氯化锰对PC12细胞凋亡和线粒体跨膜电位的影响

目的 探讨氯化锰(MnCl2)对人神经细胞株PC12细胞凋亡和线粒体跨膜电位的影响,揭示锰毒性作用机制.方法 取对数生长期PC12细胞,用含100、300、500、700、900 μmol/LMnCl2的培养液,分别作用24、48、72 h,采用四甲基偶氮唑蓝(M1T)比色实验检测细胞生长状况,流式细胞仪检测细胞凋亡和线粒体跨膜电位.结果 24 h后,700和900 μmol/L MnCl2处理组细胞抑制率与对照组比较差异具有显著性(P<0.05);48、72 h后,所有的MnCl2处理组细胞抑制率与对照组比较差异具有显著性(P<0.05);48 h后,500、700和900 μmol/L MnCl2处理组与对照组比较细胞G1期呈递增趋势,S期呈递减趋势,G2/M百分比和细胞凋亡率升高(P<0.05);各MnCl2处理组与对照组比较荧光强度呈不同程度下降(P<0.05).结论 MnCl2可引起PC12细胞生长抑制,导致线粒体跨膜电位下降,引起细胞凋亡.     

葡多酚对胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的　观察葡多酚 (GPC)对氧化损伤引发的胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。方法　在体外培养的胸腺细胞中加入不同浓度的GPC和培养液中浓度为 12 5 μmol L的H2 O2 ,共同培养 2h ,采用流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位水平。结果　氧化损伤组细胞凋亡率为 (2 9 5 3± 3 8) % ,线粒体膜电位为 2 7 2 4± 2 2 (D值 ) ,5 0mg LGPC保护组则分别为 (8 6 1± 1 2 ) %和 87 5 5± 4 7(D值 ) ,两组间的差异均有显著性 (P <0 0 5 )。结论　GPC可有效抑制氧自由基引发的胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的下降 ,对胸腺细胞的氧化损伤有良好防护作用     

四溴双酚A对HepG2细胞线粒体膜电位及凋亡的影响

目的研究不同浓度四溴双酚A(TBBPA)暴露对人肝癌(Hep G2)细胞凋亡的影响。方法以不同浓度TBBPA染毒Hep G2细胞,采用MTS法检测细胞存活率,JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位变化,以AnnexinⅤ与PI联合标记并使用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 Hep G2细胞存活率随着TBBPA暴露浓度升高相应降低;与对照组相比,20和30μmol/L TBBPA暴露组Hep G2细胞线粒体膜电位显著下降(P0.01);Hep G2凋亡细胞随TBBPA暴露浓度升高有增加趋势,其中30μmol/L TBBPA暴露组与对照组相比差异显著(P0.01)。结论 TBBPA可能通过降低线粒体膜电位引起细胞凋亡。     

蒿甲醚对大鼠神经元细胞线粒体跨膜电位与细胞膜通透性的影响

目的：通过观察蒿甲醚对原代培养的神经元细胞和传代培养的嗜铬细胞瘤细胞（PC－12）的线粒体跨膜电位以及细胞通透性的影响，探讨蒿甲醚引起神经元细胞毒性的作用方式和毒性机制。方法：将蒿甲醚分4个剂量组（0、10^-5,10^-4,10^-3mol/L)处理原代培养的神经元细胞和嗜铬细胞瘤细胞（PC－12）6h后，用碘化丙啶（PI）和罗丹明123（Rhodamine 123)荧光染料染色30min，PBS清洗两次后通过流式细胞仪测定细胞内PI和Rhodamine 123荧光染料的荧光强度来分析细胞线粒体跨膜电位和细胞膜通透性的变化。结果：（1）蒿甲醚能增强原代培养的神经元细胞和传代培养的嗜铬细胞瘤细胞（PC－12）内的PI荧光强度，作用6h后，与正常对照组细胞相比，药物组正常细胞数减少或消失，细胞内PI的荧光强度随蒿甲醚浓度的升高而增强，峰向右移动，具有显著的剂量－效应关系；（2）蒿甲醚可明显降低原代培养的神经元细胞和传代培养的嗜铬细胞瘤细胞（PC－12）内的Rhodamine 123的荧光强度，与正常对照组细胞相比，药物组正常细胞数减少，细胞内Rhodamine 123的摄取量明显减少，荧光强度随蒿甲醚浓度的升高而下降，峰向左移动，具有显著的剂量－效应关系。结论：蒿甲醚与原代培养的神经元细胞和传代培养的嗜铬细胞瘤细胞（PC-12)作用后，线粒体跨膜电位下降和细胞膜通透性增高可能是引起神经元细胞毒性的机制之一。     

