应用分子杂交和免疫组化技术检测肝外组织中的HBV—DNA和HBV抗原

在9名肝炎死亡病例尸检时,采集了多种组织,以斑点分子杂交技术及Southern吸印法检测了HBV-DNA,以免疫组织化学技术检测了各种组织细胞内的HBsAg、HBcAg和HBeAg。检测结果显示除肝脏外,HBV-DNA和/或HBV抗原常见于一些重要的肝外脏器和组织,说明了HBV的泛嗜性,并且提示可能与有些病症有关。睾丸和前列腺中检测到HBV抗原和HBV—DNA值得重视,为通过性生活可以传播及通过父亲也可以垂直传播给新生儿提供了依据。HBeAg在肝外组织中的检测尚未见报道,本组资料显示在多种肝外组织细胞内都可检出,说明在肝外组织中,HBV的复制也可以是活跃的。HBeAg大多存在于细胞核内,其意义尚待进一步探讨。     

肝病患者肝组织及血清HBV—DNA比较

肝组织HBV-DNA检测能直接反映HBV病毒的存在。我们采用PCR-溴化乙锭法对乙型肝炎68例及肝癌5例肝组织和血清HBV-DNA进行检测,并对其中51例在不同的e系统模式时HBV-DNA存在情况进行分析,以期探讨肝病患者肝细胞内HBV-DNA复制、感染情况。1　对象和方法1.1　对象　共收集乙肝68例及肝癌5例的肝穿组织及血清标本。其中男41例,女32例;年龄18～51岁,均为本院1995年12月至1998年9月的住院患者。急性肝炎22例,慢性肝炎35例,重症肝炎11例。临床诊断以1995年5月修订的病毒性肝炎防治方案(试行)为参考[1],并辅以病理诊断。1.2　试剂来源…     

聚合酶链反应在检测HBV—DNA中的价值

为探讨乙型肝炎的检出率,1997年1～6月,我们采用聚合酶链反应(PCR法)对乙型肝炎78例的血清HBV-DNA进行检测,并与乙肝病毒血清标志物(HB-VM)的检出情况(ELISA法)进行比较,以评价PCR法在监测乙肝病毒感染者中的临床意义。1　对象和方法1.1　对象　乙肝78例,男42例,女36例;年龄14～56岁,平均38.2岁。均无HAV、HCV、HDV、HEV重叠感染。1.2　方法1.2.1　HBV-DNA检测　乙型肝炎病毒基因扩增试剂盒由中山医科大学科技开发公司提供。取患者DNA血清40μl,加40μlDNA提取液后打匀,沸水浴5min,以10000r/min离心5min,取上清液2μl行P…     

用原位聚合酶链反应检测肝癌石蜡包埋组织中的HBV—DNA

为研究乙型肝炎病毒(HBV)感染和肝细胞癌(HCC)之间的关系,我们建立了原位聚合酶链反应(ISPCR)并检测26例HCC石蜡包埋组织中的HBV—DNA。结果显示,HBV DNA在肝癌组织和癌旁肝组织的阳性率分别为84.6％(22/26)、91.3％(21/23)。ISPCR技术既显示了PCR技术的高敏性和特异性,又能在细胞内定位,是研究HBV与HCC关系的一项有价值的技术。     

抗—HBe和HBV—DNA阳性慢性乙型肝炎26例临床分析

近年来，随着乙型肝炎病毒（HBV）分子生物学研究的进展，尤其是HBV前C基因突变株的发现，对慢性HBV感染中e系统的临床意义有了进一步的认识。目前趋向于将慢性乙型肝炎分为两大型[1]：乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性慢性肝炎和乙型肝炎e抗体（抗-HBe）阳性慢性肝炎（异型慢性乙型肝炎acypicalchronichepatitisB）。本文就抗-HBe和DNA阳性慢性乙型肝炎26例临床分析如下。1临床资料1．1性别与年龄男性25例，女性1例，年龄23～48岁，平均29．8岁。1．2临床症状与体征乏力和食欲不振26例，关节痛5例，低热2例，蜘蛛痣24例，肝掌18例，肝…     

应用PCR检测4种消毒剂对HBV—DNA的灭活效果

我们应用聚合酶键反应（PCR）技术，检测碘伏、高锰酸钾、来苏尔和84消毒液对HBV－DNA的灭活效果。报告如下。材料与方法一、材料碘伏，南京大学消毒剂厂生产（批号19931204）。高锰酸钾，广东梅县锰化厂生产（批号19920201）。来苏尔，南昌医药比工厂生产（批号19921024）。84消毒液，南昌健宝防疫用品厂生产（批号19930720）。HBV－DNAPCR试剂盒，由南通宏达生物技术有限公司提供（批号19930509HBV－DNA强阳性血清，采集于住我院的慢性乙型肝炎患者。中和剂：碘伏用2．5％硫代硫酸钠，高锰酸钾用0．2％硫酸亚铁该，来苏尔用2％…     

乙型肝炎病毒复制阳性417例的ALT、乙肝标志物和HBV DNA临床分析

目的调查417例乙型肝炎病毒复制阳性患者的肝损伤、乙肝标志物(HBV Markers,HBVM)和外周血HBV DNA水平及抗病毒治疗适应证符合情况。方法对乙型肝炎病毒复制阳性的417例患者的ALT、乙肝标志物(5项)和HBV DNA进行定量分析。结果HBVDNA阳性者中,性别间ALT各组例数比例不同,但在ALT≥2ULN组,性别间ALT例数相同,而HBV DNA拷贝数差异有统计学意义。ALT各组的HBeAg阴、阳性分布无差异,ALT各组HBV DNA拷贝数随ALT升高而升高。乙肝标志物组的13、145、15组的抗病毒治疗适应证符合率是一致的,135组高于其他三组,且13、135组HBVDNA拷贝数无差异,高于其他两组。结论监测ALT、乙肝标志物和HBVDNA,有助于了解本地区HBV感染情况,节约医疗资源,及时治疗,延缓病程。     

