乙肝病毒e抗体和核心抗体阳性人群的血清DNA检测结果

<正>越来越多临床资料表明,不同范围之间患者病毒载量、病情转归以及药物治疗反应有一定差异,因此检测乙肝病毒e抗体、乙肝病毒核心抗体有一定实际意义,尤其利用聚合酶链反应对乙肝病毒DNA检测,更具有指导用药和防治意     

血清乙肝病毒核心抗体定量检测在慢性乙肝患者病情评价中的应用价值

目的 探讨血清乙肝病毒核心抗体定量检测在慢性乙肝患者病情评价中的应用价值。方法 选取2019年3月～2021年5月某院门诊部和住院部收治的128例慢性乙肝病毒感染患者为研究对象,上述患者分为慢性乙型肝炎组（CHB组,n=72）和肝硬化组（LC组,n=56）。比较两组血清HBc Ab定量滴度与HBV血清标志物、血清生化指标和肝脏纤维化程度的关系。结果 LC组HBs Ag的定量滴度显著低于CHB组（P <0.05）,HBc Ab和HBV-DNA的定量滴度显著高于CHB组（P <0.05）。LC组的ALT、AST、ALB值显著低于CHB组（P <0.05）,TBil值明显高于CHB组。LC组HBc Ab滴度水平与HBV-DNA无显著相关性（r=-0.010, P> 0.05）,与ALT呈显著正相关（r=0.316, P <0.05）。LC组的HBs Ag和HBc Ab的滴度水平与未出现肝纤维化组、轻度纤维化组、中度纤维化组和重度纤维化组的差异具有统计学意义（P <0.05）。HBV感染患者的肝纤维化发展程度与其HBs Ag滴度水平呈负相关（r=-0.697...     

乙肝病毒标志核心抗体的临床分析

为进一步了解乙肝病毒标志中总核心抗体(抗HBC)的临床意义,我们对230例抗HBc阳性病人进行了抗HBC—IgM和抗HBc—IgG的检测,并对其临床意义进行分析,现将结果报告如下。 材料与方法 本组230例患者,诊断接1990年第六次全国病毒性肝炎上海会议修订的诊断标准所订。其中急性肝炎(AH)54例,慢性迁延性肝炎(CPH)20例,慢性活动型肝炎     

丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测的临床研究

目的：对丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测的临床意义进行探讨。方法选取2013年1月~2013年10月来本院住院患者输血患者1386例,对这些体检者进行丙型肝炎核心抗原（HCV-cAg）、丙型肝炎抗体（抗-HCV）检测,对于阳性标本进行HCV-RNA确定。结果1386例住院患者输血患者中,抗-HCV阳性37例,阴性1349例,阳性率2.67%, HCV-cAg阳性9例,阴性1377例, HCV-cAg阳性中含3例抗-HCV阳性,即如单独进行抗-HCV可筛查出37例,联合检测可筛查出43例,单独筛查有6例漏诊,漏诊率为13.9%。对9例HCV-cAg阳性病例进行HCV-RNA检测,确诊7例,符合率达77.8%。结论进行丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测可以避免丙型肝炎筛查漏诊的发生,值得临床推广使用。     

梅河口市高考学生乙肝病毒表面抗原和表面抗体阳性率调查

国内报告我国有1．2亿乙肝病毒感染者，约占人口的1／10。我院自一九九八年以来一直承担本市高考学生体验工作，对在我院参检的二万三干多名学生进行了肝功能和HBsAg检测，同时又对其中部分学生进行了HBsAb检测。     

乙肝病毒抗原抗体系统检测结果的模式分析

乙肝病毒（HBV）抗原抗体系统检测，即HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG六个指标的检测。俗称“两对半”检测。其检测结果具有多方面临床作用。本文对4608例血液标本乙肝“两对半”检测的结果模式进行分析如下。     

核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测的临床分析

目的 分析对体检人员采取丙型肝炎核心抗原（HCV—cAg）与丙型肝炎抗体（抗-HCV）联合检测的临床意义。方法 选择住院患者300例作为实验组,并以200例健康体检者作为对照,设为对照组;采取酶联免疫吸附法（ELISA）分别对两组人员的丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体进行检测,并以PCR荧光定量法进行确定。结果 对照组中检出3例丙型肝炎抗体呈阳性,阳性率1．5％,无一例丙型肝炎核心抗原呈阳性;实验组中检出6例丙型肝炎抗体呈阳性,阳性率2％,2例丙型肝炎核心抗原呈阳,阳性率0．67％,经PCR荧光定量法确定2例。结论 采取丙型肝炎核心抗原检测可检出早期丙型肝炎,可作为早期丙型肝炎的诊断指标,联合丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体进行检测可减少漏诊,从而提高丙型肝炎的检出率,及时采取防范措施,避免丙型肝炎病毒的传播,具有重要的临床价值。     

