以ITS为主要成分的无血清培养基对软骨细胞增殖和表型的影响

目的观察以ITS为主要成分的无血清培养基对软骨细胞增殖和表型的影响。方法培养猪耳软骨细胞,分为无血清组和含血清组,无血清组应用包含胰岛素铁硒传递蛋白（ITS）、地塞米松及维生素C为主要成分的无血清培养基：含血清组应用包含10％血清的常规培养基。观察平面和三维培养状态下无血清培养基对软骨细胞增殖、基质分泌和软骨表型维持的作用。结果平面培养条件下．无血清组的细胞增殖率出现下调．细胞表型不能维持。在三维培养情况下无血清组可以保持软骨细胞存活和软骨细胞的表型,Ⅱ型胶原和蛋白多糖组织学染色结果与含血清组无明显差异,软骨特异基因ColⅡ、Aggrecan的表达与含血清组无明显差异,并能够形成较好的软骨样组织。结论以ITS、地塞米松及维生素C为主要成分的无血清培养基．在三维培养条件下能基本保持软骨细胞的存活和表型．可用于软骨细胞的体外三维培养．     

对可注射用丝蛋白基三元水凝胶理化特性的验证

目的 设计一种可注射用丝蛋白基水凝胶体系。方法 利用丝蛋白、羟丙基甲基纤维素和丙三醇的三元混合溶液,混合形成凝胶,通过流变学、分子结构、微观形貌和力学性能对三元体系进行表征。结果 本研究设计的丝蛋白基三元溶液/水凝胶体系（SF-HPMC-G溶液/水凝胶）,其体系中丝蛋白浓度范围为2.1～6.4 wt%。该三元溶液具有剪切变稀的流动行为,剪切速率在10 s-1以上时体现低于1 Pa·s的粘度。当三种组分以相同比例混合时（SF12 wt%）,在1 h 9 min实现凝胶化。所得三元水凝胶具有较为均匀的多孔网络微观形貌,β-折叠构象含量随丝蛋白浓度提高而增加,压缩力学性能由丝蛋白浓度和HPMC浓度共同决定,压缩模量随丝蛋白浓度增加而提高。羟丙基甲基纤维素能够强韧化丝蛋白基水凝胶,同时丙三醇能加速丝蛋白凝胶化,这种三元体系也有着一定的可注射性。结论 SFHPMC-G三元水凝胶属于生物相容体系,初步验证了可注射性和快速凝胶化性质,为可注射丝蛋白基水凝胶的设计提供了一种新的应用思路。     

丹参酮ⅡA对软骨细胞去分化影响的研究

目的研究丹参酮ⅡA在大鼠膝软骨细胞体外培养中对软骨细胞去分化的影响。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法获取2周龄SD大鼠膝关节原代软骨细胞,体外培养传代至P4进行实验。对照组用含10%小牛血清高糖DMEM培养(基础培养液)。实验组有3个浓度:100μg/ml组用基础培养液+100μg/ml丹参酮ⅡA培养,200μg/ml组用基础培养液+200μg/ml丹参酮ⅡA培养,400μg/ml组用基础培养液+400μg/ml丹参酮ⅡA培养。培养72 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增值情况,光学显微镜观察软骨细胞形态,阿利新蓝染色观察糖胺聚糖(GAG)含量,实时荧光定量PCR检测Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅹ型胶原表达情况。结果 400μg/ml组肉眼可见的细胞密度低于其他各组,且阿利新蓝染色最浅。培养24 h、48 h、72 h,100μg/ml组、200μg/ml组的OD值均大于对照组,而400μg/ml组OD值均小于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。实验组的Ⅰ型、Ⅹ型胶原m RNA含量明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。400μg/ml组Ⅱ型胶原m RNA含量低于对照组,100μg/ml组、200μg/ml组Ⅱ型胶原m RNA含量高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);但100μg/ml组、200μg/ml组差异无统计学意义(P0.05)。结论不同浓度的丹参酮ⅡA对去分化软骨细胞作用有所区别,100μg/ml、200μg/ml时促进软骨细胞增殖,抑制去分化进程;400μg/ml时抑制软骨生长活性,细胞基质分泌减少。     

