儿童急性淋巴细胞白血病细胞诱导前后增殖性抗原的表达研究

用免疫荧光法结合流式细胞术对TPA和rIL-2体外诱导的儿童急性淋巴细胞白血病细胞进行诱导前后的CD25,CD34,CD71,Ki-67和PCNA等细胞增殖性抗原的表达检测,发现CD25和CD71的表达改变不明显,CD34,Ki-67和PCNA在诱导后的白血病细胞中,其表达率明显降低。我们认为TPA和rIL-2能诱导白血病细胞增殖活力的降低,对其增殖性抗原CD34,Ki-67和PCNA的检测是观察白血病细胞向成熟细胞分化的敏感性生物学指标。     

急性白血病Ki-67的表达研究

目的检测急性白血病Ki-67的表达,探讨细胞增殖在白血病发生中的作用.方法运用免疫组织化学技术检测Ki-67在25例急性白血病患者骨髓组织切片上的Ki-67表达,以良性血液病患者作为正常对照组.结果 25例急性白血病Ki-67表达水平[(34.18±17.20)%]明显高于对照组[(12.17±6.23)%,P<0.01];急性淋巴细胞性白血病的Ki-67表达[(31.19±14.25)%]与急性非淋巴性白血病[(36.28±11.87)%,P>0.05]无差异;缓解的白血病患者Ki-67水平接近对照组.结论增殖作用增强可能在白血病发生发展中起重要作用,Ki-67可作为细胞增殖的良好标志.     

Ki-67在急性髓系白血病中的研究进展

Ki-67抗原表达与细胞周期密切相关,几乎表达于整个细胞周期的分裂期,检测Ki-67抗原可以反映血液肿瘤的细胞增殖活性。Ki-67的检测已广泛应用于淋巴瘤的疾病分期,疗效监测和预后判断,并已有大量研究探讨了Ki-67表达在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)中的表达及与治疗疗效、预后的相关性,而在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AM L)中Ki-67表达的相关研究较少,研究结果也不一致。本文就Ki-67的结构、细胞内定位、表达调控、生理功能及其在AM L中的应用现状做一综述,旨在了解Ki-67可否在AM L的诊断以及预后评估中发挥作用。     

白血病干细胞相关抗原在急性白血病细胞中的表达

目的 探讨白血病干细胞(leukemia stem cell,LSC)相关抗原在不同亚型急性白血病细胞中的表达规律.方法 采用流式细胞术检测LSC相关抗原CD96,CD90,CD123,CD71等在50例不同亚型急性白血病细胞中的表达,包括急性粒细胞白血病未分化型(M1)、急性粒细胞白血病部分分化型(M2)、急性早幼粒细胞白血病(Ms)、急性粒-单核细胞白血病(M4)和急性B淋巴细胞白血病.结果 CD96在M.的表达率(90.00％)明显高于M2(18.18％)和急性B淋巴细胞白血病(20.00％)(P＜0.05);各亚型急性白血病均表达CD123,但差异无统计学意义(P＞0.05) ;CD71在急性髓细胞白血病各亚型中(M1、M2、M3和M4)阳性表达率分别为80.00％、72.73％、90.00％和100.00％,明显高于急性B淋巴细胞白血病(P＜0.05);CD90在急性B淋巴细胞白血病中阳性表达率为13.33％,高于急性髓细胞白血病(P＞0.05).结论 CD71与CD96的表达有亚型特异性,CD96可能具有指示系列分化和细胞分化程度的作用,CD71可用于区分急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞白血病.     

MMP-3、CD10及Ki-67在三阴型乳腺癌组织中的表达及其意义

【目的】探讨基质金属蛋白酶3(MMP-3)、共同型急性淋巴母细胞型白血病抗原(CD10)和细胞增殖抗原(Ki-67)在三阴型乳腺癌(TNBC)组织中的表达及其意义。【方法】采用免疫组化检测55例TNBC(TNBC组)、136例非三阴型乳腺癌(N-TNBC组)及42例正常或良性乳腺(对照组)组织中MMP-3、CD10和Ki-67表达水平,并分析其临床意义。【结果】TNBC组中MMP-3、CD10和Ki-67过表达率分别为50.9%、45.5%和56.4%,明显高于N-TNBC组的19.9%、21.3%、27.9%及对照组的9.5%、7.1%、0,其差异均有统计学意义(P<0.05);在TNBC组中MMP-3与CD10、Ki-67的表达呈正相关(rs=0.312,P=0.020;rs=0.310,P=0.021),且三者均与组织学分级、淋巴结转移情况及pN级别密切相关(P<0.05)。【结论】MMP-3、CD10及Ki-67在TNBC浸润、转移中起协同作用,三者联合检测有助于判断肿瘤的浸润能力及转移潜能,若以三者过表达的细胞为靶点研发抑制剂药物,有望为临床诊治TNBC提供新方向。     

