严重烧伤后早期大鼠肾脏细胞粘附分子1和白介素6的表达

目的:观察严重烧伤早期大鼠肾脏细胞粘附分子l(Intercellulal adhesion molecule-1,ICAM-1)、白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)在不同时间点的表达及早期病理变化,为阐明伤后早期肾脏损伤机制及为伤后早期损伤的防治打下基础。方法:①光镜和电镜观察大鼠在烧伤后早期(5min至72h)肾脏的病理变化;②免疫组织化学、原位杂交和图像分析技术对伤后不同时间点肾脏ICAM-1进行染色和分析;③免疫组织化学、原位杂交和图像分析技术对伤后不同时间点肾脏IL-6进行染色和分析。结果:①伤后早期主要病理变化为出血、充血和水肿;电镜显示:肾脏毛细血管内皮细胞受损;②伤后30min,免疫组化和原位杂交显示ICAM-1、IL-6表达增强,伤后2-24h明显增强,呈阳性或强阳性;伤后 72h,表达逐渐减弱。结论:伤后早期肾脏的损伤可能与内皮细胞损伤有关,ICAM-1、IL-6在伤后早期肾脏损害机制中占有重要地位。     

大鼠高原严重烧伤后早期心肌损伤的病理变化及复方红景天参芪花粉对其保护作用

目的：探讨高海拔地区(海拔3480m)大鼠严重烧伤(30％Ⅲ度)后心肌病理变化及复方红景天参芪花粉对其影响；方法：建立烧伤模型，156只大鼠随机分为烧伤试验组(72只)，烧伤对照组(72只)，正常组(12)只，试验组伤前灌胃给药，其余给盐水；伤后3h、6h、12h、24h、48h、72h6个时相点剖腹取心脏，10％福尔马林固定，常规石蜡包埋切片，脏染色；结果：烧伤对照组伤后3小时心肌间质增宽，充血，伤后6h～24h心肌纤维可见颗粒变性，并可见“波浪纤维”；伤后48h～72h心肌仍持续出现灶性凝固性坏死和溶解坏死，少量肌纤维断裂；烧伤试验组：伤后3h心肌问质轻度水肿，伤后6h～24h心肌纤维仅有部分颗粒变性，未见空泡变性；伤后48h～72h，仍有间质充血水肿，未见肌纤维断裂：结论：复方红景天参芪花粉对大鼠高原严重烧伤后的心肌损害有显著保护作用。     

大鼠高原严重烧伤后早期肝脏损伤的病理变化及复方红景天参芪花粉对其保护作用

目的：探讨高海拔地区(海拔3480m)大鼠严重烧伤后(30％Ⅲ度)肝脏病理变化以及复方红景天参芪花粉对其影响;方法：建立烧伤模型,156只大鼠随机分为烧伤试验组(72只),烧伤对照组(72只),正常组(12只),试验组伤前灌胃给药,其余给盐水,伤后3h、6h、12h、24h、48h和72h6个时相点剖腹取肝脏,10％福尔马林固定,常规石蜡包埋切片,HE染色;结果：烧伤对照组伤后3h肝细胞即出现肿胀,6h～24h损害继续加重,并出现部分肝小叶坏死,可累及整小叶,这种严重的器质性损伤在48h～72h仍然持续;烧伤试验组：烧伤后3h肝细胞轻度肿胀,6h～24h极少出现肝小叶坏死,伤后48h～72h肝小叶仅见中央脂肪变性范围较小,而累及整小叶及小叶中央静脉周围者少见;结论：复方红景天参芪花粉对大鼠高原严重烧伤后的肝损害有显著的保护作用。     

