IER5和Ku70在子宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨IER5和Ku70在子宫颈癌中的表达及临床意义。方法前瞻性选取2010年5月至2016年5月济南市第二妇幼保健院收治的首次接受同步放化疗的子宫颈癌患者120例为研究对象。采集患者的子宫颈癌组织,根据不同病理特点、不同放射剂量(0 Gy、10 Gy、20 Gy、30 Gy)、放射敏感与抵抗的患者IER5和Ku70表达情况。采用蛋白质印迹法及实时荧光定量PCR技术检测IER5和Ku70蛋白的表达;采用相关图像分析软件定量分析IER5和Ku70蛋白在子宫颈癌组织中的相对表达量。结果鳞癌中IER5蛋白、Ku70蛋白的表达量最高,明显高于腺癌和鳞腺癌;ⅢA～ⅢBIER5蛋白、Ku70蛋白表达量显著高于ⅡB;肉眼肿瘤直径 4 cm者显著高于≤4 cm者;低分化者显著高于中分化者,差异均有显著性(P 0. 05);对于不同放射剂量治疗的子宫颈癌,两种蛋白的表达量最高的是30 Gy(P 0. 05);放射敏感组IER5和Ku70的mRNA表达显著高于放射抵抗组(P 0. 05)。结论在子宫颈癌的治疗过程中,使用放射治疗可提高IER5和Ku70在子宫颈癌中的表达量,随着放射量的增加,IER5和Ku70在子宫颈癌中的表达量相应升高。此外,IER5和Ku70表达水平还与子宫颈癌的病理类型、临床分期和肿瘤直径有关,这对于临床子宫颈癌的诊断、预后评估和临床治疗指导具有重要意义。     

直肠癌Ku80蛋白的表达及其放射敏感性的临床研究

目的：探讨直肠癌中Ku80蛋白的表达及其放射敏感性的关系。材料与方法：选取手术切除60例直肠癌标本为研究对象，应用免疫组化方法检测各研究对象放疗前后肿瘤组织的Ku80蛋白表达。结果：根据Ku80蛋白表达在各病例中所占百分比平均数的分布情况，以中位数为界分为高、低表达两类。各病理反应与Ku80表达差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：Ku80蛋白表达可能成为预测直肠癌术前放射治疗效果的指标。     

Ku80表达抑制联合热疗对前列腺癌细胞放射敏感性影响的研究

目的探讨抑制PC3细胞中Ku80表达水平并结合热疗对前列腺癌细胞的辐射敏感性的影响。方法构建调节Ku80表达的siRNA载体,筛选转染后的PC3-Ku80（Ku80组）、PC3-p-actin（Vector组）、PC3-Ku80-siRNA（RNAi组）、PC3-pactin-siRNA（Scramble组）等4种稳定细胞株。在不同的条件下分别用7射线照射后行AnnexinV-FIC双染色及DAPI、TUNNEL染色检测细胞周期与凋亡情况,另取一组PC3一Ku80一siRNA细胞经42℃水浴30min,转37℃细胞培养12h再行射线照射,通过细胞周期与凋亡检测等了解不同组问放射效果的差异。结果Westernblot和RT-PCR分析表明转染后可明显调节PC3细胞中Ku80的表达,稳定转染的对数生长期细胞经7射线照射,细胞周期与凋亡检测结果显示随着Ku80表达的降低,细胞对放射治疗更趋敏感,5组细胞随7射线照射剂量的增加,细胞存活率下降,其中RNAi组的细胞存活率均低于对照组和Ku8q组,5组比较差异有统计学意义（F-0．953,P％0．001）。PC3-Ku80-siRNA细胞经热休克处理后再行射线照射,其存活率明显低于未经热休克处理的细胞株。结论抑制前列腺癌细胞中Ku80蛋白表达水平,结合热休克,可明显提高肿瘤组织对放射治疗的敏感性,这可能是一个较为理想的综合治疗前列腺癌的方法。     

人原发性肝细胞癌中热休克蛋白70mRNA的表达

目的 检测热休克蛋白70mRNA在人原发性肝癌中的表达情况,探讨热休克蛋白70在原发性肝癌演变过程中的意义。方法 采用原位杂交技术,用地高辛标记的热休克蛋白70cDNA探针检测41例人原发性肝癌组织及20例肝硬变组织。结果 原位杂交结果显示41例原发性肝癌组织中21例热休克蛋白70mRNA阳性（51．2％）,20例肝硬变组织有11例阳性（55．0％）,两组之间无显著差异（P＞0．05）。结论 热休克蛋白70mRNA在人原发性肝癌组织中及肝硬变组织中有较高水平的表达,提示热休克蛋白70参与了原发性肝癌的发生及发展过程,对其生物学特性作进一步研究,可能为肝癌发病机制提供一定的理论依据。     

