B（α）P诱导的V79细胞HGPRT位点突变的检测

在加与不加Ｓ９两种情况下，用Ｖ７９中国仓鼠细胞检测了Ｂ（α）Ｐ诱导的ＨＧＰＲＴ突变频率和细胞毒性。结果表明，无论加与不加Ｓ９混合液，Ｂ（α）Ｐ对Ｖ７９细胞都具有明显毒作用，但在不加Ｓ９时，不会导致６—巯基鸟嘌呤抗性细胞发生率的明显增加．在存在Ｓ９混合液时，Ｂ（α）Ｐ诱导的ＨＧＰＲＴ突变频率随Ｂ（α）Ｐ浓度的加大而明显增加。剂量在０．５—８μｇ／ｍｌ范围时，每１μｇ／ｍｌＢ（α）Ｐ诱发的Ｖ７９细胞ＨＧＰＲＴ位点突变频率为７—２４／１０６细胞。     

B（a）P诱导的V79细胞HGPRT位点突变的检测

在加与不加Ｓ９两种情况下，用Ｖ７９中国仓鼠细胞检测了Ｂ（ａ）Ｐ诱ＨＧＰＲＴ突变频率和细胞毒性。结果表明，无论加与不加Ｓ９混合液，Ｂ（ａ）Ｐ对Ｖ７９细胞都具有明显毒作用，但在不加Ｓ９时，不会导致６－巯基嘌呤抗生细胞发生率的明显增加。在存在Ｓ９混合液时，Ｂ（ａ）Ｐ诱导的ＨＧＰＲＴ突变频率随Ｂ（ａ）Ｐ浓度的加大而明显增加。剂量在０．５－８μｇ／ｍｌ范围时，每１μｇ／ｍｌＢ（ａ）Ｐ诱发的Ｖ７９细胞ＨＧＰＲ     

Ames试验与HPRT试验两种方法对6种氧化型染发剂的检测

目的：通过细菌回复突变试验(Ames试验)和体外哺乳动物细胞基因突变试验(HPRT试验)两种方法检测氧化型染发剂,并对其结果进行分析比较,探讨两种方法在检测氧化型染发剂致突变性中的应用。方法：Ames试验采用一组营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌检测6种氧化型染发剂。各受试物分别设4个可供分析的剂量组,剂量范围从312～10 000μg/皿,通过计算受试物回复突变菌落数,判定受试物的致突变性。HPRT试验采用体外培养的V79细胞,各受试物分别设4个可供分析的剂量组,剂量范围从4.88～5 000μg/mL,研究6种氧化型染发剂致细胞HPRT位点突变的频率,通过计算受试物引起的V79细胞的突变频率,判定其致突变性。结果：在Ames试验中,无论加与不加体外代谢活化系统,受试物在2 500～10 000μg/皿剂量范围均存在回变菌落数超过溶剂对照组两倍的情况,并有剂量-反应关系,表明Ames试验检测6种氧化型染发剂均为阳性结果。而在HPRT试验中,无论加与不加体外代谢活化系统,各受试物在>2 500μg/mL时具有明显毒性作用,在9.75～2 500μg/mL剂量范围细胞突变频率与阴性对照组比较...     

姜黄的抗突变抗癌作用的研究概况及展望（续）

姜黄的抗突变抗癌作用的研究概况及展望（续）支惠英综述赵泽贞审校河北省肿癌研究所石家庄０５００１１（续上期封二）２姜黄的抗突变抗癌作用机理的研究２１结构及其活性基团对不同样品的姜黄进行化学分析研究表明：姜黄中含精油（４２％－１４％）、脂肪油（４４...     

EGFR、ALK、KIT及KRAS基因Panel体细胞突变高通量测序检测法室内质量控制的建立

目的： 利用由295个靶基因所组成的高通量测序panel,试建立适用于包括表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)、间变淋巴瘤激酶(Anaplastic lymphoma kinase,ALK)、酪氨酸激酶受体（Tyrosine kinase receptor,KIT）及大鼠肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene,KRAS)体细胞突变高通量测序法日常检测的室内质量控制体系。方法： 选择EGFR、ALK、KIT和KRAS四种基因7个突变类型的患者样本,按比例稀释成5.00%、2.50%突变频率的样本作为外部质控品,对其均一性、稳定性及特异性进行评价。 结果： 均一性评价结果显示质控品均一性良好,稳定性评价结果表明质控品检测结果随时间延长无明显趋势变化,且经变异分析均显示变异系数（Coefficient of Variation,CV）<10%。结论： 临床检测突变样本型模式的阳性混合标本制备定量检测的5.00%和2.50%的两个质控品均一性、稳定性及特异性良好,可有效用于基于探针捕获的包括EGFR、ALK、KIT及KRAS基因panel体细胞突变高通量测序技术检测流程的室内质量控制,检测结果能反映标本的真实性,有一定的临床实用价值。     