乙肝病毒前S1抗原与乙肝病毒血清标志物联合检测的临床意义

目的探讨乙肝病毒前S1抗原(PreS1-Ag)与乙肝病毒血清标志物(HBV-M)联合检测在临床应用中的意义。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定328例乙型肝炎患者血清中PreS1-Ag和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)5项HBV血清标志物。结果 PreS1-Ag在HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)组和HBsAg(+)、HBeAg(+)组的阳性率显著升高,分别为87.3%和80.0%;在HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)组和HBsAg(+)、HBcAb(+)组及HBsAg(+)组的PreS1-Ag阳性率分别为47.5%、63.9%和25.0%;PreS1-Ag在HBeAg(+)组的阳性率为86.2%,明显高于在HBeAg(-)组的52.1%(χ2=21.33,P<0.01);328例乙型肝炎患者中,PreS1-Ag阳性率为61.9%,HBeAg阳性率为28.7%(χ2=73.098,P<0.01)。结论 PreS1-Ag能较好地反映HBV的复制情况,且对HBV感染的早期诊断和判断治疗效果具有重要的临床意义。     

丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测的临床分析

目的了解丙型肝炎核心抗原（HCV-cAg）和丙肝抗体检测在丙型肝炎（简称丙肝）诊疗中的作用。方法采用ELISA试剂盒对安阳市中医院2012年10月至2013年4月期间512例健康体检者和968例住院患者进行HCV-cAg和丙肝抗体（抗．HCV）联合检测,HCV-cAg阳性标本用PCR荧光定量法检测HCV-RNA确认。结果512例健康体检者6例（1．17％）抗-HCV阳性,O例HCV-cAg阳性;968例住院患者15例（1．5％）抗-HCV阳性,7例（0．7％）HCV-cAg阳性,HCV-RNA确认5例,二者符合率为71．4％。结论HCV-cAg较抗-HCV的检测将丙肝病毒感染的／窗口期提前了,是HCV的早期诊断指标,HCV-cAg与抗-HCV联合检测有助于提高HCV的诊断率,对于HCV筛查有重要意义,是有效防范丙肝传播的重要手段,临床意义重大。     

联合检测丙型肝炎抗体和核心总抗原的临床价值探讨

目的探讨联合检测丙型肝炎抗体和核心总抗原（HCV—cAg）在临床中的应用价值。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）法联合检测HCV抗体和HCV—cAg,并与荧光定量PCR法检测丙型肝炎核酸（HCV—RNA）的结果进行对照。结果157例患者中共检出HCV抗体阳性149例、HCV—cAg阳性99例、HCV-RNA阳性115例;5例HCV抗体阴性而HCV—cAg阳性的患者,经HCV—RNA证实为HCV感染;共检出HCV抗体或HCV—cAg阳性154例,另外3例经HCV—RNA排除HCV感染。结论联合检测HCV抗体和HCV—cAg提高了HCV感染的检出效率,可有效避免漏检,适合在普通医疗机构推广使用。     

人横纹肌肉瘤细胞中Utrophin表达机制的研究

目的探讨人类横纹肌肉瘤细胞中Utrophin蛋白表达上调的可能因素。方法查阅文献,检索人类Utrophin基因启动子区域可能的调控元件,应用染色质免疫沉淀(CHIP)和凝胶阻滞实验(EMSA)加以验证。并利用RNA干扰和荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法分析人类EN1转录因子调节Utrophin表达的作用机制。结果经查阅文献获知,Utrophin基因启动子区域有2个转录因子EN1的可能结合位点,经CHIP和EMSA实验证实位点2是真正结合位点。通过RNA干扰实验,发现在人横纹肌肉瘤细胞中EN1基因沉默后,可使Utrophin mRNA水平上调。结论如果能进一步验证其蛋白表达水平亦升高,将可能为假肥大性肌营养不良基因治疗提供新的靶点。     

