大鼠肢体移植过程中的细胞凋亡

背景：肢体移植是一种复合组织移植。有研究提出靶细胞的凋亡是移植物丧失功能的主要机制之一。目的：采用大鼠异体肢体移植模型观察同种异体肢体移植急性排斥反应中的细胞凋亡特征。设计：以实验动物为研究对象，随机对照研究。单位：一所医科大学医院实验动物中心实验室。材料：实验于2003-11／2004—05在哈尔滨医科大学附属第一医院实验动物中心实验室完成。健康雄性SD大鼠56只、Wistar大鼠28只．体质量200～250g，由哈尔滨医科大学附属第一医院实验动物中心提供。移植组供、受体分别为Wistar及SD大鼠(各28只)，对照组为SD大鼠(各28只)。干预：建立大鼠异体肢体移植模型(移植组)及自体肢体再植模型(对照组)，观察急性排斥反应出现时间及表现，术后1.3、5，7d切取移(HE)植体组织标本，苏木精-伊红(HE)染色进行各组织排斥反应的病理分级，原位末端标记(TUNEL)法检测各组织细胞凋亡情况，计算凋亡指数。主要观察指标：主要结局：①移植肢体急性排斥反应的病理分级。②移植肢体细胞凋亡指数与急性排斥反应的关系一次要结局：各组大鼠术后一般情况。结果：移植肢体术后(3．43&;#177;0．79)d开始出现皮下水肿、皮色变红，平均存活时间为(7．42&;#177;1．72)d，移植组织中皮肤排斥反应程度最强，病理分级术后3．5，7d分别为(1．14&;#177;0．38)．(2．28&;#177;0．48)．(2．86&;#177;0．38)级，与肌肉、神经组织比较差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，发生凋亡的细胞主要是皮下组织内浸润的淋巴细胞，其次为骨骼肌细胞，凋亡指数与急性排斥反应分级成正相关。结论：细胞凋亡参与大鼠肢体移植的急性排斥反应，凋亡指数可作为判断移植物损伤程度的定量指标。     

大鼠肢体移植过程中的细胞凋亡

背景肢体移植是一种复合组织移植,有研究提出靶细胞的凋亡是移植物丧失功能的主要机制之一.目的采用大鼠异体肢体移植模型观察同种异体肢体移植急性排斥反应中的细胞凋亡特征.设计以实验动物为研究对象,随机对照研究.单位一所医科大学医院实验动物中心实验室.材料实验于2003-11/2004-05在哈尔滨医科大学附属第一医院实验动物中心实验室完成.健康雄性SD大鼠56只、Wistar大鼠28只,体质量200～250 g,由哈尔滨医科大学附属第一医院实验动物中心提供.移植组供、受体分别为Wistar及SD大鼠(各28只),对照组为SD大鼠(各28只).干预建立大鼠异体肢体移植模型(移植组)及自体肢体再植模型(对照组),观察急性排斥反应出现时间及表现,术后1,3,5,7d切取移(再)植体组织标本,苏木精-伊红(HE)染色进行各组织排斥反应的病理分级,原位末端标记(TUNEL)法检测各组织细胞凋亡情况,计算凋亡指数.主要观察指标主要结局①移植肢体急性排斥反应的病理分级.②移植肢体细胞凋亡指数与急性排斥反应的关系.次要结局各组大鼠术后一般情况.结果移植肢体术后(3.43±0.79)d开始出现皮下水肿、皮色变红,平均存活时间为(7.42±1.72)d,移植组织中皮肤排斥反应程度最强,病理分级术后3,5,7 d分别为(1.14±0.38),(2.28±0.48),(2.86±0.38)级,与肌肉、神经组织比较差异有显著性意义(P＜0 05).发生凋亡的细胞主要是皮下组织内浸润的淋巴细胞,其次为骨骼肌细胞,凋亡指数与急性排斥反应分级成正相关.结论细胞凋亡参与大鼠肢体移植的急性排斥反应,凋亡指数可作为判断移植物损伤程度的定量指标.     

