汉黄芩苷对鼻咽癌裸鼠移植瘤模型的放疗增敏作用及其机制研究

摘要：目的观察汉黄芩苷对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗的增敏效应,并探讨其与核转录因子NF κB的关系。方法取低分化鼻咽癌5 8F细胞接种于雌性裸鼠皮下（共接种24只）,待肿瘤结节约4~6 mm时,将裸鼠随机分为4组,每组6只。分别为对照组、汉黄芩苷组［20 mg/(kg·w)］、放疗组、汉黄芩苷［20 mg/(kg·w)］联合放疗组。依照各组不同治疗措施处理,定期测量瘤体体积,3周后处死裸鼠,剥离瘤体称重,分别计算各组抑瘤率;并采用Real time PCR检测瘤体组织中NF κB mRNA的表达水平。结果汉黄芩苷联合放疗组移植瘤的体积和重量显著下降,相比对照组、汉黄芩苷组及放疗组差异均具有统计学意义(P均<0.05);汉黄芩苷联合放疗组NF κB mRNA表达水平明显下降, 与其他各组相比,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论汉黄芩苷能增强鼻咽癌裸鼠移植瘤对放疗的敏感性,其作用机制可能与抑制核转录因子NF κB的作用相关。     

细胞周期蛋白依赖性激酶2抑制对人鼻咽癌细胞株CNE-2衰老的影响及机制研究

目的　研究抑制细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin dependent kinase,CDK2）对人鼻咽癌细胞株CNE-2衰老的影响并探讨其分子机制。方法　实验分为Control组、Control siRNA组、CDK2-siRNA组、CVT-313组,分别用PI单染流式细胞仪检测各组细胞增殖情况,衰老相关β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老情况,流式细胞仪检测细胞活性氧（ROS）含量,Annexin-PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况;进一步通过Western blot法检测衰老相关蛋白表达情况。结果　人鼻咽癌细胞株CNE-2中,CDK2-siRNA组和CVT-313组细胞增殖指数明显降低,衰老细胞增多,活性氧含量增加,与对照组相比较差异具有统计学意义（P <0.05）,而细胞凋亡率无显著性变化（P >0.05）。CDK2-siRNA组和CVT-313组p53、p21、p16蛋白表达明显增加,而pRb蛋白表达明显减少。结论　抑制CDK2可诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2的衰老,其机制可能是通过促进衰老相关蛋白的表达来实现的。     

槲皮素对人鼻咽癌HEN1细胞系增殖抑制和诱导凋亡作用的研究

目的:目的:探讨黄酮类化合物槲皮素对人鼻咽癌HEN1细胞系的抑制增殖和诱导凋亡的作用,并对其机制做初步探讨。方法:应用MTT法检测不同浓度槲皮素对人鼻咽癌HEN1细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布;比色法测定凋亡相关蛋白caspase-3的表达。结果:槲皮素能明显抑制人鼻咽癌HEN1细胞增殖,存在剂量依赖(r=0.709;P<0.01)与时间依赖(r=0.703;P<0.01);HEN1细胞经不同浓度槲皮素(15、30、60、90、120μmol/L)作用48 h后细胞凋亡率分别为4.81%、9.02%、14.33%、19.65%、28.88%,明显高于对照组(1.70%)(P<0.01);随着槲皮素浓度升高,凋亡细胞和坏死细胞比例增加,将细胞特异性地阻滞在G2/M期,出现凋亡峰;槲皮素组的HEN1细胞凋亡相关因子caspase-3表达明显高于对照组(P<0.05)。结论:槲皮素能通过caspase-3途径抑制人鼻咽癌HEN1细胞增殖,诱导细胞凋亡,并具有细胞周期特异性。     

神经前体细胞表达发育下调蛋白9通过Rac1/Cdc42通路促进鼻咽癌细胞增殖和转移的机制研究

目的 探究神经前体细胞表达发育下调蛋白9(neural precursor cell expressed developmentally downregulated protein 9,NEDD9)通过Rac1/Cdc42通路促进鼻咽癌细胞增殖和转移的机制.方法 通过qPCR和Western blot检测人鼻咽上皮细胞...     