三维共培养体系促进去分化的软骨细胞再分化的实验研究

目的探讨海藻酸钠水凝胶三维共培养体系对去分化的软骨细胞再分化的影响。 方法将第1代(P1)软骨细胞及第4代(P4)软骨细胞分别与ATDC5按3 ∶1的比例在海藻酸钠水凝胶内进行三维共培养,即AP1组及AP4组。另建立单纯P1、P4及ATDC5的三维培养体系,即P1、P4及ATDC组,全部以软骨诱导液为培养基,提供外源性转化生长因子(TGF-β3)。培养28 d后,通过Q-PCR检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖基因的表达情况,组织学染色观察等手段,比较各组的Ⅱ型胶原及蛋白聚糖基因的表达水平,结果以Bonferroni检验法进行统计学分析。 结果AP4组中Ⅱ型胶原及蛋白聚糖基因的表达明显上调,且与P1、P4组的差异有统计学意义(Ⅱ型胶原：F＝38.41,P<0.01;蛋白聚糖：F＝5,P<0.01),且在组织学染色上也能观察到相关蛋白产物明显沉积。 结论三维共培养体系能让去分化的软骨细胞重新出现其特有的表型,其机制涉及细胞因子及细胞直接接触等方面。     

胶原水凝胶支架用于软骨组织工程的实验研究

目的探讨Ⅰ型胶原浓度对胶原水凝胶理化性能的影响,以及在体外组织工程模型中不同浓度的Ⅰ型胶原水凝胶对软骨细胞表型和基因表达的影响。方法制备Ⅰ型胶原浓度为12、8、6 mg/mL的3种胶原水凝胶,记为C12、C8、C6。扫描电镜观察形貌,并通过溶胀性能和抗压性能测试表征其理化性能。取2只新生7日龄新西兰大白兔的关节软骨,酶消化法分离、培养软骨细胞。取第2代软骨细胞与3种胶原水凝胶复合体外培养(C12组、C8组及C6组),1 d后采用二乙酸荧光素(fluorescein diacetate,FDA)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色,激光共聚焦显微镜观察细胞活性,体外培养14 d后行HE和甲苯胺蓝染色观察组织学形态,实时荧光定量PCR测定软骨细胞相关基因,即Ⅱ型胶原、蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅰ型胶原、Ⅹ型胶原、Sox9 mRNA表达。结果随着Ⅰ型胶原浓度从6 mg/mL提高到12 mg/mL,胶原水凝胶的理化性质出现明显变化,扫描电镜下纤维网络变得致密;192 h时C6、C8、C12溶胀率依次增大,分别为0.260±0.055、0.358±0.072、0.539±0.033,比较差异均有统计学意义(P<0.05);压缩模量逐渐增加,分别为(4.86±0.96)、(7.09±2.33)、(11.08±3.18)kPa,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。体外培养1 d,3组凝胶中软骨细胞经FDA/PI染色后,绝大部分被染成绿色,仅有少数被染成红色。14 d后组织学观察示:C12组软骨细胞在组织中聚集明显,并出现明显的甲苯胺蓝异染为紫红色的现象;C8组中也有部分增殖聚集的区域,细胞周围有较明显的甲苯胺蓝异染现象;C6组细胞分布较为均匀,也有较明显的甲苯胺蓝异染现象。实时荧光定量PCR检测显示,3组Ⅱ型胶原mRNA和Aggrecan mRNA表达水平相近;Ⅰ型胶原、Sox9和X型胶原mRNA表达水平C12组最高,C6组最低,C8组介于二者之间,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论提高Ⅰ型胶原浓度至12 mg/mL后,胶原水凝胶具有更好的理化性质,但软骨细胞纤维化和肥大相关基因表达也有所上调。     

