大黄总蒽醌含药血清对NRK细胞AQP2与AQP4表达的调节效应

目的：探讨大黄总蒽醌含药血清对体外培养NRK细胞水通道蛋白2（AOP2）、水通道蛋白4（AOP4）表达的调节效应。方法：16只SD大鼠随机分为正常组、大黄总蒽醌低、中、高剂量组（0,1400,2500,4500mg·kg^-1·d^-1灌胃）,7d后麻醉处死取血制备含药血清。体外培养NRK细胞并给予不同浓度大黄含药血清培养液24h处理,采用免疫荧光检测AQP2、AQP4的定位,Westem blot及半定量RT—FCR检测AQP2、AQP4蛋白及mRNA的表达。结果：AOP2、AQP4主要表达在NRK细胞膜上,2500,4500mg·kg^-14·d^-1大黄总蒽醌含药血清培养液可抑制NRK细胞的AQP2、AQP4蛋白及mRNA的表达,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：大黄总蒽醌含药血清可抑制NRK细胞AQP2、AQP4基因转录与翻译,提示犬黄的利尿作用可能与调节AQP2、AQP4表达有关。     

水通道与肾脏

近十余年有关水通蛋白的发现及其研究使人们对肾脏重吸收水以及在抗利尿激素调节下浓缩尿液乃至全身水代谢的生理过程有了更深入的了解，也对有关的一些肾脏疾病和机体水代谢平衡紊乱状态的病理机制有了新的认识，本文综合近年文献就水通道蛋白及其在肾脏的生理作用与病理意义作一综述。     

黄芪对肾病综合征大鼠肾脏水通道蛋白的影响

目的:探讨黄芪对阿霉素肾病大鼠水钠潴留的影响及其可能的作用机制.方法:24只大鼠随机分成正常对照组(NC组),阿霉素肾病组(NS组),阿霉素肾病 黄芪干预组(A组)和阿霉素肾病 福辛普利干预组(F组),每组6只,在第4周末时检测各组大鼠血尿生化和血尿钠及渗透压等,同时检测了大鼠肾脏皮髓质AQP2、AQP3、AVP V2受体mRNA和蛋白表达情况.结果:(1)阿霉素大鼠在4周末有明显的肾病综合征表现,且有高血钠和高血渗伴低尿钠和低尿渗,黄芪能明显降低大鼠血胆固醇和甘油三酯,而黄芪和福辛普利均能降低血钠,改善高血渗,并提高尿渗和尿钠.(2)黄芪能上调阿霉素肾病大鼠肾髓质AQP2 mRNA的表达,同时降低肾脏AQP2蛋白表达.而对肾脏AQP3的表达无影响,福辛普利仅能减少肾脏AQP3 mRNA和蛋白表达.(3)与对照组相比,NS大鼠肾脏AVP V2受体表达明显下调,黄芪能上调AVP V2 mRNA和蛋白的表达,但福辛普利对此没有影响.结论:黄芪能改善阿霉素肾病大鼠水钠潴留状态,其机制可能与其调节AQP2和AVP V2受体的表达有关.     

高原低氧环境下大鼠肾脏水通道蛋白2的表达及意义

目的 研究高原低氧环境下大鼠肾脏内髓水通道蛋白2（AQP2）mRNA及蛋白的表达。 方法 将40只雄性SD大鼠随机分为24 h、48 h、72 h及1周组，同时设立对照组（西宁地区）。将4个实验组由西宁地区（2260 m）带至青海大学可可西里高原医学研究基地(4600 m)，在不同时间点处死取材。用放射免疫法检测血浆抗利尿激素(AHD)浓度，Western印迹、实时定量PCR、免疫荧光等方法检测AQP2蛋白及mRNA的表达。 结果 暴露于高原低氧环境后，大鼠AHD水平首先呈下降趋势，24 h为（142.46±10.57）；48 h时达到最低水平，仅为对照组的28.5%[（86.94±6.49） μg/L比（302.53±10.48） μg/L]；后逐渐上升，72 h组为（169.65±11.15） μg/L，与对照组差异均有统计学意义（均P < 0.01）；1周时为（306.46±11.14） μg/L达到对照组水平。AQP2 mRNA的表达与AHD水平的变化相一致，初入高原后呈下降趋势，48 h时达到最低水平，后逐渐上升，24 h、48 h、72 h组与对照组差异均有统计学意义（分别为0.04±0.005，0.03±0.002，0.04±0.003比0.09±0.008，均P < 0.01），1周时为（0.09±0.01），达到对照组水平。AQP2蛋白表达与mRNA的表达变化一致。免疫荧光结果显示，对照组及1周组大鼠肾脏荧光强度表达一致，其余各组较低，48 h组荧光强度最低。 结论 在高原低氧环境下大鼠肾脏内髓AQP2 mRNA和蛋白的表达在缺氧早期呈下降趋势，后逐渐上升到正常水平，其改变可能和机体对缺氧的程度和高原低氧的习服过程有关。     

