表面诱导矿化技术对纯钛溶血性能的影响

[目的]评价表面诱导矿化(SIM)技术制备羟基磷灰石涂层对医用纯钛溶血性能的影响.[方法]在15个试管内分别放置两种受试材料,加入生理盐水及稀释的抗凝兔血,离心,测量上清液的吸光度值,阴、阳性对照分别为生理盐水和蒸馏水,进行统计学处理,计算溶血率.[结果]两受试材料组吸光度值差异无统计学意义(P>0.05);这两组与阴性对照组之间差异也无统计学意义(P>0.05);SIM法羟基磷灰石涂层钛体外急性溶血率为1.17%;而医用纯钛的溶血率为1.27%.[结论]两种材料均无体外溶血作用,采用SIM技术制备羟基磷灰石涂层对纯钛的溶血性能无明显影响.     

颅骨修补材料钛金属表面梯度生物活性涂层的生物相容性研究

目的 评价复合氧化及水热沉淀法制备纯钛表面梯度生物活性涂层材料的生物相容性.方法 分别通过体外细胞相容性实验和动物皮下植入实验综合评估复合氧化及水热沉淀法制备的梯度羟基磷灰石(hydroxyapitate,HA)涂层的生物相容性.结果 体外细胞相容性实验(MTT法)显示,各组材料对L929细胞的生长、增殖、代谢无不良影响.在不同时间点上,羟基磷灰石改性试件表面的光吸收值均比纯钛试件有所增加,在细胞接种后期增加尤为显著,提示羟基磷灰石改性试件的细胞相容性优于其它各组试件.动物皮下植入实验结果显示各组材料30d后,炎性细胞反应程度、囊壁形成情况、周边组织反应均＜Ⅰ级,符合GB/T16886.6-1997医疗器械生物学评价Ⅰ级标准,其中羟基磷灰石组在纤维囊壁成熟方面更优于其它组.结论 复合氧化及水热沉淀法制备纯钛表面梯度生物活性涂层材料具有良好的生物相容性,值得作为颅骨修补材料进一步研究.     

纯钛表面聚吡咯涂层的生物安全性研究

目的: 评价纯钛表面聚吡咯涂层的生物安全性,为口腔种植体表面改性提供依据. 方法: 分别通过溶血试验、口腔黏膜刺激试验、细胞毒性试验(MTT法)和急性全身毒性试验,初步评价纯钛表面聚吡咯涂层的生物安全性. 结果: 纯钛表面聚吡咯涂层材料无溶血现象,不影响凝血功能;短期全身毒性实验的受试小鼠心、肾、肝的组织切片均未见病理变化;口腔黏膜刺激实验未见异常组织学反应;MTT试验显示L929细胞在涂层浸提液中生长良好,细胞毒性为0级. 结论: 纯钛表面聚吡咯涂层材料具有良好的生物安全性.     

纳米羟基磷灰石/聚酰胺66与人胚胎成纤维细胞的生物相容性研究

目的:研究新型骨修复重建复合材料纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(n-HA/PA66)对人胚胎成纤维细胞可能存在的细胞毒性,为该材料应用于临床提供实验依据.方法:采用人胚胎成纤维细胞,经材料及材料浸提液分别与细胞共培养等方式对n-HA/PA66进行细胞毒性测试,细胞形态观察法观察各组细胞在24h、48h、72h、5天各时相点的细胞形态学变化,细胞生长抑制法(MTT比色法),测定各组1,2,4,7天细胞的相对增殖率.结果:材料表面的细胞黏附生长良好,各浸提液组和直接接触组分别与阴性对照组进行两两比较,各组对细胞的增殖均无显著影响(P＞0.05),各浸提液组和直接接触组分别与阳性对照组进行两两比较显示有显著差异(P＜0.05),材料的细胞毒性为0～1级.结论:体外试验结果显示,n-HA/PA66与人胚胎成纤维细胞相容性好,符合GB/T16886.5-1997-ISO 10993-5:1992规定的医用材料相应标准[1].     