转化生长因子-β1基因修饰对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响

目的观察骨髓间充质干细胞经转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor,TGF-β1)基因修饰后增殖能力和向软骨细胞分化能力的变化。方法利用脂质体将pcDNA3-TGF-β1基因导入骨髓间充质干细胞,通过大体形态观察、CCK-8测定转染前后骨髓间充质干细胞的增殖代谢能力,同时RT-PCR和Westernblot法检测软骨特异性细胞外基质蛋白Ⅱ型胶原的表达。结果基因修饰后骨髓间充质干细胞倍增能力明显增强,并且Ⅱ型胶原蛋白表达增加。结论经TGF-β1基因修饰的MSCs向软骨细胞分化能力增强,是优秀的软骨组织工程种子细胞。     

活性维生素D3对体外原代培养人骨关节炎软骨细胞的影响

目的探讨不同浓度的1α,25二羟基维生素D3[1,25-（OH）2D3]对体外培养的人骨关节炎患者关节软骨细胞的增殖及凋亡率的影响。方法酶二步消化法体外分离培养人软骨细胞,以碱性磷酸酶染色法鉴定。加入不同剂量的[1,25-（OH）2D3],通过噻唑蓝比色试验检测细胞存活和增殖情况,以及用流式细胞仪检测软骨细胞在不同药物浓度、不同作用时间的凋亡率。结论 [1,25-（OH）2D3]作用于人骨关节炎软骨细胞的最佳作用浓度为1×10-5umol/L,最佳作用时间点为48 h。高浓度的[1,25-（OH）2D3]能明显促进细胞坏死,极低浓度的[1,25-（OH）2D3]对软骨细胞增殖、凋亡无明显影响。     

骨性关节炎水通道蛋白1的表达与软骨细胞凋亡相关性研究

目的水通道蛋白1(aquaporins 1,AQP-1)表达变化可能与细胞凋亡相关。通过观察软骨组织中AQP-1和半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达,探讨AQP-1表达与软骨细胞凋亡的相关性,为进一步研究骨性关节炎(os teoarthritis,OA)的发病机制提供实验依据。方法取8周龄清洁级雄性SD大鼠72只,体重286～320 g,平均300 g;随机分为手术组、假手术组和对照组,每组24只。手术组采用切断前交叉韧带及内侧副韧带、部分切除内侧半月板方法制备大鼠双膝OA模型;假手术组仅暴露关节腔;对照组不作处理。造模后观察大鼠一般情况,于1、2、4、8周处死大鼠取膝关节标本行大体、组织学观察;采用实时荧光定量PCR检测AQP-1和Caspase-3 mRNA的表达情况;使用酶标仪检测Caspase-3蛋白酶活性;并对AQP-1 mRNA表达与Caspase-3 mRNA的表达及蛋白酶活性的相关性进行分析。结果术后共6只大鼠死亡,均给予补充;其余大鼠均存活至实验完成。各时间点对照组及假手术组膝关节软骨外观及结构均正常;随时间延长手术组关节软骨表面粗糙且有裂隙,可见大量赘生物,软骨表层纤维化,细胞排列紊乱。参照Mankin评分标准,造模后1周各组组织学评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);2、4、8周时手术组与对照组、假手术组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。造模后1周,手术组AQP-1、Caspase-3 mRNA表达和Caspase-3蛋白酶活性与假手术组及对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而2、4、8周时手术组以上指标均明显高于对照组和假手术组(P<0.05),且随时间延长呈增高趋势。AQP-1 mRNA和Caspase-3 mRNA表达成正相关(r=0.817,P=0.000),回归方程为y=0.426 7x2+0.051 5x;AQP-1 mRNA表达和Caspase-3蛋白酶活性亦成正相关(r=0.945,P=0.000),回归方程为y=15.423 0x+4.392 8。结论 AQP-1的表达上调可能与软骨细胞凋亡相关,在OA发病过程中AQP-1表达的变化可能参与了OA的发生、发展。     