白血病细胞的Ki-67表达与细胞周期的关系

用ABC方法检测白血病细胞Ki-67阳性率,并与同时用流式细胞仪检测的DNA倍体、S+G_2M细胞比例作比较,发现Ki-67阳性率与S+G_2M细胞比例关系十分密切;二者与DNA倍体之间都有非常显著关系。在白血病各亚型中,Ki-67阳性率与S+G_2M细胞比例表现一致。白血病组高于对照组;急性白血病组高于慢性白血病组;急性淋巴细胞白血病组高于急性非淋巴细胞白血病组。急性白血病中,治疗前Ki-67阳性率和S+G_2M细胞比例在缓解组低于未缓解组。因此,可以认为用ABC方法检测Ki-67阳性率与用流式细胞仪测定DNA单参数一样,作为白血病诊断、分析及预后判断的指标,而且更方便、价廉。     

儿童和成人急性淋巴细胞白血病中Ki-67和Bcl-2表达的临床意义

为了观察Ki-67和Bcl-2在儿童和成人ALL中的表达，探讨其与ALL免疫学分型和临床疗效的关系，用链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶（SAP）免疫组织化学染色的方法，对18例儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）和43例成人声ALL患者的骨髓或外周血进行Ki-67抗原和Bcl-2蛋白的检测。结果表明：Ki-67抗原在儿童ALL中的表达略低于成人ALL，但差异无显著性（P〉0．05）；而Bcl-2蛋白在儿童ALL中的表达显著低于成人ALL（P〈0．05）；在儿童和成人ALL上各免疫表型中，T细胞、伴有髓系抗原标记的急性淋巴细胞白血病（My^＋ALL）的Ki-67阳性表达率显著高于成人（P〈0．05）；儿童和成人ALL的完全缓解率（CR）在Ki-67和Bcl-2两项同时低表达组中最高，仅一项低表达组中次之，两项均高表达组中最低。结论：对儿童和成人ALL患者进行增殖相关抗原Ki-67和抗凋亡蛋白Bcl-2的检测，能反映患者肿瘤细胞的增殖活性和凋亡抑制情况，硒-67和Bcl-2的表达与白血病ALL类型和临床疗效密切相关。     

急性淋巴细胞白血病患儿外周血T淋巴细胞免疫功能的研究

目的:研究急性淋巴细胞白血病患儿初治时和完全缓解后外周血T淋巴细胞亚群数量及其功能,寻找更好的控制儿童白血病的方法.方法:采用单克隆抗体在流式细胞仪上测定了16例急性淋巴细胞白血痛儿童初治时、完全缓解后外周血单个核细胞(MNC)CD3,CD4,CD8含量及自然杀伤细胞(NKC)水平.结果:急性淋巴细胞白血病患儿外周血CD3,CD4,NKC细胞及CD4/CD8比值均明显低于正常对照组(P＜0.01),CD8 细胞明显高于正常对照组(P＜0.01),完全缓解患儿T淋巴细胞亚群和NK细胞达正常水平,与正常对照组比较无显著性差异(P＞0.05).结论:免疫损害在白血病的发病过程中起重要作用;T淋巴细胞的免疫功能与儿童白血病的预后关系密切;促进患儿免疫功能的恢复对治疗有重要意义.     

