表达甲型H1N1流感病毒血凝素抗原的DNA疫苗构建及其免疫原性评价

目的 构建表达甲型H1N1流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)抗原的DNA疫苗,并在小鼠中测试其免疫原性.方法 运用人密码子优化技术合成甲型H1N1流感病毒HA序列,并转移至DNA疫苗载体,用Western blotting检测其表达效率.采用单纯随机抽样方法把BALB/c小鼠分成DNA疫苗组和对照组.用...     

甲型H5N1和甲型H9N2流感病毒的抗原性和遗传学特征以及可能用于人类疫苗的候选疫苗病毒的研制

此文概述了2010年2月17日-9月26日甲型H5N1和甲型H9N2流感疫情、甲型H5N1流感病毒的抗原性和遗传学特征以及可用于人类疫苗的病毒研制状况.     

甲型H5N1和甲型H9N2流感病毒的抗原性和遗传学特征以及可能用于人类疫苗的候选疫苗病毒的研制

此文概述了2010年2月17日-9月26日甲型H5N1和甲型H9N2流感疫情、甲型H5N1流感病毒的抗原性和遗传学特征以及可用于人类疫苗的病毒研制状况.     

人用H5N1禽流感病毒疫苗生产工艺的优化

目的 建立优化的人用H5N1禽流感病毒疫苗生产的工艺。方法 在不同的稀释倍数、收获时间及灭活剂添加量下,通过测量收获液的病毒滴度和血凝效价,来确定病毒的最佳生产条件,并对离心法和凝胶过滤层析法的纯化效果进行对比。结果 103~104半数鸡胚感染量(50% egg infective dose,EID50)病毒接种鸡胚,收获的鸡胚尿囊液的病毒滴度和血凝效价最高,分别为10-8.3EID50和1∶480;在56~72 h血凝效价最高。甲醛浓度1∶10 000灭活144 h为灭活最佳条件。两种纯化方法得到的样品纯度和卵清蛋白的去除率相近,但离心纯化法和凝胶过滤层析纯化法病毒回收率有较大的差异,分别为19%和70%。结论 成功建立了高产毒的鸡胚基质H5N1禽流感病毒培养、灭活及纯化工艺。     

重症禽流感H7N9及重症甲型流感H1N1临床特点分析

目的:探讨重症禽流感H7N9与重症甲型流感H1N1的临床特点。方法:收集漳州市医院收治的7例重症禽流感H7N9(重症H7N9)与15例重症甲型流感H1N1(重症H1N1)病例,回顾性分析患者一般情况、基础病、临床症状、检验结果、影像学检查结果、治疗与预后等资料。结果:22例患者中,≥2种基础病的患者死亡率(72.73%)高于≤1种基础病患者死亡率(18.18%)(P<0.05);重症H7N9患者外周血淋巴细胞下降率(100%)高于重症H1N1患者(26.67%)(P<0.05);重症H7N9患者肺实变、胸腔积液与心包积液发生率分别为71.43%、85.71%、57.14%,高于重症H1N1患者的13.33%、13.33%、0(P<0.05);重症H7N9患者需要机械通气时间为(26.86±13.06)d,高于重症H1N1患者的(7.20±6.46)d(t=4.79,P<0.05);两组患者在出院后的随访中,重症H7N9患者在肺部影像上残留更多的纤维条索灶,吸收更慢。结论:与重症甲型流感H1N1相比,重症禽流感H7N9病情更重,预后更差。     

灭活H5N1亚型禽流感病毒A疫苗的安全性和免疫原性

H5N1亚型禽流感病毒A具有新H5亚型血凝素，免疫原性极低，对金刚烷胺及奥塞米韦耐药。具有高致病性、高住院率和高致死率，在世界范围内引起严重瘟疫，急需有效的疫苗来预防。     