大鼠心脏移植急性排斥反应与心肌细胞凋亡的相关性

目的:观察并分析大鼠心脏移植急性排斥反应与心肌细胞凋亡及心脏组织Fas及FasL表达的相关性。方法:实验于2006-01/07在南方医科大学南方医院动物实验中心完成。选用SPF级健康雄性SD,Wistar大鼠各36只,制作Wistar至SD大鼠Ono心脏移植模型,将36只SD受体大鼠按随机数字表法分为4组,即术后1,3,5,7d组,每组9只。①用QRT-PCR法检测大鼠术后1,3,5,7天心脏组织Fas,FasLmRNA的表达量,其中Fas蛋白表达于心脏组织中,FasL蛋白表达在活化的T细胞上。②应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测心肌细胞的凋亡细胞,阳性细胞胞核呈现棕黄色。凋亡指数=凋亡细胞数/总细胞数×100%。③根据常规病理切片进行急性排斥反应分级,计0￣4级,0级:无排斥,心肌组织正常,心肌间质无炎细胞浸润;4级:弥漫性多类型细胞浸润,明显心肌间质水肿、出血和心肌坏死。结果:36只心脏移植模型大鼠全部进入结果分析,无脱失。①大鼠心脏移植术后随时间推移排斥反应逐渐加重,术后第7天排斥反应最重。②随急性排斥反应的加重,凋亡指数、FasL的表达均逐渐增高(0级:1.626±0.677,0.198±0.023;4级:11.404±1.274,0.408±0.051),发生4级排斥反应大鼠的心肌细胞凋亡指数、心脏组织FasLmRNA的表达量最高;而FasmRNA的表达量保持不变。③心脏移植术后受体大鼠发生急性排斥反应的程度与心肌细胞凋亡指数及心脏组织FasLmRNA的表达成正相关(r=0.863,0.880,P<0.01);急性排斥反应程度与FasmRNA表达不相关(r=0.032,P>0.05)。结论:心脏移植术后受体大鼠发生急性排斥反应的程度与心肌细胞凋亡指数及心脏组织FasLmRNA的表达成正相关,与FasmRNA表达不相关,提示可能是FasL阳性浸润细胞-活化的T细胞诱导Fas阳性心肌细胞凋亡从而介导移植排斥反应。     

心脏移植后冠状血管病发生与细胞凋亡的实验研究

目的：检测心脏移植后冠状血管病变标本中细胞凋亡的发生，确定凋亡机制在移植后冠状血管病发生中的作用。方法：建立心脏移植后冠状血管病模型，检测细胞凋亡的发生，探讨细胞凋亡的发生规律及细胞凋亡与移植后冠状血管病的关系。结果：实验组和对照组心肌可见凋亡细胞，但无显著差异。血管壁中未见到凋亡细胞，结论：凋亡发生与组织内细胞成分多少有关，心肌内细胞凋亡的发生率高于血管壁组织。     

同种异体原位心脏移植急性排斥反应心电图分析

同种异体原位心脏移植 (简称心脏移植 ) ,1年存活率为80 % [1 ]。急性排斥反应发生率虽然不高 ,但早期发现及时处理 ,是影响预后的关键。我们发现急性排斥反应心电图 1例 ,且经取供心心肌病理切片证实为急性排斥反应 级。报告如下。1　资料与方法1.1　患者男 ,37岁。因活动时胸闷、呼吸困难 2年 ,加重伴双下肢水肿 10个月于 1999年 7月 11日入院。查 BP10 6 / 76 mmHg(14/ 10 k Pa) ,半卧位 ,口唇紫绀 ,颈静脉怒张 ,双肺底部湿罗音 ,心浊音界向两侧扩大 ,HR110次 / m in,律规整 ,心音低钝 ,心尖区有 / 6级 SM,柔和不传导。腹部膨隆 ,…     

细胞凋亡检测方法研究进展

本文综述了细胞凋亡的各种定性、定量检测方法,并对各自的优缺点作了评价。认为检测细胞膜成份的Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ联合ＰＩ染色双参数技术是较为理想的凋亡定量检测方法。     

超声心动图对心脏移植排斥反应的评价

心脏移植手术始于６０年代中晚期［１,２］,到目前为止,已挽救了数以万计的心脏病人的生命。然而,移植心脏的排斥反应却常常导致心肌细胞变性坏死,心脏功能下降,血流动力学发生改变,若病情持续发展可使心脏功能严重受损,甚至导致手术失败,影响了术后生存率。如能...     

