地塞米松对哮喘小鼠气道炎症反应和外周血单核细胞p38MAPK表达的影响

目的：探讨支气管哮喘小鼠急性外周炎症反应和血单核细胞p38MAPK表达的变化及地塞米松（DEX）对其的影响。方法：采用蛋白质印迹和ELISA方法检测PBMCs核蛋白p38MAPK的表达及细胞上清液中IL-4、IL-5的蛋白质浓度。结果：哮喘组PBMCs核蛋白p38MAPK表达及细胞上清液中IL-1、IL-6的蛋白质浓度较正常对照组显著升高（P〈0．01）,DEX处理组核蛋白p38MAPK表达及细胞上清液中IL-1、IL-6的蛋白质浓度较哮喘对照组显著降低（P〈0．01）。通过直线相关分析发现,PBMCs核蛋白p38MAPK表达与培养上清液中IL-1、IL-6蛋白质含量之间均呈显著正相关（r分别=0．72、0．56,P〈0．01）。结论：地塞米松可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症反应,作用机制可能是通过下调外周血单核细胞p38MAPK过度表达,从而抑制依赖于038MAPK信号转到通路的急性气道炎症反应。     

地塞米松对哮喘患者外周血单个核细胞p38MAPK表达的影响

目的探讨支气管哮喘患者外周血单个核细胞(PBMCs)p38MAPK表达的变化及地塞米松(DEX)对其的影响。方法分离培养哮喘患者和正常健康者的PBMCs。分别采用蛋白质印迹和ELISA方法检测PBMCs核蛋白p38MAPK的表达及细胞上清液中IL -4、IL- 5的蛋白质浓度。结果哮喘对照组PBMCs核蛋白p38MAPK表达及细胞上清液中IL -4、IL- 5的蛋白质浓度较正常对照组显著升高(P<0. 001),DEX处理组核蛋白p38MAPK表达及细胞上清液中IL- 4、IL- 5的蛋白质浓度较哮喘对照组显著降低(P<0. 01)。通过直线相关分析发现,PB MCs核蛋白p38MAPK表达与培养上清液中IL- 4、IL- 5蛋白质含量之间均呈显著正相关(r分别=0. 71、0. 64,P均<0. 01)。结论p38MAPK可能参与支气管哮喘的病理生理过程。DEX可能通过作用于p38MAPK这一靶点发挥其抗炎效应。     

地塞米松对哮喘小鼠气道炎症反应和STAT6表达的影响

目的：研究地塞米松对支气管哮喘小鼠急性气道炎症反应的作用及对信号转导子和转录激活子6（STAT6）表达的影响。方法：用免疫组织化学法检测给予地塞米松后哮喘小鼠肺组织中STAT6的表达。结果：哮喘组小鼠肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、嗜酸粒细胞（EOS）绝对值显著高于对照组（P〈0.01）,上述炎症细胞计数地塞米松组比哮喘组明显减少（P〈0.01）。HE染色示地塞米松组小鼠气道炎症反应程度较哮喘组减轻。STAT6在气道上皮细胞表达,哮喘组气道上皮细胞中STAT6表达较对照组增加,地塞米松组STAT6表达与哮喘组比较明显减少,较对照组增加。支气管上皮细胞STAT6蛋白与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关。结论：地塞米松可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症反应,作用机制可能是通过下调肺脏组织中STAT6蛋白的过度表达,从而抑制依赖于STAT6/IL-4通路的急性气道炎症反应。     

柴胡皂苷d通过调控p38 MAPK/NF-κB通路减轻过敏性哮喘小鼠的气道炎症反应

目的：探讨柴胡皂苷d对卵清蛋白(OVA)诱导的过敏性哮喘小鼠p38丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB(p38 MAPK/NF-κB)信号通路及气道炎症的影响。方法：60只BALBc小鼠随机分为正常组、模型组、柴胡皂苷d低（25 mg/kg）、中（50 mg/kg）、高剂量组（100 mg/kg）、阳性对照组（地塞米松,10 mg/kg）,每组10只。蛋白免疫印迹法检测小鼠肺组织中p38 MAPK/NF-κB通路相关蛋白的表达。结果：与模型组相比,柴胡皂苷d低、中、高剂量组、阳性对照组小鼠气道阻力参数Penh值、肺泡灌洗液中炎性因子水平、炎性细胞数量、肺组织炎症细胞浸润、肺组织中p38 MAPK/NF-κB通路相关蛋白表达降低（P<0.05）。结论：柴胡皂苷d可减轻OVA诱导的过敏性哮喘小鼠的气道炎症反应,其机制可能与抑制p38 MAPK/NF-κB通路有关。     