环孢素A对轴索损伤后的神经保护作用

目的 观察大鼠弥漫性轴索损伤（DAI）后轴索及其相应的神经元β淀粉样前体蛋白（β—APP）的表达规律，以及环孢素A（CsA）对其表达的影响，探讨CsA的神经保护作用。方法 90只健康成年雄性SD大鼠随机分为3组：正常对照组（A组）8只（其中3只制作电镜标本）、DAI组（B组）41只、CsA处理组（C组）41只。对B、C两组大鼠右侧视神经施以牵拉，C组大鼠在牵拉伤后即刻按20mg／kg腹腔注射CsA。B、C组分别在伤后、CsA处理后1，3，6，12h、1，3，7d处死，其中3h、1d各为8只大鼠（3只制作电镜标本），其余时间点各5只大鼠。光镜和电镜观察神经轴索及其相应神经元胞体的病理变化；免疫组织化学方法检测视网膜神经节细胞（RGCs）和神经轴索中β—APP的表达。结果 （1）组织病理学观察：B组大鼠右侧视神经牵拉伤后神经轴索、RGCs发生明显的病理变化，C组动物相应的病理变化明显减轻；（2）β—APP表达：①B组大鼠RGCs β—APP阳性表达呈双相变化，1，3h阳性表达强度明显低于A组，1，3，7d阳性表达强度明显高于A组；C组大鼠RGCs β—APP阳性表达规律与B组相似，但1，3，7d β—APP阳性表达明显低于B组。②B组轴索β—APP阳性表达在各个时相点明显增加，3h达到高峰；C组轴索β—APP阳性表达规律与B组相似，除1h外，其余时相点阳性表达明显低于B组，但表达强度仍明显高于A组。结论 β—APP长时间过度表达可能参与了DAI后的继发性病理变化；CsA对DAI的神经保护作用可能部分与β—APP有关。     

大鼠高原严重烧伤后早期肺损伤的病理变化及复方红景天参芪花粉对其的保护作用

目的：探讨高海拔地区大鼠严重烧伤后肺脏病理改变以及复方红景天参芪花粉对其影响；方法：180只大鼠随机分为烧伤试验组(红景天组)、烧伤对照组和正常组，试验组伤前用RACC4ml灌胃给药，对照组及正常组生理盐水4ml灌胃，伤后不同时相点剖腹取肾组织，10％福尔马林固定，石蜡包埋切片，HE染色；结果：伤后3小时，对照组肺泡即发生严重损伤，持续(6—24)小时加重，而实验组则损伤轻微；结论：大鼠高原严重烧伤后，早期肺损伤严重，复方红景天参芪花粉对肺损伤确有保护作用。     

复方红景天参芪花粉对大鼠高原严重烧伤后肾损伤的保护作用及病理形态学分析

目的：探讨高海拔地区大鼠严重烧伤后肾脏病理改变以及复方红景天参芪花粉（RACC)对其影响；方法：156只大鼠随机分为试验组(红景天组)、对照组及正常组；试验组伤前用RACC4m1灌胃给药，对照组及正常组给生理盐水4ml灌胃；伤后不同时相点剖腹取肾组织，10％福尔马林固定，石蜡包理切片，HE染色；结果：伤后3h对照组肾小球及肾小管即发生严重损伤，以肾小球为著，72h尚未恢复正常，试验组则损伤较轻，伤后(48—72)h后肾小球结构基本恢复正常；结论：复方红景天参芪花粉对大鼠严重烧伤后的肾损害有重要的保护作用。     

杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽对内毒素致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的：通过杀菌性／通透性增加蛋白（BPI）模拟肽（BNEP）拮抗内毒素（LPS），观察对血管内皮细胞分泌白细胞介素－6（IL－6），肿瘤坏死因子－α（INF－α）以及表达细胞间黏附分子－1（ICAM－1）的影响，探讨BNEP对LPS致血管内皮细胞损伤的保护作用。方法：采用体外培养的原代人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为模型，分别观察单纯应用LPS，BNEP以及不同剂量BNEP与LPS作用后各细胞因子的分泌表达，IL－6，TNF－α应用双抗夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定。ICAM－1采用生物素－抗生物素－过氧化物酶复合物（SABC）－cy3免疫荧光染色，激光共聚焦扫描显微镜下观察其表达情况，结果：LPS 10ng/ml可使IL－6分泌量显著增加；BNEP 60ug/ml即可显著降低10ng/ml LPS诱导的IL－6分泌，随BNEP浓度增加IL－6分泌量呈降低趋势，达240ug/ml时，IL－6分泌量与单纯应用BNEP组比较，差异无显著性意义（P＞0．05），BNEP 120ug/ml与LPS10ng/ml作用后，可使TNF－α分泌量降低94％，BNEP 240ug/ml可完全阻断TNF－α的分泌。激光共聚焦扫描显微镜观察结果显示，BNEP与LPS作用后，ICAM－1在细胞膜及细胞浆的表达明显减弱。结论：BNEP在阻断LPS对细胞的激活和损伤，减少炎症介质和细胞因子的过度释放中具有明显的保护作用。     

