嗜热蓝藻层理鞭枝藻（Mastigocladus laminosus）藻胆体在解离过程中荧光发射光谱和光能传递的研究

研究了层理鞭枝藻胆体在不同浓度磷酸冲溶液中解离过程中荧光发射光谱的变化和光能传递,完整藻胆体的７７Ｋ荧光光谱中只有一个峰,位于６８５ｎｍ,它是末端发射体（核心－膜连接多肽和别蓝蛋白－Ｂ）的荧光峰,部分解离藻胆体的荧光光谱的主峰位移至６５２ｎｍ,次峰位于６８５ｎｍ;６６０ｎｍ为一弱荧光发射肩,它们依次为Ｃ－藻蓝蛋白,末端发射体和别藻蓝蛋白的荧光。严重解离藻胆体的荧光主峰移至６４４ｎｍ;次峰由６８５ｎ     

螺旋藻（Spirulina platensis）藻胆体在解离过程中荧光发射光谱和光能传递的研究

对螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓ）藻胆体在室温和７７Ｋ处于不同浓度磷缓冲溶液和不同解离时间的荧光发射光谱进行了研究。藻胆体在０．９ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲溶液中,由于没有发生解离,光能传递效率高,在７７Ｋ荧光发射光谱中只有一个峰,位于６８７ｎｍ,属于别藻蓝蛋白－Ｂ。当藻胆体悬浮在０．３ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲溶液中１分钟,７７Ｋ荧光光谱的主峰出现在６８４ｎｍ．又出现６５５ｎｍ和６６６ｎｍ荧光峰,它们依次属子Ｃ－藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。在２小时;６５５ｎｍ荧先峰成为主峰,６８４ｎｍ荧光峰为次峰,６６６ｎｍ荧光肩消失。这表明Ｃ－藻蓝蛋白所捕获的先能已不能传递给别藻蓝蛋白,但能传给别藻蓝蛋白－Ｂ。我们提出在螺旋藻藻胆体中存在两类Ｃ－藻蓝蛋白,一是与别藻蓝蛋白相连接,另一是与别藻蓝蛋白－Ｂ相连接。     

螺旋藻（Spirulina platensis）藻胆体在解离过程中荧光发射光谱和光能传递的研究

对螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓ）藻胆体在室温和７７Ｋ处于不同浓度磷缓冲溶液和不同解离时间的荧光发射光谱进行了研究。藻胆体在０．９ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲溶液中,由于没有发生解离,光能传递效率高,在７７Ｋ荧光发射光谱中只有一个峰,位于６８７ｎｍ,属于别藻蓝蛋白－Ｂ。当藻胆体悬浮在０．３ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲溶液中１分钟,７７Ｋ荧光光谱的主峰出现在６８４ｎｍ．又出现６５５ｎｍ和６６６ｎｍ荧光峰,它们依次属子Ｃ－藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。在２小时;６５５ｎｍ荧先峰成为主峰,６８４ｎｍ荧光峰为次峰,６６６ｎｍ荧光肩消失。这表明Ｃ－藻蓝蛋白所捕获的先能已不能传递给别藻蓝蛋白,但能传给别藻蓝蛋白－Ｂ。我们提出在螺旋藻藻胆体中存在两类Ｃ－藻蓝蛋白,一是与别藻蓝蛋白相连接,另一是与别藻蓝蛋白－Ｂ相连接。     

优化培养基增加层理鞭枝藻藻胆蛋白产量

藻胆蛋白(phycobiliprotein)是蓝藻和红藻藻胆体的组成部分,是光合作用集光复合体的组成部分,一般由α和β亚基构成,每个亚基含1～4个辅基色素,从而使藻胆蛋白具有特定的光谱吸收性质。根据这些吸收光谱性质,可以将藻胆蛋白分为:别藻蓝蛋白(APC)、藻蓝蛋白(PC)和藻红蛋白(PE)等,在某些缺乏PE而有异形胞的蓝藻中存在充当PE天线捕光功能的藻红蓝蛋白(PEC)〔1〕。藻胆蛋白可用于天然食用色素、化妆品色素和制药行业,还可作为免疫检测、荧光显微技术和流式细胞荧光测定法技术方面的荧光探针。特别是本工作研究的层理鞭枝藻(简称M.laminosu…     

多变鱼腥藻(Anabaena variabilis)藻胆体——类囊体膜光能传递的研究

多变鱼腥藻(Anabaena variabilis)藻胆体一类囊体膜的吸收峰位于678,624,490,438和418nm.当用580nm波长光激发藻胆体一类囊体膜中藻胆蛋白时,室温荧光峰位于662nm,在680nm附近有一肩;液氮温度荧光峰位于655,666,695和730nm.这说明藻胆蛋白捕获的光能能有效地传给叶绿素a.当用436nm波长光激发藻胆体一类囊性膜中叶绿素a时,室温荧光峰(?)于683nm;液氮温室荧光峰在730nm,另一小峰在695nm.表明叶绿素a捕获的光能不能传递给藻胆蛋白.藻胆体一类囊体膜放氧速率为245μmoleO_2/小时,毫克叶绿素,电境照片显示在类囊体膜上有大量藻胆体.用0.3M蔗糖,O.05M磷酸缓冲溶液洗藻胆体一类囊体膜,能使藻胆体与类囊体膜分开.对藻胆体与类囊体之间的光能传递进行了讨论.     