X线照射对外周血淋巴细胞Ku70表达与染色体易位的影响

目的分析X线照射引起的染色体易位与DNA双链断裂修复蛋白Ku70表达的关系。方法收集12例健康人外周血标本进行X线照射(0.5 Gy、1 Gy和2 Gy剂量),并进行淋巴细胞分离培养。用荧光原位杂交(FISH)检测其染色体易位率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和western blot分别检测Ku70 mRNA和蛋白质的表达水平。分析X线照射剂量对染色体易位率和Ku70表达水平影响,以及染色体易位率与Ku70表达水平的相关性。结果 FISH检测结果表明,淋巴细胞经1 Gy和2 Gy剂量X线照射后,染色体易位率均高于对照组(P均0.05);Ku70 mRNA表达量随照射剂量增加而增加(P0.05);并且染色体易位率与Ku70在mRNA和蛋白质水平的表达存在弱相关(r分别为0.473、0.386,P均0.05)。结论染色体易位率和Ku70的表达都与X线照射剂量关系密切,且染色体易位率与Ku70表达间也存在相关性。     

Hedgehog信号通路效应蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨Hedgehog（Hh）信号通路中效应蛋白在人前列腺癌、癌旁正常前列腺组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测51例前列腺癌和癌旁正常前列腺组织中Shh、Ptchl和Glil的表达。结果Shh、Ptchl和Glil在前列腺癌组织中均为高表达,Shh与Ptchl的表达呈正相关。结论在前列腺癌Hh信号通路中Shh、Ptchl和Glil呈现高度表达状态,Glil更能准确地反映前列腺癌细胞的增殖水平和分化程度。     

p73蛋白在前列腺癌中的表达及意义

目的：探讨p73在前列腺癌中表达的意义。方法：以免疫组化法检测67例前列腺癌及12正常前列腺组织p73和p53的表达。结果：12例正常前列腺组织均无阳性表达，前列腺癌组织中p73表达的阳性率为40．3％（27／67），27例p73阳性表达的前列腺癌组织中均有p53蛋白过度表达，p73阳性表达率与前列腺癌组织病理分级、临床分期及患者5年生存明显 相关（P＜0．01）。结论：p73在前列腺癌的发生及癌细胞分化过程中起重要作用，对前列腺癌的预后有参考意义。     

DNA依赖蛋白激酶在肝胆肿瘤组织中的表达

目的 本研究旨在通过检测不同类型肝胆肿瘤组织中DNA-PKcs和Ku70的表达水平，探讨其与肿瘤恶性程度和浸润性的关系。方法 通过免疫组化SP法检测36例肝胆肿瘤组织和部分癌旁组织中DNA-PKcs和Ku70蛋白的表达状况。结果 Ku70普遍表达于所检测的肿瘤组织中，其中腺癌和部分腺瘤表达最高，但与肿瘤的恶性程度和转移特性漫有明显的关系。而DNA-PKcs表达在不同类型肿瘤间存在明显的差异，肝细胞癌表达最高，胆管或胆囊腺癌次之，乳头状腺瘤或胆管腺瘤不表达或微弱表达，但伴有非典型增生或浸润转移时，DNA-PKcs表达明显上升。癌旁组织不表达DNA-PKcs。结论 DNA-PKcs表达水平与肿瘤类型、恶性程度和转移或浸润特性有相关性，有可能成为肝胆肿瘤组织区别于正常组织的一个新的生物标记物。     