聚合酶链反应对单—抗HBc阳性的飞行员血清HBV—DNA的检测

用聚合酶链反应对单－抗ＨＢｃ阳性的飞行员血清ＨＢＶ携带情况进行了调查，首先用ＥＬＩＳＡ法对１８９份血清检测了ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ和抗ＨＢｃ。ＨＢｓＡｇ阳性率为４．７６％（９／１８９），抗ＨＢｓ１７．９９％（３４／１８９），抗ＨＢｃ２４．８７％（４７／１８９），聚合酶链反应检测单－抗ＨＢｃ阳性血１９份，抗ＨＢｓ阳性／抗ＨＢｃ阳性血２０份。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３１．５８％（６／１９）和５％（１／     

PreSlAg、HBeAg和HBV—DNA的对比检测与分析

目的：通过对比检测和分析739份血清中preS1蛋白、HmAg和HBV—DNA的检测阳性率，为临床正确选用实验室指标防治乙型肝炎提供依据。方法：应用ELISA法对739份血清进行PreSlAg和HBV血清标志物检测，并与实时荧光定量PCR检测HBV—DNA结果进行比较。结果：所有739份血清中，PmSlAg阳性率为34．6％（256／739），HmAg阳性率为觚7％（227／739），HBV—DNA阳性率为58.9％（435／739）。227份HBeAg阳性血清中，PreSlAg阳性率55．9％（127／227），HBV-DNA阳性率96．0％（218／227）；512份HBeAg阴性血清中，PreSlAg阳性率25．2％（129／512），HBV—DNA阳性率为42．4％（217／512）。HBeAg、HBV—DNA和PreSl的阳性率有显著差异（P〈0．05），阳性率高低依次为HBV—DNA〉PreSl〉HBeAg；HBeAg阳性血清中PreSlAg（55．9％）阳性率显著高于HmAg阴性血清PreSlAg（25．2％）阳性率（x^2=36．5，P〈0．01）；HBV—DNA阳性血清的PreSlAg检出率58．9％（256／435）显著高于HBV—DNA阴性血清的PreSlAg检出率1＆4％（56／304）（P〈0.01）；PreSl抗原与HBV—DNA阳性符合率为（200／256）7＆1％，阴性符合率为（248／483）51．3％。598份HBeAg阳性血清（阳性率为80．9%，598／739）中HBeAg、PreSl和HBV—DNA阳性数（率）分别是224（37．5%）、253（42．3oA）、417（69．7％）。结论：PreSlAg、HBV—DNA、HBeAg的阳性率有显著性差异（P〈0．05）。作为HBV感染和复制的指标，以检测HBV—DNA最为可靠，而PmSlAg可能较HBeAg更敏感。在HBV感染的不同时期，如何理解和使用上述指标对防治乙型肝炎有重要意义。     

乙肝病毒前S1抗原、乙肝病毒血清标志物和HBV—DNA联合检测的临床应用

目的探讨乙肝病毒前S1抗原（PreS1）、乙肝病毒标志物（HBVM）与乙肝病毒DNA（HBV—DNA）检测三者之间的关系，判断乙肝病毒在体内的复制情况。方法对550例乙型肝炎患者血清，用ELISA方法检测PreS1、两对半标志物，用荧光定量PCR方法定量检测HBV—DNA并分析3者之间的关系。结果HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）的模式中，PreS1与HBV-DNA检出率分别为5213％与88．4％，HBsAg（＋）、HbeAb（＋）、HBcAb（＋）的模式中PreS1和HBV—DNA检出率分别为31．1％和47．5％，HBsAg（＋）、HBcAb（＋）的模式中PreS1和HBV-DNA检出率分别为47.3％和63．4％。结论PreS1能较好的反映HBV病毒感染及复制情况，可作为一种新的HBV血清标志物和监测指标，三者联合检测互相补充，更有助于临床疾病的诊治。     

乙型肝炎患者不同血清标志物HBV DNA的表达及意义

 目的探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物(HBVM)表现模式的相关性.方法血清HBV DNA定量检测采用PCR ELISA法,HBVM采用ELISA法.结果在HBVM阳性的366例血清中,有199例HBV DNA阳性,占54.4%.血清HB-/ml占65.2%;HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者HBV DNA-HBc阳性者HBV DNA阳性率占95.2%,≥106 copiessAg、HBeAg、抗阳性率占29.1%,≥106 copies/ml占17.6%.结论血清HBVM阳性患者中约55.0%的血清HBV DNA阳性,且HBeAg阳性患者中HBV DNA含量及阳性率均明显高于抗-HBe阳性者;在抗-HBs、抗-HBc阳性或HBsAg阴性者血清内也有HBV DNA阳性者.     

前—S2蛋白与HBeAg,HBV—DNA及肝组织内HBcAg,HBsAg的初步研究

本文对各型HBV感染者50例的同份血清作了Pre-S_2蛋白与HBeAg、HBV-DAN检测,并与同期肝组织内HBcAg,HBsAg的关系进行了初步研究。50例HBV感染者均系1984～1988年收治的患者,其中重型肝炎9例,慢性活动性肝炎(CAH)18例,无症状HBsAg携带者(AsC)18例,甲乙型肝炎重叠感染者5例。 检测方法:(1)血清Pre-S_2蛋白ELISA检测药盒及血清HBV-DVA(斑点杂交试验)药盒均(?)北京医科大学肝病研究所提供。(2)HBeAg(?)-HBe药盒由302医院免疫室提供(ELISA)