大鼠严重烧伤后早期下丘脑NMDA受体NR1和NR2B亚基的表达

目的 观察大鼠严重烧伤后早期下丘脑N-甲基-D-天冬氨酸(N- methyl -D -aspartic acid,NMDA)受体NR1及NR2B亚基表达的变化,探讨严重烧伤后下丘脑-垂体-肾上腺皮质( hypothalamus - pituitary - adrenal,HPA)轴活化状态发生变化的机制. 方法 按随机数字表法将40只SD大鼠分为对照组和烧伤组(包括伤后6,24,48 h组),并建立30％体表面积背部皮肤Ⅲ度烧伤模型,采用免疫组织化学染色、Western blot蛋白印迹法观察大鼠下丘脑组织中NMDA受体NR1、NR2B亚基表达的变化. 结果 大鼠在严重烧伤后HPA轴活性显著增强,血清皮质醇浓度及血流动力学相关指标在伤后均发生了明显变化,血清皮质醇在伤后6h达到高峰,伤后48 h仍显著高于对照组(P＜0.05),收缩压(SP)、舒张压(DP)、左心室收缩压(LVSP)均在伤后6h显著下降,其中SP、DP在伤后48 h时仍低于对照组(P＜0.05).Western blot检测结果 显示,烧伤各组NR1亚基表达增加,伤后24h达到高峰(1.12±0.27),与对照组(0.45±0.15)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);而NR2B亚基的表达明显减少,6h最为明显(0.65±0.21),与对照组(1.38 ±0.51)比较,差异有统计学意义(P＜0.05),48 h恢复到伤前水平(1.25±0.30),与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).下丘脑室旁核(hypothalamus paraventricular nucleus,PVN)免疫组织化学染色中获得与Western blot相一致的结果 . 结论 下丘脑NR1及NR2B亚基长时间的可塑性变化可能是严重烧伤后早期HPA轴活化状态发生变化的机制之一.     

川芎嗪在严重烧伤大鼠延迟复苏中的作用及调控

目的：探讨川芎嗪在烧伤休克延迟复苏大鼠中的抗渗作用及对肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）的调控。方法：选用SD大鼠制备烧伤和烧伤休克延迟复苏模型，随机分为假烫组、烫伤组及治疗组，伤后24h检测肺脏、肝脏及肠的含水量及血管通透性，血浆中TNF—α、IL-1β及IL-6的浓度。结果：与烫伤组相比，治疗组大鼠的肺脏、肝脏及小肠的含水量及血管通透性均显著降低，血浆中TNF-α、IL—1β及IL-6的浓度显著降低。结论：大鼠严重烧伤后，早期使用川芎嗪，能下调TNF-α、IL-1β及IL-6在血浆中的总体水平，控制烧伤后过度全身炎症反应，有助于减轻脏器水肿，减轻烧伤早期脏器损害。     

休克期切痂对大鼠肝组织ICAM—1及TNF—α mRNA表达的影响

为研究烧伤后肝组织细胞间粘附分子－1（ICAM－1）及肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的表达及肝组织髓过氧化物酶（MPO）的规律，论证及早切除焦痂的重要性，取大鼠176只，30％Ⅲ度烫伤，观察伤后不同时相点及8不同时机切痂后肝组织ICAM－1、TNF－α mRNA的表达及肝组织MPO活性变化。结果显示，汤伤后肝组织ICAM－1及TNF－α的mRNA表达在伤后4h即已升高，8h和24h切痂组动物伤后96h恢复正常。未切痂组和96h切痂组在伤后7天仍未恢复正常；休克期切痂组MPO活性96h恢复正常，未切痂组和非休克期切痂组伤后7天仍未恢复正常。提示及早切痂去除了坏死组织，减轻了由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害。     

