红掌幼叶诱导组织培养技术研究

红掌深受市场青睐,但其组织培养繁殖技术未成体系。本研究以红掌‘特伦萨’的嫩叶为外植体,MS为基础培养基,探究添加6-BA、2,4-D和NAA对愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导和丛生芽生根的影响。结果表明,愈伤组织诱导的最佳培养基是1/2MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 0.5mg/L;愈伤组织增殖的最佳培养基是1/2MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 0.2mg/L;丛生芽诱导的最佳培养基是MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L;丛生芽生根的最佳培养基是1/2MS+NAA 0.2mg/L;生根后的幼苗,移栽成活率高达100%。以期为红掌种苗扩繁提供参考。     

NH4NO3及碳源对红掌愈伤组织诱导影响的研究

以红掌的根段和叶片为外植体,探讨了不同NH3 NO4浓度和不同碳源组合对外植体愈伤组织诱导率的影响.结果表明:红掌再生对NH4 NO3的浓度非常敏感,低浓度的NH4 NO3有利于诱导愈伤组织,浓度较高时抑制愈伤的诱导;而不同的碳源也会影响到外植体愈伤组织的诱导,蔗糖与葡萄糖相比更适合于红掌愈伤组织的诱导.其中NH4 NO3 0 mg/L、蔗糖3％组合中根和叶片的愈伤组织诱导率最高,分别是92.6％和81.5％.     

7个红掌品种产生愈伤组织的影响因素

采用正交试验,探讨在不同光照条件下MS大量元素、6-BA、2,4-D、NAA对7个红掌品种愈伤诱导的影响.结果表明:散射光照对红掌愈伤诱导有促进作用;时红掌愈伤诱导影响排序为:Ms大量元素>NAA>6-BA>2,4-D,大量元素的影响效果最明显,6-BA和2,4-D的影响效果差异较小.     

红掌愈伤组织诱导和芽的分化

 对影响红掌愈伤组织诱导及芽分化的几个因素进行了研究。同一成熟度的外植体, 其叶柄愈伤组织诱导率、芽分化率、分化时间均明显优于叶片。不同放置方式和光照时间对叶片愈伤组织的诱导亦有影响, 叶背向下放置, 光照时间24 h/ d 和10 h/ d 愈伤组织诱导率较高, 分别为100 %、97 %。光照时间对叶柄愈伤组织诱导无显著影响, 但光照24 h/ d 和10 h/ d 较无光照处理的明显促进芽的分化。叶柄培养以N6 , KC 和1/ 2 MS 培养基为佳。叶片培养则以P , N6 和1/ 2 MS 为好。以未展叶叶柄为外植体, 从接种到丛芽分化共49 d , 较已有报道提前11～31 d。     

红掌愈伤组织增殖分化条件的优化

以红掌愈伤组织为材料,研究影响红掌愈伤组织增殖和分化以及芽增殖的因素。结果表明:以MS+6-BA1.0 mg/L+KT 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L为红掌愈伤组织增殖和分化的最佳培养基,培养到8周绝对生长速度达到910.31%、分化率达到100%,到150 d时分化指数达到24.17;在芽增殖培养试验中,以1/2 MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L为适宜培养基。在培养方式上,液体培养优于固体培养。     

红掌叶片愈伤组织和气生根再生团块的细胞学研

 对红掌叶片诱导产生的3种愈伤组织和气生根再生团块的形成、不定芽的分化发育过程进行了显微观察。结果表明: 黄绿、黄和褐色3种愈伤组织的细胞核质比依次减小, 细胞排列越来越疏松, 细胞质变稀薄, 细胞形态变得不完整, 其中黄色和褐色愈伤组织出现类似凋亡小体的小泡, 细胞最终凋亡。叶片气生根的形态发生为间接器官发生方式, 再生团块由气生根根段切口的皮层细胞分裂分化而来。再生团块内部有大量的密集小细胞团, 细胞分裂旺盛, 为分化的原始组织, 以后逐渐分化为不定芽, 形态发生以间接器官发生方式为主, 也有少量胚状体发生方式, 小细胞团是分化产生不定芽的基础。芽的分化发生方式属内起源, 随着小细胞团的不断生长, 外层细胞逐渐凋亡, 最终使分化的芽突出再生团块再生成苗。     

红掌四倍体的离体诱导及其鉴定

以愈伤组织为诱导材料, 采用秋水仙素处理方法进行了红掌四倍体的离体诱导。结果发现,红掌四倍体诱导率因处理方法、秋水仙素浓度和处理时间不同而异。采用液体培养的四倍体诱导率比固体培养的高, 低浓度秋水仙素的诱导率比高浓度的高, 长时间处理的诱导率比短时间处理的高, 基因型对四倍体诱导率影响不明显。在含0.2 g·L^-1秋水仙素的液体培养基中振荡培养14 d, 四倍体诱导率最高, 为45.5%。四倍体红掌的花药和花粉比二倍体的大, 植株粗壮, 叶片和佛焰苞大而厚, 颜色深, 叶片下表皮上的气孔密度小, 长度长。改良压片法与气孔长度和密度鉴定法是鉴定红掌四倍体的可靠方法。     