多变鱼腥藻藻胆体的分离和荧光鉴定其完整性与解离程度

完整藻胆体的室温荧光峰位于678nm附近,而不完整藻胆体其峰位于673nm以下。在液氮温度下,完整藻胆体的F686与F666相对荧光强度比值超过10,F686与F655之比值超过20。不完整藻胆体的F686与F666和F686与F655之比值远低于完整藻胆体。可用室温荧光峰的波长位置和液氮温度下F686与F655和F666的相对荧光强度比值来判断藻胆体的完整性和解离程度。而液氮温度下F686与F655,F666之比值是更灵敏的指标。     

蓝藻藻胆体与类囊体膜之间光能传递的研究

从嗜热蓝藻优雅粘囊藻（Ｍｙｘｏｓａｒｃｉｎａ ｃｏｎｃｉｎｎａ Ｐｒｉｎｔｚ．）中分离到具有放氧活性的藻胆体－类囊体膜复合物。它的吸收峰位于６８０、６２８、４９０、４３８和４２０ ｎｍ ,在低离子强度（０．１～０．４ ｍ ｏｌ／Ｌ）磷酸缓冲液中的６６４ ｎｍ 荧光发射峰随离子强度的降低而升高,７１８ ｎｍ 荧光发射峰与此相反（７７ 。Ｋ,Ｅｘ＝ ５８０ ｎｍ ）。当把游离的藻胆体和已解离去藻胆体的类囊体膜在蔗糖磷酸缓冲液中重组时,随时间延长（０～６０ ｍ ｉｎ）,７１８ ｎｍ 荧光发射峰逐渐升高,６８５ ｎｍ 荧光发射峰逐渐下降（７７ 。Ｋ,Ｅｘ ＝ ５８０ ｎｍ ）,表明藻胆体与类囊体之间的解离和结合对光能传递的影响     

嗜热蓝藻优雅粘囊藻藻胆体的特性和别藻蓝蛋白的亚基组成

研究了优雅粘囊藻藻胆体的特性。从聚丙烯酰胺凝胶电泳、吸收光谱和二阶导数图谱可证明,它的ＰＢＳ含有一种红色藻胆蛋,两种Ｃ－藻蓝蛋白和三种别藻蓝蛋白。但是,用ＰＡＧＥ和羟基磷灰石柱层析分离和纯化所得藻胆蛋白,一般仅得到一种Ｃ－ＰＣ和一种亚基组成特殊的别藻蓝蛋白ＡＰＣ。这种ＡＰＣ吸收光谱和荧光发射相同于已报告的ＡＰＣ６６０ｎｍ。但是它的亚基组成是（αα＇ββ＇）２而不是（α＇α２β２β＇）Ｌｃ＾１０或α     

藻红蓝蛋白裂合异构酶E基因突变体的构建、表达与酶活性检测

通过诱变分别得到PecE的N端,C端和中间位置缺失突变的一系列突变基因的编码产物,测定了这5种缺失蛋白质的酶活性的大小。实验结果显示：来自层理鞭枝藻(M．laminosus,UTEX 1931)的PecE[简称PecE(UTEX 1931)]与来自层理鞭枝藻(M．laminosus,．PCC 7603)的PecE[简称：PecE(PCC 7603)]有81％的同源性。PecE(UTEX1931)／PeeF(PCC 7603)的酶催化活性与PecE(PCC 7603)／PecE(PCC 7603)的酶催化活性相当。PecE(UTEX 1931)的N端缺失22个氨基酸的蛋白质显示出了约20％的催化活性;而N端缺失36个氨基酸、56个氨基酸的蛋白质,C端缺失23个氨基酸的蛋白质和PecE(PCC 7603)中间缺失27个氨基酸的蛋白质均丧失活性,结果对酶的结构以及对酶活性的影响提供了重要信息。     

荧光能量转移和偏振研究小牛胸腺DNA与组蛋白在高低离子盐溶液中的离合

本文研究小牛胸腺DNA和组蛋白在体外低、高离子强度盐溶液中的动态缔合与解离。 实验结果是低离子溶液中荧光给体DANsyl-Cl-组蛋白在发射峰位上荧光强度降低,荧光受体吖啶橙-DNA在发射峰位上的荧光强度增高。此两峰位上荧光受体的荧光增量比值是2.7/1(大于1),有能量转移发生,DNA和组蛋白缔合。高离子溶液中两峰位上受体的荧光增量比值降到1.6/1,能量转移减少,DNA和组蛋白解离。 低离子溶液中所得的吖啶橙-DNA的荧光偏振度P值小而高离子溶液中的P值大。说明解离的DNA硷基排列比缔合的DNA硷基排列有序程度强,进一步证明低离子溶液中DNA和组蛋白是缔合的,而高离子溶液中它们是解离的。     

