Th1／Th2类细胞因子在新型甲型H1N1流感重症患者不同预后转归中作用分析

目的 探讨细胞因子在新型甲型H1N1流感重症患者不同临床预后中作用。方法 2009年4月至2010年1月间北京佑安医院收治甲型H1N1流感重症患者28例（16例治疗痊愈,12例死亡）为研究对象,正常对照11例。Luminex技术检测血清中Th1/Th2细胞因子水平。结果 Th1类细胞因子中IL-2,IL-12 （P70）,IFN-γ水平在死亡组明显低于治愈组及正常组,差异有统计学意义,P值均＜ 0.05。Th2类细胞因子中IL-4水平在死亡组明显低于治愈组及正常组,P=0.0012,0.031。结论 新型H1N1感染重症治愈患者、死亡患者Th1类细胞因子水平均呈下降趋势,死亡组患者下降更为明显,Th1类细胞因子水平的严重减低可能与重症患者预后不良相关。     

96例甲型H1N1流感的临床分析

目的 通过回顾性分析96例甲型HlNl流感的流行病学及临床特点,提高对甲型H1Nl流感的诊断和治疗水平.方法 收集2009年8月20日至9月23日于杭州市第六人民医院住院治疗的96例甲型H1N1流感患者的临床资料,对其流行病学及临床特点进行分析.结果 患者平均年龄（26.52±10.62）岁,64例有甲流接触史.以发热100%、咳嗽86.4%、咽痛66.6%和肌肉酸痛32.3%为主要临床表现.结论 甲型H1N1流感临床表现与季节性流感很难区分,需结合流行病学调查与实验室检查及时诊断隔离治疗.     

96例甲型H1N1流感的临床分析

Objective To review the epidemiologic and clinical characteristics of 96 cases with novel H1N1 influenza A.and improve the diagnosis and treatment level of novel H1N1 influenza A.Methods 96 cases of novel H1N1 influenza A admitted to the isolation wards from Oct 20 to Sep 23,2009 were studied.Their epidemioiogic,clinical,laboratory,and radiologic characteristics were analyzed. Results The median age of the 96 patients was 26.52 ±10.62 years(range,5 to 60 years).Sixty-four of the 96 patients had a close contact with novel H1N1 influenza A patients.The main symptoms included fever 100%,cough 86.4%,sore throat 66.6% and myalgia 32.3%.Conclusion The clinical presentation of novel H1N1 infection is largely indistinguishable from that of seasonal influenza.Combines beth a symptom complex with the epidemiological investigation and laboratory characteristics can improve the accuracy of diagnosis of novel H1N1 influenza A.     

96例甲型H1N1流感的临床分析

Objective To review the epidemiologic and clinical characteristics of 96 cases with novel H1N1 influenza A.and improve the diagnosis and treatment level of novel H1N1 influenza A.Methods 96 cases of novel H1N1 influenza A admitted to the isolation wards from Oct 20 to Sep 23,2009 were studied.Their epidemioiogic,clinical,laboratory,and radiologic characteristics were analyzed. Results The median age of the 96 patients was 26.52 ±10.62 years(range,5 to 60 years).Sixty-four of the 96 patients had a close contact with novel H1N1 influenza A patients.The main symptoms included fever 100%,cough 86.4%,sore throat 66.6% and myalgia 32.3%.Conclusion The clinical presentation of novel H1N1 infection is largely indistinguishable from that of seasonal influenza.Combines beth a symptom complex with the epidemiological investigation and laboratory characteristics can improve the accuracy of diagnosis of novel H1N1 influenza A.     