颌面部赝复用硅橡胶老化后体外细胞毒性研究

目的 研究颌面部赝复用硅橡胶老化后的体外细胞毒性.方法 以A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶作为受试材料,根据GB/T3512-2001分别制备24、48、72 h老化试件.以小鼠成纤维细胞(L-929)培养液为浸提介质,参照GB/T16886.5-2003制备相应浓度的浸提液培养L-929细胞.根据试件的老化时间和浸提液的浓度进行实验分组,同时设立阴性和阳性对照.于加入浸提液后的2、4、7 d分别收集细胞,MTT法检测细胞增殖,以测得的吸光度值(D490nm)计算细胞相对增殖率并以此评价受试件的毒性程度.结果 加入浸提液后2、4 d,SEI老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性为2级.加入浸提液后7 d,A.2186老化48 h 100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级;SEI老化48 h 50%和100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级.除A-2186老化24 h 50%浓度组外(细胞毒性为0级),其余各组细胞毒性评价均为1级.结论 老化48 h后,液态双组份SEI硅橡胶表现出轻微的细胞毒性;老化72 h后,A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶均有一定的细胞毒性.建议临床使用赝复体的患者定期更换赝复体.     

颌面部赝复用硅橡胶老化后体外细胞毒性研究

目的 研究颌面部赝复用硅橡胶老化后的体外细胞毒性.方法 以A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶作为受试材料,根据GB/T3512-2001分别制备24、48、72 h老化试件.以小鼠成纤维细胞(L-929)培养液为浸提介质,参照GB/T16886.5-2003制备相应浓度的浸提液培养L-929细胞.根据试件的老化时间和浸提液的浓度进行实验分组,同时设立阴性和阳性对照.于加入浸提液后的2、4、7 d分别收集细胞,MTT法检测细胞增殖,以测得的吸光度值(D490nm)计算细胞相对增殖率并以此评价受试件的毒性程度.结果 加入浸提液后2、4 d,SEI老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性为2级.加入浸提液后7 d,A.2186老化48 h 100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级;SEI老化48 h 50%和100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级.除A-2186老化24 h 50%浓度组外(细胞毒性为0级),其余各组细胞毒性评价均为1级.结论 老化48 h后,液态双组份SEI硅橡胶表现出轻微的细胞毒性;老化72 h后,A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶均有一定的细胞毒性.建议临床使用赝复体的患者定期更换赝复体.     

壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞的毒性研究

目的 了解壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞的毒性作用,为其治疗牙周病提供依据.方法 人牙龈成纤维细胞在不同浓度的壳聚糖温敏凝胶中体外培养24h、48h、72h、96h.用MTT法测定细胞相对增殖率(RGR),判断细胞毒性的级别.结果 各组细胞不同时间点相对增殖率均在96%～144%之间,各浓度的壳聚糖水凝胶材料浸提液的细胞毒性均为0级或1级,完全符合生物材料的安全评价标准.结论 壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞无毒性,用于牙周病局部治疗具有进一步的研究价值.     

钛基表面纳米银复合涂层的组织相容性研究

目的探讨钛基表面羟基磷灰石/纳米银(HA/Ag)复合涂层的组织相容性,为进一步临床研究和应用奠定基础。方法应用脉冲电泳方法,根据不同浓度的钙-磷-银电解液,在钛金属表面沉积3种复合涂层材料。按国家和ISO对生物材料相容性的检测标准,检测钛基表面HA/Ag复合涂层的生物相容性。以新西兰兔、昆明小鼠进行热原试验、皮肤刺激试验、急性毒性试验和溶血试验。结果静脉注射材料浸提液后,兔体温升高值<0.6℃。浸提液皮内注射法及划痕法观察72 h,兔局部皮肤无红肿、渗出、溃烂等刺激反应。腹腔注射浸提液后,小鼠未出现异常症状,体质量有增加趋势。3种材料溶血率均低于生物医用材料溶血国际标准(5%)。结论在钛基表面沉积制备的HA/Ag纳米复合材料,具有良好的组织相容性。     

四种牙科陶瓷材料细胞毒性研究

目的:初步评价牙科陶瓷材料的生物相容性.方法:根据ISO标准采用体外细胞毒性试验(MTT法)测试不同材料和浸提时间的浸提液对L929小鼠结缔组织成纤维细胞的影响,从而对全瓷材料的生物相容性进行初筛.结果:各组A490nm值均与阴性对照无显著性差异(P＞0.05),材料毒性级别除培养48 h后金属烤瓷粉浸提液组的细胞毒性为1级外,其他各浸提液组均为0级.结论:四种材料体外细胞毒性实验阴性,初步认为材料具有较好的生物相容性.     

聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝的羟基磷灰石复合材料的生物相容性

目的： 研究新型生物降解可吸收材料聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝的羟基磷灰石复合物（PLLA/PLLA-gHAP）的生物相容性,为其应用提供生物学依据。方法： 将96孔板上培养的L929细胞分为PLLA/PLLA-gHAP组、PLLA组、阴性对照组（空白培养液）及阳性对照组（含苯酚培养液）4个组，不同组材料浸提液与细胞共培养24、48和72h，以MTT法检测材料对L929细胞活性的影响；将L929细胞接种于被覆PLLA/PLLA-gHAP材料的盖玻片表面上，于1、2和3 d用倒置显微镜观察细胞形态学改变；将PLLA/PLLA-gHAP材料浸提液对小鼠进行腹腔内注射，观察小鼠的急性毒性反应，计数鼠骨髓多染红细胞微核率以检测遗传毒性作用；将PLLA/PLLA-gHAP板植入兔皮下，于2周、3个月和6个月检测兔血液学指标改变，光镜观察植入物周围组织病理学变化。结果：PLLA/PLLA-gHAP材料浸提液对L929细胞的增殖率(RGR)和细胞毒性分级（CTS）的影响与阴性对照组比较差异无显著性（P>0.05）,细胞在材料表面生长良好；材料浸提液对小鼠无急性毒性及遗传毒性（微核率0.24%）;材料在动物体内埋植后，早期组织内有淋巴细胞、巨噬细胞浸润，纤维膜形成，6个月时纤维膜基本消失，炎症反应明显减轻。结论：PLLA/PLLA-gHAP材料具有良好的生物相容性。     

灭菌对聚氨基酸/硫酸钙复合材料理化性能的影响

目的探讨高温高压、γ射线、低温等离子、环氧乙烷及紫外线等不同灭菌方式对新型复合生物材料——聚氨基酸/硫酸钙[poly(amino acids)/calcium sulfate,PAA/CS]理化性能的影响。方法采用熔融缩聚法制备PAA/CS材料,按照不同灭菌方式灭菌后进行浸提液L929细胞毒性、材料结构X射线衍射分析、材料力学性能测试,并与灭菌前作对照。结果环氧乙烷、紫外线灭菌及阴性对照组细胞生长良好,各时间点细胞相对增殖率在90%以上,细胞毒性0～1级。其余各组细胞24h内基本死亡,细胞相对增殖率均在50%以下,细胞毒性3～4级。X射线衍射分析显示相对于灭菌前,各灭菌组材料结晶峰数目及形态无明显变化。低温等离子及高温高压灭菌组材料抗压强度分别为(250±4)、(187±17)MPa,较灭菌前明显下降(P<0.05),其余各组无明显变化(P>0.05)。结论环氧乙烷及紫外线灭菌对PAA/CS复合材料理化性能无明显影响,可作为该材料的灭菌方法。     

