TGF-β1/ERK5信号通路对大鼠矽肺纤维化的影响

[背景]矽肺发病机制尚不清楚,探讨矽肺纤维化的机制可以为矽肺纤维化的治疗提供指标.[目的]探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)/细胞外信号调节激酶5(ERK5)信号通路在肺纤维化中的作用.[方法]选取SPF级Wistar健康雄性大鼠21只随机分为对照组、模型组和干预组,每组7只.模型组和干预组采用一次性非暴露气管染尘...     

VEPH1介导TGF-β信号通路调控黑色素瘤细胞EMT和增殖的研究

目的:探讨VEPH1通过TGF-β信号通路对人皮肤黑色素瘤(CM)细胞的上皮-间质转化(EMT)和增殖的调控作用。方法:体外培养黑色素瘤细胞,将黑色素瘤细胞分别体外转染VEPH1、TGF-β过表达或干扰质粒,或经TGF-β通路抑制剂SB-431542处理后,运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(We...     

TGF-β1/Smads信号通路与肝纤维化

肝纤维化是肝脏对各种刺激的创伤性愈合,主要表现为细胞外基质的过量沉积.肝星形细胞(HSC)被认为是引起肝纤维化的主要细胞,它的活化受到多种细胞因子的调节.TGF-β1在启动和促进HSC向肌成纤维细胞转化的过程中有着重要作用,是目前已知最重要的敛肝纤维化细胞因子之一.此文就TGF-β1/Smads信号通路在肝纤维化发病机制及其治疗方面的作用进行综述.     

TGF-β信号通路在骨关节炎中的调控作用

TGF-β超家族包括TGF-β和BMPs等成员,骨形经典的TGF-β信号通路通过TGF-β信号分子激活膜受体后经R-Smads与Smad4形成复合物进入细胞核内调节靶基因,调节细胞的增殖、分化、细胞外基质的合成、移动以及机体的免疫功能等生物学作用。TGF-β能抑制软骨细胞终末分化,而BMP能促进软骨细胞的肥大化,引发骨关节炎,因此了解清楚TGF-β信号通路的各个环节及调节对于疾病的治疗有极大的帮助。     

抗菌肽merecidin通过ERK/mTOR 信号通路对肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的 探讨抗菌肽merecidin通过ERK/mTOR 信号通路对肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 实验分为对照组Control、抗菌肽Merecidin干预组和雷帕霉素Rapamycin干预组。通过CCK-8 法检测A549细胞的增殖能力,通过流式细胞术检测A549细胞凋亡和周期,通过平板划痕试验和Transwell检测A549细胞的迁移和侵袭能力,通过 Western blot 法检测A549细胞中MAPK1、MEK2、mTOR、PRAS40、EIF4EBP1 磷酸化蛋白的表达量。结果 抗菌肽merecidin能够明显抑制A549的增殖能力,处理24 h后的 IC50值为10.01 μmol /L(P<0.05)。与control组比较,抗菌肽merecidin处理后促进细胞凋亡(P<0.05),阻滞细胞周期于S期(P<0.05),细胞的迁移及侵袭能力均降低(P<0.05)。同时抗菌肽merecidin可抑制p-MAPK1和p-MEK2蛋白的表达,并且降低了mTOR、PRAS40和EIF4EBP1 的磷酸化水平(P<0.05)。结论 抗菌肽merecidin可抑制肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于S期,该作用可能与其抑制ERK/mTOR通路有关。     

IGFBP-rP1通过调控MEK/ERK信号通路对抑制子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖的影响及机制探讨

目的:探讨外源性胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 (IGFBP-rP1)联合MEK/ERK信号通路抑制剂PD98059对子宫内膜癌细胞HEC-1A增殖的影响及其机制.方法:体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-1A细胞,向培养基中添加不同浓度人重组胰岛素生长因子结合蛋白相关蛋白1 (rhIGFBP-rP1)和PD98059,上调IGFBP-rP1的水平,采用Cell CountingKit-8(CCK-8)法检测不同浓度rhIGFBP-P1及rhIGFBP-P1联合MEK/ERK信号通路抑制剂PD98059对HEC-1A细胞增殖的影响,并用蛋白免疫印迹(western blot)法分析不同浓度rhIGFBP-rP1作用下子宫内膜癌细胞HEC-1A细胞总的ERK1/2和磷酸化ERK1/2水平变化.结果:添加rhIGFBP-rP1子宫内膜癌细胞HEC-1A增殖受到明显抑制,其抑制作用呈浓度和时间依赖性(P＜0.05);4ag/ml rIGFBP-rP1对HEC-1A增殖抑制作用随着时间延长越来越明显,12、24、48、72 h增殖抑制率比较差异有统计学意义(P＜0.05).而MEK/ERK通路抑制剂PD98059能增强其抑制作用,rIGFBP-rP1(4μg/ml)与PD98059(25 μmol/L)联用,以上各时间点细胞增殖抑制率分别增至(10.04±2.71)％、(17.02±1.58)％、(28.59±2.04)％、(35.29±1.12)％,各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot示添加rhIGFBP-rP1,磷酸化的ERK1/2水平显著降低,磷酸化的ERK1/2水平与rhIGFBP-rP1呈剂量依赖性.结论:IGFBP-rP1可以通过MEK/ERK信号通路抑制细胞增殖.     