心脏移植急性排斥反应与CD8+CD28+T细胞钙离子浓度变化的相关性研究

目的：探讨CD8^＋CD28^＋T细胞钙离子浓度的变化与心脏移植急性排斥反应（AR）的相关关系。方法：用流式细胞仪检测正常SD大鼠组（T0组）、同种心脏移植组（T1）（Wistar→SD大鼠）术后第1、3、5、7天CD8^＋CD28^＋T细胞内钙离子浓度的变化，分析CD8^＋CD28^＋T细胞内钙离子浓度的变化与心脏移植AR程度的相关关系。结果：CD8^＋CD28^＋T细胞内钙离子浓度升高与AR严重程度成正相关，相关系数为0．469，相关具有显著性（P〈0．05）。结论：心脏移植后CD8^＋CD28^＋T细胞内钙离子浓度显著升高，其升高程度与AR严重程度成正相关。     

大鼠小肠移植中细胞凋亡发生的阶段性及其意义

目的研究同种异体大鼠小肠移植后移植肠缺血再灌注、排斥反应与细胞凋亡的关系以及相关肠系膜淋巴结（GALT）中出现凋亡细胞的意义。方法选用近交系F344／N和封闭群Wistar／A大鼠建立异位小肠移植模型，同时根据移植肠是否缺血预处理分为4组；同基因移植组（A组）、同基因缺血预处理组（A^＋组）、异基因移植组（B组）、异基因缺血预处理组（B^＋组），未行移植F344／N大鼠为空白对照。每组术后2h、1d、3d、5d、7d分别处死4只大鼠，获取移植肠及相关肠系膜淋巴结分别行组织病理学检查、TUNEL法检测细胞凋亡以及电镜观察。结果术后2h：A^＋、B^＋组移植肠细胞凋亡数量显著增加；术后1d：A^＋、B^＋组移植肠细胞凋亡数量均明显减少，而B、B^＋组相关肠系膜淋巴结细胞凋亡数量明显增加；术后3d、5d、7d：B、B^＋组移植肠细胞凋亡数量呈渐进性增加，而相关肠系膜淋巴结细胞凋亡数量呈渐进性减少。结论排斥反应和缺血再灌注损伤均可引起细胞凋亡，早期移植肠第1次出现凋亡细胞系缺血再灌注损失所致，移植肠第2次细胞凋亡数量增加则是排斥反应的标志。早期移植肠相关肠系膜淋巴结细胞凋亡数量增加与排斥反应有关并发生于排斥反应出现前。     

与细胞凋亡相关的蛋白酶研究进展

目前国内外许多学者都逐渐认识到细胞内蛋白酶与细胞凋亡密切相关,认为这些蛋白酶可能在细胞凋亡的启动方面起着关键性作用。本文就这些蛋白酶的种类,底物及其抑制剂的作用作一综述。     

氨基胍与环孢素A联用对大鼠心脏移植后细胞凋亡的影响

目的: 探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍与环孢素A联合应用对同种大鼠心脏移植后急性排斥期细胞凋亡的影响.方法:采用Ono大鼠心脏移植模型,将Wistar大鼠心脏移植入SD大鼠腹腔内,分为四组.(1)对照组:术后不作处理;(2)环孢素A组:术后每日腹腔注射环孢素A 5mg/(kg·d);(3)氨基胍组:术后每日皮下注射AG 600mg/(kg·d);(4)环孢素A加氨基胍组:术后每日腹腔注射环孢素A 5mg/(kg·d)并皮下注射AG600mg/(kg·d).术后4 d用TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数(AI),并观察移植心肌存活时间.结果:与单独使用环孢素A和氨基胍相比,环孢素A与氨基胍联合应用显著减少急性排斥期移植心肌细胞凋亡数目,凋亡指数与其他组比较有显著性差异(P<0.05),并延长了移植心脏的存活时间(P<0.05).结论:环孢素A与氨基胍合用可协同移植心肌细胞凋亡,延长移植物存活时间.     

氨磷汀与细胞凋亡的研究进展

氨磷汀(Amifostine)一种广谱的细胞保护剂，除了通过稳定细胞DNA分子、消除氧自由基而发挥保护作用外，抑制细胞凋亡是其保护细胞作用的重要机制。本文着重讨论氨磷汀的抗凋亡作用以及可能的分子机制。     

细胞凋亡与肾脏疾病

生物体内环境的稳定不但依赖细胞增殖和分化，也依赖于细胞凋亡。凋亡与增殖是调控细胞数目稳态作用相反的一对机制，破坏他们之间的平衡就会导致机体的细胞数目异常增多或减少，从而导致疾病发生。在肾脏发育和各种肾脏疾病包括各种肾小球肾炎、梗阻性肾病、肾小管损伤及其修复、肾囊肿、肾脏缺血再灌注及移植肾排斥反应中均发现有细胞凋亡的发生，细胞凋亡影响着肾脏疾病的发生、发展和结局。     