软骨形态发生蛋白1诱导犬真皮成纤维细胞向软骨细胞表型分化的实验研究

目的探讨软骨形态发生蛋白1（Cartilage-derived morphogenetic protein-1,CDMP1）诱导体外培养的犬真皮成纤维细胞（Dermal fibroblasts,DFs）向软骨细胞表型分化的可行性。方法应用CDMP1细胞诱导液对体外扩增至第4代的犬DFs进行诱导培养,观察细胞的形态变化,以免疫荧光染色和RT-PCR检测细胞中软骨特异蛋白的表达情况。结果诱导培养6 d后,实验组部分DFs呈星形或多角形,免疫组化染色显示有软骨特异的II型胶原分泌,RT-PCR检测也表明有Ⅱ型胶原、aggrecan和SOX9表达。但是诱导培养10 d后,均转为阴性。结论 CDMP1可以诱导犬DFs向软骨细胞表型分化,有可能成为组织工程化纤维软骨的种子细胞。     

水凝胶敷料对糖尿病足创面的促愈合作用研究进展

近年来,糖尿病患者人数逐渐增加,发生糖尿病足患者人数也随之增加。糖尿病足具有较高的致残率和致死率,严重影响患者的生活质量,既缩短预期寿命,又带来沉重的社会负担。糖尿病足目前的治疗方法存在不足,组织工程的理念与方法为糖尿病足的治疗提供了新的思路和手段。本文介绍了糖尿病足的发病机制、导致糖尿病足创面难愈合的因素、用于治疗糖...     

骨形态发生蛋白-2对兔骨髓基质细胞向软骨细胞分化基因表达的影响

目的 观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因对兔骨髓基质细胞(MSCs)向软骨细胞分化mRNA表达的影响.方法 从兔骨髓细胞中分离提取BMP-2 mRNA,构建重组BMP-2真核表达质粒,并转染兔MSCs,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组MSCs内Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达水平.结果 转染后2、4 d实验组MSCs内的Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达量28.7±4.0、236.7±48.5及26.9±4.3、208.2±36.7,均明显高于转染后2、4 d的空白对照组(16.1±2.8、99.2±24.8及14.6±2.7、111.1±18.9)和空载体对照组(14.6±2.6、85.4±24.7及16.1±2.8、98.0±22.5)(P＜0.05).结论 重组真核表达载体BMP-2质粒能够诱导MSCs向软骨细胞分化.

Abstract：

Objective To observe the effect of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) on gene expression during the differentiation of marrow stromal cells (MSCs) into chondrocytes. Methods The BMP-2 mRNA was extracted from the rabbit bone marrow cells. The recombinant BMP-2 eukaryotic expression plasmids were constructed and transfected into MSCs. The mRNA expression of type Ⅱ collagen and proteoglycan was detected by using quantitative polymerase chain reaction (PGR) technique. Results At 2nd, and 4th day after transfection of plasmid pEGFP-C3-BMP-2 into MSCs, the mRNA expression levels of type Ⅱ collagen and proteoglycan in MSCs of experimental group were significantly higher than controls (P ＜ 0. 05 ). Conclusion Recombinant eukaryotic expression plastmid pEGFP-C3-BMP-2 can induce MSCs differentiation towards chondrocytes.     

PhaP—RGD融合蛋白修饰的PHBHHx与人鼻中隔软骨细胞的生物相容性研究

目的：观察经PhaP-RGD融合蛋白修饰的3-羟基丁酸和3-羟基己酸的共聚酯（PHBHHx）生物材料与人鼻中隔软骨细胞的生物相容性。方法体外培养人鼻中隔软骨细胞,接种于经PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx膜性材料上进行体外培养,通过MTT比色法、DAPI染色、扫描电镜、甲苯胺蓝染色等实验方法观察在体外条件下生物修饰后的PHBHHx膜与鼻中隔软骨细胞的生物相容性。结果经PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx膜表面接触角变小,亲水性增加;人鼻中隔软骨细胞在蛋白修饰后的生物膜材料表面能保持较高的增殖率;经蛋白修饰的PHBHHx膜表面的软骨细胞活力明显高于细胞培养板及未经蛋白修饰的PHBHHx膜上的软骨细胞;甲苯氨蓝染色发现经PhaP-RGD修饰的PHBHHx膜能促进软骨细胞分泌胞外基质糖胺多糖。结论经PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx与软骨细胞的生物相容性良好,是一种较理想的软骨组织工程支架材料。     