水通道与肾脏

近十余年有关水通道蛋白的发现及其研究使人们对肾脏重吸收水以及在抗利尿激素调节下浓缩尿液乃至全身水代谢的生理过程有了更深入的了解 ,也对有关的一些肾脏疾病和机体水代谢平衡紊乱状态的病理机制有了新的认识。本文综合近年文献就水通道蛋白及其在肾脏的生理作用与病理意义作一综述。     

人脑膜瘤水通道蛋白4表达及其生物学意义

目的 研究水通道蛋白4(aquaporin 4 AQP4)在人脑膜瘤中的表达与脑膜瘤的病理学分型的相关性,并探讨其与瘤周脑组织水肿的关系及其可能机制.方法 取伴水肿(MRI证实)的良性脑膜瘤组织15例,无水肿良性脑膜瘤组织21例,恶性脑膜瘤15例和正常脑组织6例,应用免疫组织化学方法检测AQP4在脑组织的表达,并结合临床病理参数进行综合分析.结果 在不伴脑水肿的良性脑膜瘤组、伴水肿的良性脑膜瘤组以及恶性脑膜瘤组中阳性表达率均升高,正常脑组织中几乎未见阳性表达.伴水肿的良性脑膜瘤组织中AQP4阳性表达率高于无水肿良性脑膜瘤组(P＜0.05),恶性脑膜瘤组织中AQP4阳性表达率明显高于不伴脑水肿良性组(P＜0.01),AQP4的表达和脑膜瘤病理分级无相关性(P＞0.05).AQP4的表达与瘤周水肿显著相关(P＜0.05).结论 AQP4在脑膜瘤中的高表达与脑组织水肿的发生密切相关.检测脑膜瘤AQP4的表达对了解脑膜瘤生物学行为和判断预后有重要价值.     

不同单肺通气时间对大鼠肺组织中水通道蛋白1、4表达的影响

目的研究不同单肺通气(OLV)时间对大鼠肺组织水通道蛋白1、4(AQP1、AQP4)表达的影响,探讨AQP1、AQP4与OLV致急性肺损伤的关系。方法将30只SD大鼠随机均分成五组,实验组(OLV1、OLV2、OLV3、OLV4组)麻醉后使用小动物呼吸机行机械通气,对照组(C组)行双肺通气,实验组采用插管过深法将气管导管插入右肺,分别行右肺OLV 0.5h(OLV1组)、1h(OLV2组)、2h(OLV3组)、4h(OLV4组),确定左肺萎陷。实验结束后取左下肺组织,采用实时定量PCR测定各组大鼠AQP1、AQP4 mRNA表达,免疫组化观察AQP1、AQP4蛋白表达。结果 OLV4组AQP1 mRNA的表达明显低于C组(P<0.01)。肺组织免疫组化观察到随着OLV时间的延长,AQP1蛋白表达逐渐减少,OLV3和OLV4组明显低于C组(P<0.01),五组AQP4 mRNA表达和AQP4蛋白差异无统计学意义。结论长时间的OLV后,AQP1在调节肺内液体平衡中起到明显作用,可能参与了OLV致急性肺损伤的发病过程,而AQP4与其无明显关系。     

水通道蛋白4在食管鳞癌中的表达

目的 观察水通道蛋白4(AQP4)在食管鳞癌组织中的表达并探讨其在食管癌发病中的作用.方法 取食管鳞癌组织、癌旁正常鳞状上皮组织各16例,应用免疫组织化学,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测AQP4的表达及分布.结果 免疫组织化学显示,AQP4表达于正常食管黏膜鳞状上皮细胞,在食管鳞癌组中主要表达于肿瘤上皮细胞和癌巢中.RT-PCR法结果 显示,AQP4在癌旁正常组织和食管癌组织中的mRNA表达平均相对A值分别为0.45±0.12、0.70±0.23,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 AQP4在正常食管黏膜鳞状上皮细胞以及食管鳞癌组中均有表达,而且在癌组织中表达增加;AQP4可能对人食管癌的发生、发展起促进作用.     

