狗和小鼠骨髓细胞体内扩散盒琼酯培养方法

一些研究表明,各种种系动物的正常骨髓细胞都能在适当的细胞团刺激因子(CSF)作用下,在体外琼酯培养体系中生成细胞团。这种细胞团刺激因子广泛地存在于各种动物体内。近来,培养技术上的一个改进就是将琼酯培养体系注入扩散盒内(不含细胞团刺激因子),然后将扩散盒埋入经受射线照射的或正常小鼠腹腔内,在体内某些因子作用下,经过几天培养后产生与体外琼酯培养体系生成同样的细胞团。     

人骨髓细胞体外长期培养中贴壁细胞层的作用

本实验用人骨髓细胞建立起贴壁细胞层,做第二次骨髓接种后,每周换液时取出全部细胞悬液,换入等量的无细胞新鲜生长培养液,观察悬浮细胞和GM-CFUc数量变化的规律。在这种培养条件下,造血干细胞的增殖与分化可维持7周。虽然悬浮细胞和GM-GFUc的数量在培养第二周后下降较快,但在培养七周内悬液中始终存在少量悬浮细胞和GM-CFUc。对部分培养同时测定了悬液与贴壁层中的GM-CFUc,在培养2～3周时贴壁层中GM-CFUc有增多趋势,到5～8周时贴壁层中就测不出GM-CFUc,此时悬浮的GM-CFUc也很少了。实验结果说明在人骨髓体外培养悬液中的造血干细胞(或祖细胞)来源于贴壁层,贴壁层是维持体外造血干细胞增殖与分化的基地。     

急性淋巴白血病骨髓细胞体外无血清液体培养的研究

利用无血清骨髓液体培养体系(SF),以有血清培养体系(SD)为对照,研究了两者对10例(11次)急性淋巴细胞白血病(ALL)骨髓细胞中正常(GM-CFU BFU-E)及白血病细胞增殖分化的影响。ALL细胞的检测除用形态学外,还用白血病祖细胞(CFU-ALL)测定及更加敏感的bcr/abl基因转让〔t(bcr/abl)〕的多聚酶链式反应(PCR)测定法。结果表明:SF培养体系可能具有选择性清除ALL细胞及维持残留的正常造血细胞的作用。     

造血细胞在体外琼脂培养中的原位固定与染色技术

随着造血干细胞研究的深入,对于粒系祖细胞(GM-CFUc)测试技术的研究和应用日趋广泛。在体外琼脂培养条件下,粒系祖细胞可以生成由粒系细胞、单核一巨噬细胞、或两者混合组成的细胞集落。它们的生成数量或产率(GM-CFUc/10~5)以及集落中的细胞组成,在一定程度上反映了机体的造血功能、集落刺激因子的性质以及这类细胞群体的不均一性的特征。本文介绍了我们在动物和人的骨髓细胞或外周血单个核细胞经体外琼脂培养后,对     

体外琼脂培养人与小鼠骨髓粒系定向干细胞的比较

It has been shown that the muscular conditioned medium(MCM)is rich in colony stimulating factor.Its effect is species specific.The mouse MCM can be inactivated by ethyl ester.More than 70% colonies produced by mouse MCM are of loose diffusive type.On the contrary,the activity of human MCM is only slightly inhibited by ethyl ester and about 66%colonies formed by human MCM appear to be dense and compact.The doubling time for the multiplication of mouse bone marrow cells is 10.6 hours while that for human cells is 23.6 hours.     

体外琼脂培养人与小鼠骨髓粒系定向干细胞的比较

国内外许多研究工作者分别对人与小鼠骨髓粒系定向干细胞(CFU-C)的培养作了较多的研究,体外琼脂培养这类细胞时必须加入细胞团刺激因子(CSF)。我们曾报     

体外琼脂和甲基纤维素培养骨髓粒和巨噬细胞集落超微结构分析

应用SEM和TEM比较研究了小鼠骨髓细胞在体外半固体琼脂和甲基纤维素培养体系中,并在RSP-2·P3-CSF或HU-CSF刺激下,粒细胞和巨噬细胞集落生成的形态学特征。超微结构分析结果指出RSP-2·P3-CSF以刺激粒系细胞集落生成为特征。但是,随着体外培养时间的延长,一部分粒系细胞集落退化,大多数粒系细胞集落转变为粒和巨噬细胞集落或巨噬细胞集落。然而,HU-CSF以刺激巨噬细胞集落生成为特征,但在培养早期可见到粒系或粒系与巨噬细胞混合集落的存在。所以,RSP-2·P3-CSF和HU-CSF在生物学作用特性上是不均一的,不能根据它们在培养早期或晚期的集落细胞成分简单地归结为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)。     

