移酶PR-SET7 在食管癌组织中的表达及其与临床特征的相关性。方法 应用免疫组织化学法检测武警江苏省总队医院2010 年6 月-2011 年2 月32 例食管癌患者食管癌组织和癌旁组织中PR-SET7 的表达，并探讨PR-SET7 的表达量与患者性别、年龄、细胞分化程度、TNM 分期及淋巴结转移等临床特征的相关性。结果 32 例食管癌组织中均检测到PR-SET7 的表达，癌组织中PRSET7的表达强于癌旁组织，高表达率为81.25%，癌旁组织中以弱表达为主，高表达率为15.62％（P <0.05）。PR-SET7 主要表达在细胞核，食管癌中的表达与肿瘤细胞分化程度、TNM 分期及淋巴结转移相关（P <0.05），与患者的性别、年龄无相关（P >0.05）。结论 食管癌发生与发展过程中PR-SET7 异常表达，其表达水平可能与肿瘤的进展、转移及预后密切相关。     

miRNA let-7a靶向抑制ACVR1B表达

目的：探讨miRNA let-7a对ACVR1B表达的影响。方法：生物信息学分析表明activin receptor type 1B（ACVR1B）是一个let-7a的潜在靶基因。构建ACVR1B 3’UTR野生型（ACVR1B 3’UTR-WT）和ACVR1B 3’UTR突变型（ACVR1B 3’UTR-MUT）双荧光素酶报告载体,分别与let-7a模拟物（let-7a mimic）或let-7a阴性对照（let-7a NC）共同转染HEK293T细胞,通过双荧光素酶报告系统检测各组细胞的荧光素酶活性。分别转染let-7a mimic、let-7a inhibitor和let-7a NC至HEK293T细胞,采用qRT-PCR和Western blot分别检测ACVR1B的mRNA和蛋白表达水平。结果：ACVR1B 3’UTR含有let-7a潜在的高度保守的结合靶点（77～83位点）。在HEK293T细胞中共转染ACVR1B 3’UTR-WT报告载体的let-7a mimic组比let-7a NC组荧光素酶活性组明显降低（P＜0.05）;而共转染ACVR1B 3’UTR-MUT报告载体的let-7a mimic与let-7a NC组其荧光素酶活性差异无统计学意义（P＞0.05）。在HEK293T细胞中let-7a mimic转染组中ACVR1B的mRNA和蛋白水平均低于let-7a NC组和let-7a inhibitor组（P＜0.05）。结论：ACVR1B是let-7a潜在调控的靶基因,miRNA let-7a可以直接抑制HEK293T细胞中ACVR1B基因的表达。     

Livin、CD44v6、E-钙黏蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的 检测非小细胞肺癌（NSCLC）癌组织和癌旁组织中Livin、CD44v6、E-钙黏蛋白（E-cad）的表达,探讨NSCLC组织Livin、CD44v6、E-cad表达的临床意义.方法 运用免疫组织化学染色法检测71例NSCLC组织、癌旁组织及20例良性肺组织标本中Livin、CD44v6、E-cad的表达情况,分析其与肺癌分期、分化、病理类型及淋巴结转移之间的关系及相关性.结果 （1）肺癌组织中Livin阳性表达率明显增高,与癌旁组织及良性肺组织比较差异有统计学意义（P＜0.01）,癌旁组织中Livin阳性表达率较良性肺组织中增高,但差异无统计学意义（P ＞0.05）; Livin在Ⅲ期肺癌中表达较Ⅰ、Ⅱ期明显增高,其表达与肺癌TNM分期呈正相关;淋巴结转移组Livin阳性率86.2%（25/29）,高于无淋巴结转移组23.8%（10/42）,两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.（2）CD44v6在肺癌组织中表达增高,与癌旁组织及良性肺组织比较差异有统计学意义（P＜0.01）; CD44v6表达与临床病理分期（TNM）呈正相关（P＜0.01）.淋巴结转移组CD44v6阳性率96.6%（28/29）,高于无淋巴结转移组[33.3%（14/42）],两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）;CD44v6的表达与肺癌的分化程度呈负相关（P＜0.05）.（3）E-cad在肺癌组织中表达降低,与癌旁组织及良性肺组织相比差异有统计学意义（P＜0.01）.E-cad的表达与临床病理分期、淋巴结转移、分化程度无关（均P ＞0.05）.（4）Livin与CD44v6在肺癌组织均有较高表达,Livin阳性表达组中CD44v6的表达强度较阴性组明显增高,Livin与CD44v6表达呈正相关（P＜0.01）.Livin与E-cad在肺癌组织中的表达无相关性.结论 Livin、CD44v6在NSCLC组织中高表达、E-cad在NSCLC组织中表达降低,Livin、CD44v6与NSCLC临床病理分期、淋巴结转移的相关,提示三者在NSCLC的发病过程中可能起重要作用.CD44v6 与Livin在肺癌组织中的表达呈正相关,推测两者可能共同参与了NSCLC的疾病过程,其确切机制有待于进一步研究.     