脑源性神经营养因子预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激及神经细胞凋亡的影响

目的探讨不同剂量的脑源性神经营养因子（BDNF）预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注（I／R）损伤氧化应激及神经细胞凋亡的影响。方法采用大鼠大脑中动脉线栓法（MCAO）建立局灶性脑I／R损伤模型,BDNF于缺血前12h经侧脑室注射给药。采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量,TUNEL法检测脑皮层凋亡神经细胞,免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与I／R组比较,BDNF预处理各组脑组织SOD活性明显增强,MDA含量明显降低,给药各组中脑皮层Bcl-2蛋白表达明显增高,而Bax蛋白表达及TUNEL阳性细胞指数均明显降低（P〈0．01）;在BD-NF预处理各组中,以BDNF预处理高剂量组脑组织SOD活性及Bcl-2蛋白表达最高、MDA含量和Bax蛋白的表达以及TUNEL阳性细胞指数最低（P〈0．01）。结论不同剂量的BDNF预处理均能明显减轻脑I／R后氧化应激和神经细胞凋亡,具有不同程度的脑保护作用,其保护作用与BDNF预处理的剂量有关。其机制可能与BDNF预处理能够提高机体内源性抗氧化物质的含量及调节凋亡相关基因的不同表达有关。     

蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的观察蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后的细胞凋亡率和相关蛋白（Bcl-2、Bax）的表达,探讨蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血损伤的保护作用。方法60只Wistar大鼠随机分成5组：空白对照组、模型对照组、阳性药物舒血宁组、蒺藜果皂苷高剂量组和蒺藜果皂苷低剂量组。线栓法阻断一侧大脑中动脉,缺血24h制成脑缺血模型。流式细胞仪检测细胞凋亡率和蛋白的表达水平。结果模型组的细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显高于阳性药物组和蒺藜果皂苷高、低剂量组,而模型组的Bcl-2蛋白表达明显低于阳性药物组和蒺藜果皂苷高、低剂量组（P〈0.05）。结论蒺藜果皂苷能够抑制细胞凋亡,增加Bcl-2蛋白的表达而降低Bax蛋白的表达水平。     

兔脑缺血再灌注后PPARγ表达对神经元凋亡的影响

目的观察脑缺血再灌注损伤后过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达对神经元凋亡的影响。方法日本大耳白兔72只,参照Pulsinelli四动脉阻断法建立兔全脑缺血90min/再灌注6h,1d,3d,7d,14d和28d的动物模型。TUNEL法染色观察脑皮质、海马和纹状体区神经元凋亡,免疫组织化学法检测PPARγ阳性神经元在各区的表达。结果脑缺血90min再灌注6h,1d,3d,7d,14d皮质、海马和纹状体区凋亡神经元明显增加(t皮质=3.86,P<0.01;t海马=4.96,P<0.01;t纹状体=2.91,P<0.05)。脑缺血再灌注6h,1d,3d,7d,14d,28d,PPARγ阳性神经元在各区明显增加(t皮质=7.98,P<0.01;t海马=7.65,P<0.01;t纹状体=6.98,P<0.01),其中再灌注6h,7d,14d,28d阳性神经元呈高值表达。结论脑缺血再灌注损伤后PPARγ表达能有效抑制神经元凋亡。     

