不同金属离子对菠萝蛋白酶活性及热稳定性的影响

该试验研究表明,Mg2+、Mn2+和Ca2+对菠萝蛋白酶的酶活性均有促进作用,且在浓度分别为4mmol/L,2mmol/L和2mmol/L最明显;Zn2+对菠萝蛋白酶的活性抑制作用明显,且随浓度的增大抑制作用越大。在60℃下Ca2+、Mn2+对菠萝蛋白酶的热稳定性具有促进作用,Ca2+浓度为3mmol/L时菠萝蛋白酶的半衰期延长了55min,增加了原菠萝蛋白酶的59.5%。Mn2+浓度为1mmol/L时半衰期延长了19.78min,增加了原菠萝蛋白酶的29%。Mg2+、Zn2+对菠萝蛋白酶的热稳定性没有明显的促进作用。     

Ca2+对菠萝蛋白酶热稳定性和二级结构的影响

研究了Ca2+对菠萝蛋白酶活性及远紫外圆二色谱的变化.在37℃下,Ca2+与酶作用1h后,5～10mmol/L Ca2+对酶的活性均有促进作用,其中当Ca2+浓度为2mmoL/L时.促进作用最明显.在60℃下,Ca2+浓度为3mmol/L时,对菠萝蛋白酶的热稳定化效果最好,处理100min后仍然能保留68%的活性;菠萝蛋白酶在60℃下活性的半衰期为86min,除Ca2+浓度为1mmoVL外,其他浓度(2、3、4、5mmol/L)的Ca2+与菠萝蛋白酶作用后,酶的半衰期均有所延长.由圆二色谱曲线发现,菠萝蛋白酶在波长209nm与221am处有明显的负峰.与Ca2+作用后菠萝蛋白酶的α-螺旋、β-转角和无规则卷曲均有所变化,其中,在37℃下加入Ca2+后,菠萝蛋白酶的α-螺旋均减少,而β-转角有所增加.在70℃下处理1h,Ca2+对菠萝蛋白酶二级结构也有所影响.无Ca2+处理的菠萝蛋白酶和加入4mmol/L Ca2+的菠萝蛋白酶的α-螺旋分别减少为34.90%和35.60%,而β-转角则有所增加,分别为26.30%和25.10%.圆二色谱结果表明,α-螺旋结构对菠萝蛋白酶的稳定性起关键作用.     

食品加工业中菠萝蛋白酶的热稳定性

运用动力学的方法研究了菠萝蛋白酶的热稳定性，发现某些多羟基、多羟基化合物能明星延长菠萝蛋白酶在较高温度下的半寿期。这些物质无毒无害，能安全有效的提高食品加工业中菠萝蛋白酶的贮藏期和使用期。     

超声波对菠萝蛋白酶热稳定性及二级结构的影响

研究了菠萝蛋白酶经超声波处理后的活性、热稳定性和远紫外圆二色谱的变化.在超声波处理条件为240W,5min时,菠萝蛋白酶活性增大至119.05%,随着处理时间的延长,酶活性逐渐下降,在280W,35min时,酶活下降至58.60%.热稳定性分析发现,160W和200W的处理功率均可以改善菠萝蛋白酶的热稳定性,其中160W,5min时最为显著,菠萝蛋白酶在60℃中保存120min后的酶活残留率为63.49%,比未处理时提高了约20%.圆二色谱结果表明,在处理条件为200W,5min及160W,5min时,菠萝蛋白酶的α-螺旋分别减少为24.30%和26.80%,而β-折叠由34.50%分别增加到40.10%和44.50%,无规则转曲由18.60%分别增加到19.00%和13.50%.     

Ca2+对菠萝蛋白酶热稳定性和二级结构的影响

研究了Ca2+对菠萝蛋白酶活性及远紫外圆二色谱的变化。在37℃下,Ca2+与酶作用1h后,5～10mmol/L Ca2+对酶的活性均有促进作用,其中当Ca2+浓度为2mmol/L时,促进作用最明显。在60℃下,Ca2+浓度为3mmol/L时,对菠萝蛋白酶的热稳定化效果最好,处理100min后仍然能保留68%的活性;菠萝蛋白酶在60℃下活性的半衰期为86min,除Ca2+浓度为1mmol/L外,其他浓度（2、3、4、5mmol/L）的Ca2+与菠萝蛋白酶作用后,酶的半衰期均有所延长。由圆二色谱曲线发现,菠萝蛋白酶在波长209nm与221nm处有明显的负峰。与Ca2+作用后菠萝蛋白酶的α-螺旋、β-转角和无规则卷曲均有所变化,其中,在37℃下加入Ca2+后,菠萝蛋白酶的α-螺旋均减少,而β-转角有所增加。在70℃下处理1h,Ca2+对菠萝蛋白酶二级结构也有所影响。无Ca2+处理的菠萝蛋白酶和加入4mmol/LCa2+的菠萝蛋白酶的α-螺旋分别减少为34.90%和35.60%,而β-转角则有所增加,分别为26.30%和25.10%。圆二色谱结果表明,α-螺旋结构对菠萝蛋白酶的稳定性起关键作用。      

