部分枣属植物硅胶干燥叶片DNA提取方法的比较

以硅胶干燥15 D和半年的3种野生枣属植物叶片为试材,分别采用简易CTAB法、高盐沉淀法和高盐低PH法3种方法提取基因组总DNA,通过A260/A280、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增分析对提取的基因组DNA进行了鉴定。半年内不同保存时期的材料对于DNA提取没有明显差异;高盐沉淀法所得DNA纯度最高。     

棕榈科植物DNA的提取及SRAP引物筛选

采用CTAB法提取棕榈科植物基因组DNA,选用4个棕榈科植物DNA作模板,对100个SRAP引物组合进行筛选,以条带清晰多态性丰富为引物筛选原则,最后共筛选出14个组合作为棕榈科植物SRAP分子标记的核心引物,为后续SRAP分析提供依据。同时还对SRAP-PCR扩增程序进行优化,在不影响扩增效果的前提下,节约了大量实验时间。     

棕榈科植物DNA的提取及SRAP引物筛选

采用CTAB法提取棕榈科植物基因组DNA,选用4个棕榈科植物DNA作模板,对100个SRAP引物组合进行筛选,以条带清晰多态性丰富为引物筛选原则,最后共筛选出14个组合作为棕榈科植物SRAP分子标记的核心引物,为后续SRAP分析提供依据。同时还对SRAP-PCR扩增程序进行优化,在不影响扩增效果的前提下,节约了大量实验时间。     

西南桦硅胶干燥叶DNA提取方法比较

采用常规CTAB法、CTAB硅珠法、核分离法、二次抽提法、改良CTAB法对富含多糖的西南桦干叶进行DNA提取,并将DNA进行电泳检测及RAPD分析,结果表明：不同提取方法结果差异较大,CTAB硅珠法得率最低,为0.4～11.6μg/g;核分离法和二次抽提法较常规法去除多糖效果好,得率高;改良CTAB法得率最高,为171.2～364.8μg/g,电泳条带最清晰,RAPD扩增结果最好,适合干叶西南桦基因组DNA提取。     

硅胶干燥罗布麻叶片DNA提取及RAPD反应体系建立

[目的]得到适用于罗布麻RAPD的最优体系.[方法]以伊犁地区新源县罗布麻硅胶干燥叶片为材料,采用TIANGEN试剂盒提取罗布麻基因组DNA,得到满足RAPD(Random amplified polymorphic DNA)分析的罗布麻基因组DNA.[结果]通过单因素优化实验,得到罗布麻RAPD分析的最佳反应体系为:Mg2+ (2.0mmol/L)、dNTPs(0.5 mmol./L)、primer(0.4 mmol/L)、DNA(1μL)、Tap酶取1μL、10×buffer取1μL,总反应体系为10 μL;扩增程序为:在94℃下预变性,然后进行42个循环(94℃变性30 s、38℃退火30 s、72℃延伸2min),最后在72℃延伸7 min.[结论]提取的罗布麻总DNA均有较高的质量,适合RAPD分析;Tiangen植物基因组DNA提取试剂盒对罗布麻基因组DNA有着良好的提取效果;对罗布麻RAPD-PCR中Mg2+、dNTPs、DNA聚合酶和引物浓度进行优化,较为理想的各因子用量和扩增程序为:Mg2+(2.0 mmol/L)、dNTPs(0.5mmol/L)、primer(0.4 mmol/L)、Tap酶(0.5 U/μL)、DNA(40 ng),总反应体系为10 μL;扩增程序为:在94℃下预变性5 min,然后进行42个循环(94℃变性30 s、38℃退火30 s、72℃延伸2 min),最后在72℃延伸7min.     