EB病毒核抗原1对鼻咽癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的 研究EB病毒核抗原1(Epstein-Barr virus nuclear antigen 1,EBNA1)对人鼻咽癌细胞增殖及细胞周期的影响.方法 构建特异性的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)EBNA1慢病毒干扰载体,包装慢病毒后感染过表达EBNA1的鼻咽癌细胞C666-EBNA1(简写为CE).应用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)和细胞计数法检测细胞增殖状态,流式细胞术、荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测细胞周期及相关调控因子变化.结果 成功构建含shRNA EBNA1的重组慢病毒,其感染可显著下调CE细胞中EBNA1表达.细胞计数和MTT均证明CE-shRNA细胞的增殖能力较CE-对照组显著下降(P值均＜0.05).细胞周期提示干扰EBNA1后CE细胞G0-G1期比例由(62.43±6.62)%升高到(89.66±0.64)%,两者比较差异有统计学意义(t=-7.091,P=0.002),S期比例由(34.93±7.36)%下降为(7.82±2.44)%,两者比较差异有统计学意义(t=6.095,P=0.004),G2-M期无明显变化(t=0.090,P=0.933).抑制EBNA1后,c-myc、CDK4、CDK6、pRb的mRNA水平分别下调65.60%、34.06%、41.05%、55.29%.蛋白免疫印迹法证实抑制EBNA1后4种蛋白的表达亦下调.结论 沉默EBNA1基因可抑制鼻咽癌细胞增殖,其机制之一可能是通过影响c-myc、CDK4、CDK6、pRb等基因的表达使鼻咽癌细胞阻滞于G0-G1期.     

SGK1在鼻咽癌中的表达及其对鼻咽癌细胞生物学特性的影响

DOI:10.11798/j.issn.·鼻咽癌专栏·基金项目：第目的探讨SGK1在鼻咽癌（NPC）中的表达及其对肿瘤细胞存活、增殖和迁移的影响。方法采用免疫组织检测NPC组织和慢性鼻咽炎组织中SGK1的表达。使用lipofectamine 2000瞬时转染NPC细胞系HNE 1,Western blot检测siRNA干扰组、阴性对照组及未转染组细胞中的SGK1表达,筛选SGK1沉默效果最佳的NPC细胞。CCK8法检测转染细胞的增殖能力,Transwell细胞迁移实验检测SGK1沉默对细胞迁移能力的影响,流式细胞术检测其凋亡水平。结果NPC组织中SGK1的表达明显高于慢性鼻咽炎组织。Western blot结果显示转染SGK1 siRNA后HNE 1细胞中SGK1蛋白水平明显下降。SGK1基因沉默后,HNE 1细胞表现出较强的细胞增殖和迁移抑制作用。此外,沉默SGK1后,HNE 1细胞的凋亡率增加。结论SGK1在NPC组织中呈高表达。沉默SGK1基因可抑制NPC细胞系HNE 1的增殖、迁移和存活能力。     

鼻咽癌放疗后鼻咽部出血原因分析及治疗对策探讨

目的探讨鼻咽癌放疗后鼻咽部出血的原因及治疗对策。方法回顾性分析2012年1月—2017年12月住院的25例鼻咽癌放疗后导致鼻咽部出血患者的临床资料,治疗方法主要包括鼻咽鼻腔填塞、鼻内镜下鼻咽痂皮及坏死肉芽清创、介入治疗、低温等离子手术止血、鼻内镜下鼻咽肿瘤切除术。结果25例患者中,由鼻咽癌复发引起鼻咽出血8例,其中3例大出血死亡;5例由假性动脉瘤引起,其中3例大出血死亡,2例经介入治疗止血;11例为鼻咽放疗后痂皮及肉芽出血,其中有7例经低温等离子手术成功止血,3例经介入后止血,1例经填塞止血;1例不明原因大出血窒息死亡。结论鼻咽癌放疗后鼻咽部出血是致死率高的并发症, 其中以鼻咽癌复发及假性动脉瘤危险性最高。积极检查明确出血原因,采取有针对性的治疗措施,能够有效降低鼻咽癌放疗后出血的死亡率。     

紫草萘醌衍生物联合放射线照射抑制 人鼻咽癌细胞增殖和诱导凋亡

目的探讨紫草萘醌衍生物（SYUNZ 4）［3,11 bis(2 hydroxyethansulfanyl) 6 isohexeny lnaphthazarin］联合放射治疗对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）细胞生长的协同抑制作用及放疗增敏机制。方法人NPC高分化鳞状细胞癌细胞株CNE1和低分化鳞状细胞癌细胞株CNE2随机分为空白对照组、单纯SYUNZ 4组、单纯放射治疗组及SYUNZ 4联合放射线照射组共4组。单纯放射治疗组仅给予剂量4 Gy放射线照射,单纯SYUNZ 4组仅给予最大非细胞毒性剂量的SYUNZ 4液培养,SYUNZ 4联合放射线照射组在给予4 Gy的放射线照射后,立即给予最大非细胞毒性剂量的SYUNZ 4液培养;然后应用流式细胞术检测SYUNZ 4诱导CNE1和CNE2细胞凋亡的作用及其对细胞周期的影响。结果SYUNZ 4对CNE1和CNE2细胞均具有增殖抑制作用,且其作用呈浓度依赖性。与空白对照组相比,单纯放射线照射组及联合治疗组细胞增殖均受到抑制（P<0.05）,且前者G2/M期细胞比例明显增加（P<0.05）,后者S期及G2/M期细胞比例均显著增加（P<0.05）。与单纯放疗组相比,联合干预使CNE1和CNE2细胞增殖受到更明显地抑制（P<0.01）。与对照组相比,放射线照射导致细胞凋亡率明显增加（P<0.05）;而联合治疗组与单纯放疗组和空白对照组相比,联合干预使CNE1和CNE2细胞凋亡率明显增加,组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论紫草萘醌衍生物SYUNZ 4联合放射线照射能显著抑制人NPC细胞的增殖,并导致NPC细胞周期阻滞和诱导凋亡。     