凋亡细胞清除的研究进展

细胞凋亡与增殖过程的平衡是维持机体组织的自身稳定性和保证正常细胞及组织功能发挥的一个重要机制。凋亡细胞表面组分性质的改变构成传递给吞噬细胞识别信号。单核细胞来源的巨噬细胞、树突细胞等通过识别凋亡细胞表面特异性信号，如细胞表面的胞膜磷脂成分、碳水化合物等，识别、吞噬和清除凋亡细胞。凋亡细胞的及时清除，可以防止细胞内有害物质的释放，避免炎症的发生，对防止重要组织、器官(如肺、肝)的损伤和延缓自身免疫性疾病的发生有重要的临床意义。     

超声心动图系列监测原位心脏移植后的临床研究

目的探讨原位心脏移植术后超声心动图系列检测的临床意义。方法自1998年起7例心脏移植患者，定期超声心动图检查，必要时心肌活检。结果（1）吻合左右心房术后即出现二尖瓣、三尖瓣返流；心房大小与术后是否出现瓣膜返流直接相关；（2）急性排斥时最先出现右室扩大及新出现三尖瓣返流；心肌增厚、返流逐渐加重提示排斥反应；（3）慢性排斥可导致限制型心肌病。结论超声心动图可及时无创地监测排斥反应，为临床诊治提供重要的参考依据。     

脑缺血再灌注损伤中细胞凋亡的研究进展

在近些年的研究中，发现脑缺血后有相当部分的血管能自然再通或经溶栓治疗后血流恢复再通，但随之而来的是出现再灌注损伤。脑缺血再灌注损伤中的神经细胞凋亡现象受到人们的关注，本文就其研究进展作一综述。     

肾移植体液免疫排斥反应的研究进展

肾移植术后的免疫排斥反应是影响移植肾长期存活的主要原因。而启动移植免疫排斥反应的根本原因是移植物中表达有受体内所缺少的主要组织相容性复合物（MHC）、次要组织相容性复合物（minMC）、ABO抗原等,受体免疫系统将移植物作为异物而发生的免疫反应。移植排斥反应包括细胞免疫和体液免疫。通常认为,细胞性排斥反应是移植物排斥反应的直接原因。而越来越多的证据表明,同种异体抗体介导的体液免疫排斥反应亦能对移植物的丢失产生重要的影响。目前国内外已有体液免疫排斥的相关研究。     

大鼠异位心脏移植动物模型制作的外科技巧

目的：探讨大鼠异位心脏移植动物模型制作的外科技巧。方法：制作80例Wistar-SD大鼠腹腔异位心脏移植动物模型，在供心的切取、受体的肝素化、腹腔血管的准备、心肌的灌注和保护及血管的吻合上有较多的改进。结果：应用改进的方法，制作心脏移植动物模型成功率为92．5％。结论：提高外科技能是保证大鼠异位心脏移植成功率的关键。     

手术期间输注供体脾细胞诱导异基因大鼠心脏移植耐受

目的在进行心脏移植手术的同时,经门静脉输注供体脾细胞诱导移植耐受,并探讨其耐受机制。方法在DA→Lewis大鼠间进行心脏移植手术,血液流通后经门静脉给Lewis大鼠输注供体DA的脾细胞（3×10     

同种异位心脏移植的超声心动图研究

目的 研究异位心脏移植的超声心动图特点,评价心功能及早期排异反应.方法 对5例接受异位心脏移植的患者,应用超声心动图分别进行术前、术中、术后及随访观测.观察原位受体心脏(受体)和异位供体心脏(供体)的吻合关系及房室大小、左室射血分数(LVEF)、室壁运动、瓣膜功能、肺动脉压变化、胸腔积液及心包积液情况.结果 5例均为冠心病晚期患者,心功能Ⅲ～Ⅳ级,左室射血分数平均(24.4±4.1)%.所有患者均有室壁瘤,并接受冠状动脉旁路移植术.部分患者接受二尖瓣成形、室壁瘤切除及干细胞移植.供体均置于右侧胸腔.4例为左心辅助,1例为全心辅助.超声评价术前受体的心功能减低,均发现异常室壁运动及室壁瘤.术中经食管超声能够评价复跳后即刻心功能、吻合口、瓣膜以及心脏排气的情况.超声显示术后供体和受体心功能均逐渐恢复;在术后随访6个月至1年中,受体心功能较术前不同程度提高.主要的排异反应为少量的胸腔及心包积液.结论 异位心脏移植超声心动图具有鲜明的特征性,在术前受体评价、术中监测及术后随访中都具有重要的临床价值.