去铁胺对高氧机械通气大鼠肺表面活性蛋白D和抗氧化酶的影响

目的研究去铁胺(DFO)对高氧机械通气大鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)和抗氧化酶的影响。方法雄性SD大鼠24只,体重180～220 g。随机分为三组:空气组(M组)、高氧组(H组)和DFO组(D组),每组8只。麻醉状态下,M组行空气(FiO_2=21%)机械通气,H组和D组行高氧(FiO_2=90%)机械通气。M组和H组尾静脉输注生理盐水1 ml/h,D组尾静脉输注等容量DFO(200mg/kg,1 ml/h)。机械通气4 h后取左肺制备支气管肺泡灌洗液(BALF),取右肺组织制备肺组织匀浆、计算湿干重比(W/D)并制备病理切片、行病理损伤评分。采用ELISA法测定BALF和肺组织匀浆中SP-D含量、谷胱甘肽还原酶(GR)和黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。结果 H组和D组BALF和肺组织匀浆中SP-D含量明显低于M组(P0.05),GR活性明显弱于M组(P0.05),XOD活性明显强于M组(P0.05),W/D和病理损伤评分明显高于M组(P0.05)。D组SP-D含量明显高于H组(P0.05),GR活性明显强于H组(P0.05),XOD活性明显弱于H组(P0.05),W/D和病理损伤评分明显低于H组(P0.05)。结论高氧机械通气4 h可造成明显的肺损伤和肺组织SP-D含量降低,去铁胺可增加SP-D含量、减轻肺损伤,其机制与增强肺组织GR活性和降低XOD活性有关。     

胰岛素和睾酮对Ishikawa细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的探讨胰岛素(INS)和睾酮(T)对多囊卵巢综合征(PCOS)子宫内膜腺上皮细胞生长的影响和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的调节机制。方法体外培养Ishikawa细胞,予不同浓度INS(90、60、30、3、0.3 U/L)或T(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mmol/ml)刺激Ishikawa细胞48 h,MTT法检测INS、T对Ishikawa细胞生长的作用;免疫细胞化学检测GLUT4蛋白在Ishikawa细胞定位表达;分别以30 U/L INS和10-5mmol/ml T刺激Ishikawa细胞24和48 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定INS和T对Ishikawa细胞GLUT4 mRNA表达的影响。结果(1)不同浓度的INS均可促进Ishikawa细胞的生长,随着INS浓度的增加,INS促进Ishikawa细胞生长作用越强,INS浓度自0.3~30 U/L时,Ishikawa细胞生长依次加强,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。INS浓度达60、90 U/L时,细胞生长状况与INS浓度为30 U/L相似。不同浓度的T均可抑制Ishikawa细胞的生长,随着T浓度的增加,T抑制Ishikawa细胞生长作用越明显。T浓度自10-7、10-6、10-5mmol/ml,Ishikawa细胞生长依次减弱,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01,P<0.05),T浓度达10-4、10-3mmol/ml时,细胞生长抑制状况与T浓度10-5mg/ml相似。(2)GLUT4蛋白,定位表达于Ishikawa细胞的细胞浆内。(3)Ishikawa细胞中GLUT4 mRNA表达,在INS组和T组均较对照组减弱(P<0.01,P<0.05),INS组比T组减弱更明显(P<0.05),且INS和T作用24和48 h GLUT4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论不同浓度INS和T均可影响Ishikawa细胞生长,并降低GLUT4 mRNA的表达,推测PCOS高胰岛素、高雄激素血症的病理生理特性有可能影响子宫内膜的代谢过程,与子宫内膜的病变相关。     