鼻咽癌外科治疗的历史与现状及展望

近年来越来越多学者开始关注鼻咽癌（NPC）内镜手术治疗。虽然目前以放疗为主的综合治疗被认为是主流的治疗方法,但是随着研究的不断深入,有学者提出内镜手术治疗NPC不仅可取得较好的疗效,同时提高患者生活质量。本文通过国内外文献回顾分析,综述了外科手术在复发性NPC以及原发性NPC患者中的开展情况以及未来治疗NPC新的趋势。方法结果结论     

2450 MHz微波辐照对人鼻咽癌细胞增殖与细胞周期的影响

目的〓〖HTK〗探讨微波辐照对人鼻咽癌细胞增殖与细胞周期的影响。〖HTW〗方法〓〖HTK〗运用微波理疗仪以连续波、垂直极化照射方式对人鼻咽癌细胞CNE-2行微波辐射（频率2450MHz）。实验分为4组：空白对照组,10、20、30mW/cm2微波组。利用MTT法和流式细胞技术检测微波辐照对人鼻咽癌细胞增殖与细胞周期的影响。〖HTW〗结果〓〖HTK〗随着微波剂量的增加,辐照组细胞存活率呈逐渐下降的趋势。20mW/cm2和30mW/cm2组存活率为76.75%、65.07%,两组与对照组和10mW/cm2组相比差异有高度统计学意义(P<0.01) 。随着微波剂量的增加,20mW/cm2组和30mW/cm2组均出现了亚G1峰,两组凋亡细胞的数量有随微波强度增强而增加的趋势。〖HTW〗结论〓〖HTK〗微波辐照能抑制人鼻咽癌细胞的增殖,促进细胞凋亡。     

鼻咽癌早期筛查的研究进展

目的鼻咽癌作为我国南部地区常见的恶性肿瘤,对人类健康及生命带来了极大的危害,鼻咽癌的病理及解剖特性决定了其以放射治疗为主的治疗方法,鼻咽癌的分期与患者的预后密切相关,因此早期干预可以极大地提高患者的远期生存率,而寻找合适的筛查手段对鼻咽癌的早期发现至关重要,基于此,本文对鼻咽癌的早期筛查的研究新进展作一综述。     

PD-L1蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的探讨PD L1在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学技术对收集的162例鼻咽癌组织进行PD L1蛋白的表达检测,并结合患者临床病理参数及预后信息,探讨其临床价值。结果PD L1蛋白表达水平与性别、年龄、PS评分、临床分期、吸烟情况等临床病理参数之间无显著差异(P>0.05)。PD L1阳性组与阴性组3年总生存率分别为92.3%与80.0%,差异具有统计学意义(P=0.026)。结论PD L1蛋白阳性鼻咽癌患者预后较好,有望成为鼻咽癌患者预后评估的生物标志物。     

Skp2与P27kip1在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的：F-box蛋白家族中的一员Skp2参与细胞周期抑制蛋白P27kip1泛素化降解,研究发现Skp2在乳腺癌、胃癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤中表达增加。本研究旨在探讨Skp2与P27kip1在鼻咽癌组织中的表达及与鼻咽癌多项临床病理特征的关系,并探讨两者的相关性。方法：鼻咽癌组39例,慢性鼻咽炎组24例。标本均经石蜡包埋,HE染色确诊。Skp2和P27kip1蛋白的检测采用免疫组化染色（PV-9000二步法）。结果：(1) Skp2在鼻咽癌组织中的阳性表达率为71.79%,明显高于其在慢性鼻咽炎组织中的阳性表达率(41.67%),差异有统计学意义（P＜0.05）;P27kip1在鼻咽癌组织中的阳性表达率为35.90%,明显低于其在慢性鼻咽炎组织中的阳性表达率(79.17%),差异有统计学意义（P＜0.01）;(2) Skp2、P27kip1的蛋白表达与鼻咽癌的临床分期、颅神经侵犯有关（P＜0.05）,与年龄、性别、分化程度、颈淋巴结转移无关（P＞0.05）;(3) Skp2、P27kip1在鼻咽癌组织中的表达呈负相关（rs=-0.373,P=0.019）。结论：鼻咽癌中Skp2蛋白表达与靶蛋白P27kip1蛋白降解有关,Skp2、P27kip1可能与鼻咽癌的发生发展有关,联合检测Skp2、P27kip1蛋白表达可作为判断鼻咽癌生物学行为的指标之一。