快速筛选金钱松内生真菌抗真菌活性的研究

目的：筛选金钱松内生真菌抗病源真菌的活性菌株。方法：首次对金钱松内生真菌进行了分离,以稻瘟霉PyricuLaria oryza P-2b为筛选模型,采用微量稀释法筛选金钱松内生真菌抗真菌活性,研究其抗病源真菌的能力。结果：金钱松内存在着大量且具有抗稻瘟霉P-2b活性的内生真菌,占内生真菌总数的44.8％。其中JJ314,JJ323可诱导稻瘟霉P-2b菌丝念珠状、膨大变形,JJ324可抑制孢子萌发,它们对红色毛癣菌Trichophyton rubrum、新型隐球菌Cryptococcus neoformans、白色念珠菌Candida albicans等病源真菌都具有强烈的活性。结论：金钱松内生真菌是潜在的抗真菌药物资源。     

内生真菌在中药现代化中的作用

中药现代化是中药走出国门、为国际所认可和接受的必要基础,是振兴传统中药产业的必经之路。在中药现代化进程中存在着各种挑战:重金属超标、有效成分含量低、创新性弱、中药资源利用与保护间的矛盾等。如何应用生命科学的新理论、新技术来解决这些问题已成为当务之急。近年研究发现,内生真菌在药用植物生长发育等过程中发挥着不可替代的积极作用,对中药材生产的质和量影响较大。故该文对内生真菌在揭示药用植物道地性、中药材栽培种植、资源保护和开发利用等方面的作用进行阐述,探讨其在中药现代化中的应用前景,以期为促进中药现代化的发展提供新思路、新动力。     

地黄内生真菌促生作用的初步研究

目的:筛选出促进地黄生长的内生真菌,并初步研究其促生作用.方法:通过4株分离自地黄的内生真菌与地,黄无菌苗及地黄盆栽苗的共生实验,以苗重,叶绿素含量和根冠比为指标筛选出促进地黄生长的内生真菌,通过PC比色法测定真菌分泌IAA的能力并研究内生真菌的促生作用.结果:通过共生实验,发现4株真菌中,Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ显著促进盆栽地黄生长(P<0.05),与该菌共生的地黄无菌苗平均增长量是对照组正常生长地黄的1.25倍,并显著提高叶片中的叶绿素含量(P<0.01).通过salkowski比色法表明Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ分泌IAA,LAA浓度的峰值约可达到5.712 mg·L-1.结论:Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ促进地黄生长.     

肉苁蓉内生真菌多样性研究

目的:研究肉苁蓉内生真菌菌群的多样性.方法:分别于春、秋季在宁夏和内蒙古两地采集健康的肉苁蓉进行内生真菌的分离,对分离的内生真菌采用玻片法和胶带粘贴法进行分类鉴定.结果与结论:共分离得到618株内生真菌菌株,其中453株为产孢菌株,鉴定为22个属,占分离菌株总数的73.30%,以镰孢属Fusarium(25.89%)和枝顶孢霉属Ammonium(16.99%)为优势种群.肉苁蓉内生真菌在数量和种类上存在极其丰富的多样性,同时在部位、地区以及季节存在一定的差异性.     

铁皮石斛内生真菌研究进展

研究表明植物内生真菌与植物之间形成互利共生的关系,具有促进植物生长次生代谢产物积累等功能。本文简要综述了近年来铁皮石斛内生真菌的分离、多样性、促生作用、诱导子效应及生物活性等方面的进展,为今后的相关研究提供参考。     

槲寄生内生真菌发酵产物抗肿瘤作用的初步研究

目的:初步研究槲寄生内生真菌发酵产物的抗肿瘤药理作用。方法:从槲寄生植株中分离出内生真菌,采用MTT法对JF、A1和G6的发酵产物进行了抗肿瘤药理活性研究。结果:从槲寄生中分离到JF、A1、G6等11株内生真菌。JF、A1和G6的发酵产物都具有一定的抗肿瘤活性,其中JF、G6对人胃癌细胞SGC-7901抑制作用较强;G6、A1对人肝癌细胞SMMC-7721抑制作用较强,且随发酵天数的增加作用明显加强;然而三者发酵产物对小鼠脾淋巴细胞增殖没有明显促进作用。结论:槲寄生内生真菌发酵产物同槲寄生一样具有抗肿瘤作用,值得进一步深入研究。     

川芎内生真菌种群稳定性研究

目的 探讨四川产区川芎内生真菌种群组成情况.方法 采用纯培养法对川芎根茎中的内生真菌进行分类鉴定.结果 从4个产地的川芎中共分离得到内生真菌64株,经显微鉴定为1纲、3目、4科、17属;两年分离的内生真菌共有7个,其菌株数量占总菌株数的81.3%.结论 四川产区川芎内生真菌种群结构基本稳定.     