活性氧、线粒体膜电位在亚砷酸钠诱导凋亡中作用

有研究表明,砷可以引起机体内砷致机体脂质过氧化的产生及抗氧化能力降低,从而造成机体的氧化损伤^(1-2)。而肝脏是砷主要累及的靶组织⁽³⁾,但砷对肝细胞的作用特点研究较少。研究提示,活性氧(ROS)和线粒体膜电位(ΔΨm)在细胞凋亡中发挥着重要作用^(4-5)。为了进一步探讨砷对肝细胞的凋亡作用机制,本研究采用流式细胞仪检测细胞凋亡率和胞浆中ROS、ΔΨm水平,并探讨ROS和ΔΨm在NaAsO₂诱导L-02肝细胞凋亡过程中的作用。     

脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡与CIDE-B表达的关系

目的研究脑缺血/再灌注损伤后诱导细胞死亡DNA片段因子-45样因子-B（CIDE-B）表达在神经元凋亡的作用。方法成年健康雄性Wistar大鼠24只,随机分为假手术组（n=6）和脑缺血30min（n=6）、90min（n=6）和120min（n=6）再灌注组。参照Pusinelli四动脉阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。采用TUNEL法染色观察海马区神经元凋亡,免疫组织化学检测CIDE-B表达。结果大鼠脑缺血30min、90min和120min,海马区凋亡神经元数量较假手术组均显著增加（t=3.12,P〈0.05;t=3.94,P〈0.01;t=2.47,P〈0.05）;同时,CIDE-B阳性神经元数量较假手术组均有明显增加（t=2.46,P〈0.05;t=3.93,P〈0.01;t=2.28,P〈0.05）。结论脑缺血/再灌注损伤后CIDE-B表达与神经元凋亡呈时相依赖性。     

过钒酸钠对无EPO状态下BET-2细胞线粒体膜电位与细胞凋亡的影响

目的:观察酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphotases,PTP)抑制剂过钒酸钠(sodium Pervanadate,Per)对去除EPO状态下BET-2细胞存活、增殖、线粒体膜电位改变与细胞凋亡的影响。方法:应用MTT法、流式细胞仪等方法观察Per对EPO依赖的小鼠源性髓系白血病细胞株BET-2细胞在无EPO状态下细胞存活、增殖、细胞线粒体膜电位改变、细胞凋亡的影响。结果:BET-2细胞对EPO有良好的依赖性,在无EPO状态下BET-2细胞增殖停滞、细胞线粒体膜电位下降,并出现细胞凋亡;适当浓度Per(1~31.25μmol/L)能促进无EPO状态下BET-2细胞存活、增殖,维持细胞线粒体膜电位,减少细胞凋亡。结论:通过Per等调控PTP活性可能促进EPO依赖的BET-2细胞在EPO缺乏状态下的存活、增殖。     

Gastroprotective Effects of Ganoderma lucidum Polysaccharides with Different Molecular Weights on Ethanol-Induced Acute Gastric Injury in Rats

Ganoderma lucidum is known as a medicine food homology that can ameliorate gastrointestinal diseases. To evaluate the gastroprotective effects on different Ganoderma lucidum polysaccharides (GLPs), GLP was separated into three parts with different molecular weights using 100 kDa, 10 kDa, and 1 kDa membranes. The mitigation effects of different GLPs on ethanol-induced acute gastric injury were observed in rats. After pretreatment with different GLPs, especially GLP above 10 kDa, the symptoms of gastric mucosal congestion and bleeding were improved; serum myeloperoxidase, inflammatory factor, and histamine were decreased; and antioxidant activity and defense factors (NO and EGF) were increased. Results showed that GLP with different molecular weights had a dose-dependent effect in alleviating alcohol-induced gastric injury. The underlying mechanism might be related to regulating anti-oxidation, promoting the release of related defense factors, reducing inflammatory factors, and reducing the level of histamine in serum. The current work indicated that GLPs above 10 kDa could be applied as natural resources for producing new functional foods to prevent gastric injury induced by ethanol.     