DEPRESSION OF MASTIGOCLADUS LAMINOSUS (CYANOPHYTA) NITROGENASE ACTIVITY UNDER NORMAL SUNLIGHT INTENSITIES1

The effect of light intensity (PAR) on the nitrogenase activity of Mastigocladus laminosus Cohn was studied by the acetylene reduction technique. Benthic mat from a thermal stream, Hot River, in Yellowstone National Park was used in both experimental and in situ incubations. This hot spring maintained a mean pH of 7.0, was essentially isothermal (ca. 50°C), and had virtually no upstream to downstream physicochemical gradients (P > 0.05). Two surveys of the stream showed that nitrogenase of the M. laminosus mat was significantly more active (P > 0.02) under low light intensities than under high intensities, 252 and 712 μE · m^?2· s^?1, respectively. Maximum activity of Hot River Mastigocladus (268 nmol C₂H₄· mg Chl a^?1· h^?1) occurred at 50% full midday light intensities; the rates at low light (mean = 247 nmol C₂H₄· mg Chl a^?1· h^?1) were significantly (P > 0.001) greater than those at high light (mean = 106). The results indicate that M. laminosus nitrogenase activity is low light adapted and suggest that the temporal pattern for nitrogen fixation might be significantly different from that of thermophilic Calothrix.     

多管藻中R-藻蓝蛋白能量传递途径及动力学

以蛋白亚基复性技术和皮秒级时间分辨荧光光谱,研究海洋红藻多管藻中R－藻蓝蛋白（R－PC）单体和三聚体内能量传递过程。利用亚基复性技术对分离后的β亚基复性,以R－藻蓝蛋白单体和β亚基之间的差谱获得α亚基的吸收光谱。皮秒级时间分辨三维谱图（时间、波长和强度）直观地显示出藻红胆素发色团向藻蓝胆素发色团的能量传递;根据时间分辨测量结果的组份解析,对R藻蓝蛋白单体和三聚体内能量传递途径和相关传递参数进行了指认和讨论;对观察到的单体与三聚体能量传递组份特性的差别提出了解释。与C－藻蓝蛋白光谱对比,R－藻蓝蛋白独特的色团组成使其更有效地捕获与传递光能。     

PHYCOBILIPROTEIN COMPONENTS AND CHARACTERISTICS OF THE PHYCOBILISOME FROM A THERMOPHILIC CYANOBACTERIUM MYXOSARCINA CONCINNA1

A phycocyanin (PC) and three allophycocyanin (AP) components (designated PC, AP1, AP2, and AP3) were prepared from Myxosarcina concinna Printz phycobilisomes by the native gradient PAGE performed in a neutral buffer system combined with the ion exchange column chromatography on DEAE‐DE52 cellulose. PC contained one β subunit () and two α ones ( and ), and it carried two rod linkers ( and ) and one rod‐core linker (). AP1 and AP3 were characterized as peripheral core APs, whereas AP2 was an inner‐core one. AP2 and AP3 were demonstrated to function as the terminal emitters. Each of the three APs contained two β subunits ( and ), two α subunits ( and ) and an inner‐core linker (). AP2 and AP3 had another subunit of the allophycocyanin B (AP‐B) type () belonging to the β subunit group, and AP1 and AP3 carried their individual specific core linkers ( and ), respectively. No AP component was shown to associate with the core‐membrane linker L_CM. The functions of the linker polypeptides in the phycobilisome (PBS) construction are discussed.     

SYNTHESIS OF NOVEL PIPERIDINYL LINKER BASED ENERGY TRANSFER TERMINATORS AND THEIR POTENTIAL USE IN DNA SEQUENCING

Synthesis of novel piperidinyl linker based ET cassettes and terminators is described. These novel terminators are evaluated in the DNA sequencing experiments using thermostable DNA polymerase.     

镉诱导蚯蚓金属硫蛋白的分离纯化及其溶液构象的研究

镉诱导蚯蚓匀浆液经热沉淀,乙醇沉淀后,经凝胶过滤ＳｅｐｈａｃｒｙＳ－２００柱层析,得三个镉结合蛋白峰,分子量依次为４０,１７及９ｋＤ。这三个组份再分别经ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ柱层析,分别得三、三、二个镉结合蛋白峰。根据光谱学特征、巯基含量及氨基酸组成等分析,认为凝胶过滤第二峰为金属硫蛋白（ＭＴ）,其经ＤＥＡＥ柱层析所得三个峰为ＭＴ三个亚型。对蚯蚓ＭＴ三个亚型在不同ＰＨ条件下