红掌愈伤组织和再生团块发育过程中糖和蛋白质的组织化学研究

以红掌叶片诱导出的4类愈伤组织和气生根根段诱导的再生团块为试材,研究糖和蛋白质在愈伤组织衰老与再生团块发生发育过程中的变化。经石蜡切片PAS和汞溴酚兰组织化学染色观察发现,糖主要以颗粒状存在于愈伤组织细胞中,并有明显的围绕核的现象,蛋白质主要集中于细胞核及其周围。糖和蛋白质的含量在黄绿愈伤组织中有明显的从外向内减少的梯度变化;深绿愈伤组织中梯度不太明显。糖在金黄色愈伤组织中含量很低,没有梯度;在褐色愈伤组织中散乱分布。蛋白质含量变化在金黄色愈伤组织中由外层细胞向内层细胞有一定的梯度但不明显;在褐色愈伤组织中没有梯度。刚形成的再生团块的糖和蛋白质含量在由外向内的细胞中有明显的梯度变化,在再生团块膨大生长过程中两者含量少,没有梯度变化。分化期再生团块中的糖主要集中在分裂旺盛的分生细胞团和维管组织周围,蛋白质则集中于分生细胞团的细胞中。在各类愈伤组织和再生团块中均出现各种特化细胞。糖的含量及其梯度变化是愈伤组织和再生团块分化的重要内在条件,蛋白质含量以及核形态是否完整是愈伤组织和再生团块分化的关键。     

不同红掌品种愈伤组织诱导及高效再生体系的建立

以"火焰"、"阿拉巴马"和"粉冠军"3个红掌盆花品种的叶柄、叶片为外植体,对红掌愈伤组织诱导及植株再生进行了研究,建立了红掌的高效再生体系。结果表明:红掌的叶柄较叶片更适宜愈伤组织的诱导,叶柄为外植体诱导愈伤组织的最适培养基:1/2MS+1.5mg/mL 6-BA+0.6mg/mL 2,4-D,诱导率为81.7%;以叶片为外植体诱导愈伤组织的最适宜培养基为:1/2MS+1.0mg/mL 6-BA+0.8mg/mL 2,4-D,诱导率为65.0%;"火焰"的愈伤组织诱导率最高,其次为"阿拉巴马","粉冠军"的愈伤组织诱导率最低。以叶柄和叶片作为外植体诱导产生的愈伤组织最适宜分化培养基为:1/2MS+1.0mg/mL 6-BA+0.2mg/mL NAA,分化率分别达到88.3%和73.3%;"火焰"的芽分化率仍最高,"阿拉巴马"次之,"粉冠军"的芽分化率最低。幼苗生根的最适宜培养基为:1/2MS+0.5mg/mL NAA。草炭土+珍珠岩(1:1)混合基质是理想的移栽基质,移栽成活率为95%。     

荷兰切花红掌‘爱维特粉’组培技术研究

以荷兰切花品种‘爱维特粉’红掌为材料,研究不同的培养基对‘爱维特粉’红掌的愈伤组织诱导、不定芽诱导及诱导生根的影响。结果表明,叶柄是最适宜切花品种‘爱维特粉’红掌诱导产生愈伤组织的外植体,而适宜的愈伤组织诱导培养基为1/2MS+0.5mg/L噻苯隆（TDZ）+30g/L蔗糖;不定芽诱导培养基为MS+0.5mg/L吡效隆（CPPU）+25g/L蔗糖,生根培养基为1/2MS+0.2mg/L IBA+30g/L蔗糖。     

红掌组织培养技术研究

对影响红掌愈伤组织诱导及芽分化的几个因素进行了研究.结果表明:同一成熟度的外植体,其叶柄愈伤组织诱导率明显优于叶片和花柄.诱导愈伤组织形成的培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D;芽分化和增殖培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;生根与增殖同步.     

不同红掌品种在组培生产上的差异表现

以"亚利桑那"、"阿拉巴马"、"粉冠军"3个红掌品种根茎、叶柄、叶片为外植体,研究比较了3个品种的外植体诱导、继代增殖、生根培养的差异表现。结果表明:根茎诱导无菌芽成功率为86.9～90.0%,叶片诱导愈伤组织成功率为80%～84%,叶柄诱导愈伤组织成功率为64%～68%,根茎一般较难诱导出愈伤组织;不同品种的红掌增殖继代的增殖倍率不同,"粉冠军"最高为6.8,其次为"亚利桑那"5.8,"阿拉巴马"为3.8。红掌的生根较易,不同品种的红掌生根率均可达到95%以上。     

含内生菌外植体红掌组培方法的研究

为了解决组织培养中组织内部带菌的问题,以组织内部带菌的红掌为外植体,采用含有40%的次氯酸钠水溶液消毒10min,然后分别接种到各种含不同浓度的抗生素的培养基上,经过2～3次继代培养后发现:外植体在含有500mg/L的羧苄青霉素、100mg/L硫酸链霉素和1000mg/L的制霉菌素的培养基上生长正常,组织内部所带细菌和真菌得到了较好的抑制和消除。     