亚低温对新生大鼠缺血脑凋亡细胞数和bcl—2表达的影响

目的 明确缺氧缺血性脑损害（HIBD）后亚低温干预对脑组织bcl-2和凋亡细胞数的影响其及相关性。方法 建立新生大鼠HIBD模型,31℃亚低温干预,采用原位末端标记技术观察脑组织凋亡细胞数,免疫组化法观察脑bcl-2表达水平,作统计分析。结果 新生HIBD大鼠8日龄时凋亡细胞大量出现（P＜0．01）,并达高峰,亚低温干预使8日龄凋亡细胞数减少（P＜0．01）,高峰后移;新生HIBD大鼠8日龄开始有bcl-2大量表达（P＜0．01）,8－10日龄其水平最高,亚低温干预使bcl-2表达水平下降（P＜0．01）;8日龄时bcl-2水平与8日龄脑海马及皮质凋亡细胞数呈等级正相关,相关系数分别为0．88及0．71（均为P＜0．05）;10日龄bcl-2水平与10日龄海马凋亡细胞数等级正相关,相关系数0．75（P＜0．05）,与皮质凋亡细胞数无相关意义。结论 新生大鼠HIBD后早期发生凋亡过程,bcl-2水平与凋亡数一致;亚低温干预使凋亡过程延缓,高峰时间的调亡细胞数及bcl-2水平降低,从而保护脑组织。     

血塞通对大鼠脑缺血再灌注损伤保护的观察

目的：探讨血塞通注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：SD大鼠150只,雌雄不拘,采用Pulsinelli方法建立大鼠急性全脑缺血/再灌注型;按照随机数字表法分为三组,分别为假手术组,脑缺血再灌注组即对照组和血塞通组,分别于再灌注后3、6、12、24和48 h 5个时间点处死大鼠取出脑组织,每组10只。血塞通组于再灌注时给予血塞通注射液（5 mg/100 g）腹腔内注射后,其他组给予等容量的生理盐水（0.5 mL/kg）腹腔内注射后,均每间隔6 h等量注射;检测用于脑组织匀浆液的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）。结果：脑缺血再灌注期间,体内SOD减少,MDA增多,对照组与假手术组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）,提示在脑缺血再灌注期间氧自由基大量生成而清除减少。而血塞通组与对照组相比较,SOD增多,MDA减少,两组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：血塞通注射液对于大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,可减少氧自由基的产生。     

大鼠脑缺血预处理后脑组织内皮素含量的改变及其意义

目的探讨脑缺血预处理后脑组织内皮素(ET-1)含量的变化及其与脑缺血耐受产生之间的关系。方法采用改良四血管阻断法对实验大鼠分组进行全脑缺血预处理,用RIA法测定大鼠脑组织中ET-1含量。结果实验鼠四血管阻断(预处理)3min后12h组、24h组脑组织ET-1含量均显著高于对照组(假手术组)(P<0.05),72h组显著低于对照组(P<0.05)。结论大鼠短暂的非不可逆损伤性3min脑缺血灌注72h后脑组织中ET-1含量显著降低,这可能是脑缺血耐受保护机制的一个重要因素。     

阿维菌素对大鼠大脑皮层中神经代谢酶的影响

目的研究阿维菌素对大鼠神经系统的神经毒性作用以及对大鼠大脑皮层中神经代谢酶的影响,探讨阿维菌素的神经毒性作用机制。方法将健康清洁级成年Wistar大鼠72只按体重随机分为高(5 mg/kg)、低剂量(2.5 mg/kg)阿维菌素染毒组和溶剂对照组(生理盐水),每组24只,雌雄各半。采用经口灌胃方式染毒,隔日灌胃1次,共染毒3次,灌胃剂量为20 ml/kg。在染毒结束后第7、14和21天,称量各组大鼠体重和大脑重量,并计算大脑系数。按照试剂盒使用说明书测定大脑皮层中乳酸脱氢酶(LDH)、谷氨酰胺合成酶(GS)、肌酸激酶(CK)以及钙调神经磷酸酶(CaN)活力。结果高剂量阿维菌素染毒组大鼠染毒后出现明显兴奋症状,表现为烦躁,多动,互相厮打,至染毒后第7天时,兴奋症状基本消失,而表现出一定的抑制症状,如闭目静卧,四肢无力,站立不稳等。低剂量阿维菌素染毒组的症状表现不明显。各阿维菌素染毒组体重、大脑重量及其间大脑系数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与溶剂对照组比较,各阿维菌素染毒组大脑皮层中乳酸脱氢酶(LDH)、谷氨酰胺合成酶(GS)和肌酸激酶(CK)活力较高,钙调神经磷酸酶(CaN)活力较低,差异多有统计...     