一起新型甲型H1N1流感疫情的临床和实验室特点

目的分析一起新型甲型H1N1流感疫情患者的临床和实验室特点。方法某部集体发病患者35例,均由核酸检测方法确诊;回顾调查患者的密切接触史、实验室检测结果、治疗和预后等。结果本次疫情收治的35人,密切接触平均1．7d出现临床症状,首发症状为发热占97．1％（34／35）,咽痛65．7％（23／35）,咳嗽51．4％（16／35）,肌肉酸痛31．4％（11／35）,头痛28．6％（10／35）。病毒核酸检测阴性的平均天数为4．5d,奥司他韦治疗,5d标准疗程,所有患者7d后痊愈出院。结论本次疫情为比较典型的新型甲型H1N1流感。     

轻症和重症甲型 H1 N1流感患者免疫学特征比较分析

目的对比分析轻症和重症甲型H1 N1流感患者的细胞免疫学特征,为该病的病情监测和治疗提供科学依据。方法收集2009年7月1日至2009年12月31日于宁波市第二医院及宁海县第一医院就诊并确诊为甲型H1N1流感的204名患者作为病例组,其中轻症组52例,重症组152例,选取同时期的26名健康志愿者作为对照组;采用流式细胞仪检测各组外周血淋巴细胞亚群,采用ELISA方法检测各组血清干扰素-γ（IFN-γ）及白细胞介素-4（IL-4）水平。结果 H1N1流感患者重症组外周血淋巴细胞计数降低显著,与健康对照组及轻症组患者比较差异均有统计学意义（P＜0．01）;重症组T淋巴细胞、NK细胞、CD4＋T及CD8＋T淋巴细胞计数、百分比均较轻症组显著降低（ P＜0．01）,B淋巴细胞及CD4＋T/CD8＋T比值虽然较轻症组降低,但差异无统计学意义（P＝0．11,0．175）;轻症组和重症组血清IFN-γ水平均较健康对照组降低,但是重症组降低更为显著（与健康对照组和轻症组比较,P＜0．01）;同样,轻症组和重症组血清IL-4水平均较健康对照组降低,但各组间比较统计学差异均无显著性意义（P＞0．05）。结论甲型H1N1流感患者免疫功能的异常与病情轻重有一定关系,尤其是细胞免疫功能,监测患者的免疫功能变化,对于判断患者的病情有较好的参考价值。     

甲型H1N1流感患者排毒规律及抗病毒治疗研究

目的 研究2009年深圳市收治的甲型H1N1流感确诊病例排毒规律和抗病毒治疗疗效.方法 75例患者均经两次鼻咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性（RT-PCR）,此后每天检测病毒核酸直至连续两天均阴性.第1次病毒检测阳性后立即随机分三组抗病毒治疗,分别为奥司他韦（Oseltamivir）（组Ⅰ）、中药（组Ⅱ）和奥司他韦联合中药（组Ⅲ）抗病毒治疗,5 d为一疗程.应用流式细胞仪检测T细胞亚群和IL-17表达.结果 75例患者中,78.7%（59/75）在起病后甲型H1N1流感病毒核酸阳性持续≤7 d,平均年龄为（22.25±10.38）岁;21.3%（16/75）病毒持续＞7 d,年龄为（17.16±13.66）岁.对其中56例患者细胞与体液免疫功能进行分析,发现其IL-17表达明显低于季节性流感和健康人（P＜0.01）.进一步研究发现,10例病毒持续＞7 d的患者IL-17表达值（1.91±0.80）明显低于46例病毒持续≤7 d者IL-17表达（3.05±1.59）（P＜0.05）,也明显低于季节性流感（P＜0.01）和正常对照组（P＜0.001）.比较三治疗组抗病毒治疗5 d疗程结束时病毒核酸转阴率,分别为组Ⅲ92.86%,组Ⅰ71.43%,组Ⅱ46.15%,组Ⅱ明显低于前两组（分别为P＜0.01,P＜0.05）.组Ⅲ经治疗后体温恢复正常时间较组Ⅰ、组Ⅱ缩短（P＜0.05）.结论 IL-17和年龄与甲型H1N1流感病毒感染及排毒时间长短可能存在一定关系.奥司他韦联合中药治疗在抗病毒疗效和减轻症状方面均有其独特优势.     