脑创伤早期大鼠肺组织细胞间黏附分子-1mRNA的表达及其意义

目的 观察脑创伤后早期大鼠细胞间黏附分子－1（ICAM－1）mRAN的表达及细胞定位,探讨其病理生理意义。方法 Wistar大鼠104只,随机分为假致伤组（8只）、致伤组（48只）、致伤加N－乙酰半胱氨酸（NAC）处理组（48只）。用牙科钻在大鼠冠状缝后缘、中线左侧开骨窗、保持颅脑膜完整,再用落体撞击装置撞击硬度,按各时相点麻醉成功后,取相同部位肺组织制作标本,采用原位杂交、计算机图像分析技术及病理学观察等方法,研究脑创伤后肺组织ICAM－1mRNA的表达和分布情况,以及病理学改变。结果 假致伤动物ICAM－1mRNA在肺组织中仅有少量表达。脑创伤后,大鼠肺组织ICAM－1mRNA表达强度明显增加;阳性细胞主要定位于支气管内皮细胞、肺间质细胞、血管内皮细胞及血管壁组织细胞。腹腔注射N－乙酰半胱氨酸（NAC）显著抑制脑伤后肺组织ICAM－1mRNA表达。结论 脑创伤后肺内ICAM－1mRNA表达分泌增加,可能是脑外伤后急性肺损伤发病的分子基础之一。     

1,6-二磷酸果糖对内毒素损伤性肺组织的保护作用

目的 观察内毒素(ET)致兔急性肺损伤(ALI)后肺组织炎症反应指标及病理改变.探讨1,6-二磷酸果糖(FDP)对ET所致的兔ALI可能的保护性作用.方法 24只大耳白兔随机分为对照组(A组)、ET致伤组(B组)、ET致伤 FDP干预组(C组),每组8只.A组仅注射生理盐水作为空白对照,B、C组经静脉一次性注射ET复制兔ALI模型,C组在ET致伤后静注FDP作干预.6h后处死动物,观察肺组织病理改变,并测定肺组织中脂质过氧化物(LPO)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)和白介素13(IL-13)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与A组相比,B组肺组织LPO和TXB2含量显著增高(P＜0.05, P＜0.01),SOD活性显著降低(P＜0.05),6-keto-PGF1α和IL-13含量则无明显变化.C组LPO含量和SOD活性较A组无显著变化,而TXB2、6-keto-PGF1α和IL-13含量则较A组显著增加(P＜0.01).光、电镜下观察,A组肺组织结构基本正常,B组病理损害明显,C组损伤较轻.结论 ALI过程中,氧化损伤、TXB2/6-keto-PGF1α比值失衡和保护性细胞因子分泌不足是导致肺组织病理损伤的重要因素.FDP可抑制氧化损伤, 改善TXB2/6-keto-PGF1α平衡并促进保护性细胞因子分泌,从而在ET致兔ALI的过程中对肺组织起到一定的保护作用.     

白细胞介素2葡聚糖微球并碘油栓塞治疗肝癌的动物实验

目的观察白细胞介素2(IL-2)葡聚糖微球并碘油经肝动脉栓塞后、实验兔肝种植瘤灶的坏死程度及其免疫功能的改变。方法20只肝脏载瘤兔,经肝动脉注入IL-2葡聚糖微球并碘油栓塞,栓塞前、后取血测IL-2和sIL-2R,栓塞后1周处死实验兔取瘤灶,进行光、电镜病理学检查,并以空白葡聚糖微球并碘油栓塞行对比观察。结果用药组术后IL-2血浓度明显升高,sIL-2R则明显下降,1周后瘤结节完全坏死,假包膜形成。对照组术后IL-2血浓度回升,sIL-2R下降,瘤结节中心性部分坏死,无假包膜形成。结论IL-2葡聚糖微球组与空白葡聚糖微球组各观察指标的对比分析表明,前者在肿瘤坏死程度、免疫功能促进方面明显优于后者。     