一株番荔枝内生真菌的化学成分研究

目的:研究一株来源于海南刺果番荔枝、能够抑制肿瘤细胞增殖的内生真菌F-31(黑团孢霉,Periconiasp.)的化学成分。方法:采用改良PDA培养基,对内生真菌F-31进行放大培养,通过大孔树脂吸附、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱等色谱手段对其发酵液及菌丝中的化学成分进行分离,利用IR,MS,NMR等多种波谱手段鉴定获得的化合物的结构,应用MTT法评价化合物的体外抗肿瘤活性。结果:从内生真菌F-31的菌液乙酸乙酯层提取部分和菌丝部分提取物中分离并鉴定了6个化合物,分别为:5-(3-hydroxybutyl)furan-2(5H)-one(1),chloranthalactone E(2),5,7-二甲氧基-6-羟基香豆素(3),(1′R,2′R,3′S,4′R)-1,2,4-三唑核酸(4),L-亮氨酸(5),L-苯丙氨酸(6)。药理活性评价结果表明该6个化合物均无明显的体外抗肿瘤活性。结论:所得的化合物中,化合物1为新化合物。     

槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用

目的：研究槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用。方法：将槲寄生8个不同部位的组织进行外植体培养，分离纯化其内生真菌,利用CMC平板培养和DNS法筛选出具有较高纤维素酶活性的菌株；将槲寄生寄生的膨大部位进行组织切片，染色观察其内生真菌的组织分布。结果：槲寄生体内分布着丰富的真菌菌丝；从槲寄生各组织部位共分离出83株内生真菌；初步筛选得到38株可降解纤维素的菌株，19株降解纤维素能力较强，其中10株分离自槲寄生寄生的膨大部位。结论：内生真菌分泌纤维素酶可降解枫杨树的细胞壁及细胞间隙组织，协助槲寄生的吸器穿透枫杨树组织，帮助槲寄生在枫杨树上寄生。     

植物内生真菌活性成分的研究

综述了近5年来从植物内生真菌中发现的具有生物活性的化合物及其作用机制,为新药研发提供新的天然产物和研究思路。其结构类型主要有萜类、酮类、异香豆素类、醌类、生物碱类、苯并呋喃类、多肽类等,其生物学活性主要为抗菌、抗肿瘤、抗疟、抗结核、抗氧化等作用,就目前植物内生真菌次生代谢产物研究存在问题及今后研究方向进行讨论。     

金钱松化学成分及药理活性研究进展

金钱松Pseudolarix amabilis为松科(Pinaceae)金钱松属植物,为我国特有树种。其根皮或近根皮可作为药用,名为土荆皮,其性辛、温;归肺、脾经,具有杀虫、疗癣、止痒作用,可用于疥癣瘙痒,在我国民间作为药用已有悠久历史。迄今从金钱松分离出215个化合物,主要为二萜类、三萜类、倍半萜类、苯丙素类、黄酮类、甾醇类及其它化学成分。现代药理研究表明金钱松具有抗菌、抗肿瘤、抗生育、抗血管生成等活性。就金钱松的化学成分及药理作用方面进行总结,以期为金钱松深入的研究开发及利用提供科学的依据。     

白茅内生菌Chaetomium globosum的化学成分研究

采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和高效液相色谱等方法对白茅内生菌Chaetomium globosum固体发酵产物的化学成分进行分离纯化,获得9个化合物。利用高分辨质谱、核磁共振谱及文献比对的方法,将上述化合物分别鉴定为chaetoglobosin F(1),chaetoglobosin F_ex(2),chaetoglobosin E(3),cytoglobosin A(4),penochalasin C(5),isochaetoglobosin D(6),N-benzoylphenylalaninyl-N-benzoylphenylalaninate(7),尿嘧啶(8),5-甲基尿嘧啶(9),其中化合物 7 为首次从毛壳菌中分离得到。采用MTT法测定化合物的体外细胞毒活性,结果显示,化合物 1,3,4,5 对人宫颈癌细胞株HeLa具有明显的抑制活性,IC₅₀分别为99.43,23.77,97.92,86.25 μmol·L^-1,而阳性对照药顺铂的IC₅₀为24.33 μmol·L^-1。     

