利用16S rRNA的PCR法鉴定双歧杆菌

随着以双歧杆菌为主的微生态制剂在医疗、保健、食品等行业的广泛应用 ,建立特异、灵敏、快速、简易的双歧杆菌分类鉴定方法日益引起人们的关注。荧光原位杂交〔1〕、ＰＣＲ〔2〕等已被引入双歧杆菌的鉴定。双歧杆菌各种型间发生学上密切相关 ,其 16ＳｒＲＮＡ相似性大于 93 % 〔3〕,这就为直接利用这些序列设计属特异性引物或寡核苷酸探针检测双歧杆菌提供了依据。本研究利用双歧杆菌 16ＳｒＲＮＡ基因序列设计属特异性引物 ,通过ＰＣＲ鉴定双歧杆菌 ,通过琼脂糖凝胶电泳和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法对扩增产物进行特异性及灵敏度方面的研究。…     

双歧杆菌LTA、EPS 对小鼠巨噬细胞活力的影响

脂磷壁酸（LTA）和胞外多糖（EPS）是双歧杆菌的细胞壁表面物质，在抗肿瘤和提高免疫力方面已成为研究热点。据此，本研究采用MTT法、荧光显微镜形态观察及激光扫描共聚焦分子生物学观察法检测LTA和EPS对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫激活能力，并通过脂多糖（LPS）作用组做对照，进一步探讨LTA和EPS提高免疫活性机理及影响程度。     

活动期SLE患者外周血淋巴细胞、单核细胞HLA-DR的表达

目的：探讨活动期SLE患者外周血淋巴细胞、单核细胞HLA-DR表达的变化。方法：应用双色荧光抗体标记流式细胞术检测活动期SLE患者外周血淋巴细胞、单核细胞HLA-DR表达的阳性百分率及荧光强度。结果：与正常对照组比较,活动期SLE患者外周血淋巴细胞HLA-DR表达的阳性率和荧光强度均显著升高（t=9.769,P〈0.001;t=11.184,P〈0.001）;而单核细胞HLA-DR表达的阳性率和荧光强度均显著降低（t=27.528,P〈0.001;t=67.522,P〈0.001）。结论：淋巴细胞HLA-DR表达的增高、单核细胞HLA-DR表达的降低与SLE的发病、发展有着非常密切的关系。     

SLE患者外周血淋巴细胞VCS参数的变化及意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者淋巴细胞VCS参数的变化及临床意义。方法:利用Beckman-Coulter Gen.S血液细胞分析仪的VCS技术,测定79例SLE患者(SLE组活动情况根据SLEDAI积分判断:分为轻度活动组25例、中度活动组28例、重度活动组26例)、85例其他风湿免疫性疾病患者(疾病对照组)及50名健康对照者的WBC、淋巴细胞百分率(LY%)和LY的体积(LYV)、电导率(LYC)、光散射性(LYS),及各自的平均分布宽度(LYVSD、LYCSD、LYSSD),并采用ROC曲线分别评价各参数的敏感度和特异度。结果:参数LYVSD、LYC、LYCSD、LYS在SLE组分别为19.7±5.8、109.9±8.2、13.0±2.8、53.0±8.2,疾病对照组分别为15.9±2.1、112.9±4.4、11.6±2.4、47.7±6.3,健康对照组分别为14.1±1.3、114.3±2.0、10.7±1.3、41.9±2.1,差异有统计学意义(F值分别为34.259、15.244、13.479、23.226,P均<0.05),以SLE组的上述各参数变化最为显著。SLE患者疾病活动期各组的LYV、LYS、LYVSD、LYCSD、LYSSD明显升高,而LY%和LYC显著下降,以重度活动组的LYVSD、LYCSD、LYS变化最为显著(P均<0.05)。ROC曲线分析LYVSD、LYC、LYCSD、LYS的曲线下面积分别为0.748、0.626、0.621、0.633,其中LYVSD的截值(cut-off值)≥15.9时,其敏感度和特异度达80.7%和71.4%。结论:SLE患者的淋巴细胞体积、细胞内部结构及胞浆复杂性等发生了明显变化,以SLE重度活动组的LYVSD、LYCSD、LYS变化最明显;LYVSD(cut-off值≥15.9)在区分SLE和其他风湿免疫性疾病时具有较高的敏感度(80.7%)和特异度(71.4%)。     