大刺猴头（88）多糖抗突变,抗氧化及对免疫功能影响的研究

本实验观察了大刺猴头多糖（Ｈｅｒｉｃｌｉｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＨＥＰＳ）对大肠杆菌ＳＯＳ应答的抑制作用；径口给大鼠ＨＥＰＳ（３０ｄ）测定大鼠血液和肝组织中超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｘｉｄｅｄｉｓｕｍｕｔａｓｅＳＯＤ），脂质过氧化物丙三醛（Ｍａｌｏｎｙｌｄｉａｌｄｅｇｙｄｅ（ＭＤＡ）含量的变化；经口给小鼠（ＨＥＰＳ）（３０ｄ），其对小鼠腹腔吞噬率、吞噬指数，脏器指数的影响。结果表明：ＨＥＰＳ可以抑制由（ＭｉｔｏｍｙｃｉｎｃＭＭＣ）诱导的ＳＯＳ应答，其抑制率大肠杆菌ＰＱ３５为６４％，ＰＱ３７为５６％；经口给大鼠ＨＥＰＳ其血液及肝匀浆中ＳＯＤ含量均高于对照组。ＭＤＡ的含量均低于对照组，各自２组比较分别有非常显著性差异及显著性差异（Ｐ＜０．０１，ｐ＜０．０５）。ＨＥＰＳ组小鼠的腹腔吞噬细胞吞噬率、吞噬指数，胸腺指数，腺指数与对照组比较也有非常显著性差异（ｐ＜０．０１）。结果提示：大刺猴头（８８）（ＨＥＰＳ）在本实验体系表现有抗突变，抗氧化及增强免疫功能的作用。     

高分辨率熔解曲线分析技术检测BRAF基因V600E突变方法的建立及初步临床应用

目的建立高分辨率熔解曲线分析技术(high resolution melting,HRM)检测BRAF基因V600E突变的方法,并探讨其在临床检测中的应用价值。方法用所建方法检测16例甲状腺乳头状癌患者超声引导下细针穿刺抽吸活检标本,并与测序法结果进行比较分析。结果所建HRM检测方法 Ct值与Tm的CV值均较小,重复性好。HRM法BRAF基因V600E突变检测标本的结果与测序法相比较,突变检出率分别为43.75%和40.00%,敏感性为100.00%,特异性为90.00%。结论成功建立的HRM法检测BRAF基因V600E突变敏感性高,特异性强,重复性好,操作简便,节约时间,成本低,适合细针穿刺抽吸活检标本检测BRAF基因V600E突变。     

3H—TdR法检测LAK细胞活性的建立及人肺腺癌细胞株（GLC—82）对LAK细胞的…

用３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测了个旧人肺腺癌细胞株（ＧＬＣ－８２），小鼠肥大细胞瘤（Ｐ８１５）及人红白血病细胞株（Ｋ５６２）对自然杀伤细胞（ＮＫ细胞），洒巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）的敏感性。结果表明：用３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测ＮＫ、ＬＡＫ细胞活性具有灵敏、准确、重复性好的优点，适用于国内一般实验室开展；ＧＬＣ－８２细胞对ＮＫ细胞不敏感，而对ＬＡＫ细胞敏感，提示人肺腺癌用ＬＡＫ细胞治疗可能有效，ＧＬ     

￣3H─TdR法检测LAK细胞活性的建立及人肺腺癌细胞株（GLC─82）对LAK细胞的敏感性

用３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测了个旧人肺腺癌细胞株（ＧＬＣ─８２），小鼠肥大细胞瘤（Ｐ８１５）及人红白血病细胞株（Ｋ５６２）对自然杀伤细胞（ＮＫ细胞），淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）的敏感性。结果表明：用３Ｈ─ＴｄＲ释放法检测ＮＫ、ＬＡＫ细胞活性具有灵敏、准确、重复性好的优点，适用于国内一般实验室开展；ＧＬＣ─８２细胞对ＮＫ细胞不敏感，而对ＬＡＫ细胞敏感，提示人肺腺癌用ＬＡＫ细胞治疗可能有效，ＧＬＣ─８２细胞可作为检测ＬＡＫ细胞活性的靶细胞。     

全身免疫炎症指数（SII）对胶质瘤患者临床预后的影响及与p53突变的关系

目的:探讨全身免疫炎症指数（SII）对胶质瘤患者临床预后的影响及与p53突变的关系。方法:收集2006年8月至2015年11月于我院脑外科行手术治疗的80例神经胶质瘤患者。应用ROC曲线确定SII最佳临床分界值,并依此分组。采用Kaplan-Meier和Log-rank法分析两组患者术后生存情况。COX比例风险模型分析临床预后因素。应用免疫组织化学方法检测p53基因突变情况。结果:SII是神经胶质瘤的独立预后因素,最佳临床分界值为500×109/L。低SII组术后中位无病生存时间（disease free survival,DFS)和中位总生存时间（overall survival,OS)分别为43.85个月和56.69个月,而高SII组术后中位DFS和中位OS分别为29.10个月和45.10个月,两组DFS和OS比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）。经单因素和多因素分析,年龄、手术情况、WHO分级、SII、p53突变是神经胶质瘤的独立预后因素。未发生p53突变的低SII组神经胶质瘤患者预后好于其他情况。结论:SII是神经胶质瘤的独立预后因素,具有简单方便、可重复性强、非侵袭性等特点,可用来预测神经胶质瘤患者的预后,未发生p53突变的低SII组神经胶质瘤患者预后较好。     