RNA干扰Ku70基因对宫颈癌Hela细胞放射敏感性影响的实验研究

目的观察ku70基因短干扰RNA(siRNA)对宫颈癌Hela细胞放射敏感性的影响。方法采用集落形成技术测定不同剂量射线照射对Hela细胞存活率的影响,观察Hela细胞对射线照射的敏感性。采用时定量PCR技术(quantitiv real time PCR,QRT-PCR)检测Ku70 mRNA水平表达。采用Western Blot免疫印记技术检测Ku70蛋白表达。采用RNA干扰(RNAi)技术抑制Hela细胞中Ku70蛋白的表达,观察Ku70蛋白表达下调对Hela细胞放射敏感性的影响。采用集落形成技术测定4.0 Gy射线照射对Hela细胞存活率的影响。进而分析Hela细胞对射线的放射敏感性。结果宫颈癌Hela细胞对1.0-4.0 Gy射线照射不够敏感,有相当高的辐射抗性。量效实验证实,1.0-6.0 Gy射线照射后,HeLa细胞中Ku70 mRNA及Ku70蛋白表达均明显增高。时效实验证实,4.0 Gy射线照射后8 h-72 h,HeLa细胞中Ku70 mRNA及Ku70蛋白表达均明显增高。本实验成功的构建了Ku70基因RNA干扰载体pSilencer-4.1-Ku70,稳定转染HeLa细胞后,有效抑制Ku70蛋白的表达。稳定转染pSilencer-4.1-Ku70干扰质粒并抑制Ku70蛋白表达后,HeLa细胞对射线照射的放射敏感性显著增高(P0.001)。结论 Ku70 siRNA有效下调Ku70 mRNA水平,抑制Ku70蛋白的表达,可明显提高Hela细胞对辐射的敏感程度。本研究结果还提示,Ku70基因可作为衡量宫颈腺癌辐射敏感性指标,为临床合理筛选患者进行放疗、预测放疗疗效提供一条适用途径。     

Bcl-2和Bax在前列腺癌中表达与前列腺癌分期、分级和预后的关系

目的：研究Bcl-2和Bax蛋白在前列腺癌中的表达及其与前列腺癌的关系。方法：选取大连医科大学附属第一医院1998-01／2003-12未经治疗的前列腺癌组织标本45例，前列腺增生组织标本10例。应用免疫组化Elivision法，检测45例前列腺癌和10例前列腺增生组织标本中Bcl-2及Bax的表达，并探讨Bcl-2及Bax的表达与前列腺癌分期、分级、术前PSA、内分泌治疗效果及预后的关系。结果：①Bcl-2表达在前列腺癌和前列腺增生中阳性表达率分别为37．8％和10%，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；在不同分期．不同Gleason评分，不同PSA，不同内分泌治疗反应效果的前列腺癌中Bcl-2阳性表达率和阳性表达程度差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。②Bax表达在前列腺癌和前列腺增生中Bax阳性表达率分别为88．9％和50%，前列腺癌的Bax表达高(P&;lt;0．05)；在不同分期的前列腺癌中阳性表达率为100%和87．5％，阳性表达率差异无显著性意义(P&;gt;0．05)，强阳性表达率为100%和68．75％，D期前列腺癌Bax阳性表达程度显著增强(P&;lt;0．05)；在不同分级的前列腺癌阳性表达率为100％和85．7％，分化差的前列腺癌Bax表达显著增强(P&;lt;0．05）；不同PSA，不同内分泌治疗效果的前列腺癌中Bax阳性表达率和阳性表达程度差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；LogRank检验分析Bcl-2和Bax表达不同的前列腺癌生存时间差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：Bcl-2在前列腺癌和前列腺增生中表达无差异，并且与前列腺癌分级、分期、PSA、生存时间和内分泌治疗效果无关；Bax在前列腺癌和前列腺增生中表达明显增加，虽阳性表达率与前列腺癌分级、分期、PSA、生存时间和内分泌治疗效果无相关性，但阳性表达程度与前列腺癌分级、分期有关，对判定前列腺癌预后有参考价值。     

前列腺癌组织中E-钙粘蛋白和环氧化酶2表达的研究

目的探讨E-钙粘蛋白、环氧化酶2因子与前列腺癌病理分级及临床分期的关系。方法采用免疫组织化学SABC方法检测32例前列腺癌患者和24例良性前列腺增生标本中E-钙粘蛋白、环氧化酶2的表达。结果两组标本中E-钙粘蛋白在前列腺癌标本中的阳性表达率21.88％,在良性前列腺增生标本中的阳性表达率91.67％;而环氧化酶2在前列腺癌标本中的阳性表达率90.63％,在前列腺增生标本的阳性表达率37.50％。E-钙粘蛋白在高分化前列腺癌中的表达高于低分化前列腺癌;在A期和B期前列腺癌中的表达高于C期和D期的前列腺癌。环氧化酶2在低分化前列腺癌中的表达高于高分化前列腺癌;而在C期和D期的前列腺癌中的表达高于A期和B期前列腺癌。结论E-钙粘蛋白在前列腺癌标本中的表达明显低于前列腺增生标本,环氧化酶2的表达与此相反;两者在前列腺癌的表达与前列腺癌的病理分级及临床分期有关。     