Survivin在肺癌中表达意义及其与Fas/FasL表达的关系

目的：检测肺癌组织中Survivin和Fas/FasL的表达水平及其相互关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测86例肺癌组织、30例癌旁肺组织、11例肺良性病变组织中Survivin、Fas、FasL基因的表达情况。结果：Survivin、Fas及FasL在肺癌组织阳性表达与在癌旁肺组织阳性及良性病变组织中表达差异有统计学意义（P〈0.05）;Survivin在肺癌中表达与TNM分期、淋巴结转移、病理学分级相关,差异有统计学意义（P〈0.05）;Fas表达与病理学分级相关（P〈0.05）;FasL在肺癌中表达与TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0.05）;肺癌组织中Survivin、Fas、FasL表达无相关性（P〉0.05）。结论：Survivin在肺癌组织中高表达,其阳性表达率与TNM分期、淋巴结转移和细胞分化程度相关,表明Survivin参与肺癌的发生、发展,过表达Survivin的肺癌患者可能预后不良;Survivin表达与Fas、FasL表达无相关性,表明两条凋亡路径可能没有交叉点。     

α7-nAChR在肺癌中的表达和临床意义

目的 :检测α7-烟碱型乙酰胆碱受体(α7-niccotinic acetylcholine receptor,α7-n ACh R)在肺癌组织中的表达,探讨其与临床病理学特征的关系及意义。方法:采用免疫组织化学染色法检测130例肺癌组织及40例癌旁肺组织中α7-nAChR表达,并分析α7-nAChR表达与吸烟、病理分型、分化程度、临床分期、淋巴结转移等关系。结果:肺癌组织α7-nAChR阳性表达率70.77%,癌旁组织阳性率37.50%,肺癌组织中α7-n ACh R阳性表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001)。肺癌组织中α7-nAChR的表达水平与肺癌患者吸烟、临床分期、分化程度相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理分型、淋巴结转移之间的关系无统计学意义(P>0.05)。结论:α7-nAChR高表达在肺癌的发生中起一定作用,可为肺癌的α7-nAChR靶向治疗提供一定依据。     

非小细胞肺癌患者Bcl-2蛋白的表达及意义

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者Bcl-2蛋白的表达情况及其意义。方法应用组织芯片、免疫组化技术检测208例NSCLC患者的肿瘤组织（肺癌组）、150例癌旁组织（癌旁组织组）以及17例良性肺疾病（良性肺组织组）肺组织中的Bcl-2蛋白的表达情况。结果肺癌组Bcl-2蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织组及良性肺组织组（P〈0.01）;Bcl-2蛋白表达与NSCLC临床分期及有无淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论 Bcl-2蛋白在NSCLC组织中高表达,与NSCLC的发生发展有关,可用于NSCLC的早期诊断;Bcl-2蛋白表达与临床分期及淋巴结转移有关。     