重症甲型H1N1流感八例呼吸系统病理学特征分析

目的 探讨重症甲型H1N1流感死亡患者呼吸系统病理变化特征.方法 收集北京市8例重症甲型H1N1流感死亡病例,其中6例为死后床旁穿刺标本,2例为系统尸体解剖标本,进行常规病理形态学观察,并利用免疫组织化学、流式细胞术、Western blot等技术进行病毒定位检测.结果 重症甲型H1N1流感患者呼吸系统的主要病理改变为坏死性支气管炎伴周围炎、弥漫性肺泡损伤、肺出血.Westem blot检测肺组织内可见病毒抗原的表达,免疫组织化学染色显示甲型H1N1病毒核蛋白、血凝素抗原主要表达于部分气管、细支气管上皮及腺体、肺泡上皮细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞等.流式细胞术检测2例尸体解剖病例肺内Ⅱ型肺泡上皮凋亡率(32.15％,78.15％)明显高于对照组(1.93％,3.77％).结论 弥漫性肺泡损伤、肺出血和晚期的肺纤维化是甲型H1N1流感重症死亡的主要病理改变;肺脏的损伤可能与病毒侵袭有关.     

一种新型甲型H1N1流感核酸双检诊断试剂盒的验证评价

目的验证一种“甲型流感通用型及H1N1型病毒核酸双检试剂盒（PCR-荧光探针法）”。方法连续收集流感样患者咽拭子标本150例,提取RNA后,以北京市CDC配发的“甲型H1N1流感病毒Real—timePCR诊断试剂盒”为对照,同时用待评价的双检试剂盒平行扩增,对结果进行Kappa一致性检验和McNemar x2差异性检验以及计算两种方法的检测一致率。结果待验证的双检试剂盒与北京市CDC配发的Real—timePCR诊断试剂盒的一致率,通用引物M为97．33％,H1N1为98．67％。经Kappa一致性检验和MeNemarX。差异性检验,两种方法诊断试剂盒有较高的一致性（分别为Z=10．6466,P〈0．0001和Z=11．3402,P〈0．0001）,且待验证双检试剂盒相对于CDC配发试剂的“假阴性率”和“假阳性率”很低（分别为P=0．3173〉0．05和P=1．000〉0．05）。结论上海科华生物工程股份有限公司生产的“甲型流感通用型及H1N1型病毒核酸双检试剂盒（PCR．荧光探针法）”对于甲型流感通用型和H1N1型的诊断均有良好的诊断特性。     

2009-2010年山西省流感／甲型H1N1流感的病原学监测分析

目的分析掌握山西省2009--2010年流感／甲型H1N1流感的流行特征,为预测和防控流感／甲型H1N1流感流行提供科学依据。方法对哨点医院和集体发热疫情进行监测采样,采用病毒核酸检测法和细胞培养法分离鉴定流感／甲型H1N1流感病毒,并对2009年5月至2010年4月山西省录入“中国流感监测信息系统”的流感样病例监测报告数据及其样本病原学监测数据进行统计分析。结果山西省全年均有流感病毒活动,2009年流行优势毒株为甲型H1N1流感病毒,流行最高峰在11月（阳性率为58．1％,甲型H1N1占88．1％）,主要导致59岁以下人群发病,其中5-24岁年龄组阳性率较高,进入2010年后乙型（Victoria系）流感病毒的活动有所增加,成为流行株。结论流感样病例监测和病原学监测,可以及时反映流感活动状况,对于掌握该省流感／甲型H1N1流感流行规律有着重要意义。     

T淋巴细胞在甲型H1N1流感病毒感染中的变化及意义

目的 研究甲型H1N1流行性感冒（流感）患者外周血T淋巴细胞及其激活亚群的变化.方法 用流式细胞仪检测144例甲型HlNl流感患者和41例健康体检者淋巴细胞亚群,对其中83例患者进一步分析治疗前后T淋巴细胞及其激活亚群（HLA-DR＋CD3＋、HLA-DR＋CD4＋和HLA-DR＋CD8＋细胞）.结果 ①与对照组相比,H1N1并发肺炎组和H1N1组淋巴细胞数明显低于对照组,H1N1并发肺炎组淋巴细胞数明显低于H1N1组;H1N1并发肺炎组T淋巴细胞百分比明显低于对照组（P〈0.05）.②治疗前后CD3、CD8细胞百分比和绝对数均差异有统计学意义,治疗前显著降低,CD4细胞数治疗前显著降低.③治疗前后T淋巴细胞激活亚群（HLA-DR＋CD3＋、HLA-DR＋CD4＋和HLA-DR＋CD8＋细胞）百分比差异有统计学意义,治疗前显著降低.结论 测定甲型H1N1流感患者外周血T淋巴细胞及其激活亚群的变化有助于评价甲型H1N1流感患者感染早期的细胞免疫状况,可以作为甲型H1N1流感早期诊断的辅助指标.     