基于p38MAPK信号通路中药治疗支气管哮喘的研究进展*

支气管哮喘（bronchial asthma,简称哮喘）是一种常见的慢性气道炎症性疾病,具有发病率高且易反复的特点,给家庭和社会造成沉重负担。而p38MAPK信号通路作为生物体内细胞多种信号传导途径,与哮喘的发生发展息息相关。本文主要从p38MAPK信号通路与哮喘的关系,以及中药基于p38MAPK通路作用于哮喘的机制研究方面进行综述,以期为进一步研究提供参考。     

急性胰腺炎患者外周血单个核细胞p38 MAPK信号通路的变化

目的： 探讨急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)丝裂原活化蛋白激酶p38（p38 MAPK）信号水平的变化及其与疾病严重程度的关系。方法： 收集轻型胰腺炎（mild acute pancreatitis,MAP）组29例及重症胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）组23例, 健康对照组21例。荧光实时定量PCR检测患者PBMC p38 MAPK基因表达水平,蛋白质印迹法检测PBMC p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK（P-p38 MAPK）的水平。统计处理用单因素方差分析（One-Way Anova）和LSD法。结果： p38 MAPK基因表达水平,SAP组较对照组升高了11.7%（P＜0.05）,但MAP组与对照组比较差异无统计学意义;p38 MAPK总蛋白量SAP组较对照组增加了18.7% （P＜0.05）,但MAP组与对照组相比较差异无统计学意义;磷酸化p38 MAPK水平SAP 组较对照组和MAP组分别提高了444.4%（P＜0.01）和44.1%（P＜0.05）,MAP组较对照组增加了27.8%（P＜0.05）。结论： p38 MAPK磷酸化水平在AP患者PBMC中显著升高,并与AP严重程度呈正相关;AP患者PBMC p38 MAPK基因表达水平和蛋白水平变化较小。     

p38蛋白激酶信号通路对支气管哮喘小鼠骨髓CD34~+祖细胞迁移的调控作用

目的:探讨p38蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对哮喘小鼠骨髓CD34+祖细胞迁移的调控作用。方法:将小鼠随机分为3组:模型组[卵白蛋白(ovalbumin,OVA)组]、吡啶咪唑类衍生物干预组(SB203580组)、对照组(NS组),每组20只。前两组以OVA致敏和激发建立哮喘模型,其中SB203580组于抗原激发前经腹腔注射SB203580。于最后一次抗原激发后48 h,留取骨髓悬液、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及外周血,分别行细胞计数、流式细胞仪分析及细胞涂片。留取肺组织制备组织切片。体外趋化实验检测各骨髓CD34+祖细胞对eotaxin的趋化反应和Western Blot检测骨髓CD34+祖细胞上磷酸p38MAPK蛋白的表达。结果:OVA组小鼠BALF、外周血中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞(eosinophil,Eos)数及CD34+细胞数较NS组明显增加,而骨髓中CD34+细胞数较NS组无明显变化(P>0.05),体外趋化实验表明OVA组小鼠骨髓CD34+祖细胞对eotaxin趋化反应明显增强,与NS组相比差异有统计学意义(P<0.01),WesternBlot显示OVA组小鼠骨髓中CD34+祖细胞上磷酸化p38MAPK蛋白的表达明显高于NS组(P<0.01);SB203580组上述指标较OVA组明显降低(P<0.01),肺组织Eos浸润及黏液高分泌亦较OVA组明显减轻。结论:通过SB203580抑制p38MAPK的活性可以降低哮喘小鼠骨髓中CD34+祖细胞的迁移,从而抑制气道嗜酸性粒细胞炎症,为哮喘的防治提供新视角。     

黄芩苷对哮喘大鼠 p38 MAPK 信号通路影响初探

目的：初步探讨黄芩苷防治支气管哮喘的作用机理。方法用卵蛋白致敏大鼠制备支气管哮喘动物模型,经黄芩苷干预治疗,运用免疫组化法及 Western Blot 法检测各组大鼠肺组织匀浆中 p38 MAPK 磷酸化蛋白表达量。结果两种检测方法均显示,p38 MAPK 磷酸化蛋白水平在模型组中有明显的增加,地塞米松组、黄芩苷高剂量组和低剂量组的 p38 MAPK 磷酸化蛋白水平均低于模型组（P ＜0．05）。结论黄芩苷能有效治疗哮喘的作用与抑制哮喘大鼠 p38 MAPK 信号通路的表达密切相关。     