唐山地区甲型H1N1流行性感冒与普通发热临床特征对比分析

对2009年10月23日至12月22日唐山市人民医院发热门诊就诊的临床及实验室检查资料完整的36例甲型H1N1流感患者和相同时间段内的季节性甲型H3流感以及普通发热患者的临床特征进行对比分析。1对象与方法1.1研究对象甲型H1N1流感确诊病例诊断依据参照卫生部《甲型H1N1流感诊疗方案(2009年第三版)》[1]标准:出现流感样临床表现,同时甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性,故36例甲型H1N1流感核酸检测阳性的患者均被确诊为甲型H1N1流感;     

H9N2禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶DNA疫苗对小鼠的免疫保护研究

目的 检测H9N2禽流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)DNA疫苗保护小鼠抵抗致死量同源病毒感染的能力.方法 通过小鼠肺对肺传代,建立禽流感病毒A/chicken/Jiangsu/07/2002(H9N2)小鼠适应株.同时,构建病毒HA和NA DNA疫苗,以不同剂量电击法免疫小鼠1或2次,在初次免疫后4周或加强免疫后1周用致死量(40 LD50)鼠适应型病毒攻击小鼠.通过测定小鼠血清抗体滴度、小鼠存活率和肺部病毒滴度来评价疫占的效果.结果 HA或NADNA 10μg免疫1次或3μg免疫2次均可保护小鼠抵抗致死昔H9N2病毒的感染.结论 低剂量HA或NA DNA可为抗H9N2禽流感病毒感染提供有效的免疫保护.     

甲型H1N1流感的护理体会

目的探讨甲型H1N1流感患者的护理经验。方法回顾性分析1例重型甲型H1N1流感患者的临床特点,并阐述了护理经验。结果治愈出院。结论加强消毒隔音、个人防护、心理干预及健康教育等护理措施,成功救治患者,有效控制院内感染的发生,使患者短期内康复出院。     

妊娠期感染甲型H1N1流感病毒1例

孕妇,23岁,怀孕26周。因发热、咽痛和全身肌肉酸痛7d,加重伴咳嗽、气促3d到我院就诊。入院查：体温38．0℃,血压105／64mmHg（1mmHg=0．133kPa）,脉搏110次／min,     

对禽流感H5N1灭活疫苗与不同免疫方式诱导的免疫应答及异亚型保护研究

目的  观察禽流感H5N1灭活疫苗以不同方式免疫后诱导的免疫应答及抗异亚型病毒攻击的保护作用.  方法 将H5N1灭活疫苗分别通过腹腔和滴鼻方式免疫BALB/c小鼠,同时以PBS作为对照;免疫后分别以PR8和H9N2病毒攻击,观察小鼠的体重变化和生存情况.采用ELISA对各组小鼠攻毒后不同时间的血清IgG及其亚类水平进行动态检测;流式细胞仪检测脾淋巴细胞亚群情况.采用t检验对各组数据进行比较.   结果 PR8和H9N2病毒攻击后,各组小鼠体重均下降,但疫苗组小鼠于后期体重恢复正常,存活率分别为100%和70%-80%,而PBS组小鼠则全部死亡.无论以何种方式免疫,疫苗组的特异性IgG及其亚类水平均明显升高,其中以IgG2a水平升高更为明显.攻毒后疫苗组小鼠脾CD4+与CD8+T淋巴细胞比值出现下降(t=6.8017,P<0.01);滴鼻免疫组与腹腔免疫组相比降低更明显(t=3.9701,P<0.05).    结论   H5N1疫苗免疫原性良好,可诱导较高水平的特异性抗体产生,诱导的抗体亚类以IgG2a为主.两种免疫方式均可对小鼠提供很好的异亚型保护,而滴鼻免疫能够诱导更强的CD8+T细胞应答.     