Protein kinase inhibitors modulate time-dependent effects of UV and ionizing irradiation on ICAM-1 expression on human hepatoma cells

Purpose : To investigate modulation of the expression of the adhesion protein ICAM-1 by UV and ionizing irradiation. Materials and methods : HepG2 hepatoma cells were irradiated in vitro with UVB (20 mJ cm -2) or X-rays (5 Gy), respectively. Gene expression of ICAM-1 after irradiation was quantified by RT-PCR. Cell surface density of ICAM-1 was determined by flow cytometry. Protein or lipid kinase inhibitors were used to clarify radiation-induced transduction pathways that control ICAM-1 expression. Immuno-electron microscopy and dot-blot analysis were used to examine localization of ICAM-1. Results : The study showed time-dependent effects of ionizing and UV irradiation on ICAM-1 expression of HepG2 cells. After an immediate transient decrease of ICAM-1 cell surface expression within minutes to hours, ICAM-1 expression increased up to 1.35-fold over normal level at 48 h post-irradiation. Irradiation caused ICAM-1 to become internalized into lysosomes. Additionally, ICAM-1 together with parts of the cell were pinched off. Finally, ICAM-1 levels were down- and up-regulated by decreased or increased gene expression. The early decrease of ICAM-1 expression could be blocked by a potent PKC inhibitor (BisX), whereas the increase of ICAM-1 after 24 h was prevented by addition of the p38 MAP kinase inhibitor SB 203580. Conclusion : The data suggest that ICAM-1 expression is modulated by UV, as well as ionizing radiation, in a time-dependent way involving PKC and p38 MAP kinase pathways.     

汽车正向碰撞所致交通伤的实验研究

目的应用实车碰撞模拟轿车驾驶员无防护状态下的交通伤，探讨轿车正向高速碰撞交通伤的发生情况和伤情特点。方法杂种大白猪8只随机分为4组，分别将猪以坐姿固定于驾驶员座椅上，以49，64，72，80km／h的行驶速度正向与壁障相撞，观察伤后猪存活情况、器官组织形态学改变以及伤情特点。结果伤后猪5min内死亡2只，11，15min各死亡1只，4只存活4h以上。损伤类型主要为撞击伤和挤压伤，形态学改变主要表现为躯体部分挤压毁损、体腔破裂、肢体离断骨折，心、肺、肝、脾、胃肠等器官均有不同程度损伤、破裂和出血，伤后肺含水量明显增多。实验猪均存在多发伤和胸腹联合伤。结论车辆正向碰撞极其危险，多发伤发生率高，伤情复杂、严重，多合并有重要脏器损伤。     

急性脊髓损伤后脊髓组织内皮素-1mRNA表达的实验研究

探讨内皮素－１在急性脊髓损伤中的表达及其作用机制。方法应用３ｇ负荷压迫大鼠胸段脊髓（Ｔ８－９）５ｍｉｎ,造成大鼠胸段脊髓急性中度损伤;借助原位杂交组织化学方法,定位,定量研究大鼠急性脊髓损伤后早期ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达的时间和空间分布特征。结果脊髓压迫伤后３０ｍｉｎＥＴ－１ｍＲＮＡ表达明显增多,４ｈ达最高峰,一直持续至７２ｈ恢复至正常水平。ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达阳性细胞主要是神经细胞,高表达区在脊髓前     