山麻黄内生菌Myrothecium roridum LLY的化学成分及其体外细胞毒活性研究

目的研究山麻黄Ephedra equisetina内生真菌Myrothecium roridum LLY固体发酵产物的化学成分,并进行体外细胞毒活性研究。方法采用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和高效液相色谱法进行分离纯化,利用高分辨质谱、核磁共振谱等方法鉴定化合物的结构。MTT法进行化合物体外细胞毒活性筛选,并采用流式细胞术和Western blotting法进行化合物细胞毒活性机制初步研究。结果从M.roridum LLY固体发酵产物中分离得到9个化合物,分别鉴定为吩嗪-1-羧酸(1)、1-甲氧基吩嗪(2)、N-methyl-1H-indole-2-carboxamaide(3)、甲基硫赭曲菌素(4)、ditryptophenaline(5)、7,8-二甲基异咯嗪(6)、deoxyleporin B(7)、尿嘧啶(8)和胸腺嘧啶(9)。MTT测定发现,化合物3对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖具有一定的抑制活性,其IC50值为38.0μg/m L,阳性对照顺铂的IC_(50)值为11.5μg/m L。细胞周期分析发现,化合物3可导致SMMC-7721细胞S期阻滞;Western blotting分析发现,化合物3可使SMMC-7721细胞中细胞周期负调控蛋白p27的表达上调,并且Cleaved-PARP蛋白被明显活化。结论化合物7为1个新的天然产物。化合物3能诱导SMMC-7721细胞凋亡;其对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用与S期细胞周期阻滞相关,并受到p27蛋白的调控。     

多花黄精内生菌群落结构多样性及其与有效成分含量相关性研究

目的 通过分析多花黄精Polygonatum cyrtonema内生菌菌群结构多样性及其与主要有效成分含量之间的相关性,探讨多花黄精内生菌对其药材品质的影响.方法 收集不同产地多花黄精样品,采用高通量测序对内生菌群落结构进行分析,并测定多糖、总皂苷等有效成分含量,通过双因素关联分析探究菌群多样性及其与有效成分之间的关系...     

豚草化学成分的研究

从豚草地上部分分得3个倍半萜内酯,鉴定为psilostachyin,psilostachyin B和psilostachyin C。药理实验表明3个化合物皆有一定的杀螺活性。     

元宝草共生菌球毛壳霉发酵产物的次级代谢产物研究

目的研究元宝草共生菌球毛壳霉Chaetomium globosum发酵产物的化学成分。方法采用正、反相硅胶柱色谱,凝胶sephadex LH-20柱色谱,高效液相色谱等方法进行系统分离纯化,根据化合物的理化性质,借助核磁共振等方法鉴定化合物的结构。结果从球毛壳霉发酵产物的乙醇提取液中共分离鉴定了8个化合物,分别鉴定为glolactone A(1)、4′-epialtenuene(2)、交链孢霉烯(3)、chaetomugilin Q(4)、chaetomugilin D(5)、chaetomugilide B(6)、chaetoglobosin Vb(7)、chaetoglobosin C(8)。结论化合物1为新化合物,命名为球毛壳内酯A,化合物2和3为首次从该菌中分离得到。     

半夏内生菌的分离与初步鉴定

目的:探讨半夏内生菌类群的多样性.方法:采用平板分离法分离半夏的内生真菌、细菌、放线菌,同时采用点植法、插片法和印片法对分离真菌菌株进行分类鉴定.结果:从多年生和一年生的半夏根茎叶样品中共获得内生菌84株,其中内生真菌48株、细菌31株、放线菌5株,内生真菌经形态观察分类鉴定为4科、15属.结论:半夏内生菌多样性丰富,同时不同部位内生菌的数量、种类及分布存在差异.     

黄芩道地性形成“逆境效应”的实验验证与展望

逆境效应是环境对道地药材形成影响的一种表现,其主要核心思想是环境饰变通过影响药用植物基因的表达,从而影响其次生代谢产物的形成和积累。该文以热河黄芩为研究对象,从19个产区采集野生黄芩,分析其活性成分的含量,并结合近10年1—12月的气候因子的变化,得出气候因子影响黄芩活性成分积累的结论。随后以黄芩悬浮细胞为材料,模拟环境变化,检测其代谢途径中相关酶和基因的变化,从分子水平上阐述"逆境效应"对黄芩药材品质的影响。该文介绍了道地药材形成"逆境效应"实验验证的前提条件、黄芩道地性形成"逆境效应"研究思路和研究进展,并对未来研究的发展趋势进行展望,以期为其他道地药材品质形成机制研究提供借鉴。     

喜树内生真菌Diaporthe sp.XZ-07中的2个新内酯及其抑制肿瘤活性研究

对1株喜树内生真菌Diaporthe sp.XZ-07的次生代谢产物进行研究。采用RP-18,Sephadex LH-20,硅胶等材料进行色谱柱分离纯化得到2个新化合物,鉴定为5-((E)-1,4,5-trihydroxyhex-2-enyl)furan-2(5H)-one(1)和(5Z)-5-(2,3,4,5-tetrahydroxyhexylidene)furan-2(5H)-one(2)。用MTT法测试化合物活性,结果显示化合物1对Hela有较强抑制活性,化合物2对MCF-7,SH-SY5Y,3LL均有较强抑制活性。