The diagnostic value of urine heat shock protein 70 and prostatic exosomal protein in chronic prostatitis

ObjectiveTo explore the diagnostic value of the levels of prostatic exosomal protein (PSEP) and heat shock protein 70 (HSP70) in the urine of patients with chronic prostatitis (CP).MethodUrine samples from 210 CP patients (70 cases of the USA National Institutes of Health Category II [NIH‐II], 70 NIH‐IIIa, and 70 NIH‐IIIb patients) and 70 control subjects were collected between May 2018 and February 2020. The levels of PSEP and HSP70 in urine were detected by enzyme‐linked immunosorbent assay. The differences in urine PSEP and HSP70 levels between the groups were analyzed, and receiver operating characteristic (ROC) curves were used to analyze the clinical value of PSEP and HSP70 in the diagnosis of CP.ResultsThe PSEP levels of CP patients were significantly higher than those of the control group (p < 0.001), but there was no difference in PSEP levels among CP subgroups. The level of HSP70 in the urine of the NIH‐II patients was significantly lower than the levels in the NIH‐IIIa and NIH‐IIIb subgroups and the control group, but there was no difference in HSP70 levels between the NIH‐IIIa and NIH‐IIIb subgroups and the control group. ROC curve analysis results showed that the area under the curve (AUC) of PSEP for the NIH‐II, NIH‐IIIa, and NIH‐IIIb patients was 0.751, 0.776, and 0.731, respectively. The AUC of HSP70 in NIH‐II patients was 0.784, and the AUC of combined detection of PSEP and HSP70 in NIH‐II patients was 0.858.ConclusionUrine PSEP can be used as a marker for the diagnosis of CP, but it cannot distinguish between the various types of CP, and HSP70 can be used as a diagnostic index for NIH‐II classification.     

血清胸苷激酶的检测以及其在前列腺癌早期筛查中的意义

目的前列腺癌是一种老年男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤,近年其发病率呈上升趋势,已高居泌尿生殖系统肿瘤的前3位,且发病年龄也日趋年轻化。长期以来,人们对前列腺癌的检测手段一直停留在直肠指诊、PSA筛查和穿刺活检上。能否早期诊断、早期治疗前列腺癌在临床上就显得尤为重要。本研究旨在探讨通过检测血清胸苷激酶1（TK）在早期诊断前列腺癌中的可行性和有效性。方法采用免疫印迹-增强化学发光检测法,检测在本院就诊的150例男性患者血清胸苷激酶1水平,其中70例为前列腺癌患者（年龄29～80岁）,40例为前列腺增生患者（年龄50～92岁）,另40例为来本院作健康体检的健康男性（年龄35～50岁）。结果1）前列腺癌组：70例经过病理活检确诊的前列腺癌患者,STK1值（3．66&#177;1．91）pM／L,灵敏度71．5％。2）前列腺增生组：40例同期治疗的病理检查确诊的前列腺增生患者（1．28&#177;0．35）pM／L,特异度85％。3）健康对照组：40例健康人检查结果均无泌尿系统疾病,STK1值（0．79&#177;0．27）pM／L,无一例异常结果。经血清胸苷激酶1检测发现,前列腺癌组与健康男性组间TK1水平差异有统计学意义（P〈0．05）。前列腺癌组与前列腺增生组血清胸苷激酶1水平差异有统计学意义（P〈0．05）。血清胸苷激酶1对前列腺肿瘤TMN分期,T135例,T219例,L10例,T46例的灵敏度分别为：62．85％（22／35）、73．68％（14／19）、80．00％（8／10）、100．00％（6／6）。结论使用血清胸苷激酶检测前列腺癌中有显著的特异性,可作为前列腺癌的早期筛查方法。     