Preparation and characterization of a new monoclonal antibody against CXCR4 using lentivirus vector

CXCR4 is a member of chemokine receptors and plays a vital role in numerous diseases and cancer processes, which makes the CXCR4/CXCL12 chemotactic axis a potential therapeutic target. In this study, we used lentiviral vectors as a novel technology to produce a monoclonal antibody against CXCR4. Lentivirus vector pLV-CXCR4-Puro was successfully constructed and a hybridoma cell line 1A4 was generated. The CXCR4 monoclonal antibody (MAb) 1A4 had high titer and affinity, and the isotype was identified as IgG1a. The recombinant lentivirus vector could effectively stimulate the production of 39 kDa CXCR4 antibody in vivo after immunization. Western blot analysis showed that the MAb could recognize the CXCR4 antigen expressed on transfected 293T cells as well as various human cancer cell lines. Immunofluorescence assays showed that MAb 1A4 mainly localized and strongly stained on the membrane of transfected 293T cells. Immunohistochemistry assays demonstrated that 1A4 could recognize strong expression of CXCR4 on the hepatocellular carcinoma (HCC). Thus, the method using lentiviral vectors may have application on effective and large-scale production of the CXCR4 monoclonal antibody, which will be a potential tool for the diagnosis and treatment of human cancers.     

诱生型一氧化氮合酶抗体的制备与初步应用

目的制备诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)特异性抗体并应用于iNOS检测。方法将iNOSN端片段装入原核表达载体pET 2 8a(+) ,在大肠杆菌BL2 1中表达 ,两步法纯化目的蛋白 ,使用纯化蛋白制备iNOS多克隆抗体。获得的抗血清用于小鼠巨噬细胞及小鼠脑缺血模型中iNOS的检测。结果得到具有较高表达量的融合蛋白 ,经两步纯化获得iNOSN端融合蛋白纯品 ,将此蛋白免疫家兔 ,得到iNOS多克隆抗体 ,Westernblot分析表明该抗体不与nNOS、eNOS交叉反应 ,而能检测组织、细胞中的iNOS。结论原核表达iNOSN端片段制备的iNOS抗体具有很好的反应性及特异性     

抗哇巴因单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备抗哇巴因单克隆抗体。方法以半抗原哇巴因与蛋白质载体卵清蛋白(OVA)的耦联物为抗原,免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,获得两株分泌抗哇巴因的单克隆抗体的细胞株(OUA1,OUA2)。结果两株细胞染色体数目均为100条左右,证实为杂交瘤细胞;所分泌抗体为小鼠IgG1亚类;小鼠腹水效价测定分别为5×106,8×106;和地高辛交叉反应率分别为1.342%和2.323%;ELISA相加试验表明,两株单克隆抗体可能针对同一抗原决定簇。结论成功制备出小分子物质哇巴因的单克隆抗体。     

人m3受体单克隆抗体的研制

目的：制备抗人m3受体肽链的单克隆抗体。方法：人工合成人m3受体亚型特异的细胞外氨基端肽链段,与血蓝蛋白偶联,免疫Balb/c小鼠,制备m3受体的单克隆抗体。用PEG－6000二步沉淀法与Sephadex G-50柱层析分离纯化技术。用ELISA、免疫组织化学和放射配基法鉴定抗体的特异性。结果：抗体与m3肽链、大鼠唾液腺及大脑皮质膜蛋白发生特异性的结合,不与m4肽链发生结合。抗体能抑制^3H-QNB与大鼠唾液腺膜蛋白的结合,不抑制^3H-QNB与大鼠心肌的结合,也不抑制^3H-PZ与大鼠大脑皮质膜蛋白结合。免疫组织化学结果显示唾液腺呈棕色阳性反应,而心肌呈阴性反应。结论：本研究制备的人m3受体单克隆抗体具有高的特异性,可专一性识别m3受体。     

抗脊髓灰炎IgY抗体研制的初步报告

本文报通抗脊髓灰质类ＩｇＹ抗体的制备与纯化法，结果显示三型脊髓灰质炎病毒均于免疫鸡卵中产生特异抗体，并具有仅母体传递到卵黄的特性，抗体滴定度高达１：１６万，为生物学研究由鸡卵中制备ＩｇＹ抗体是有利的方法。     

抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用

目的获得抗HBsAg单链抗体(HBScFv)的单克隆抗体,并初步研究其在抗HBsAg类小分子抗体及其融合蛋白质的纯化、活性鉴定方面的应用。方法利用杂交瘤技术,以大肠杆菌表达的重组抗HBScFv为抗原,免疫Balb/c小鼠,再将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合。通过ELISA法、Western-blot鉴定特异性单克隆抗体,通过免疫双扩散法鉴定单抗亚型,并将筛选到的高效价单抗用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及ELISA鉴定。结果建立了9株能够稳定分泌抗HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株,其细胞上清效价为1∶160~1∶12 800,腹水效价为1∶50 000~1∶400 000;单克隆抗体的亚类分析结果显示有6株为IgG1,其余3株为IgG2a。初步应用结果表明制备的单克隆抗体14F7可用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及活性鉴定。结论成功建立了能够稳定分泌HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株。     

金葡菌肠毒素SEC2的抗体制备及应用

生产厂家以金葡菌肠毒素C2(SEC2)的标示量作为金葡素注射液的质量控制标准，但其真正的含量由于滤液成分复杂而很难检测，本实验试图建立一种方便的鉴定金葡素注射液中的SEC2的方法。首先将重组的SEC2分别免疫BALB/c小鼠和新西兰兔，制备并纯化了单克隆及多克隆抗体。采用自制的抗体建立了检测SEC2的生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附实验，检测目标蛋白的质量浓度范围为2～20 ng·mL^-1，在检测范围内检测值的平均变异系数为5.08%，采用本法检测质量浓度分别为100 ng·mL^-1的重组肠毒素(SEA/SEO/SEM/SEN/SEG/SEI)，均呈现阴性反应，说明此检测方法的专一性较好。采用此方法对金葡素注射液中的SEC2含量进行了检测，发现SEC2标识量与实际含量存在一定的差距。     

抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因的克隆及原核表达载体的构建

目的 克隆抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因(VH),并构建其原核表达载体.方法 从能分泌抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞BDI-1中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出VH cDNA,用HindⅢ和XhoⅠ酶切纯化的RT-PCR产物和原核表达载体pET28a( ),在T4 DNA连接酶作用下室温连接.重组质粒经酶切鉴定,阳性克隆测序并进行序列分析.结果 扩增出VH cDNA片段,大小约为370bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致.VH基因序列长度为366bp,编码122个氨基酸.VH基因属于鼠免疫球蛋白重链Ⅱ亚类.结论 成功克隆出抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因,并成功构建其原核表达载体.     

电鳐乙酰胆碱酯酶单链抗体基因的克隆及表达(英文)

目的　欲用计算机模拟及分子对接技术揭示抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体 3F3抑酶的分子基础 ,但 3F3分子远大于乙酰胆碱酯酶 (AChE) ,难以操作 ,故拟用其单链抗体为工具进行研究。本研究旨在设计、克隆并表达抗AChE单链抗体Sc3F3基因 ,推演重组单链抗体的氨基酸顺序 ,并证明纯化的重组单链抗体有抑制AChE的作用。方法　使用分泌抗电鳐AChE单克隆抗体 3F3(3F3Ab)的杂交瘤细胞提取总RNA。用RT PCR技术扩增重链可变区 (VH)cDNA及轻链可变区 (VL)cDNA基因 ,通过连接肽(Gly4 Ser) 3 基因将VH 基因和VL 基因连接 ,制成单链抗体基因 (ScFv)。将ScFv基因插入载体pCANTAB 5E用于表达。在大肠杆菌中表达的 3F3单链抗体(Sc3F3)用SephadexG75凝胶过滤和QAE SephadexA 5 0离子交换层析纯化。AChE与抗体的免疫反应性用ELISA法测定。AChE活性用微量羟胺比色法测定。结果　测序结果证明所克隆的ScFv基因是功能重排基因 ,长度为 72 3bp。重、轻链基因长度分别为 35 7bp和 32 1bp。ScFv基因 (含连接肽基因 )所编码的纯化的重组Sc3F3的分子量为 31.6ku。Sc3F3与AChE反应良好 ,但对AChE活性的抑制明显弱于 3F3Ab。Sc3F3的抑制效力约为 3F3Ab的 1/10。结论　在计算机模拟及分子对接研究中使用本研究设计的单链抗体Sc3F3应是可靠的