猪苓汤对阿霉素肾病大鼠肾脏AQP2表达的影响

目的:探讨猪苓汤对阿霉素肾病大鼠水通道蛋白2表达的影响。方法:110只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组,尾静脉注射阿霉素14 d后,24 h尿蛋白定量≥100 mg提示模型复制成功,将模型大鼠再次随机分为模型组、猪苓汤组、呋塞米组,分别于灌胃2、4、6、8周处死部分大鼠,留取血液、尿液、肾脏标本,半自动生化仪检测尿蛋白含量、肾功能等生化指标,HE染色观察肾脏病理改变,RT-PCR法检测AQP2 mRNA表达,Western Blot法检测AQP2蛋白表达。结果:(1)生化指标:灌胃8周,猪苓汤组平均尿量高于模型组(P<0.05),其他生化指标比较,各造模组之间差异无统计学意义;(2)AQP2 mRNA:注射后14 d,模型组平均表达量高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05),猪苓汤组在灌胃2、4、6、8周时AQP2 mRNA平均表达量均低于模型组(P<0.05);(3)AQP2蛋白:注射后14 d,模型组平均表达量高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05),猪苓汤组在灌胃4、6、8周时AQP2蛋白平均表达量均低于模型组(P<0.05)。结论:猪苓汤的利尿作用可能通过下调AQP2 mRNA和蛋白表达而实现。     

充血性心力衰竭时肾脏水通道蛋白mRNA表达的改变及意义

目的 研究在不同程度的充血性心功能衰竭（心衰）时肾脏水通道蛋白2（AQP2），上皮性钠通道（ENaC)和髓襻升支粗段的Na-K-2Cl转运子（rBSC1)表达的情况。方法 将SD大鼠通过腹主动脉－下腔静脉穿刺造瘘和冠状动脉结扎的方法建成不同的心衰模型，设正常对照组，穿刺造瘘1孔组，穿刺造瘘3孔组和冠脉结扎组。用Doppler超声心动图及心脏秤重的方法比较其心功能的各项参数，并用RT－PCR的方法检测肾脏AQP，ENaCα亚单位和rBSC1mRNA表达。结果 穿刺造瘘大鼠心功能损害较轻，而冠脉结扎大鼠心功能严重失代偿。AQP2仅在冠脉结扎大鼠肾皮质表达增高，而rBSC1在造瘘1孔，3孔和结扎大鼠的肾髓质表达均显著上调。肾皮质αENaC含量3组心衰大鼠都显著增高，而在肾髓质仅冠脉结扎大鼠明显升高，造瘘大鼠虽有上升趋势，但差异无显著性意义。结论 在不同类型的充血性心力衰竭大鼠模型中存在着肾脏AQP，rBSC1和ENaC mRNA表达的上调，其中rBSC1增高可能和心脏受累早期肾脏排钠障碍有一定关系。     