兔关节软骨细胞体外培养的生物学特性及中药黄芪对其的影响

目的:研究兔关节软骨细胞与海藻酸钠复合体外培养的生物学特性及中药黄芪对其的影响。方法:取5个月龄兔膝关节软骨分离成软骨细胞悬液分组培养,A组只用培养液培养,B组用含2%黄芪注射液的培养液培养。分别于第2、4、6、8周进行细胞组织形态学、糖胺多糖(GAG)含量的测定及Ⅱ型胶原蛋白表达的观察。结果:①两组于第4～6周体外培养的软骨细胞合成糖胺多糖的能力及Ⅱ型胶原蛋白的表达均达高峰,6周后逐渐下降;②B组软骨细胞合成糖胺多糖及Ⅱ型胶原蛋白的能力均比同期A组增强,具有显著统计学意义(P<0.05)。结论:软骨细胞与海藻酸钠复合培养,可保持软骨细胞的表型,用其构建组织工程化软骨是可行的。黄芪有促进软骨细胞合成Ⅱ型胶原和GAG的作用。     

透明质酸水凝胶包封对携带BMP-2基因的腺病毒转染骨髓间充质干细胞增殖活性及其表达的影响

目的:探讨携带骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)基因的腺病毒转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后应用透明质酸水凝胶(hyaluronic acid hydrogel,HAH)包封对BMSCs增殖能力及其表达目标蛋白BMP-2的影响。方法:体外分离、提取、鉴定BMSCs,并将提前构建好的Ad-BMP-2转染BMSCs并使用HAH进行包封,激光共聚焦显微镜下观察Ad-BMP-2转染的BMSCs在HAH包封下的三维形态。实验分为4组(各组培养条件无差异):A组(未转染BMP-2的BMSCs);B组(HAH+未转染BMP-2的BMSCs);C组(转染BMP-2的BMSCs);D组(HAH+转染BMP-2的BMSCs)。分别一周内不同时相点(1d、2d、3d……7d)使用CCK-8法检测各组OD值来评价细胞增殖活性;ELISA法检测各组BMP-2的量(pg/ml)来评价目标蛋白的表达状况。结果 :激光共聚焦显微镜三维重建可观察到BMSCs可在HAH中任意平面铺展,有充足的生长空间。BMSCs的增殖活性检测显示,随着培养时间延长,细胞增殖活性逐渐增强,A组、C组4d后的OD值较1d时明显增大(P0.05);B组和D组5d后的OD值较1d时明显增大(P0.05);至7d时,A组OD值为1.283±0.061,B组为1.844±0.075;C组为1.570±0.099;D组为1.976±0.142,包封HAH的B、D组OD值均优于没有包封HAH的A、C组(P0.05)。BMP-2的表达在A、B组较弱,不同时间点间无显著性差异(P0.05);C、D组的BMP-2表达各时间点均明显高于A、B组(P0.05);从4d时起,C、D两组的BMP-2表达显著增加(与1d时比较P0.05),且D组明显优于C组,差异有显著性(P0.05)。结论 :三维环境下(即包封HAH后),Ad-BMP-2转染的BMSCs不仅有较强的增殖活性;而且对BMP-2的表达具有一定的促进作用。     

煅烧骨与水凝胶复合对骨髓基质细胞贴附和生长的影响

目的：观察煅烧骨（CBB）与聚氧化乙烯－聚氧化丙烯－聚氧化乙烯三聚体（PEO－PPO－PEO）聚合物水凝胶（HG）复合对骨髓基质细胞（MSC）的贴附，增殖及分化的影响，探讨组织工程骨构建的最佳方法。方法：CBB、HG、MSC按不同方式和顺序复合，形成三种复合物CBB／HG／MSC和A组、HG／MSC／CBB为B组、CBB／MSC／HG为C组，CBB／MSC作为对照进行体外培养。5、10天取材，扫描电镜观察细胞形态以及与材料的贴附情况，细胞计数观察其增殖情况，组织化学方法检测MSC的碱性磷酸酶（ALP）活性及免疫组织化学方法检测其Ⅰ型胶原基因表达情况，结果：扫描电镜见A、C组与对照组细胞完全伸展，但A组细胞数量明显增多，重叠生长，细胞外基质分泌增加，优于C组和对照组，而B组细胞大多数圆形，轻微伸展，无细胞外基质分泌。A组与C组的ALP活性无差异（P＞0．05），但显著高于B组和对照组（P＜0．05＝。5天时四组细胞Ⅰ型胶原合成情况无明显差异，但10天时B组细胞的Ⅰ型胶原平均灰度值明显高于其它三组（P＜0．01）。结论：CBB、HG与细胞不同的复合对MSC的贴附，增殖，分化均有影响，CBB／HG／MSC顺序复合较好。     