一种简便的果树夏秋梢硅胶干燥叶DNA提取方法

以硅胶干燥的杨梅秋梢叶片为试材,对基因组DNA提取方法进行了研究。通过对涡旋、16℃离心、预磨样等方面的改进,提取的杨梅DNA含蛋白质、RNA、多糖等杂质较少,A260/A280在1.72~1.92之间,完全能满足酶切、PCR等试验的要求。同时对梅、枇杷、桃、樱桃、杏等果树较老的叶片、秋梢、鲜叶等样品进行了通用性检验,同样高效快速地获得了高质量的DNA。     

不同棕榈科植物对铁皮石斛附生的影响研究

通过不同活体植物附生铁皮石斛试验,研究不同植物、不同附生方式对附生铁皮石斛性状的影响,从而选择出较佳附生树种和探索其附生栽培的可行性,为铁皮石斛产业的可持续发展提供技术支撑。结果表明,蒲葵和中东海枣等棕榈科植物是理想的铁皮石斛附生树种。     

不同方法对石榴叶片DNA提取效果的影响

以4个石榴(PunicagranatumL )品种为实验材料,用SDSⅠ,SDSⅡ,CTABⅠ,CTABⅡ4种方法提取石榴叶片DNA 结果表明,SDS法提取得率为500～600μg·g-1,但OD值偏低,为1 50～1 70;RAPD分析无扩增;CTAB法所得DNA得率为200～500μg·g-1,OD值为1 80～1 90;RAPD分析扩增带清晰CTABⅠ和CTABⅡ相比,操作简单、省时,得率高,综合考虑CTABⅠ是石榴叶片DNA提取的最佳方法     

棕榈科植物的开发应用

随着城市建设的迅速发展，人民生活水平的提高，人们越来越重视周边的环境，重视绿化植物的观赏性。棕榈科植物形态独特，色彩丰富，融自然之美与艺术之美于一体，具有极高的观赏价值，引起了人们的特别重视。     

值得开发利用的棕榈科植物

棕榈植物是典型的热带雨林植物,广泛分布于热带和亚热带地区,以热带美洲和亚洲热带地区为分布中心.世界棕榈植物约210属2800多种[1,2],原产我国的有18属89种(含变种).     

梨属植物基因组DNA提取部位对RAPD扩增的影响

中国梨属植物资源丰富,RAPD技术已广泛用于梨资源遗传多样性研究.通过对不同部位提取的DNA纯度进行测定,并进行RAPD扩增分析,为 RAPD技术在梨属种质资源中的应用提供参考.以鸭梨和杜梨为试验材料,利用CTAB法对其幼叶、老叶及韧皮部等不同组织或同一组织的不同时期进行了基因组DNA的提取,并对其进行了RAPD反应的比较.所提取的鸭梨的幼嫩叶片、成熟叶片、韧皮部DNA OD260/OD280的比值分别为2.0、1.8、1.7;杜梨幼嫩叶片、成熟叶片、韧皮部DNA OD260/OD280的比值分别为1.9、1.8、1.6.二者都能成功进行RAPD扩增,且扩增结果基本一致.利用CTAB法从鸭梨和杜梨的幼嫩叶片、成熟叶片、韧皮部提取的DNA均能成功进行RAPD扩增,且结果基本一致.     

不同阳离子皂土对植物RNA提取效果的影响

在提取缓冲液中加入皂土能有效地去除蛋白质并抑制RNAse,以Mg2+、K+和Na+3种阳离子处理的皂土提取缓冲液提取麻疯树叶片总RNA,结果显示,不同的处理对RNA的提取效果明显不同。其中Mg2+-K+-Na+-皂土的提取效果最佳,叶片RNA提取得率为790μg/g(鲜重),比对照高6倍。用该法提取的RNA能用于分子克隆与基因表达分析等后继分子生物学实验。该方法为一种简便,快速,经济高效的RNA提取方法。     

我国棕榈科植物的抗寒性研究进展

低温是影响棕榈科植物引种北移的主要因素之一,研究其抗寒性对扩大棕榈的分布区域有重要意义。通过综述我国棕榈科植物的抗寒性测定以及抗寒棕榈的繁殖和提高棕榈抗寒性的栽培方法3方面的研究进展,展望了未来研究的发展趋势。     

PEX法提取植物组织DNA

介绍了一种简单而实用的DNA提取法,利用PEX试剂从高粱与转基因玉米的新鲜叶片中提取植物组织DNA。所得DNA经定量检测后,可满足AFLP分析及PCR-Southern杂交等要求。     