大黄对烫伤大鼠胃肠激素变化的影响

目的 了解严重烫伤大鼠早期血浆巾胃肠激素的变化及大黄对胃肠激素水平的影响.方法 88只Wistar大鼠随机分为正常对照组(8只)、烫伤对照组(40只,Ⅲ度烫伤后管饲蒸馏水)、烫伤治疗组(40只,Ⅲ度烫伤后管饲大黄水提液).于烫伤后6、12、24、48、72 h取大鼠腹腔静脉血,用放射免疫法检测血浆胃动素(MTL)、P物质、血管活性肽(VIP)、生长抑素(ss)的含量. 结果 (1)正常对照组大鼠MTL和P物质分别为(198±28)、(61±10)ng/L;烫伤对照组明显下降,最低值分别为(110±15)、(30±5)ng/L,而后缓慢上升,72 h达高峰,但仍未恢复正常(P<0.05);烫伤治疗组MTL和P物质下降趋势明显变缓,各时相点均高于烫伤对照组,伤后48 h已达正常水平,72 h分别为(232±32)、(73±11)ng/L,明显高于正常对照组(P<0.05).(2)止常对照组大鼠VIP和SS分别为(35±6)、(30±5)ng/L;烫伤对照组旱明显上升趋势,伤后6 h分别为(70±12)、(49±9)ng/L(P<0.01),而后缓慢下降但72 h时仍高于正常水平(P<0.05);烫伤治疗组VIP和SS上升趋势幅度较小,各时相点均低于烫伤对照组,48 h恢复至正常水平;VIP达最高值的时间推迟至伤后12 h. 结论 大黄对严重烫伤大鼠早期血浆中胃肠激素的分泌和释放有明显的调控作用.     

七氟醚对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及Na+-2Cl--K+协同转运蛋白1和水通道蛋白2在其中的作用

目的 探讨七氟醚对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及Na+-2Cl--K+协同转运蛋白1(BSC1)和水通道蛋白2(AQP2)在其中的作用.方法 健康雄性SD大鼠24只,8～12周龄,体重125 ～145 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=8)∶假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚组(Sev组).采用夹闭肾动脉45 min再灌注24 h的方法制备双侧肾脏缺血再灌注损伤模型.Sev组吸入1 MAC(2.2％)七氟醚,意识消失后开始制备模型,并吸入1 MAC(2.2％)七氟醚3h.于模型制备前24 h(T1)和再灌注24 h(T2)时采集尿样,记录尿量,测定尿比重、肌酐(Cr)水平,计算内生肌酐清除率(Ccr);T2时采集下腔静脉血样,测定血清BUN和Cr、MDA浓度、SOD和髓过氧化物酶(MPO)活性浓度;取血后取左侧肾脏,观察肾组织病理学结果,进行肾小管损伤程度评分,测定肾组织SOD和MPO活性、MDA含量,分别采用免疫组化法和Western blot法测定AQP2和BSC1的表达.结果 与S组比较,I/R组和Sev组T2时尿量增加,血清BUN和Cr浓度升高,尿比重和Ccr降低,血清和肾组织MPO、MDA水平升高,SOD活性降低,肾小管损伤评分升高,肾组织AQP2和BSC1表达水平下调(P＜0.05);与I/R组比较,Sev组Ccr升高,血清BUN和Cr浓度降低,血清和肾组织MPO、MDA水平降低,SOD活性升高,肾小管损伤评分降低,肾组织AQP2和BSC1表达水平上调(P＜0.05),尿量和尿比重差异无统计学意义(P＞0.05),肾组织病理学损伤减轻.结论 七氟醚可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制与上调BSC1和AQP2的表达有关.     

水通道蛋白4在慢传输型便秘患者结肠黏膜的表达和意义

Objective To explore the relationship between the expression of aquaporin 4 (AQP4) and slow transit constipation(STC). Methods The expression of AQP4 in the ascending colon mucosa of 45 patients with STC was detected by immunohistochemistry. The transit time of stool was measured with barium sulfate suspensions. Stool was classified using Bristol stool chart. The difference between the pre- and post-operation groups was analyzed. Results Of 45 STC patients, 36 had high AQP4 expression (high expression group) and 9 had low AQP4 expression (low expression group).Preoperatively 30 (83.3%) patients in the high expression group and 3 (3/9) patients in the low expression group presented dry and hard stool (type Ⅰ or Ⅱ )(P＜0.01). Postoperatively, stool pattern was improved in all the patients of high expression group. One patient in low expression group still presented dry and hard stool (P＜0.01). Preoperatively the transit time was (127.3±28.2) h in high expression group and (64.2±12.9) h in low expression group(P＜0.01 ). Postoperatively, the transit time was (17.3±7.0)h in high expression group and (28.0 ±12.6)h in low expression groups(P＜0.01).Conclusion High expression of AQP4 accelerates the water absorption in colon mucosa and may be one of the crucial events in the development of STC.     