不同持续时间亚低温对缺血新生鼠脑的保护作用

目的 研究亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）形成后,其保护作用的干预最短有效持续时间。方法 建立HIBD新生大鼠模型,通过HE染色、电镜、原位末端标记手段对比观察HIBD新生大鼠亚低温干预后不同时间各脑区的凋亡细胞等。结果 常温组HIBD后24小时为凋亡细胞表达高峰,亚低温组HIBD后24小时凋亡细胞数目减少,凋亡高峰延迟出现,持续时间6、15小时比3小时保护作用明显,持续6小时与15小时脑保护作用相近。结论 HIBD后31℃亚低温干预可明显抑制凋亡的表达,保护脑神经,持续时间越长保护作用越明显,超过6小时之后延长干预时间无意义。     

高压氧预处理对宫内缺氧缺血大鼠脑组织SOD活性、MDA含量的影响

目的 观察高压氧（HBO）预处理对宫内缺氧缺血大鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量的影响,探讨HBO预处理对宫内缺氧缺血大鼠的神经保护作用及机制。方法 给予处理组孕鼠产前HBO预处理,临产时建立宫内缺氧缺血模型,测定生后48小时脑组织SOD活性及MDA含量。结果 宫内缺氧缺血大鼠脑组织SOD活性下降,MDA含量升高,与对照组相比差别显著（P＜0．01）。HBO预处理组与模型组比较SOD活性升高,而MDA含量下降（P＜0．01）。结论HBO预处理能提高、诱发SOD生成和活力,对宫内缺氧缺血大鼠脑组织脂质过氧化及自由基清除系统具有有益的调节作用,HBO预处理能够提高脑组织对缺氧缺血的耐受性。     

尼莫地平防治胎鼠宫内窘迫脑损害的实验研究

为探讨尼莫地平是否对胎鼠宫内窘迫脑损害有保护作用，本研究采用动物试验，对２０天胎龄ＳＤ大鼠胎鼠５６只随机分为５组；正常对照组，窘迫对照组，以尼及纪莫地平治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。对母鼠腹腔注射民莫地平（１ｍｇ／ｋｇ）的时间分别为钳夹进入每个胎盘的分支血管前２０分钟、钳夹同时与再灌注同时。再灌注３０ｍｉｎ后检测胎鼠脑细胞内外 钙、钠、钾含量。结果发现（１）存在缺血缺氧的各组胎鼠脑细胞出现细胞内钙超载；（２     

硒对沙土鼠脑缺血再灌注的保护作用及其作用机制研究

目的 研究亚硒酸钠对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 将50只沙土鼠随机分为5组，Ⅰ组：假手术组；Ⅱ组：缺血灌注1天处死组；Ⅲ组：缺血再灌注4天处死组；Ⅳ组：硒处理、缺血再灌1天处死组；Ⅴ组：硒处理、缺血再灌注4天处死组。采用夹闭双侧颈动脉法制备沙土鼠脑缺血再灌注模型，焦油紫染色，光镜下观察各组海马CAl区神经细胞的形态变化，电镜下超微结构变化。同时测定脑组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果 硒处理组沙土鼠脑缺血再灌注后，神经细胞病理形态损伤较轻，SOD、GSH-PX含量较高，MDA含量较低。结论 硒对沙土鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能和增强脑缺血再灌注早期脑组织中SOD、GSH-PX的活性，抑制氧自由基损伤，减轻脂质过氧化反应有关。