哮喘大鼠p38mRNA及磷酸化蛋白水平的动态变化

目的研究哮喘大鼠p38mRNA及磷酸化蛋白（P—p38）水平的动态变化。方法取SPF级雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组及哮喘组（分为哮喘0．5、1、3、12h组,每组10只。培养各组大鼠外周血单个核细胞（PBMCs）。分别应用RT—PCR、Western Bloting技术检测各组大鼠PBMCs p38mRNA及P—p38的相对表达水平。结果哮喘0．5、1、3h组PBMCs p38mRNA及P—p38蛋白表达水平均较正常对照组均显著升高（均P〈0．01）,哮喘12h组与正常对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。正常对照组及哮喘0．5、3、12h组p38 mRNA及P—p38蛋白表达水平均较哮喘1h组显著降低（均P〈0．01）。结论P—p38可能在哮喘气道炎症和重塑中发挥重要作用。深入研究p38在哮喘发病机制中的具体调控作用,可能对支气管哮喘的临床防治有重要意义。     

p38 MAPK信号通路与糖皮质激素抵抗型哮喘的关系

支气管哮喘是最常见的呼吸道疾病之一,其治疗主要以糖皮质激素为主,吸入性糖皮质激素作为局部气道用药可通过减少免疫炎性介质的生成,抑制炎性因子的产生。然而,临床上部分患者在保证依从性的前提下规律用药后,药效差,症状未能控制,甚至还出现激素抵抗。糖皮质激素抵抗型哮喘是所有哮喘患者中病情最重的一种类型,p38促分裂原活化的蛋白激酶(p38 MAPK)在激素抵抗型哮喘的发病过程中起着重要作用,因此了解p38 MAPK及其在激素抵抗型哮喘中发挥的作用,能够为今后激素抵抗型哮喘的诊治提供一定的参考作用。     

阿奇霉素对支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞功能的影响

目的探讨阿奇霉素对支气管哮喘患儿的疗效及其对外周血辅助性T淋巴细胞功能的影响。方法86例支气管哮喘患儿随机分为观察组和对照组各43例,比较两组的疗效及临床症状、体征消失时间以及血清IFN-γ、IL-4和IFN-γ／IL-4比值的变化情况。结果观察组的疗效明显优于对照组1,且观察组的临床症状改善程度较对照组1更明显（P〈0．05）。观察组和对照组1治疗后的IFN-1均较治疗前明显升高,IL-4较治疗前明显降低（P〈0．05）,IFN-γ／IL-4比值较治疗前明显升高（P〈0．05）,且观察组较对照组1改善更明显（P〈0．05）,更接近健康对照组。结论阿奇霉素治疗支气管哮喘患儿疗效确切,明显改善患儿的临床症状、体征,考虑是其通过上调IFN—γ的表达,抑制炎症因子IL-4的表达,从而调节Th1/Th2细胞失衡而发挥抗炎及免疫调节作用。     

氯胺酮对糖尿病神经痛大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

目的:观察氯胺酮对糖尿病神经病理痛大鼠神经系统中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的影响,探讨其作用的信号机制。方法:16只雌性Wistar大鼠注射链脲菌素复制糖尿病神经病理痛模型。随机分为糖尿病组(D组)和氯胺酮组(K组),另设对照组(C组)。K组大鼠经氯胺酮处理。均测机械痛阈和神经传导速度(NCV),免疫组化和ELISA法检测脊髓和背根神经节(DRG)磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)水平。结果:与对照组比较,糖尿病组和氯胺酮组MWT和NCV均下降,脊髓和DRG中p-p38MAPK水平均升高(P<0.05),但糖尿病组变化幅度明显(P<0.05)。结论:氯胺酮对大鼠糖尿病神经病理痛有疼痛治疗和神经保护作用,其机制可能是阻断p38MAPK信号通路。     

P38蛋白激酶抑制剂SB203580对哮喘小鼠肥大细胞活化的影响

目的:探讨P38蛋白激酶抑制剂SB203580对哮喘小鼠肥大细胞活化的作用.方法:将BALB/c小鼠30只随机分为3组,即对照组、哮喘组、SB203580干预组,每组10只.哮喘组、SB203580干预组分别予以鸡卵清蛋白(OVA)致敏和激发.每次激发前1 h,SB203580干预组予以SB203580(5 mg/kg...     

慢性粒细胞白血病患者外周血单个核细胞诱生树突细胞的体外研究

目的 :体外诱生慢性粒细胞白血病 ( CML)患者外周血单个核细胞 ( PBMNCs)为树突细胞( DCs)。方法 :CML患者 PBMNCs在含 GM- CSF、IL- 4、TNF- α的培养液中培养 1 4d,倒置显微镜、电镜下观察细胞形态 ,流式细胞仪检测细胞的表面标志 ,免疫磁珠 ( MACS)富集所诱生的 DCs,用D- FISH、RT- PCR方法检测 DCs的白血病源性。利用 MTT法检测所诱生 DCs刺激 T细胞增殖能力。结果 :所诱生的细胞高表达 CD80 、CD86、CD1a、HLA- DR,电镜下细胞表面有丰富突起 ,细胞浆内有丰富线粒体 ,D- FISH、RT- PCR检测所诱生的 DCs具有 bcr/abl融合基因。CML DCs具有刺激 T细胞增殖能力。结论 :体外利用 CML患者 PBMNCs成功诱导生成了来源于 CML细胞的 DCs( CML DCs)。     