儿童急性淋巴细胞白血病骨髓细胞增殖活力与预后观察研究

目的 检测儿童急性淋巴细胞白血病细胞增殖性抗原表达情况,观察其与预后的关系。方法 用流式细胞仪结合仪细胞增殖性抗原ＣＤ７１,Ｋｉ－６７和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）检测１２名正常儿童和３５例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患儿骨髓细胞的表达率、观察８治疗前后增殖指数（ＬＩ）的变化及其与预后的关系。     

67例儿童急性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的探讨儿童急性白血病流式细胞术（flow cytometry）免疫分型的特点。方法选择67例儿童急性白血病，采用CD45／SSC双参数散点图设门法流式细胞术进行急性白血病免疫表型检测，分析儿童急性白血病细胞的抗原表达规律。结果①FAB分型与免疫分型相符率为92．5％（62／67）。②B细胞系列急性淋巴细胞白血病（B-ALL）中CDl9敏感性最高，HLA-DR、cCD79a特异性强。T细胞系列急性淋巴细胞白血病（T-ALL）中cCD3、CD7敏感性最高，cCD3特异性强。③急性髓细胞自血病（AML）中CD117、CDl3、CD33敏感性高，CDll7、cMPO的髓系特异性强。④急性淋巴细胞白血病（ALL）中伴髓系抗原表达（My^＋-ALL）占50．0％，主要表达的髓系抗原为CD33、CDl3。AML中伴淋系抗原表达（Ly^＋-AML）占35．0％，主要表达的淋系抗原为CD7。结论①免疫学分型弥补了FAB分型的不足，更能反映白血病细胞的异质性，提高了诊断的准确性。②儿童降ALL最具有诊断价值的抗原是CDl9、HLA-DR、cCD79a，T-ALL最具有诊断价值的抗原是cCD3、CD7。My^＋-ALL主要表达的髓系抗原为CD33、CDl3。③儿童AML最具有诊断价值的抗原为CDll7、CDl3、CD33，而CDll7的髓系特异性优于CDl3、CD33，是鉴别ALL、AML的重要标志，Ly^＋-AML主要表达的淋系抗原为CD7。     

热休克蛋白90α、70、27mRNA在急性白血病细胞中表达的研究

运用RNA分子杂交的方法,观察了热休克蛋白(heat shock protein,HSP)90α、70、27在22例白血病病人细胞,正常血细胞及K562红白血病细胞系中的表达。结果表明:16例白血病病人中,4例急性淋巴细胞白血病(ALL),6例急性非淋巴白血病(ANLL)、1例慢性粒细胞白血病急变期(慢粒急变)和2例骨髓增生异常综合征(MDS)血细胞呈现HSP27高水平表达,较正常血细胞显著增多,ALL(5例)与ANLL(7例)白血病细胞HSP27表达水平无明显改变。检测了7例白血病细胞HSP70的表达水平,除1例ALL及1例MDS明显升高外,其余5例(包括1例ALL,3例ANLL和1例慢粒急变)显著低于正常血细胞。17例白血病病人细胞(包括9例ANLL、5例ALL、2例慢粒急变和1例MDS)HSP90α表达水平均升高,明显高于正常。结果提示:白血病细胞HSP90α表达水平的升高可能与白血病细胞活跃异常增殖有关,而HSP27基因的高表达可能不是某种急性白血病的特殊标志。     

Cyclin A与PCNA在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达

目的 探讨细胞周期蛋白A(cyclin A)和增殖细胞核抗原(PCNA)在B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)中的表达及意义。方法 采用免疫组织化学法检测65例B-NHL及20例反应性增生淋巴结中cyclin A和PCNA蛋白的表达情况。结果 cyclin A和PCNA在B-NHL中的平均标记指数(1abel index,LI)明显高于反应性增生性淋巴结(生发中心以外的淋巴组织);侵袭性B-NHL中cyclin A的LI和PCNA的LI均高于惰性组;cyclin A与PCNA的表达成正相关。结论 cyclin A和PCNA的高表达与B-NHL的发生发展有关,cyclin A的LI与PCNA LI可以作为衡量B-NHL恶性程度的重要指标。     

细胞因子在CD34阳性骨髓细胞中的表达

CD34~ 细胞包含有造血干/祖细胞,而造血干/祖细胞能被IL-3,GM-SCF,G-CSF等诱导分化与增殖。正常的CD34~ 细胞是否参与一些细胞因子的产生尚未被阐明。我们采用逆转录-聚合酶链反应分析了经流式细胞仪分选出的正常骨髓CD34~ 细胞IL-1β,IL-3,IL-4,IL-6,GM-CSF,TNF-α,TNF-β及c-kit基因的表达,并且分析了重组IL-1β,IL-3,IL-7,GM-CSF,PIXY321(IL-3/GM-CSF融合蛋白)及干细胞因子(SCF)对这些细胞因子的调节作用。结果发现新分选出的CD34~ 细胞表达较高水平的IL-1β,c-kit mRNA及低水平的IL-3,TNF-α,TNF-βmRNA。经外源性的细胞因子刺激后,IL-1β,TNF-α及TNF-βmRNA均有不同程度的上调,唯IL-7能使GM-CSF mRNA的表达变为阳性,IL-7亦能显著增强IL-6基因的表达。所有这些细胞因子对c-kit及IL-3基因表达均无明显作用。     