荧光原位杂交（FISH）检测乳腺癌中HER-2基因状态与p53、Ki-67、TOPOⅡ表达的相关性

目的:研究乳腺癌中HER-2基因状态和p53、Ki-67、TOPOⅡ蛋白表达的相互关系,以及HER-2基因扩增与HER-2蛋白表达的相关性。方法:运用FISH和IHC技术分别检测172例浸润性乳腺癌中HER-2基因状态及HER-2、p53、Ki-67、TOPOⅡ蛋白表达情况,分析HER-2基因状态与其相互的关系。结果:172例浸润性乳腺癌中HER-2基因扩增与p53、Ki-67、TOPOⅡ蛋白表达呈正相关（P<0.05）,HER-2基因扩增阳性率为43.6%（75/172）,HER-2基因扩增与HER-2蛋白表达具有相关性（P<0.05）。结论:联合检测HER-2基因状态和p53、Ki-67、TOPOⅡ蛋白表达可为浸润性乳腺癌的预后及分子靶向治疗提供依据。     

卵巢浆液性癌中p-Akt~（473） Ser、p53及Ki-67的表达与临床意义

目的：探讨p-Akt473Ser、p53及Ki-67蛋白在卵巢癌组织中的表达及其相互关系。方法：应用免疫组化法,检测10例正常卵巢、12例卵巢良性上皮性肿瘤、15例卵巢交界性上皮性肿瘤、60例卵巢浆液性癌中p-Akt473Ser、p53及Ki-67蛋白的表达,分析p-Akt473Ser与p53及Ki-67三者间的关系。结果：pAkt473Ser、p53及Ki-67蛋白在正常卵巢组织中的阳性蛋白率分别是10%、20%、10%;pAkt473Ser、p53及Ki-67蛋白在卵巢良性上皮性肿瘤组织中的阳性蛋白率分别是17%、25%、25%,均显著低于卵巢浆液性囊腺癌组织中的60%、67%、83%（P〈0.01）。pAkt473Ser、p53及Ki-67蛋白在交界性肿瘤组织中的阳性表达率分别为40%、60%、67%,交界性肿瘤与卵巢癌组织比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,而与组织学分化、临床分期有关（P〈0.01）。结论：pAkt473Ser、p53及Ki-67蛋白在卵巢癌中过表达,可能共同参与卵巢癌的发生、发展。     

老年患者的幽门螺杆菌（HP）感染与胃癌及癌前病变中C-myc、p16、p53、K-ras和C-erbB-2基因表达

目的探讨老年患者幽门螺杆菌（HP）感染与胃癌及癌前病变中C-myc、p16、p53、K-ras和C．erbB-2基因表达及其临床意义。方法分析老年患者的胃镜检查活检标本116例,HE染色观察胃黏膜的炎症和异型增生变化,特染法检测胃黏膜的肠上皮化生,应用Warthin-stary银染色法检测HP,应用ELISA法检测血清学HPIgG,14C尿素呼气试验（14C-UBT）检测HP,应用免疫组化sP法检测C-myc、p16、p53、K-ras和C-erbB-2基因的表达。结果老年患者在不同胃组织中C-myc、p16、p53基因的表达均有显著差异,而K-ras和C-erbB-2基因表达未见显著性差异。HP感染率以胃癌为最高,其次为胃溃疡。结论本实验通过老年患者的HP检测和观察胃黏膜的炎症和异型增生变化,再结合癌基因和抑癌基因的表达异常,提示萎缩性胃炎异型增生、肠上皮化生和胃癌的HP感染率均高于非萎缩性胃炎。再次表明胃癌与HP感染有一定相关性。     

围术期肺癌患者 CD4＋／CD8＋T 细胞与TGF -β、IL -4、IL -6的检测及临床意义

目的：研究围术期肺癌患者CD4＋/CD8＋T细胞与TGF-β、IL-4、IL-6的含量变化及临床意义。方法分别采用流式细胞术（Flow cytometry,FCM）及酶联免疫吸附法（ELISA）检测20例肺癌患者手术前后和10例正常对照者CD4＋T、CD8＋T细胞比例及细胞因子TGF-β、IL-4和IL-6的含量。结果20例肺癌患者术前CD4＋T、CD8＋T细胞比例分别为（46．26±4．26）％、（43．15±5．18）％,术后5天分别为（44．30±4．25）％、（39．80±2．53）％;肺癌患者术前血清中TGF-β、IL-4、IL-6的含量分别为（240．51±46．37）pg/mL、（19．85±2．52） pg/mL、（129．28±33．06） pg/mL,术后5天分别为（210．79±36．94） pg/mL、（17．37±2．57） pg/mL、（107．28±27．83） pg/mL。两组之间差异均有统计学意义（ P＜0．05）。结论围术期肺癌患者的免疫状态呈先抑制后恢复,监测围术期CD4＋/CD8＋T细胞与TGF-β、IL-4、IL-6的含量变化对肿瘤患者病情监测及预后判断具有重要意义。