布地奈德对支气管哮喘患儿体内Th17细胞的影响及临床意义

目的 探讨布地奈德治疗儿童支气管哮喘对患儿体内Th17细胞的影响,从而指导临床用药.方法 收集支气管哮喘患儿60例,轻度组20例,中度组20例和重度组20例,另选健康幼儿15例作为正常对照.使用布地奈德治疗哮喘患儿,分别于治疗前、治疗后4周、治疗后8周和治疗后12周分离各组外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测Th17细胞和IL-22＋CD4＋细胞;采用ELISA检测IL-17和IL-22水平.结果 与对照组相比,哮喘患儿体内Th17细胞和IL-22＋ CD4＋细胞及其相关细胞因子IL-17和IL-22明显增加（P＜0.05）,且增加的程度与病情严重程度相关.使用布地奈德治疗后,哮喘患儿体内IL-17和IL-22水平下降,且下降程度随布地奈德使用时间延长而增加.结论 Th17细胞及其细胞因子在儿童支气管哮喘的发病中起着十分重要的作用,布地奈德可通过抑制Th17细胞产生IL-17和IL-22控制支气管哮喘.     

脊髓p38丝裂原活化蛋白激酶对神经痛大鼠热痛觉过敏影响的研究

目的:观察脊髓p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的激活对神经病理性疼痛大鼠热痛觉过敏的影响,探讨神经痛的机制。方法:40只雄性SD大鼠,建立坐骨神经结扎性损伤(CCI)疼痛模型,随机分成五组,对照组、SB 0.1μg组、SB0.5μg组、SB2.5μg组和SB5μg组,(n=8),CCI后7 d,鞘内注射5%二甲基亚砜或不同剂量的p38 MAPK抑制剂SB203580(0.1μg、0.5μg、2.5μg、5μg)10μL,在给药前和给药后0.5 h、3 h、6 h、12 h、24 h,用热辐射刺激仪测定大鼠术侧后爪热缩足反射潜伏期(TWL)。另24只大鼠随机分为假手术组、CCI组、溶媒对照组和SB203580组(n=6),分别于假手术后7d、CCI后7 d、CCI后7 d鞘内注射5%二甲基亚砜后第6 h或SB203580 5μg后第6 h取材脊髓,用免疫组织化学方法观察脊髓背角磷酸化p38 MAPK表达的变化。结果:鞘内注射SB203580剂量依赖性地延长了TWL(P<0.05或P<0.01),SB203580同时抑制脊髓背角磷酸化p38 MAPK的表达。结论:脊髓p38 MAPK的激活参与了CCI...     

哮喘患儿外周血RORC和FOXP3mRNA表达水平的变化及其意义

 摘要：【目的】研究淋巴细胞亚群Th17与Treg上游调控基因RORC、 Foxp3mRNA在支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达变化,并探讨其临床意义。【方法】采用荧光实时定量PCR技术分别检测20例哮喘发作期(年龄8.5 ± 2.3)和20例哮喘缓解期(年龄9.2 ± 1.8)外周血单个核细胞的RORC和Foxp3 mRNA表达水平,并与10例健康对照组(年龄8.0 ± 1.6)进行比较。并将哮喘患儿RORC和Foxp3 mRNA表达水平与其同期肺功能第一秒用力呼气容积（FEV1）进行相关分析。【结果】哮喘发作组RORCmRNA水平显著高于缓解组和正常对照组（5.41 ± 0.12 vs 3.33 ± 0.27 vs 3.78 ± 0.13, P < 0.01）;哮喘发作组Foxp3mRNA水平显著低于缓解组和正常对照组（3.34 ± 0.12 vs 4.43 ± 0.07 vs 4.13 ± 0.04,P < 0.01）;缓解组和正常对照组相比较,RORC和Foxp3 mRNA水平均无明显差异（P > 0.05）。哮喘发作组RORCmRNA/Foxp3mRNA比值明显高于缓解组和正常对照组（1.68 ± 0.09 vs 0.76 ± 0.06 vs 0.92 ± 0.04, P< 0.01）。Pearson相关分析显示,哮喘患儿外周血RORC mRNA水平与FEV1成负相关,而Foxp3 mRNA水平与FEV1成正相关（r分别为-0.58和 0.52,P < 0.01）。【结论】RORCmRNA/Foxp3mRNA在发作期哮喘患儿存在失衡表达,提示Th17/ Treg失衡可能在哮喘的急性发作及肺功能损伤中起着重要作用。