Bmi-1蛋白在肺癌组织中的表达及临床意义

目的研究原癌基因鼠类淋巴瘤滤过性病毒致癌基因（Bmi-1）在人非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达,探讨Bmi-1作为新的肿瘤标志物在NSCLC临床诊断、分期及预后评估中的意义。方法应用免疫组化方法检测48例肺癌组织、29例癌旁肺组织及13例肺良性病变组织中Bmi-1蛋白的表达情况,并分析与NSCLC临床病理特征之间的关系。结果Bmi-1水平的表达在NSCLC组织中明显高于肺良性病变（P〈0．05）,而在肺良性病变组织及癌旁组织之间无明显差异（P〉0．05）。Bmi-1在鳞癌和腺癌组织中的表达并无明显差异（P〉0．05）;在低分化肺癌中的表达明显高于中分化和高分化肺癌（均P〈0．05）,但中分化和高分化肺癌间无明显差异（P〉0.05）;Ⅲ、Ⅳ期肺癌标本中Bmi-1阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期肺癌,差异有统计学意义（均P〈0．05）,但Ⅰ、Ⅱ期肺癌间无明显差异（P〉0.05）;Bmi-1在有淋巴结转移的肺癌患者中阳性表达率明显高于无淋巴结转移患者（P〈0．05）。结论Bmi-1在肺癌组织中表达增高,并与肺癌的分期、淋巴结转移相关;Bmi-1可作为评估肺癌患者病变范围和预后的标志物。     

结直肠癌组织中同源异型盒基因B7蛋白的表达及临床意义

目的 探讨同源异型盒基因B7(HOXB7)蛋白在结直肠癌中的表达及其与患者临床病理因素和预后的关系.方法 回顾性分析结直肠癌患者87例,采用RT-PCR法和免疫组织化学法分别检测结直肠癌组织中HOXB7 mRNA和HOXB7蛋白的表达,分析其表达与患者临床病理参数和预后的相关性.结果 HOXB7 mRNA在结直肠癌组织中的相对表达量为(42.4±16.3),显著高于癌旁正常组织的(19.4±7.6),差异有统计学意义(P＜0.05);HOXB7蛋白在结直肠癌组织中表达的阳性率为73.9％,显著高于癌旁正常组织的10.3％ (P＜0.05);HOXB7蛋白表达与患者TNM分期、淋巴结转移和远处转移有显著相关性(P＜0.05),且HOXB7蛋白阳性表达的患者具有更差的预后.结论 HOXB7蛋白在结直肠癌组织中表达上调,其高表达与结直肠癌患者的临床病理因素和预后相关.     

食管癌组织MTA1蛋白表达与患者临床病理特征及3年生存率的关系

目的 探讨食管癌组织中肿瘤转移相关蛋白1(MTA1)的表达与临床病理特征、3年生存卒的关系.方法 选取2010年1月至2012年12月该院病理科收集的96例食管癌患者术后病理标本、符合纳入标准的癌旁组织标本40例采用免疫组织化学染色,分析MTA1蛋白表达与患者临床病理特征及远期生存率的关系.结果 食管癌组织中MTA1蛋白阳性表达率(73.96％)显著高于癌旁组织的2.50％(P＜0.05);食管癌组织中MTA1蛋白阳性表达主要与患者的TNM分期、淋巴结转移具有显著的相关性(P＜o.05);食管癌组织中MTA1蛋白阳性表达患者的3年生存率(33.80％)显著低于阴性患者(60.00％)(P＜0.05);食管癌患者的远期生存率与TNM分期、MTA1蛋白表达具有显著的关系(OR=1.638、1.433,P＜0.05).结论 食管癌组织中MTA1蛋白高表达,并且与患者的TNM分期、淋巴结转移有关,MTA1蛋白高表达是食管癌患者预后的独立危险因素.     