对禽流感H5N1灭活疫苗不同免疫方式诱导的免疫应答及异亚型保护研究

目的 观察禽流感H5N1灭活疫苗以不同方式免疫后诱导的免疫应答及抗异亚型病毒攻击的保护作用.方法 将H5N1灭活疫苗分别通过腹腔和滴鼻方式免疫BALB/c小鼠,同时以PBS作为对照;免疫后分别以PR8和H9N2病毒攻击,观察小鼠的体重变化和生存情况.采用ELISA对各组小鼠攻毒后不同时间的血清IgG及其亚类水平进行动态检测;流式细胞仪检测脾淋巴细胞亚群情况.采用t检验对各组数据进行比较.结果 PR8和H9N2病毒攻击后,各组小鼠体重均下降,但疫苗组小鼠于后期体重恢复正常,存活率分别为100%和70%-80%,而PBS组小鼠则全部死亡.无论以何种方式免疫,疫苗组的特异性IgG及其亚类水平均明显升高,其中以IgG2a水平升高更为明显.攻毒后疫苗组小鼠脾CD4+与CD8+T淋巴细胞比值出现下降(t=6.8017,P<0.01);滴鼻免疫组与腹腔免疫组相比降低更明显(t=3.9701,P<0.05).结论 H5N1疫苗免疫原性良好,可诱导较高水平的特异性抗体产生,诱导的抗体亚类以IgG2a为主.两种免疫方式均可对小鼠提供很好的异亚型保护,而滴鼻免疫能够诱导更强的CD8+T细胞应答.

Abstract：

Objective To observe immune responses and heterosubtypic protection elicited by an inactivated influenza H5N1 vaccine with different immunization routes in mice. Methods BALB/c mice were intraperitoneally injected or intranasally immunized with the inactivated H5N1 vaccine, the mice administered with PBS were used as control. Weight loss and survival in mice were observed after PR8 or a H9N2 virus challenge. Serum specific IgG antibody and its subclasses were detected by ELISA kits. Ratios of CD4+ /CD8+ lymphocytes in spleens of mice were assayed. The t-test was used in the comparison of different groups.Results After challenge, weight loss was found in all groups, but the weight of mice in vaccination groups returned to normal later. The mice in PBS groups all died. The vaccinated mice were completely protected against PR8 and partly protected against H9N2 virus. The level of IgG antibody increased significantly after vaccination, and the increase magnitude of IgG2a was higher than that of IgG1. The ratios of CD4+ /CD8+ lymphocytes in spleens of vaccinated mice decreased after challenge (t=6. 8017,P<0. 01) , especially in the intranasal group (t = 3. 9701, P < 0. 05 ). Conclusions Both intraperitoneal injection and intranasal immunization can induce a high level of specific IgG, especially the level of IgG2a, and provide protection against heterosubtypic viruses. Intranasal immunization seems to induce a higher level of CD8+ T cell response.     

上海地区人群甲型H1N1流感抗体水平监测分析

目的 了解上海地区不同年龄组人群甲型H1N1流感血清抗体水平,对人群中甲型H1N1与2008-2009年季节性流感疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)的血清抗体水平进行分析比较.方法 应用常规微量血凝抑制试验(micro-hemagglutination inhibition test,HI)对上海地区不同年龄组(0～5月龄、6月龄～4岁、5～24岁、25～59岁和≥60岁)人群进行甲型H1N1流感抗体检测.各年龄组抗体阳性率的比较采用Pearson X2检验和Fisher确切概率法进行分析.结果 上海地区人群甲型H1N1流感血清抗体总阳性率为9.2%(37/404).不同年龄组中以老年人组(≥60岁)的血清抗体阳性率最高,为25.0%(21/84);其次是成年人组(25～59岁),血清抗体阳性率为10.0%(8/80);其他年龄组血清抗体阳性率较低.Pearson X2检验结果显示不同年龄组之间抗体阳性率差异有统计学意义.在2008-2009年季节性流感疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)抗体阳性的329份血清中有31份甲型H1N1流感抗体阳性,季节性疫苗株抗体阴性的75份血清中有6份甲型H1N1流感抗体阳性.经Pearson X2检验分析,这两层人群甲型H1N1流感抗体阳性率差异没有统计学意义.结论 上海地区人群血清中甲犁H1N1流感抗体水平普遍偏低,其中老年人组抗体水平最高,人群对甲型H1N1流感病毒普遍高度易感;季节性疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)HI抗体阳性人群血清不能对甲型H1N1流感病毒产生交叉保护抑制.     