影响菠萝蛋白酶活力因素的研究进展

菠萝蛋白酶作为一种典型的巯基类蛋白酶,具有稳定性差、易失活的特性。本文主要从物理因素、化学因素及生物学因素等几个方面对影响菠萝蛋白酶的活力作一概述。     

菠萝蛋白酶

对菠萝蛋白酶的生产方法、理化性质与分离纯化进行了介绍。     

金属离子对蛋白酶活力和热稳定性的影响

分别详细考查了3种金属离子对1398中性蛋白酶活力和热稳定性的影响。采用福林法测定了蛋白酶的最适反应温度和pH值,并在最适条件下确定了3种不同金属离子的最适反应浓度,考察和比较了它们对蛋白酶活力及热稳定性影响的差异,结果表明:这3种金属离子对酶活均有提高,而钙离子还具有增强酶热稳定性的作用。     

超高压处理对菠萝汁中菠萝蛋白酶纤溶活性的影响

为保留菠萝汁中菠萝蛋白酶的纤溶活性,探讨了超高压处理中压力、保压时间和温度对菠萝蛋白酶纤溶活性的影响,并考察其在模拟胃肠道环境中的稳定性。结果表明:压力、保压时间和温度均对菠萝汁中菠萝蛋白酶纤溶活性的影响显著,压力300MPa、温度30℃、保压10min时菠萝蛋白酶的纤溶活性比未处理样高65.54%;300MPa保压10min(30℃)处理的菠萝汁在模拟胃液和肠液各处理4h后,纤溶活性残留率分别为37.91%和85.33%,均高于鲜榨汁。说明,通过调整超高压处理条件,可以提高菠萝汁中菠萝蛋白酶的纤溶活性及其对模拟胃肠液的耐受性。      

茶多酚对菠萝蛋白酶的分离及特性的影响研究

本研究用从茶叶中提取的多酚类物质分离菠萝蛋白酶、井研究了菠萝蛋白酶与茶多酚结合后的性质、结果表明,用０．５％的茶多酚提取物对菠萝蛋白酶的沉淀回收率达７８％,茶多酚与菠萝蛋白酶的结合比为１∶６４３（ｍｇ∶ｕ）。等电聚焦电泳图谱表明菠萝皮汁中有６种同工酶组份．这６种酶组份均可与茶多酚结合形成沉淀而得以分离,结合后酶的等电点（ｐＨ３．６０,ｐＨ４．９０,ｐＨ５．３５,ｐＨ６．５０,ｐＨ７．８０,ｐＨ９．２５）、最适ｐＨ值（ｐＨ６．５～８．５）以及最适温度（６０℃）不改变,但酶对底物酪蛋白的亲和力下降（游离酶Ｋｍ＝８．１×１０￣６ｍｏｌ／Ｌ,结合酶Ｋｍ＝１．３９×１０￣５ｍｏｌ／Ｌ）。酶的稳定性有明显的提高,常温下的半衰期由游离酶的５天延长至２７天。酶稳定性的提高与茶多酚的抗氧化特性有关。     

Ca2+、Mg2+及食盐对浸酸铬鞣的影响

研究了水中Ca2+、Mg2+和NaCl的含量对猪皮浸酸铬鞣的影响.通过正交试验和扩大试验研究发现,Ca2+、Mg2+和NaCl对浸酸铬鞣的影响趋势为Mg2+＞NaCl＞Ca2+.当水中Ca2+、Mg2+含量分别达到质量浓度为80 mg/L和30 mg/L时,铬吸收率大于95%,坯革的Ts均达到100℃以上.坯革粒面平细、染色均匀,物理机械性能达到同类产品指标.NaCl质量浓度高于65 g/L时,不利于铬的吸收和结合.试验结果表明水中Ca2+、Mg2+含量分别达到质量浓度为80 mg/L和30 mg/L时,对猪皮浸酸铬鞣无不良影响.     