丝蛋白软骨支架力学特性及其对关节软骨原位再生的影响

目的 探讨组织工程软骨支架降解过程中的力学保持性及其对软骨原位再生效果的影响。方法 采用低温冷冻凝胶策略制备具有物理化学双交联结构的丝蛋白（SF）支架,在此基础上,运用扫描电镜、力学测试和组织学方法表征了支架的微观形貌、降解过程中的力学性能、体内组织相容性和软骨原位再生效果。结果 物理化学双交联SF支架相较于普通冷冻干燥法制备的支架,呈现出更均匀的空隙结构,体现更优异的弹性和韧性,并且在降解过程中保持了结构完整性和力学稳定性。大鼠皮下试验结果表明,SF支架植入28 d后无明显异物反应,与周围组织融合良好。兔关节软骨缺损模型试验表明,SF支架能够维持稳定的力学微环境,促进软骨新基质的形成并实现软骨原位再生。结论 SF支架降解过程中的力学保持性对于软骨新基质的形成具有重要作用。     

铁调素对小鼠单核细胞RAW264.7膜铁转运蛋白1（FPN1）表达的影响

目的：观察铁调素对小鼠单核细胞RAW264．7膜铁转运蛋白1（ FPN1）的表达,探讨铁调素对RAW264．7细胞作用的可能通路和机制。方法将不同浓度的铁调素加入含有核因子κB受体活化因子配体（ RANKL）的RAW264．7细胞培养基,24 h后用免疫荧光和Western－blot方法测定FPN1的表达,共聚焦显微镜（ CLSM ）测定细胞内铁离子的浓度。结果 RAW264．7细胞膜上存在FPN1受体的阳性表达;在本实验铁调素浓度干预范围内,FPN1的表达随着铁调素浓度的增加呈浓度依赖性降低（P＜0．05）,同时细胞内铁离子的含量随着铁调素浓度的增加呈浓度依赖性增加（P＜0．05）。结论小鼠单核细胞RAW264．7是铁调素作用的靶细胞,铁调素可通过降解其细胞膜上的FPN1增加细胞内的铁离子。     

水胶体敷料联合小牛血去蛋白提取物眼用凝胶在ICU昏迷患者眼部保护的应用效果

目的 分析水胶体敷料联合小牛血去蛋白提取物眼用凝胶在重症监护室（ICU）昏迷患者眼部保护的应用效果。方法 选取2021年1月-12月我院外科ICU收治的中-重度昏迷患者40例（80眼）,左眼为对照组,右眼为试验组,对照组使用0.9%氯化钠纱布覆盖眼部,试验组使用小牛血去蛋白提取物眼用凝胶滴眼后给予水胶体敷料覆盖眼部,比较两组眼睑闭合程度、角膜荧光素着染情况、角膜水肿情况、泪膜破裂时间、眼红程度。结果 试验组眼睑闭合良好占比高于对照组,有着染和水肿占比低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。试验组眼红程度评分低于对照组,泪膜破裂时间长于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 水胶体敷料联合小牛血去蛋白提取物眼用凝胶在对昏迷患者眼部保护效果优于0.9%氯化钠盐水纱布覆盖的传统方法,可以有效改善患者眼睑闭合情况,同时促进眼表修复,缓解患者角膜水肿,减少角膜荧光素着染,同时改善患者眼红以及延长泪膜破裂时间。