棕榈科植物桄榔学名的订正

桄榔 (南方草木状 )ＡｒｅｎｇａｗｅｓｔｅｒｈｏｕｔｉｉＧｒｉｆｆ.ｉｎＣａｌｃ.Ｊｏｕｒｎ .Ｎａｔ.Ｈｉｓｔ. 5 :474.1845Ａｒｅｎｇａｐｉｎｎａｔａｓｅｎｓｕｎｏｎ (Ｗｕｒｍｂ .)Ｍｅｒｒ.;中国植物志 13(1) :110 ,Ｐｌ.2 5 (1～ 6) ,1991;海南植物志 4:167,Ｐｌ.10 68,1977;广东植物志 2 :45 2 ,1991.分布 :海南、广西及云南南部至东南部 ,生于海拔 60 0ｍ以下的山地密林或疏林中 中南半岛及东南亚亦有分布 Ｈａｉｎａｎ(海南 ) :Ｙａｘｉａｎ(崖县 ) ,Ｆ .Ｃ .Ｈｏｗ(侯宽昭 ) 70 690 ;Ｌｅｄｏｎｇ(乐东 ) ,Ｌａｕ (刘心祈 …     

棕榈科植物基因克隆方法的优化

【目的】优化棕榈科植物基因克隆方法,为其基因组学研究和分子育种奠定基础。【方法】通过优化DNA提取和目的片段回收步骤,检测其对提取DNA质量和纯度、目的片段回收率与阳性克隆等的影响。【结果】DNA提取方法优化后,提取获得的DNA完整性好,无杂质、无弥散现象,质量较好,其OD260/OD280在1.88-1.93;优化前不同样品提取的DNA仅为40.0-60.0 ng/μL,优化后样品DNA在104.5-214.8 ng/μL,为优化前的2-3倍;目的片段回收方法经优化后,可以从扩增的PCR产物中回收获得条带较清晰的目的片段,其胶回收率较高;对回收的目的片段进行亚克隆,以gyspy74引物鉴定阳性克隆,每个样品的菌落均在700 bp左右扩增获得清晰的目的条带,且其中3个菌落的目的条带测序结果与预期核酸序列一致。【结论】优化后的方法适用于棕榈科植物基因克隆。     

濒危兰科植物DNA的提取方法

濒危兰科植物组织富含多糖和多酚类物质,提取高质量的DNA较困难。为优化濒危兰科植物基因组DNA提取方法,采用改良CTAB法、改良SDS法和试剂盒法对多种濒危兰科植物基因组DNA进行提取,对获得的DNA质量、浓度和纯度进行比较。结果表明,用改良CTAB法和试剂盒法可有效去除多糖类和多酚类物质的干扰,DNA提取效果较理想,改良SDS法较差;CTAB法获得的DNA浓度高于试剂盒法,且后续PCR扩增效果也优于试剂盒法。     

不同处理对柿属植物DNA提取产率和品质的影响

基于CTAB法对鄂柿一号、前川次郎、君迁子3份材料进行DNA提取纯化,探讨不同采样时期、不同的纯化及沉淀方法对柿属植物DNA产率和品质的影响.结果表明,不同时期采样对DNA产率影响很大,随叶片生长,DNA产率不断下降,成熟叶片DNA产率仅为幼嫩叶片的16.7％～19.4％;在苯酚氯仿法、高盐乙醚法、CTAB沉淀法中以高盐乙醚法效果最好,可酶切,能有效去除多糖污染,产率较高;4种沉淀方法中,高浓度的盐溶液有助于去除多糖、多酚等杂质,相比单纯的乙醇或异丙醇沉淀可获得更高品质的DNA.另外,不同材料间提取DNA难度存在较大差异.     

高分子量植物DNA的快速提取

本文介绍一种快速、简易、适于一般植物 DNA 的提取方法。本法可以获得较纯净的、双链的、高分子量 DNA,以满足分子克隆和遗传转化实验的要求。