骨髓琼脂培养时形成的细胞结构

本文用琼脂培养法研究了新鲜和冷冻保存的骨髓粒细胞增殖活性动力学和分化特点。     

体外冲击波致狗肾损伤的病理形态学研究

对２４条狗肾脏进行体外冲击波实验，电压１０～１２ＫＶ，冲击波２０００次，而后以每组４条随机分６组，分别于冲击波致伤后立即、第３日、１周、１月、３月和６月时取肾活检。光镜显示急性损伤典型改变分为中心出血、变性坏死及外周反应三个区。电镜示肾小体血管内皮细胞破裂、线粒体肿胀、肾曲管上皮细胞核染色质浓缩、边集。病理形态学观察结果提示：体外冲击波可引起肾脏不同程度损伤，其不可逆损伤及远期影响尚待进一步研究。     

给照射小鼠移植长期培养的骨髓细胞

试图以除去T细胞的骨髓移植而形成同种H-2不相配的小鼠骨髓嵌合体研究已取得明显进展。一些实验,移植经抗Thy~(-1),2处理的骨髓,可使照射小鼠活存几乎达到100%(>100天)。但有人使用不同品系小鼠为供、受体时则同种小鼠骨髓移植后8周以上的活存率仅5%。动物不是死于抗宿主病,而是死于骨髓未移植成活或由于嵌合体缺乏免疫机能所致。作者曾移植长期培养的造血细胞并形成了同种移植的嵌合体。长期培养可使小鼠骨髓在体外能维持CFU—S的生长、分化和成熟,使祖细胞、成熟中性粒细胞、具有吞噬功能的单核细胞和巨核细胞增加至20周以上。只有当起细胞诱导环境作用的贴壁层细胞存在的条件下,体外造血才能形成。体外培养中粒系细胞能迅速生长,可是用核型分析或功能测试方法,既     

在琼脂中培养的造血细胞的原位染色法

目1970年发表最初的报告以来,骨髓和外周血的向粒/单系定向分化的前驱细胞的体外培养已成为一种有广泛用途的技术。用甲基纤维素作为半固体的支持性培基时,集落中的单个细胞的形态能很容易的分辨清楚。但是,大多数的学者都发现,用不同浓度的琼脂构成的双层培养技术,结果的重现性较好。可是生长在琼脂上的集落和集落里的细胞的形态是难以识别的。为此,我们选取了干燥琼脂循平皿时用的方法,并将他们用到造血细胞的琼脂培养上。可很好地保持集落的形态,并能识别每个集落中的单个细胞的     

正常成人骨髓细胞对8种抗癌药物的体外敏感性研究

为了探讨骨髓细胞对这类药物的敏感性,观察了8种常用抗癌药物(长春新硷、环胞苷、阿糖胞苷、阿霉素、氨甲喋呤、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、三尖杉酯硷)对正常成人骨髓细胞在体外培养条件下的抑制作用,以探求骨髓细胞对上述药物的敏感性。 材料与方法 一、药物配制 8种抗癌药用0.9％氯化钠溶液稀释10倍,分装于小瓶内放冰箱冰冻保存。实验时再用RPMI1640培养液稀释至所需浓度,按照Limburg公式计算临床用药剂量。     

肌培养液对人骨髓细胞培养的成团作用

关于人骨髓细胞体外培养的方法已有较多的报导。骨髓细胞体外琼脂培养时形成细胞团(CFU-C)需要细胞团刺激因子(CSF)的参与。过去曾用猴或人的白细胞作为营养层获得良好的结果。也曾用人的白细胞(特别是单核细胞)、胚胎肾或胎盘等制成条件培养液都显示出一定的活     