小鼠放射性肺损伤中细胞间黏附因子-1的表达

目的利用小鼠放射性肺损伤模型，了解细胞间黏附因子-1（ICAM-1）在放射性肺损伤不同阶段中的表达及其意义。方法成年雌性C57BL／6小鼠90只，按随机表分作2组：①对照组（36只）：不做任何处理；②照射组（54只）：全肺单次照射12Gy。于照射后1、24和72h及1、2、4、8、16和24周取照射组及相同鼠龄对照组小鼠肺组织，分别用HE和Masson染色在光镜下观察组织病理改变和胶原纤维沉积；免疫组织化学S-P法观察ICAM-1蛋白和白细胞共同抗原（CD45）蛋白表达，用碱水解法测定羟脯氨酸含量和实时定量RT—PCR法检测ICAM-1 mRNA相对含量。结果光镜下，照射组小鼠肺组织较对照组组织学改变和胶原纤维沉积明显，免疫组织化学结果显示，对照组小鼠肺组织中ICAM-1和炎性反应细胞的阳性细胞数均相对较低，照射组的阳性细胞数较之明显增高（P〈0．01）；羟脯氨酸含量的测定结果显示，照射组小鼠肺组织中的羟脯氨酸含量较对照组明显增高（P〈0．05）；实时定量RT-PCR的结果显示，照射组的ICAM-1 mRNA的表达水平较对照组均明显升高（P〈0．01）。结论在放射性肺损伤的过程中，ICAM-1是一重要的细胞因子，不仅介导早期炎性反应细胞的黏附和浸润，还参与后期放射性肺纤维化的形成。     

高功率微波辐照后大鼠肝组织的形态学改变

目的 探讨高功率微波(high power microwave，HPM)辐照后对大鼠肝组织形态结构的影响。方法雄性SD大鼠36只，随机分为两组，实验组(24只)和正常对照组(12只)，在微波辐照后6、24和48h及7d活杀大鼠，取肝脏组织；30mg／L戊二醛固定，进行常规扫描电镜标本制备；甲醛固定制备光镜标本。结果对照组肝细胞形态正常，肝板排列整齐。辐照后6h，肝细胞轻度肿胀。辐照后24h，肝细胞肿胀，肝板排列紊乱，肝窦狭窄。辐照后48h，肝细胞变性更明显，肝板排列严重紊乱，肝细胞空泡化明显，肝窦内广泛淤血。辐照后7d，肝细胞仍然肿胀，空泡化现象主要在中央静脉周围，肝窦内淤血有所减轻。结论高功率微波辐照对肝组织的损伤主要是发生肝细胞肿胀和肝窦淤血；这可能与辐照的致热效应，以及电场、电离作用等有关。     

N-乙酰半胱氨酸对脑死亡巴马小型猪肝脏功能与核因子-KB mRNA及其蛋白表达的影响

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetyleysteine,NAC)对脑死亡状态下巴马小型猪肝脏功能与NF-kB mRNA及其蛋白表达的影响.方法 将猪用随机数字表法分为3组,每组5只.应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型.对照组(C组):仅行开颅及开关腹手术;非药物干预组(B组):不进行药物干预;NAC处理组(N组):于腩死亡后1,12 h按200 mg/ks的剂量将NAC加入100 ml等渗盐水中,经静脉缓慢滴注.脑死亡3,6,12,18,24 h取上腔静脉血检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)及IL-1β、IL-6、TNF-α的水平;在以上各时相点开腹取相同部位肝脏组织,光镜下观察肝脏组织结构变化,电镜下观察肝脏超微结构变化,免疫组化染色观察肝脏组织中NF-KB的表达水平,RT-PCR检测NF-KB mRNA的变化.结果 (1)与C组相比较,B组及N组ALT和AST水平自12 h开始逐渐升高,IL-1β、IL-6、TNF-α水平自3 h开始逐渐升高,NF-kB mRNA及其蛋白表达水平自6 h即开始逐渐升高,但N组升高幅度均显著低于B组,差异有统计学意义(P<0.05).(2)脑死亡后12 h可见肝细胞结构变化;N组肝脏结构损伤明显轻于B组.结论 NAC能够抑制脑死亡状态下NF-KB mRNA及其蛋白的表达,减少炎症介质的释放,从而保护脑死亡状态下肝脏的结构和功能.