甲型流感病毒（N1N2）亚型毒株血凝素和神经氨酸酶基 …

目的 研究新分离到的Ｈ１Ｎ２亚型毒株血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）基因的来源。方法 病毒通过鸡胚增殖后提取其ＲＮＡ,通过逆转录合成ｃＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增和产物纯化,用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定,并用ＭｅｇＡｌｉｇｎ（１．０３版）和Ｅｄｉｔｓｅｑ（３．６９版）软件进行种系发生学分析。结果 新分离到Ｈ１Ｎ２毒株ＨＡ１区氨基酸序列与Ａ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）和Ａ／Ｇｕａｍｇｄｏｎｇ／６／９     

H1N1亚型流感病毒血凝素Th和B细胞表位预测及抗原性分析

目的:应用生物信息学方法预测H1N1亚型流感病毒血凝素Th和B细胞相关抗原表位,并初步分析其抗原性,为研制H1N1亚型流感病毒的表位疫苗奠定基础.方法:依据近年流感病毒流行趋势,从GenBank下载具有代表性的H1N1亚型流感病毒HA蛋白氨基酸序列.进行生物信息学综合分析预测,获得Th和B细胞相关抗原表位,并比较其保守性和特异性.通过Balb/c小鼠H1N1亚型流感病毒阳性血清与表位肽的结合试验,初步鉴定候选表位抗原性.结果:综合多项预测及空间构像模拟结果,我们获得了三条候选Th和B细胞表位,分别为HA_(73～87)、HA_(125～139)、HA_(188～205).候选表位处于H1N1亚型流感HAI蛋白序列上相对保守的区域内,且与目前流行的H1N1亚型流感病毒HA相应区域具有较好的一致性.而不同候选表位在BMB/e小鼠H1N1亚型流感病毒阳性血清反应中显示了不同抗体结合能力,预示了其成为功能表位的可能.结论:所筛选的表位具有成为H1N1亚型流感病毒HA Th和B细胞相关抗原表位的可能.此研究为深入揭示流感病毒感染与免疫机制,H1N1亚型流感功能表位认知及表位疫苗研究奠定了基础.     

唐山市甲型H1N1流感病毒血凝素基因序列分析

目的 分析2010—2016年唐山市甲型H1N1流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)基因序列进化特征.方法 选取唐山市3家哨点医院流感样病例分离到的24株甲型H1N1病毒,通过RT-PCR和测序方法获得HA基因的全长序列,运用分子生物学软件和统计学软件对序列进行拼接、比对和分析.结果 同源进化分析显示,24株甲型H1N1流感病毒HA基因与疫苗株A/California/7/2009的核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.0%~99.0%和97.0%~98.5%.进化分析显示,2010—2016年唐山地区流行的甲型H1N1流感病毒属于1、7、6三个基因分支,其中6分支毒株分为6C、6B、6B.1和6B.2亚支.氨基酸位点分析显示,不同毒株与疫苗株比较存在8~16处氨基酸位点改变,其中7个变异涉及3个抗原表位:H138Q/Y和S203T突变位于Ca区,N125S、K153E、S162N、K163T/Q突变位于Sa区,S185T突变位于Sb区同时也位于受体结合部位;2015—2016流行季6B.1分支毒株抗原位点S162N突变增加了新的潜在糖基化位点.结论 与疫苗株比较,随着时间推移唐山地区甲型H1N1流感病毒发生了抗原漂变,未来仍应关注6B分支流行株的变化.