纳米羟基磷灰石根管充填材料的基础研究

目的：通过对纳米羟基磷灰石根管充填材料与传统根管充填材料（充填用复方麝香草酚散甲醛甲酚复合制剂）进行细胞毒性、根管密合性的对比研究,评价纳米羟基磷灰石材料的细胞毒性、根管壁密合度．方法：①细胞毒性实验：体外培养成骨细胞,添加纳米羟基磷灰石材料浸提液,并以培养液为阴性对照组,充填用复方麝香草酚散甲醛甲酚复合糊剂为阳性对照组．根据ISO标准,采用MTT法进行体外细胞毒实验,测试不同浸提时间的材料浸提液与成骨细胞接触1,3,5,7d的A值,以评价其细胞毒性．②根管密合性实验：将10颗新鲜拔除的单根牙随机分成两组,每组牙齿按常规方法进行根管预备．实验组为400g/L纳米羟基磷灰石糊剂充填,对照组为充填用复方麝香草酚散甲醛甲酚复合糊剂充填．拍X线片以保证各组中实验离体牙牙根均完善充填,充分硬固后,进行微渗漏试验．改良葡萄糖检测微渗漏分析装置进行根管密合度实验,30d后结果由葡萄糖定量分析仪测定．结果：①细胞毒性实验：实验组与阴性对照组无统计学差异,实验组与阳性对照组有统计学差异（P〈0．05）．②根管密合性试验：对照组葡萄糖浓度明显高于实验组,有统计学差异（P〈0．05）．结论：纳米羟基磷灰石根管充填材料体外细胞毒性实验阴性,有良好的生物相容性．纳米羟基磷灰石根管充填材料根管壁密合度明显优于充填用复方麝香草酚散甲醛甲酚复合糊剂．     

纳米羟基磷灰石/羧甲基壳聚糖复合材料作为注射性软组织填充剂的细胞毒性研究

目的 探讨纳米羟基磷灰石/羧甲基壳聚糖(N-HA/CMCTS)复合材料的细胞相容性,评价其作为软组织填充剂的可行性.方法 设计制成复合材料(纳米羟基磷灰石与羧甲基壳聚糖的比例为6∶4),小鼠成纤维细胞L929行体外细胞传代培养.制备材料浸提液,MTT法进行细胞毒性评价,细胞接种于复合材料,通过倒置相差显微镜,应用形态观察法、细胞增值率,定性定量观察复合材料对细胞生长、附着、增值的影响.结果 纳米羟基磷灰石/羧甲基壳聚糖(N-HA/CMCTS)复合生物材料的细胞毒性不大于1级.成纤维细胞在复合材料的环境中生长良好并促进细胞生长.结论 纳米羟基磷灰石/羧甲基壳聚糖(N-HA/CMCTS)复合材料具有良好的生物相容性,作为一种新型的注射性软组织填充材料有望应用于整形美容领域.     

正畸不锈钢种植体的细胞毒性评价

目的 评价正畸不锈钢种植体的细胞毒性.方法 选择人成骨样细胞系MG-63作为细胞毒性的实验对象,用倒置相差显微镜观察细胞在不锈钢种植体和钛合金种植体浸提液中的生长情况,通过MTT试验检测细胞在培养24 h和48 h的光密度值和细胞相对增殖率,评价不锈钢种植体的细胞毒性.结果 钛合金种植体组的光密度值高于不锈钢种植体组,但两者之间无统计学差异.细胞在两种种植体浸提液中均生长旺盛,形态正常,钛合金种植体组细胞相对增殖率高于不锈钢种植体组,两组细胞毒性分级均为0级.结论 不锈钢种植体与钛合金种植体的细胞毒性无统计学差异,符合口腔正畸材料临床应用的要求.     

具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙的体外细胞毒性研究

目的 利用体外细胞培养技术,对具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙的细胞毒性进行研究.方法 采用体外培养的小鼠成纤维细胞(L-929),在培养液中分别添加不同浓度的β-磷酸三钙浸提液(原液及2、4、8、16倍稀释液),于接种后 72 h 通过 MTT 法显色,在酶标仪 490 nm 波长处测定吸光度值,计算相对增殖率(RGR),对β-酸三钙的细胞毒性进行评价.结果 各组的 RGR 值均≥80%,各浓度组之间差异无显著性意义(P>0.05),提示L-929细胞增殖与β-磷酸三钙浸提液的浓度无明显相关,不同浓度浸提液的细胞毒性为0～1级.结论 具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙对细胞的生长和增殖无明显抑制作用,无明显的细胞毒性.     

245例3种类型牙种植体的近期临床效果

应用纯钛螺旋式，钛芯羟基磷灰石涂层及纯钛叶片式３种类型牙种植体，为１９５名患做了２４５个种植修复体，对３种牙种植体材料的生物机械性能，结构特点，临床应用范围，植入术式及成功率等方面做了全面客观评述。在充分肯定口腔种植修复医疗技术的基础上，进一步探索了扩大种植修复的适应证。     

人工牙种植21颗近期疗效观察

人工牙种植２１颗近期疗效观察广州市第二人民医院口腔科（５１０１５０）陈仕泽目前人工种植材料较多，常用的材料有纯钛，生物活性陶瓷——生物玻璃，羟基磷灰石、生物活性玻璃陶瓷等。钛芯羟基磷灰石复合人工牙根（ＨＡ－Ｔｉ人工牙根）具有良好的生物相容性，近年来在...     