红掌组织培养过程中外植体褐变的研究

在红掌组织培养过程中,外植体易发生褐变,严重阻碍了红掌组织培养的正常进行。现以红掌‘红粉佳人’(Anthuriumandraeanum cv.Sonate)品种为试材,取健康植株幼嫩叶片为外植体,对其愈伤组织培养过程中褐变现象进行研究。研究不同抗氧化剂、吸附剂(柠檬酸、抗坏血酸VC、叶酸、聚乙烯吡咯烷酮PVP、活性碳AC)以及不同培养基硬度的防褐化效果。结果表明:使用硬度为5 g/L琼脂的MS培养基,并添加6-BA1.0 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.2%可有效控制褐变并获得较高的愈伤诱导率。     

红掌组培快繁技术研究

以红掌的顶芽、茎段、叶片、叶柄等为外植体,通过以芽繁芽方式或愈伤组织诱导芽途径诱导无菌芽,并获得再生植株,以期建立一套完善的红掌组培快繁技术体系.结果表明:改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基组合最适合红掌以芽繁芽的增殖芽,繁殖系数达4.5以上;而改良MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L培养基组合更适合愈伤组织分化芽和增殖芽,芽繁殖系数达5.8以上;最好的生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L.     

安祖花叶片组织培养的研究

以安祖花的叶片为材料,研究安祖花组织培养的适宜条件。结果表明:最佳消毒条件为0.1%的升汞消毒5~6 min;诱导产生愈伤组织的最佳培养基为:1/2MS+KT 0.1 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+2.4-D 0.4 mg/L);诱导产生丛生芽的最佳培养基为:1/2MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT0.05 mg/L;诱导生根的最佳培养基为:1/2MS+NAA 0.05 mg/L。     

花烛体细胞胚胎发生及植株再生研究

 以花烛(Anthurium andraeanum Lind. ) 盆花品种无菌苗叶片、叶柄、根段为外植体, 对花烛体细胞胚胎发生及植株再生进行了研究, 建立了花烛体细胞胚胎发生体系。结果表明, 花烛叶片较其他外植体更适宜体细胞胚的诱导; 胚性愈伤组织及胚性结构诱导最适培养基为改良MS + 2, 4-D 2.0～3.0 mg·L ^{- 1} + KT 0.5 mg·L ^{- 1} +蔗糖2% +葡萄糖1% , pH 5.5, 暗培养40 d, 诱导率可达90.3%; 体胚发育适宜培养基为改良MS + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} +蔗糖3% , 光强20 μmol·m ^-2 · s^-1 , 培养20 d后体胚萌发率达6219%; 萌发的体胚在发育培养基上继续培养30 d后均能发育成完整植株。对不同阶段培养材料的组织结构及超微结构的观察证明了花烛体胚发生过程。     

不同品种红掌观赏特性的比较

以9种不同品种的红掌为试材,采用测量计算形态特征的方法,研究了9种不同红掌品种之间的形态差异,总结出各品种的观赏特性,以期为优良品种的选择及繁育推广提供参考依据。结果表明:各品种均具有其优良的特性以供观赏,‘玛格拉’‘梦幻’‘火焰’等红掌品种花量较多,‘梦幻’‘骄阳’‘红唇’等红掌品种叶量较多,易营造出枝繁叶茂之感,适宜成丛在会议室、酒店大厅等环境中应用。另有一些具有特殊色彩的‘梦幻’‘彩霞’‘粉红军’等红掌品种,适宜摆放在家居室内等环境中以供观赏。由此看出,每种红掌品种均有其独特的优良观赏特性可加以推广,而从各品种的整体形态、花部形态、叶部形态等综合表现看,相对于其它几种红掌品种,最适宜繁育推广的品种为‘火焰’红掌。     

红掌新品种‘丹韵’

‘丹韵’是以‘快乐’为母本、以‘紫旗’为父本杂交选育而成的红掌新品种。株形中等,平均株高33.8 cm。叶片卵形,平均长20.3 cm,宽10.7 cm。佛焰苞明显高于叶,卵形,亮红色,光泽度极强,平均长8.5 cm、宽7.0 cm。肉穗花序直立,紫红色,平均长4.9 cm。从6 ~ 10 cm高的商品小苗到成品花约15个月。     

基于SRAP 分子标记的安祖花遗传连锁图谱的构建

 以安祖花（Anthurium andraeanum）抗逆性较强的品种‘Pink Champion’为母本,主栽品种‘Dakota’为父本,杂交得到F₁代,从该杂种F₁代中随机选出94个单株为作图群体,利用SRAP分子标记技术并运用JoinMap4.0^®软件的CP作图模型构建了遗传连锁图谱。该图谱覆盖基因组长1 689.5 cM,共254个标记,定位于19个连锁群上,标记间平均距离为6.65 cM。各连锁群长度在7.6 ~ 187.2 cM范围内,每个连锁群包含3 ~ 43个标记。