采后钙处理对小油菜贮藏品质与抗氧化能力的影响

以白菜型油菜(Brassica campestris L.,品种"五月慢",俗称小油菜)为材料,以CaCl2溶液为钙源,研究Ca2+处理对小油菜贮藏品质与抗氧化能力的影响。结果表明,浓度为0.3%的Ca2+能够有效地抑制小油菜的黄变和腐烂,提高其总抗氧化能力并延长了贮藏期。     

罗非鱼蛋白酶解液的多肽与钙复合物的制备及其抑菌分析

采用木瓜蛋白酶和风味酶的复合酶解罗非鱼蛋白,制取富含多肽的酶解液;并将酶解液中的多肽与Ca2+反应制备多肽-钙螯合物,探讨反应液的pH值、反应温度、反应时间、多肽与CaCl2的质量比对螯合反应的影响,并对产物进行抑菌实验。结果表明：多肽液与Ca2+的最佳螯合工艺为反应pH7.13,反应温度29.5℃,反应时间24.05min,多肽与CaCl2的质量比2.68:1,在此最佳条件下钙的螯合率为87.5%;产物对多种微生物,特别是对细菌的生长有良好的抑制作用。     

提取条件对白鲢肌动球蛋白得率及Ca2+-ATPase活性的影响

本文以白鲢为原料，研究肌动球蛋白提取条件对其得率及Ca^2 -ATPase活性的影响。结果表明：用水漂洗1次，低盐磷酸缓冲液清洗3次后肌动球蛋白得率及其Ca^2 -ATPase活性较高；肌动球蛋白得率及其Ca^2 -ATPase活性均随浸提温度的升高而下降，温度低于20℃时对Ca^2 -ATPase活性的影响较小，但高于20℃时，Ca^2 -ATPase活性随浸提温度的升高而迅速下降；浸提时间极显著地影响Ca^2 -ATPase活性，离心速度对得率影响显著，其最佳浸提时间、离心速度分别为22h和8000r／min。在所得的适宜提取工艺条件下，肌动球蛋白得率为12．57％，Ca^2 -ATPase活性可达60．62U／g。     

钙和镁型离交树脂的制备及其二混蜜脱盐

比较了镁型和钙型离子交换树脂的制备及其对二混蜜脱钾钠的效果,探讨钙型树脂替代耗用大量Mg^2＋再生剂的传统镁型树脂对二混蜜脱盐以提高糖分回收率的可行性。结果表明,相同的静态吸附和洗脱条件下,钠型BK001树脂对Ca^2＋的吸附量大于Mg^2＋,但Mg^2＋型树脂对二混蜜脱钾钠效果稍好于Ca^2＋型树脂;动态的钙型树脂对二混蜜脱钾钠效果好于静态的镁型树脂。故钙型BK001树脂可用于二混蜜脱钾钠的糖分回收工艺。     

Ca2+/GA3处理对发芽糙米中淀粉酶活力影响的研究

研究了Ca2 +/GA3处理对发芽糙米中淀粉酶活力的影响。结果表明 ,在 (16± 1℃ )发芽温度下 ,0～ 15mmol/LCa2 +浓度范围内 ,以 0 .5mmol/L处理的发芽糙米中淀粉酶活力最高 ,超过 5 .0mmol/L则产生抑制作用 ;Ca2 +配合GA3的处理中以 0 .5mmol/LCa2 ++ 0 .0 2mg/LGA3的处理对提高淀粉酶活力、淀粉降解速度和还原糖生成速度的效果为最好。糙米中还原糖含量的变化与淀粉酶活力变化趋势是一致的。     

多糖和添加剂对菠萝茎蛋白酶活力的影响

以相对酶活力及热失活动力学为指标,研究不同类型的添加剂对菠萝茎蛋白酶活力的影响,并探讨作用机理,以提供菠萝茎蛋白酶存放和应用过程中的有效保护方法。结果表明：葡萄糖、海藻糖和可溶性淀粉对菠萝茎蛋白酶热稳定作用由高到低分别为：海藻糖＞葡萄糖＞可溶性淀粉;金属离子螯合剂(EDTA-2Na、多聚磷酸钠)、防腐剂(苯甲酸钠)和还原剂(焦亚硫酸钠、β-巯基乙醇)对菠萝茎蛋白酶活力保护机理不同,但适量使用都能使其酶活力得到提高,其中还原剂的激活效果最好;焦亚硫酸钠在质量分数为0.05%时,能显著提高菠萝茎蛋白酶活力,相对酶活力达3.68,且在存放3d后酶活力才降至原酶液水平。     

pH和钙离子促进采摘后蕨菜中类黄酮积累的初步研究

初步研究了pH和Ca2+对采摘后蕨菜中类黄酮积累的影响。结果表明,pH 5.0~8.0的柠檬酸-磷酸缓冲液或50~200μmol/L的CaCl2溶液浸泡处理能显著促进采摘后蕨菜细胞中类黄酮的合成和积累,而且效果与处理时间密切相关。采用pH 6.6的缓冲液泡处理4 h或150μmol/L的Ca2+溶液处理3 h效果最佳,可使蕨菜总黄酮的含量分别比对照增加287.8%和325.3%,然而pH和Ca2+2种因素共处理时没有明显的累加效应。实验结果显示,采摘后的新鲜植物组织在一定条件下对环境信号刺激仍然具有响应能力,通过生物技术处理能够促进采摘后植物细胞的次生代谢,从而提高天然活性物质的产量,这为植物性食品的深加工提供了新思路。