青石棉诱导A549细胞ERK1/2及Elk1激活的研究

目的　研究细胞外信号调节蛋白在青石棉致肺部疾病的作用。方法　用Western免疫印迹、免疫沉淀等对石棉刺激A5 4 9细胞后细胞外信号调节蛋白及其下游Elk1蛋白磷酸化等进行了研究。结果　石棉刺激细胞后 ,磷酸化ERK1 2、Elk1等高表达 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　ERK1 2、Elk1磷酸化可能参与青石棉的致病过程     

α-亚麻酸植物甾醇酯调控TGF-β1/Smad信号通路改善小鼠肝纤维化

目的探讨α-亚麻酸植物甾醇酯(PS-ALA)对高脂高胆固醇饮食(HFCD)诱导的肝纤维化的改善作用,及其抑制TGF-β1/Smad信号通路的分子机制。方法将50只雄性C57BL/6J小鼠随机分为Control、HFCD、ALA、PS和PS-ALA组,每组10只。Control组给予普通饲料;HFCD组给予高脂高胆固醇饲料(45%kcal脂肪、2%胆固醇);ALA、PS和PS-ALA组给予相同的高脂高胆固醇饲料并分别添加1.3%ALA、2%PS和3.3%的PS-ALA。24w后,Masson染色评估肝脏纤维化严重程度;试剂盒检测HYP、ALT和AST水平;免疫荧光法检测肝脏α-SMA的表达水平;Western-blot法检测肝脏TGF-β1、Smad2/3、P-Smad2、α-SMA、COL1A1及CTGF蛋白表达水平。结果与Control组相比,HFCD组小鼠肝脏组织出现大量胶原沉积,同时伴随α-SMA蛋白表达水平上调,提示肝脏纤维化发生。PS-ALA显著改善HFCD诱导的小鼠肝脏纤维化,并显著降低血清ALT、AST以及肝脏HYP水平(P <0.05);PS-ALA显著下调纤维化...     

积雪草苷对矽肺大鼠NLRP3/IL-1β/IL-18/TGF-β1信号通路的干预作用

目的 拟从NLRP3/IL-1β/IL-18/TGF-β1通路探讨积雪草苷（asiaticoside，AS）对染矽尘大鼠肺纤维的干预作用，为临床治疗提供理论依据。方法 将32只SD雄性大鼠随机分为对照组、SiO2模型组以及积雪草苷低、高剂量组，每组8只。对照组大鼠经气管灌注1 ml生理盐水，其余各组灌注1 ml SiO2（50 mg/ml）混悬液。造模后的第2天开始灌胃，AS低、高剂量组分别给予40、60 mg/kg AS对照组和模型组给予等量的生理盐水。每天1次，连续给药28 d。于灌胃第28天处死大鼠，取大鼠肺组织行HE、Masson染色观察病理变化，检测大鼠肺组织中羟脯氨酸（HYP）、白介素（IL）-1β、IL-18的含量、I型胶原蛋白（Col-I）、转化生长因子（TGF）-β1和NLRP3、 caspase-1、ASC蛋白表达水平。结果 模型组大鼠肺组织中HYP、IL-18、IL-1β含量均高于对照组（P<0.05），Col-I、TGF-β1、NLRP3、caspase-1、ASC蛋白表达水平亦较对照组明显升高（P<0.05），积雪草苷干预后上述各项指标均较模型组显著降低（P<0.05）。结论 积雪草苷可减轻肺部炎性细胞浸润和肺泡结构的损伤，其机制可能通过NLRP3/IL-1β/IL-18/TGF-β1信号通路进行干预。     