水通道蛋白4在慢传输型便秘患者结肠黏膜的表达和意义

Objective To explore the relationship between the expression of aquaporin 4 (AQP4) and slow transit constipation(STC). Methods The expression of AQP4 in the ascending colon mucosa of 45 patients with STC was detected by immunohistochemistry. The transit time of stool was measured with barium sulfate suspensions. Stool was classified using Bristol stool chart. The difference between the pre- and post-operation groups was analyzed. Results Of 45 STC patients, 36 had high AQP4 expression (high expression group) and 9 had low AQP4 expression (low expression group).Preoperatively 30 (83.3%) patients in the high expression group and 3 (3/9) patients in the low expression group presented dry and hard stool (type Ⅰ or Ⅱ )(P＜0.01). Postoperatively, stool pattern was improved in all the patients of high expression group. One patient in low expression group still presented dry and hard stool (P＜0.01). Preoperatively the transit time was (127.3±28.2) h in high expression group and (64.2±12.9) h in low expression group(P＜0.01 ). Postoperatively, the transit time was (17.3±7.0)h in high expression group and (28.0 ±12.6)h in low expression groups(P＜0.01).Conclusion High expression of AQP4 accelerates the water absorption in colon mucosa and may be one of the crucial events in the development of STC.     

肺水通道蛋白1表达在体外循环致犬肺损伤中的作用

目的 评价肺水通道蛋白1(AQP1)表达在体外循环致犬肺损伤中的作用.方法 健康杂种犬24只,体重15-20 kg,雌雄不拘,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=6):对照组(C组)、乙酰唑胺Ⅰ组(AⅠ组)、乙酰唑胺Ⅱ组(AⅡ组)和乙酰唑胺Ⅲ组(AⅢ组),开胸并制备犬CPB模型.C组采用传统预充液,AⅠ组、AⅡ组和AⅢ组分别在预充液中加入乙酰唑胺20、40、60 mg/kg.于开胸未行机械通气(T1)、停机(T2)和停机后1 h(T3)时取股动脉血,行动脉血气分析,计算呼吸指数 (RI)和氧合指数(OI),取肺组织采用RT-PCR及Westem-blot法检测AQP1 mRNA和蛋白表达,光镜下观察肺组织病理学结果并进行肺损伤评分.结果 与C组比较,AⅠ组、AⅡ组和A Ⅲ组T2,3时P(A-a)O2和RI升高,OI降低,AQP1蛋白表达下调,肺损伤评分升高,AⅡ组和AⅢ组T2,3时AQPl mRNA表达下调(P＜0.05);与AⅠ组组比较,AⅡ组和AⅢ组T2,3时P(A-a)O2和RI升高,OI降低,AQP1蛋白表达下调,肺损伤评分升高,AⅢ组T2,3时AQP1 mRNA表达下调(P＜0.05);与AⅡ组比较,AⅢ组T2,3时RI升高,AQP1蛋白表达下调,肺损伤评分升高(P＜0.05).结论 AQP41表达下调参与了体外循环致犬肺损伤的过程.     

机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5表达的变化

目的 评价机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达的变化.方法 健康雄性SPF级SD大鼠70只,周龄7周,体重200～250 g,随机分为7组(n=10),对照组(A组)仅切开气管保留自主呼吸;不同通气时间小潮气量组(B_1组和B_2组)V_T 7 ml/kg,分别通气2 h或4 h;不同通气时间中潮气量组(C_1组和C_2组)V_T20 ml/kg,分别通气2 h或4 h;不同通气时间大潮气量组(D_1组和D_2组)V_T 40 ml/kg,分别通气2 h或4 h.A组在气管切开即刻,其余各组在机械通气结束时处死大鼠,开胸取肺组织行病理损伤评分,测定AQP5蛋白及其mRNA表达,计算肺组织湿/干重比值(W/D比值),收集肺泡灌洗液,计数中性粒细胞(PMN).结果 与A组比较,C_1组、C_2组、D_1组、D_2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).与B_1组比较,C_1组和D_1组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).与B_2组比较,C_2组和D_2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).与C_1组比较,D_1组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).与C_2组比较,D_2组AQP5蛋白及其mRNA表达下调,W/D比值、PMN计数和病理损伤评分升高(P＜0.05).结论 AQP5表达下调参与了机械通气诱发大鼠肺水肿的发生.