SLE患者IFN-γ、IL-4及IL-12水平变化及意义

从Th1/Th2细胞代表性细胞因子IFN γ/IL 4和IL 12水平的变化分析SLE患者Th1/Th2细胞的偏移现象。本实验通过半定量PCR法和ELISA酶联免疫检测法检测上述三种细胞因子含量。实验结果显示 ,SLE患者IL 4/IFN γ基因水平比值为0 32 8,高于对照组 (0 0 7)。ELISA检测显示IL 12在SLE患者血清中为 (38 39± 15 1)pg/ml,低于对照组 (84 97± 13 7)pg/ml(P <0 0 5 )。结论 :SLE患者Th1/Th2细胞因子平衡失调 ,IL 4细胞因子基因水平增高 ,同时血清中IL 12水平降低。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞干扰素诱导基因IFIT1和IFIT4 mRNA表达水平的研究

为分析系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）中两个干扰素 （IFN）诱导基因（IFIT1、IFIT4）的表达及其与SLE疾病活动度的相关性,运用实 时定量聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测95例SLE患者与48名正常对照者的 IFIT1、IFIT4的mRNA表达水平,并且与抗ds-DNA抗体等指标比较,分析IFIT1、 IFIT4的mRNA表达水平以及与抗ds-DNA抗体、SLEDAI积分之间的相关性。结果 显示：①SLE组与正常对照组相比,IFIT1、IFIT4的mRNA表达显著增高 （P〈0.01）;SLE活动组与SLE缓解组比较,IFIT1、IFIT4的mRNA表达增高 （P〈0.05）;SLE组IFIT1、IFIT4的mRNA表达水平之间呈正相关（r〉0.5,P〈0.05） 。②抗ds-DNA抗体与IFIT1、IFIT4的mRNA表达水平及SLEDAI积分呈正相关 （r〉0.5,P〈0.05）。结论：SLE患者IFIT1、IFIT4的mRNA表达水平显著增高,并且 与SLEDAI积分呈显著正相关,IFIT1、IF-IT4的mRNA表达水平对SLE患者病情活 动程度的判断有较大价值,抑制这2个基因的表达可能为SLE的治疗提供新的靶 点。     

复发性流产和不明原因不孕患者子宫内膜白血病抑制因子表达研究

目的探讨白血病抑制因子(leukaemia inhibitory factor,LIF)在复发性流产和不明原因不孕患者黄体中期子宫内膜的表达情况.方法采用实时荧光定量PCR技术,对31例不明原因不孕和30例复发性流产患者黄体中期子宫内膜LIF表达量的测定,对照组34例为继发性不孕患者(输卵管阻塞的)黄体中期子宫内膜.结果不明原因不孕组妇女子宫内膜中LIF表达量(M)为(169.00ng/l),与对照组(M) 为(240.00ng/l)相比,差异有显著性(P<0.01);习惯性流产组LIF表达量(M) 为(90.25ng/l),与对照组相比,差异有显著性(P<0.01),复发性流产组与不明原因不孕组相比差异无显著性(P>0.05).结论 LIF基因可能在启动胚泡着床和维持妊娠方面有重要作用, 黄体中期子宫内膜LIF基因表达量的减少可能是导致不明原因不孕和复发性流产的原因.     

SLE、RA患者血清sICAM-1和PTM水平的变化及其临床意义

系统性红斑狼疮(SLE)和类风湿性关节炎(RA)是多系统受累的自身免疫性疾病(aut oimmune diseases,AID),其免疫特征是,T细胞活化增加,B细胞多克隆活化并产生多种自身抗体,但其发病机制尚不清楚.可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular ad hesion molecules-1,sICAM-1),是表达于内皮细胞和其他抗原递呈细胞上的ICAM-1脱落于血液中的可溶性形式,属于免疫球蛋白超家族中的成员,为一种表面跨膜蛋白抗原.内皮细胞表面细胞黏附分子的异常表达是内皮细胞损伤的早期变化[1].     