锌对体外海马神经细胞MEK/ERK信号通路的调控作用研究

目的探讨锌对海马神经细胞MEK/ERK通路的调控机制。方法将原代培养乳鼠海马神经细胞分为3组。(1)对照组(Control组):不加任何处理因素。(2)四吡啶甲基乙二胺[N,N,N',N'-tetrakis(2-pyridylmethyl)ethylenediamine,TPEN]干预组(TPEN组):2μmol/L TPEN处理海马神经细胞24h,以诱导海马神经细胞缺锌。(3)TPEN+5μmol/L Zn组:同时加入终浓度为2μmol/L TPEN及5μmol/L的Zn SO4。采用Western-Blot法检测pMEK,perk,Total-MEK、Total-ERK蛋白表达;免疫荧光法检测细胞内[Ca~(2+)]_i浓度;分子探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)含量。结果 (1)与对照组比较,TPEN组海马神经细胞上清液中LDH活性明显升高(P0.05);加入5μmol/L Zn后LDH活性显著降低(P0.05)。(2)与对照组比较,TPEN组pMEK及pERK蛋白表达均明显下降(P0.05);5μmol/L Zn可明显抑制TPEN诱导的海马神经细胞pMEK及pERK蛋白表达的降低(P0.05)。(3)与对照组比较,TPEN组细胞内[Ca~(2+)]_i浓度及ROS水平明显升高(P0.05);5μmol/L Zn能明显抑制细胞内[Ca~(2+)]_i及ROS水平的升高(P0.05)。结论缺锌可下调海马神经细胞MEK/ERK信号通路,其作用机制可能与细胞内[Ca~(2+)]_i及ROS的调控有关。     

宫颈癌术后尿路感染对TGF-β1/Smads 信号通路及预后的影响

目的 探究宫颈癌患者术后尿路感染对转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads信号通路及预后的影响。方法 选取2018年1月-2021年4月中山大学附属第一医院收治的宫颈癌术后发生尿路感染患者109例为研究组,同时募集同期宫颈癌术后未发生尿路感染的患者90例为对照组,比较两组患者血清白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α及TGF-β1水平,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测外周血TGF-β1、TGF-β受体1(TGF-βR1)、Smad6及Smad7 mRNA水平,并分析两组患者预后。结果 研究组患者血清IL-6、IL-1β、TNF-α、TGF-β1及外周血TGF-β1 mRNA水平高于对照组,TGF-βR1、Smad6及Smad7 mRNA水平低于对照组(P<0.05),IL-6、IL-1β、TNF-α、TGF-β1及外周血TGF-β1 mRNA随感染程度加重而升高(P<0.05),TGF-βR1、Smad6及Smad7 mRNA水平随感染程度加重而降低(P<0.05);研究组患者留置尿管时间(12.68±3.52)d、术后住院时间(2...     

TGF-β1调控MAP1S通过NER信号通路影响肺癌细胞的增殖和侵袭

目的探讨TGF-β1调控MAP1S通过NER信号通路影响肺癌细胞的增殖和侵袭。方法免疫组化检测肺癌和正常肺组织中TGFβ1和MAP1S的表达情况;免疫共沉淀实验检测TGFβ1和MAP1S蛋白的相互关系;MTT实验检测沉默MAP1S后肺癌细胞增殖能力的变化;Transwell试验检测沉默MAP1S后肺癌细胞侵袭能力的影响;Western blotting检测沉默MAP1S后ERCC1和ERCC3蛋白的表达情况;裸鼠体内成瘤实验检测沉默MAP1S后肺癌细胞成瘤能力变化。结果与正常肺组织相比,肺癌组织中TGFβ1和MAP1S表达水平明显升高;免疫共沉淀实验表明TGFβ1和MAP1S结合为共同体;沉默MAP1S抑制肺癌A549细胞的增殖和侵袭能力、下调ERCC1和ERCC3蛋白的表达、抑制肺癌A549细胞的体内成瘤能力。结论 TGFβ1和MAP1S在肺癌中表达明显升高,同时沉默MAP1S可以抑制肺癌细胞增殖和侵袭能力,TGFβ1可以靶向MAP1S蛋白通过NER信号通路调控肺癌细胞的生物学行为。     