非小细胞肺癌组织中脆性组氨酸三联体和PCNA的表达

目的:观察人非小细胞肺癌组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.方法:应用免疫组织化学(SP法)检测80例非小细胞肺癌和40例肺良性病变组织中FHIT和PCNA的表达.结果:非小细胞肺癌组织中FHIT表达阳性率(57.5%)低于肺良性病变组织(90.0%)(P＜0.01);腺癌组织中FHIT的表达阳性率高于鳞癌,且表达阳性率与鳞癌分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关(P＜0.05);非小细胞肺癌组织中FHIT表达阳性率与患者是否有吸烟史有相关性(P＜0.05);非小细胞肺癌组织中PCNA表达阳性率(60.0%)高于肺良性病变组织(10.0%)(P＜0.01);FHIT表达阳性率与淋巴结转移、TNM分期有关(P＜0.05);非小细胞肺癌组织中FHIT和PCNA表达呈负相关(rs=-0.547,P＜0.01).结论:FHIT表达下调是肿瘤细胞增殖活跃的分子基础之一,FHIT与非小细胞肺癌的发生、发展关系密切.     

颤抖蛋白异构体7在乳腺癌中的表达及其与患者预后的关系

目的: 探讨乳腺癌组织中颤抖蛋白异构体7(Quaking isoform 7,QKI-7)表达及临床意义。方法: 采用免疫组织化学方法检测QKI-7、P53和Ki-67在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达和胞内定位;对肿瘤组织中QKI-7表达与患者临床病理参数、随访资料、P53及Ki-67的表达进行相关性分析。结果： 肿瘤组织中QKI-7阳性表达率明显低于癌旁组织(χ2=73.378,P<0.05)。乳腺癌组织中QKI-7表达与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期及孕激素受体相关(P均<0.05)。QKI-7阴性表达患者的累计生存率明显低于QKI-7阳性患者;乳腺癌组织中QKI-7表达与P53表达呈正相关,而与Ki-67表达呈负相关(P均＜0.05)。结论： 乳腺癌组织中QKI-7呈低表达,是患者预后不良的标志。     

紧密连接蛋白1和血管内皮生长因子C蛋白与大肠癌的关系研究

目的：探讨紧密连接蛋白1（Claudin‐1）与血管内皮生长因子C（VEGF‐C）在大肠癌组织中的表达情况及二者间的相互关系。方法对该院病理科收集的50例大肠癌组织、癌旁组织及50例正常大肠组织采用免疫组织化学S P法检测,根据患者的年龄、性别、是否发生淋巴结转移、浸润深度、临床分期进行综合比较,分析Claudin‐1和VEGF‐C蛋白在大肠癌组织中表达的相关性。结果大肠癌组织的Claudin‐1、VEGF‐C阳性率显著高于癌旁组织和正常大肠组织（χ2＝32．270,P＝0．000;χ2＝41．209,P＝0．000）;癌旁组织的 Claudin‐1、VEGF‐C阳性率显著高于正常大肠组织（χ2＝7．294,P＝0．007;χ2＝5．741,P＝0．017）。大肠癌组织Claudin‐1的表达与分化程度、浸润程度、TNM 分期、淋巴结转移具有密切关系（P＜0．05）,大肠癌组织VEGF‐C的表达与浸润程度、TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小具有密切关系（P＜0．05）。大肠癌Claudin‐1、VEGF‐C表达具有显著的正相关关系（χ2＝10．953,P＝0．001,r＝0．468）。结论大肠癌组织的Claudin‐1、VEGF‐C表达显著高于癌旁组织和正常大肠组织,大肠癌组织的Claudin‐1、VEGF‐C表达与临床分期等因素具有一定的关系。     

非小细胞肺癌组织中磷酸化AKT的表达及意义

目地探讨磷酸化AKT（p-AKT）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测52例NSCLC组织和18例正常肺组织中p-AKT的表达。结果p-AKT在NSCLC组织中的表达阳性率为53.8%,高于正常肺组织中表达0.0（P〈0.05）。NSCLC组织中p-AKT的表达与患者年龄、性别、吸烟、组织学类型、肿瘤组织分化程度及有无淋巴结转移、临床分期无关（P〉0.05）。结论NSCLC组织中p-AKT高表达,PI3K/AKT信号传导通路参与了NSCLC的发生发展。