荧光定量PCR检测新疆地区不孕不育患者UU、CT结果分析

目的利用实时荧光定量PCR技术了解新疆地区不孕不育患者解脲支原体（UU）和沙眼衣原体（CT）感染情况,通过对实验结果的统计学处理分析不孕不育与UU、CT感染率及感染量之间的关系,方法采用实时荧光定量PCR技术检测新疆地区不孕不育患者及能正常生育人群解脲支原体-DNA和沙眼衣原体-DNA含量并进行统计学分析。结果不孕不育患者UU-DNA阳性率52.18%,CT-DNA阳性率3.65%,正常对照组则分别为46.08%、1.00%,两组间的差异显著性有统计学上的意义,不孕不育组UU和CT的感染率明显高于对照组（P〈0.05）。不同性别,不用民族的UU阳性检出率不同。结论新疆地区不孕不育患者中UU和CT感染是引起男女不孕不育的重要原因之一,且女性UU阳性率高于男性,维吾尔族UU阳性率高于其它民族。     

miR-187在宫颈癌中的表达与临床病理关系的研究

目的 探讨miR-187在宫颈癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法 收集78例宫颈癌组织标本,同时收取同期手术的60例正常宫颈组织标本,采用实时荧光定量PCR检测方法检测两种组织中miR-187的表达量并进行比较,同时分析癌组织中miR-187的表达水平与临床病理特征的关系。结果 宫颈癌组织中miR-187的表达量低于正常宫颈组织标本,统计学意义显著（P＜0.001）;宫颈癌组织中miR-187的表达水平与宫颈癌组织的分化程度、患者的临床分期及有无淋巴结转移情况有关（P＜0.05）,而与患者的年龄、肿块类型、肿瘤大小及组织学类型无关（P＞0.05）。结论 miR-187在宫颈癌组织中低表达,可能作为其诊断与治疗的重要靶点。     

核酸传感器与CD72在系统性红斑狼疮中的作用

系统性红斑狼疮（SLE）是一种多发于青年女性的累及多个脏器的自身免疫性炎症性结缔组织疾病,其特征为机体产生针对各种细胞核抗原的自身抗体。核酸（NA）传感器在这一过程中起关键作用,一方面NA传感器可以识别微生物NA,并诱导抗微生物的免疫反应;另一方面也可以识别自身NA使B细胞产生自身抗体,同时使类浆细胞的树突状细胞产生IFN-I。CD72是一种抑制性的B细胞共受体,已有研究显示CD72可以调控SLE的发生发展。本文针对核酸传感器与CD72在系统性红斑狼疮中的作用作一简要综述,旨在为临床治疗提供参考。     

Sexual disparities in the incidence and course of SLE and RA

Systemic lupus erythematosus (SLE) and rheumatoid arthritis (RA) disproportionately affect females compared to males, with female to male prevalence ratios of 7–9:1 for SLE and 2–3:1 for RA. Interestingly, epidemiologic studies indicate that men that develop SLE may have more morbidity than women, but the same is not true for RA. Given the sex and age bias of SLE and RA, sex hormones may influence the pathogenesis of these diseases. However, the ways in which, and to what degree, sex hormones affect disease incidence and severity remain unclear and is the topic of ongoing research. Recent findings have implicated interactions between sex hormones, the immune system, genetic factors, and epigenetic modifications in influencing SLE and RA disease activity. This article reviews current hypotheses regarding the potential impact of sex hormones and genetics on disease pathogenesis, incidence, and severity of SLE and RA.     

系统性红斑狼疮患者血清抗dsDNA抗体的表达水平变化及临床意义分析

目的：通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患者血清中抗dsDNA抗体,探讨抗dsDNA抗体在SLE的诊断与治疗中的临床意义。方法：用间接结合的放射性核素检测法（radioisotopic methods）检测SLE患者及疾病对照组（原发性干燥综合征,系统性硬化征,类风湿关节炎,多发性肌炎,混合性结缔组织病,强直性脊柱炎等）血清中的抗dsDNA抗体,同时评估SLE患者的各种临床表现（SLEADI）及实验室指标,并分析其与抗dsDNA抗体的相关性。结果：①60例SLE患者中有39例抗dsDNA抗体为阳性,阳性率为65%,抗dsDNA抗体,在33例对照组中有2例为阳性,阳性率为6.7%,抗dsDNA抗体在SLE的敏感性为65%,特异性为93.3%;②抗dsD-NA抗体与Sm抗体无相关性（P〉0.05）;与抗SSA抗体有相关性（P〈0.05）;③抗dsDNA抗体阳性患者的脱发,皮疹,口腔溃疡,蛋白尿等临床表现的发生率明显高于阴性患者（P〈0.05）;④抗dsDNA抗体阳性患者的白细胞、血小板降低等的发生率明显高于阴性患者,差异有绝对统计学意义（P〈0.05）。结论：抗dsDNA抗体作为SLE的特异性标记的抗体,其表达与疾病的活动性及严重程度密切相关。     