Hp感染对胃癌组织中TGF-β/Smad信号通路的影响

目的 分析幽门螺杆菌(Hp)感染对胃癌组织中转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路的影响。方法 选取2019年2月-2021年4月新乡市中心医院收治的96例行手术治疗的胃癌患者为研究对象,另选取同期性别、年龄匹配的42例慢性胃炎患者及36名健康体检者,均进行¹⁴C-尿素呼气试验检测Hp感染情况,胃癌患者根据Hp感染情况分为Hp阳性组72例和Hp阴性组24例。收集胃癌患者临床资料,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测手术切除癌组织标本中TGF-β1、Smad3、Smad7、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA水平。结果 96例胃癌患者中Hp阳性率为75.00%(72/96),与慢性胃炎组Hp阳性率64.29%(27/42)比较无统计学差异,但高于健康对照组22.22%(8/36)(P<0.05)。胃癌患者中,Hp阳性组与Hp阴性组肿瘤局部浸润深度、临床分期和淋巴结转移差异有统计学意义(P<0.05),Hp阳性组TGF-β1、Smad3 mRNA水平均高于Hp阴性组,Smad...     

TGF-β/Smad信号通路在骨关节炎中作用的研究进展

骨关节炎(0A)是一种由多因素导致的骨关节疾病,严重威胁人类健康,其主要表现为关节疼痛、功能障碍,严重者可致畸形.OA的机制尚不十分明确,且缺少有效的治疗药物;针对OA病因、发病机制及预防措施的探索一直是该领域的重要研究方向.有研究发现,转化生长因子-β (TGF-β)/Smad信号通路在OA的发生和发展过程中起着关键...     

p38/ERK激酶调控TGF-β1诱导的HLF-02细胞Ⅰ型胶原表达及MMP-2活力

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在调控人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原表达、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活力中的作用.方法 以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10 ng/ml的TGF-β1刺激不同时间;阻断实验以P38激酶特异性抑制剂(SB203580)、ERK激酶特异性抑制剂(PD98059)分别阻断p38通路和细胞外调控激酶(ERK)通路;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内Ⅰ型胶原mRNA的表达;运用Western印迹检测细胞上清液中Ⅰ型胶原蛋白表达;酶谱分析细胞上清液中MMP-2、MMP-9的活力.结果 (1)TGF-β1刺激HLF-02细胞,24、48、72 h组的Ⅰ型胶原mRNA表达水平分别为1.33±0.07、2.46±0.09、2.39±0.08;Ⅰ型胶原蛋白表达水平分别为114.89±8.95、208.16±6.75、211.46±8.05;MMP-2的活力分别为190.33±5.86、214.33±8.39、212.67±11.59.(2)SB203580对TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原mRNA水平、蛋白水平及MMP-2活力的抑制率分别为51%、24%、20%.(3)PD98059对TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原mRNA水平、蛋白水平以及MMP-2活力的抑制率分别为42%、13%、16%.结论 TGF-β1可促进HLF-02细胞Ⅰ型胶原的转录和蛋白表达,上调MMP-2活力;p38、ERK激酶通路在此过程中具有重要的调控作用.     

TGF-β1/Smads信号通路激活与血液透析导管相关性血流感染的关联

目的 分析转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路与血液透析发生导管相关性血流感染(CRBSI)的关系。方法 选取漳州市第三医院2018年1月-2021年1月进行血液透析的患者,按CRBSI情况分为感染组47例与对照组46例;分析患者发生CRBSI的相关影响因素、导致感染的病原菌类型、血清炎症因子表达水平以及TGF-β1和Smad2、Smad4的蛋白表达水平。结果 感染组的穿刺次数、合并糖尿病例数、导管留置时间高于对照组(P<0.05),感染组血清白蛋白水平低于对照组(P<0.05);感染组患者的肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-8(IL-8)以及TGF-β1表达水平均高于对照组(P<0.05);感染组患者的TGF-β1、Smad2及Smad3蛋白表达水平均高于对照组患者(P<0.05);Logistic逐步回归分析发现,穿刺次数、合并糖尿病、导管留置时间、白蛋白表达水平、血清TNF-α、IL-8及TGF-β1表达水平和血清TGF-β1、Smad2及Smad3蛋白表达水平均是血液透析治疗患者发生CRBSI的影响因素(P<0.05)。...     