上海地区在校中学生接种甲型H1N1流感疫苗前后抗体水平监测分析

 目的  了解上海地区在校中学生接种甲型H1N1流感疫苗前后的抗体水平;观察甲型H1N1流感疫苗对该人群的免疫保护作用。 方法    应用常规微量血凝抑制试验（micro-hemagglutination inhibition test, HIT）对上海地区在校中学生分3个时间段进行甲型H1N1流感病毒抗体的血清学监测,3个时间段的抗体阳性率比较采用Pearson χ2 检验进行分析。 结果  2009年甲型H1N1流感流行前上海地区在校中学生的血清抗体阳性率仅为1.3%。经过一段时间流行后,血清抗体阳性率升至8.5%。接种甲型H1N1流感疫苗后,血清抗体阳性率升至87.3%。经Pearson χ² 检验分析,3个时间段在校中学生的血清甲型H1N1流感抗体阳性率差异有统计学意义（χ²=243.7,P<0.05）。 结论  在甲型H1N1流感流行前,上海地区在校中学生对其几乎没有免疫力,接种甲型H1N1流感疫苗能为该人群提供较好的免疫保护作用。     

高致病性H7N9禽流感病毒研究进展

摘要：H7N9禽流感病毒在中国出现以来共造成5次流行。在第5次流行中出现了高致病性H7N9变异株,该病 毒株的HA链接肽位置发生了基因插入性突变,导致该病毒对家禽毒力的增强。同时在人感染H7N9禽流感病例中 也相继分离到了该病毒。因此,对高致病性H7N9禽流感病毒病原学及流行病学研究对于该疾病的预防和控制具有 重要意义。本文从高致病性H7N9禽流感病毒的变异来源、流行病学特征及防治措施等方面进行综述,为高致病性 H7N9禽流感的有效防治提供科学策略。     

贵州省A(H1N1)亚型流感病毒HA基因系列分析

目的:了解贵州省A(H1N1)流感病毒血凝素抗原的基因变异情况.方法:对贵州省分离的部分A(H1N1)流感病毒株利用聚合酶链反应进行扩增,将扩增产物进行序列测定,然后进行基因系列分析.结果:2001-2005年贵州省分离的A(H1N1)流感病毒株有以下位点发生变异:202G>R、203D>N、225R>K、268M>R...     

上海地区人群甲型H1N1流感抗体水平监测分析

Objective To understand levels of antibody to swine-origin influenza A(H1 N1) virus (A/ H1N1) among different age groups in Shanghai, and to compare the levels between antibodies to A/H1N1 and to 2008-2009 seasonal influenza vaccine virus A/Brisbane/59/2007(H1N1). Methods The anti-A/HlN1 antibody levels were determined among 5 age groups (0-5 months, 6 months-4 years, 5-24 years, 25-59 years, and ≥60 years) with routine micro-hemagglutination inhibition test. The positive rates of the antibodies among different age groups were compared by Pearson's X2 test and Fisher' s exact probability test. Results The positive rate of antibody to A/H1N1 in the whole population in Shanghai was 9.2% (37/404). The highest rate was 25.0% (21/84) in the age group of ≥60 years, the next was 10. 0% (8/80) in the age group of 25-59 years, the positive rates in other groups were lower. The result of Pearson's X2 test showed that there were statistically significant differences in the positive rates of the antibodies among different age groups. Of 329 sera positive for antibody to 2008 -2009 seasonal influenza vaccine virus A/Brisbane/59/ 2007 (H1N1), 31 had anti-A/HlNl antibodies, and of 75 sera negative for antibody to A/Brisbane/59/ 2007(H1N1), 6 had anti-A/HlNl antibodies. The result of Pearson's X2 test showed that there were no significant differences in positive rates of antibody to A/H1N1 between the two types of population. Conclusions The anti-A/HlNl levels in Shanghai population are low, and people are generally susceptible to A/H1N1. The sera positive for antibody to A/Brisbane/59/2007(H1N1) can not provide cross-protection against A/H1N1.