纳米羟基磷灰石/聚氨基酸复合材料生物安全性评价

目的 初步评价新型骨修复材料纳米羟基磷灰石/聚氨基酸(nano-hydroxyapatite and poly-amino acid, n-HA/PAA)的生物安全性.方法 按照ISO10993-1标准中规定以自制n-HA/PAA为实验组进行以下实验: ①体外细胞毒性实验:采用L929成纤维细胞,完全培养基为阴性对照,苯酚为阳性对照,通过细胞形态学、MTT试验以及流式细胞进行细胞毒性评价;②全身急性毒性实验:以生理盐水为阴性对照组观察2组小鼠腹腔注射材料浸提液和生理盐水后72 h内有无中毒和死亡现象;③致敏试验:白化豚鼠30只均分3组,以生理盐水为阴性对照组、二硝基氟苯丙酮溶液为阳性对照组观察各组动物致敏区有无红肿和红斑,并记分;④溶血实验:生理盐水作为阴性对照组,灭菌蒸馏水为阳性对照组,分别加入抗凝兔血后计算溶血率;⑤热源实验:新西兰大白兔3只,按10 ml/kg注射材料浸提液,测量正常体温与注射后连续 3 h 内每小时体温的差值;⑥遗传毒性实验:KM小鼠30均分3组,分别按100 g/kg间隔24 h注射材料浸提液、环磷酰胺及生理盐水2次,观察骨髓嗜多染红细胞及含微核小体的骨髓嗜多染红细胞,并计算微核率.结果 体外细胞毒性实验观察材料对细胞形态与生长无明显影响,MTT检测实验组细胞毒性为1级,流式细胞仪检测材料不会引起细胞凋亡;全身急性毒性实验显示实验组动物无中毒及死亡;致敏试验显示致敏区无水肿及红斑;溶血实验表明材料溶血率为0.71%,符合小于5%的实验标准;热源实验显示实验动物无明显体温升高;遗传毒性实验显示材料微核试验阴性,无遗传毒性.结论 n-HA/PAA复合材料具有良好的生物安全性.     

LDH法测定纤维蛋白胶对人脂肪干细胞的细胞毒性

目的采用LDH法测定纤维蛋白胶对人脂肪干细胞的细胞毒性。方法取成人吸脂术后的废弃脂肪组织并从中得到人脂肪干细胞,分别制成50%浸提液组、100%浸提液组、阴性对照组、阳性对照组,并采用LDH检测试剂盒测定各组纤维蛋白培养液中LDH的含量。结果原代ASCs生长缓慢,传代后生长加速,且ASCs呈成纤维样细胞形态;24 h和72 h两个时间点中50%纤维蛋白胶浸提液组、100%纤维蛋白胶浸提液组分别与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论纤维蛋白胶对ASCs无明显细胞毒性,可为以纤维蛋白胶为支架材料的脂肪组织工程研究提供参考。     

细胞培养法评价义齿磁性固位体中软磁合金的生物相容性

目的：检测软磁合金的体外细胞毒性，并与口腔科常用的钴铬合金、纯钛的细胞毒性相比较，以评价软磁合金的生物相容性。方法：将材料浸提液与体外培养的细胞接触培养后，进行四咪盐比色实验来评定材料的细胞毒性。结果：软磁合金与钴铬合金的细胞毒性级为I级，纯钛组的毒性级为Ⅱ级，软磁合金组对细胞增殖的抑制作用大于纯钛组而小于钴铬合金组，但统计学分析结果显示：3种金属材料组与阴性对照组的吸光度值之间的差异均无统计学意义(P＞0．05)。结论：软磁合金仅具有极微弱的细胞毒性，符合临床应用的要求，为其在义齿磁性固位体中的应用提供了生物学依据。