臭灵丹提取物调控TGF-β/BMPs信号通路对股骨粗隆间骨折固定术后感染大鼠的影响

目的 分析臭灵丹提取物调控转化生长因子-β/骨形成蛋白(TGF-β/BMPs)信号通路对股骨粗隆间骨折固定术后感染大鼠的影响。方法 选取SPF级Wistar大鼠44只,10只大鼠作为空白组,剩余34只建立股骨粗隆间骨折固定术后感染模型,共有30只大鼠建模成功,将其分为模型组、药物对照组、臭灵丹提取物组3组,每组10只。药物对照组给予阿莫西林,臭灵丹提取物组给予臭灵丹提取物,空白组、模型组不做处理,干预7 d后观察大鼠变化。结果 与空白组相比,模型组、药物对照组、臭灵丹提取物组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)水平上升,IL-10、Ⅰ型原胶原N-端前肽(PⅠNP)、骨碱性磷酸酶(BALP)水平、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)mRNA表达量及相对表达量下降(P<0.05);与模型组相比,药物对照组、臭灵丹提取物组TNF-α、IL-6、β-CTX水平下降,IL-10、PⅠNP、BALP、TGF-β mRNA、BMP-2 mRNA表达量及相对表达量上升(P<0.05);与药物...     

小窝蛋白1介导TGF-β信号通道调控肺细胞外基质重塑机制研究

目的：探讨caveolin-1通过介导TGF-β信号通道在体外调控小鼠肺细胞外基质重塑的机制研究。方法：选取cav1-/-小鼠作为动物模型设为实验组,野生型C57BL/6J小鼠设为对照组,检测肺机械性指标,测定Ⅰ型胶原纤维与弹性纤维含量及mRNA水平,检测肺血管蛋白渗出及支气管灌洗液（BAL）中细胞含量及细胞因子水平,测定TGF-β下游信号分子Smad2及ERK1/2水平。结果：与对照组比较,实验组中肺顺应性下降,僵硬度增加（P〈0.05）;BAL中总蛋白及白蛋白水平和静脉注射伊文思蓝在肺组织的含量均明显增加（P〈0.05）;Ⅰ型胶原纤维与弹性纤维含量及mRNA水平增加（P〈0.05）;Smad2及ERK1/2水平均明显提高（P〈0.05）;但BAL中细胞含量及细胞因子水平无差异。结论：小窝蛋白1通过介导TGF-β信号转导在体外上调细胞外基质重塑,促进肺纤维化发生。     

食管癌术后肺部感染对TGF-β1/Smads 信号通路蛋白及应激水平的影响

目的 探究食管癌患者术后肺部感染对转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads信号通路蛋白及应激水平的影响。方法 收集2015年3月-2020年3月河南科技大学第一附属医院收治的行食管癌切除术的患者作为本次试验的研究对象,将出现肺部感染的100例患者设为感染组,另选同期术后未出现感染的412例患者作为非感染组,以及同期体检的50名健康者作为对照组。对感染组患者的痰液标本进行病原菌鉴定,酶联免疫吸附实验检测各组患者血清炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、IL-1β和TGF-β1含量,免疫印迹法检测各组患者肺组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的蛋白表达,放射免疫分析法检测皮质醇(COR)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、丙二醛(MDA)等应激指标,分析肺部感染对TGF-β1/Smads信号通路蛋白及应激水平的影响。结果 共培养分离病原菌269株,其中革兰阴性菌185株占68.77%,革兰阳性菌73株占27.14%,真菌11株占4.09%;感染组和非感染组患者血清炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β和TGF-β1高于对照组(P<0.05),且感染组各项因子...     

PM_(2.5)对A549细胞IL-1β表达的影响

目的研究6个不同城市大气污染颗粒PM_(2.5)对肺癌A549细胞炎症因子IL-1β的影响,探讨PM_(2.5)成分和炎症因子IL-1β之间的关系。方法采集湛江、广州、武汉、上海、北京和成都6个城市PM_(2.5),测定不同城市PM_(2.5)中金属元素及多环芳烃(PAHs)的含量。将不同城市PM_(2.5)以100μg/m L染毒A549细胞24 h,荧光定量PCR检测不同城市PM_(2.5)染毒细胞后细胞内炎症因子IL-1β基因表达水平。通过线性回归和相关性分析研究PM_(2.5)成分和细胞炎症因子之间的关系。结果 6个城市PM_(2.5)中均含有高浓度的PAHs,其中广州、武汉、上海3个城市PM_(2.5)中PAHs浓度高达900 pg/μg,高于其他3个城市。6个城市PM_(2.5)金属成分中,过渡金属元素Fe、Cu、Ni含量较高。6个城市PM_(2.5)均能够引起A549细胞内IL-1β基因表达水平上调,PM_(2.5)中PAHs和Ni元素含量与细胞内IL-1β表达水平呈显著相关。结论不同城市的PM_(2.5)能上调细胞IL-1β的表达,PM_(2.5)上调细胞内IL-1β的作用与PAHs和Ni元素相关。