异丙基肾上腺素对体内及体外骨髓细胞中cAMP含量的影响

造血细胞的增殖及成熟是由很多因素控制的,其中应考虑到某些激素。激素的作用多数通过环3′,5′-AMP(cAMP)为媒介。其他作者已证实β-肾上腺素能刺激可增加 cAMP 的含量及触发造血干细胞进入细胞周期。作者研究了正常及受200伦照射的小鼠骨髓细胞对β-肾上腺素能刺激的影响,结果发现未照射的小鼠骨髓中 cAMP 的含量因腹     

不同的培养液与血清对琼脂培养GM-CFU-C的影响

在体外琼脂培养骨髓粒系祖细胞(GM-CFU-C)时,必须加入一定量的培养液与血清,它们的种类与质量对培养结果的影响早已为人们所了解。但如何合理选择培养液与血清有时还会遇到不少具体问题。本文就其中使用培养液与血清的一些问题进行了探讨。     

培养小鼠骨髓细胞半同系移植研究的补充材料

用体外培养不同时间的C57BL/6雄性小鼠骨髓细胞移植到受致死剂量γ线照射的DBF_1雌性小鼠,记录受照射小鼠30天和60天的活存率,并分析造血和免疫功能的主要指标.对部分长期活存小鼠(60～110天)的骨髓细胞和淋巴细胞的染色体核型作细致观察,了解移植进去的造血细胞是否已被植入,结果表明移植培养骨髓细胞的受照射小鼠活存率远较照射对照组为高,造血与免疫功能明显地重建,这无疑是由于移植骨髓在照射动物中形成稳定的辐射嵌合体所致.     

短期培养小鼠骨髓细胞的增殖、分化及其移植效果

实验采用添加肌条件培养液方法进行小鼠骨髓细胞短期液体培养,细胞增殖分化十分活跃。2天起细胞总数和CFU-C逐渐增多,6天分别增至原来的4倍和6倍。淋巴细胞在培养4天或3天消失。CFU-S 6天时减至原来的21%。照后1天或3天静脉输注培养6天的CFU-S,提高照射900拉德同系小鼠的活存率82%。照后30天和60天分别活杀,8只受体小鼠的骨髓细胞2只为供体型,5只为以供体型为主的嵌合体,1只为受体型为主的嵌合体。     

卵母细胞的体外成熟培养研究进展

卵母细胞体外成熟培养研究主要集中在提高体外成熟卵母细胞支持胚胎发育的能力上。本文主要从基础培养液的改进、性腺激素的添加、生长激素和生长因子所起的作用、延迟成熟培养以及其它物质添加方面进行分析，介绍了目前卵母细胞体外成熟培养的进展情况。     

人前脂肪细胞的体外培养

 目的 建立人前脂肪细胞培养及其在药物诱导下向脂肪细胞分化的细胞模型.方法 取成人的腹部纯脂肪颗粒,采用消化法进行人前脂肪细胞的原代培养,并在培养液中加入胰岛素和地塞米松对细胞进行诱导.对培养细胞进行形态学研究,测定生长曲线,并用油红O染色法对前脂肪细胞向脂肪细胞的分化进行定性、定量研究.结果 培养出的人前脂肪细胞呈梭形,成分均一,增殖旺盛.经胰岛素和地塞米松诱导后,通过油红O脂肪染色法测定,证明前脂肪细胞已向脂肪细胞分化.结论 在成熟的脂肪组织中存在着可以增殖,并可以分化成脂肪细胞的前脂肪细胞,经诱导后可以分化成成熟的脂肪细胞.     

小鼠多向祖细胞的体外培养

本文介绍小鼠多向祖细胞(CFU-mix)的测定方法,培养体系包括IM-DM,2-ME,转铁蛋白-铁,牛血清白蛋白V,PWM-SCM及EPO。在36.5℃,7%CO_2,饱和湿度下培养10～14天。本文用实验数据表明培养体系中EPO量不能少于0.5U/皿,PWM-SCM占10%为宜,转铁蛋白则应加300μg,植入的骨髓细胞量与CFU-mix集落数有线性正比关系。