Pregnancy outcomes and appropriate timing of pregnancy in 183 pregnancies in Korean patients with SLE

This study was undertaken to investigate the pregnancy outcomes in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and the appropriate timing of pregnancy. We performed a retrospective evaluation of 183 pregnancies with SLE at Catholic University Medical Center during the 13-year period from 1998 to 2010. Pregnancy outcomes were compared according to SLE characteristics. The predictive value of the different cut-off points of the stable period before conception on adverse pregnancy outcomes was calculated by ROC (Receiver operating characteristics) curve analysis. In multivariate analysis, the presence of antiphospholipid antibodies (aPLs) increased the risk of pregnancy loss (p<0.0001) and premature birth (p=0.0040). Active disease at conception increased the risk of premature birth (p< 0.0001) and complications (IUGR, PIH, or both) (p= 0.0078). The other predictor of complications was found to be lupus flare (p=0.0252). At a cut-off level of stable period of 4 months before conception, sensitivity and specificity were 70.8% and 53.2%, 71.4% and 61.5%, and 63.6 % and 59.8 %, respectively on reducing pregnancy loss, premature birth, and complications. Pregnancies with aPLs, active disease at conception and SLE flares are at a higher risk of adverse outcomes. It is essential that disease activity remains stable at least 4 months before conception, for favorable pregnancy outcomes.     

青岛地区住院患儿EB病毒感染状况分析

目的 了解青岛地区医院住院患儿EB病毒感染情况以及疾病的表现形式。方法 选取2016年6月~2017年12月在青岛市妇女儿童医院的住院患儿1635例,进行EB病毒PCR检测,分别从EB病毒感染的阳性率、感染患儿性别和年龄、疾病表现形式等相关方面进行回顾性分析。结果 1635例住院患儿中EB病毒感染阳性为404例,阳性率为24.71%;不同患儿性别,差异无统计学意义(P＞0.05);不同年龄组,差异有统计学意义(P＜0.05),其中1~3岁组EB病毒感染率最高,0~1岁组最低;EB病毒感染的疾病表现形式以呼吸道系统疾病为最多。结论 EB病毒感染率较高,EB病毒感染在性别上无差异,不同年龄EB病毒感染率有差异,EB病毒临床表现以呼吸系统为主。     

天津市津南区2015~2018年儿童流感 病原学监测结果分析

目的 对天津市津南区2015~2018年儿童流感病原学监测资料进行分析,为儿童流感的预防提供依据。方法 采集2015~2018年津南区流感监测哨点医院流感样病例（ILI）患儿的咽拭子标本,采用实时荧光定量PCR进行流感病毒检测,对不同流感病毒的流行进行型别和年龄分布的统计学分析。结果 共采集1783份0~14岁ILI患儿咽拭子标本,核酸阳性549份,阳性率为30.79%。季节性甲型H1N1、季节性H3型、B（Victoria）系（BV）、B（Yamaga-ta）系（BY）病毒交替流行。不同年龄组病毒阳性率呈显著上升又下降趋势,以6~8岁年龄组阳性率最高数（41.90%）,其次为3~5岁年龄组（35.37%）。结论 天津市津南区2015~2018年儿童流感流行高峰主要在冬春季节,优势毒株交替流行出现。应重视季节性甲型H1N1流感病毒对儿童健康的影响,加强对学龄儿童的流感防控工作。     

酪酸梭菌活菌散治疗小儿消化不良性腹泻的效果

目的 观察酪酸梭菌活菌散在治疗小儿消化不良性腹泻患儿中的应用疗效。方法 选取2016年8月~2017年6月我院收治的小儿消化不良性腹泻患儿84例,按随机数字表法分为两组,各42例。观察组给予酪酸梭菌活菌散药物联合醒脾养儿颗粒医治,对照组单独给予醒脾养儿颗粒药物医治,比较两组总有效率、症状改善时间、不良反应发生率。结果 治疗后,观察组总有效率明显高于对照组（P＜0.05）。观察组患儿腹泻、腹胀、腹痛消失时间、大便性状改变时间均短于对照组（P＜0.05）;观察组患儿大便次数小于对照组（P＜0.05）;观察组用药后不良反应发生率为7.14%,低于对照组的16.67%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 在小儿消化不良性腹泻患儿中给予酪酸梭菌活菌散联合醒脾养儿颗粒医治效果较好,改善腹泻症状,用药安全性较高。