人前列腺癌靶向超声造影剂对荷瘤裸鼠靶向显像的研究

目的：探讨携前列腺特异性膜抗原（PSMA）抗体和携血管内皮生长因子（VEGF）抗体的靶向超声造影剂对荷人前列腺癌裸鼠的特异增强显像效果。方法：人前列腺癌细胞株LNCaP体外无菌条件下培养传代，BALB／c-nu雄性裸鼠皮下接种，建立荷人前列腺癌裸鼠动物模型。分别经荷瘤裸鼠尾静脉推注普通造影剂和携PSMA抗体及携VEGF抗体的靶向造影剂12min后采用能量多普勒成像，测量并计算肿瘤截面内血流信号所占的面积比，并分析比较普通造影剂和靶向造影剂对前列腺癌组织能量多普勒信号的增强效果。结果：成功建立了荷人前列腺癌裸鼠动物模型，推注携带VEGF抗体的靶向造影剂超声造影后行能量多普勒显像，可见前列腺癌组织能量多普勒信号显著增强，与普通造影剂和携带PSMA抗体的靶向造影剂相比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：VEGF抗体介导的靶向超声造影剂在体内可以有效特异性地与前列腺肿瘤新生血管内皮细胞结合，可作为诊断前列腺癌的靶向造影剂。能量多普勒延迟显像能有效显示靶向造影后肿瘤组织内的能量多普勒增强信号。     

PRL-3基因在前列腺癌组织中的表达及其意义

目的研究前列腺癌、前列腺增生组织中PRL-3（phosphataseofregeneratingliver-3,PRL-3）基因的表达,探讨其与患者临床病理特征的关系。方法分别采用免疫组织化学S—P法和实时荧光定量PCR检测54例前列腺穿刺／手术切除标本中的PRL-3蛋白和mRNA,其中前列腺增生组织20例,前列腺癌组织34例,比较两者间基因表达的差异;研究PRL．3蛋白和mRNA表达水平与前列腺癌患者年龄、Gleason评分、神经侵犯等临床病理特征的关系和相关性。结果PRL-3蛋白和mRNA在前列腺癌及前列腺增生组织中均可检出,癌组织中的PRL-3蛋白和mRNA表达水平显著高于增生组织（P=0．001;P=0．001）。PRL-3蛋白和mRNA表达水平均与前列腺癌患者年龄无关。PRL-3蛋白与前列腺癌神经侵犯和Gleason评分无关（P=0．376;P=0．360）。PRL．3mRNA与Gleason评分密切相关（P=0．001）;PRL-3 mRNA与神经侵犯也存在相关P=0．001。结论PRL-3基因的表达与前列腺癌发生发展机制关系较密切,可作为前列腺癌鉴别诊断及判断预后的一种较有价值的病理学指标。     

常规MRI联合PWI对前列腺癌的诊断价值研究

目的探讨良性前列腺增生（benign prostatichy perplasia,BPH）及前列腺癌（prostate carcinoma,PCa）磁共振成像（MRI）和磁共振灌注加权成像（PWI）表现以及灌注值,评价两者对BPH和PCa的诊断及鉴别诊断价值。方法对临床诊断为前列腺疾病的76例患者行常规MRI及PWI扫描,分析BPH及PCa的常规MRI表现及所获得时间-信号曲线（TIC）,计算最大灌注斜率（SSmax）。结果 35例PCa及41例BPH的TIC均有明显的上升支,较之BPH组,PCa组TIC上升支较陡峭,峰值高,达峰时间短;PCa组的SSmax高于BPH组（P〈0.05）。结论 MRI与PWI联合应用有助于PCa的诊断与鉴别诊断。     

VIP与MMP-9在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinnases,MMP-9）在前列腺癌组织中的表达及其与前列腺癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化法检测VIP与MMP-9在前列腺增生组织、前列腺癌组织中的表达,并对两者的相关性进行分析。结果前列腺癌组织中VIP、MMP-9的表达阳性率显著高于前列腺增生组织（χ2=8.255,P=0.004;χ2=7.417,P=0.006）。前列腺癌组织中VIP、MMP-9在不同病理学分级及临床分期之间的表达阳性率差异有统计学意义（χ2=6.957,χ2=6.618;χ2=7.210,χ2=6.454;P均〈0.05）,且同病理学分级及临床分期相关（r=0.390,r=0.368;r=0.400,r=0.377;P均〈0.05）。前列腺癌组织中VIP表达与MMP-9表达具有相关性（χ2=4.066,P=0.044,r=0.323）。结论 VIP、MMP-9参与了前列腺癌的发生、发展,二者在前列腺癌的浸润和转移的过程中起重要作用,二者可能有协同作用。