CD44v6及Ki-67在子宫腺肌病中的表达及意义

目的：探讨CD44v6及Ki-67在子宫腺肌病（AM）中的表达及作用。方法：采用免疫组化Envision法检测80例子宫腺肌病患者的异位和在位内膜及30例正常子宫内膜中CD44v6、Ki-67的表达情况。结果：（1）AM异位内膜及在位内膜组织CD44v6的表达强度均高于对照组（P均〈0.05）;（2）AM异位内膜增生期与分泌期Ki-67表达无显著性差异（P〉0.05）;（3）CD44v6与Ki-67在AM异位内膜组织中表达具有相关性（P〈0.05）。结论：CD44v6的表达上调及Ki-67增殖活性的持续存在,两者的协同作用可能促使了AM的发生及发展。     

垂体泌乳素腺瘤中EMMPRIN的表达及临床病理意义

目的探讨泌乳素瘤中EMMPRIN的表达及意义。方法运用免疫组化法检测泌PRL瘤中EMMPRIN、CD34及Ki-67的蛋白表达。结果 EMMPRIN在侵袭性腺瘤中表达率(86.2%)明显高于非侵袭性腺瘤(40.6%),两者比较有显著性差异(P<0.05);在侵袭性腺瘤中EMMPRIN与MVD和Ki-67增殖指数呈正相关。结论 EMMPRIN在PRL腺瘤的表达与侵袭性密切相关,可作为判断PRL腺瘤侵袭性生长的指标;EMMPRIN可能通过诱导细胞增殖与血管生成促进腺瘤侵袭性生长。     

宫颈病变组织中Ki-67、NF-KB的表达与HPV感染的相关性研究

目的 探讨宫颈病变组织中Ki-67抗原(Ki67)、核转录因子κB(NF-κB)的表达与人乳头瘤病毒(HPV)感染的相关性.方法 选取2015年1月至2017年1月在蒙阴县人民医院行手术切除或宫颈活检患者70例(宫颈标本70例)为研究对象,采用免疫细胞化学染色法检测病变组织Ki-67、NF-κB及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并进行Spearman秩相关分析.结果 Ki-67、NF-κB及PCNA在宫颈上皮内瘤变(CIN)和子宫颈浸润性鳞癌组织中的表达率显著高于慢性宫颈炎组织,差异具有统计学意义(P＜0.05);Spearman秩相关分析显示,Ki-67(r=0.582,P＜0.05)和NF-κB(r=0.603,P＜0.05)与PCNA表达呈正相关,Ki-67 (r=0.601,P＜0.05)、NF-κB(r=0.596,P＜0.05)和PCNA(r=0.647,P＜0.05)与HPV感染呈正相关.结论Ki-67、NF-κB在不同宫颈病变组织中的阳性表达率具有差异,且与HPV感染相关,其可能参与宫颈病变过程,可以作为宫颈疾病的鉴别、诊断及评估指标.     

链亲和素-胶体金原位杂交研究急性白血病的髓过氧化物酶基因表达

用链亲和素-胶体金原位杂交(ISH-SAG)检测了87例急性白血病、7株白血病细胞系和7例正常骨髓细胞的髓过氧化物酶(MPO)的基因表达。结果发现,7例正常骨髓细胞几乎不表达MPO mRNA;粒(单核)细胞系和急性髓性白血病(AML)细胞不同程度表达MPO mRNA;淋巴细胞系和急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞不表达MPOmRNA;7例难分类急性白血病(UAL)中,4例表达MPO mRNA并对髓系抗原阳性;诊断为极低分化的AML;2例只表达免疫球蛋白重链基因,考虑为早期B细胞ALL;1例无任何细胞标志,考虑为急性未分化细胞白血病。上述结果表明,用ISH-SAG检测MPOmRNA敏感性高,特异性强,为确诊AML和区分ALL提供了一个更为有用的新手段,特别对识别停滞在细胞分化早期的AML意义更大。