妊娠高血压疾病孕妇胎盘凋亡相关基因的表达

目的:探讨正常妊娠及妊娠高血压疾病(HDCP)孕妇胎盘组织凋亡相关基因Survivin、Bcl-2和Caspase-3的表达及其相互关系。方法:应用免疫组化的方法(S-P法)检测101例HDCP(其中轻度子痫前期51例、重度子痫前期50例,分别为轻度组、重度组)及62例正常晚孕(对照组)胎盘组织Survivin、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果:①Survivin主要定位于绒毛细胞滋养细胞胞浆内,在重度组表达显著低于轻度组及对照组(P<0.05);②Bcl-2主要定位于合体滋养细胞胞浆内,Bcl-2阳性表达在各组之间无显著性差异(P>0.05)。③Caspase-3主要定位于合体滋养细胞及细胞滋养细胞胞浆内,Caspase-3表达在轻度组、重度组显著高于对照组(P<0.01)。④Survivin与Caspase-3在两组胎盘组织中表达呈负相关(r=-0.208,P=0.008<0.01);Bcl-2与Caspase-3在两组胎盘组织中表达呈负相关(r=-0.199,P=0.011<0.05);Sur-vivin与Bcl-2基因表达无相关性(P>0.05)。结论:在妊娠高血压疾病患者胎盘组织中Survivin基因表达下调、Caspase-3基因表达上调、Bcl-2基因表达无明显变化。妊娠高血压疾病的发病机制可能与Survivin及Caspase-3表达变化有关。     

Survivin、Caspase-3在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:探讨凋亡相关蛋白Survivin(生存素)和Caspase-3(半胱氨酸蛋白酶-3)在子痫前期患者与正常妊娠妇女胎盘组织中的表达规律及其在子痫前期发病过程中可能的机制。方法:随机选取子痫前期患者60例(轻度组25例,重度组35例)和正常妊娠孕妇30例作为病例组和对照组,应用免疫组织化学(SABC)法对3组胎盘的Survivin、Caspase-3进行标记,通过彩色病理图像分析系统对染色结果进行定量检测并分析。结果:①Survivin在子痫前期重度组表达低于轻度组及对照组,差异有统计学意义(P<0.01);轻度组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);②Caspase-3在子痫前期重度组表达高于轻度组及对照组,轻度组表达高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);③Survivin与Caspase-3在3组胎盘组织中表达呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。结论:子痫前期患者胎盘组织中凋亡相关蛋白Survivin表达下调、Caspase-3表达上调,Survivin及Caspase-3的表达变化可能与子痫前期的发病机制有关。     

RECK和MMP-9在大肠癌组织中的表达及其相互关系

目的 检测RECK和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在大肠癌及正常大肠黏膜组织中的表达,探讨其在大肠癌的发生、发展及浸润和转移中的作用.方法 应用免疫组织化学法检测50例大肠癌组织和20例正常大肠黏膜组织中RECK和MMP-9的表达情况.结果 RECK在大肠癌组织中的阳性表达率为64%(32/50),明显低于在正常大肠黏膜组织中的阳性表达率(100%,20/20)(P<0.05).并随肿瘤分化程度的降低、Dukes分期的增高而降低.MMP-9在大肠癌组织中阳性表达率为68%(34/50),明显高于在正常大肠黏膜组织中的阳性表达率(20%,4/20)(P<0.05),并随肿瘤分化程度的降低、Dukes分期的增高而增高.大肠癌组织中RECK与MMP-9的表达呈负相关(r=-0.480,P<0.05).结论 大肠癌组织中RECK低表达,MMP-9高表达.RECK可能在大肠癌的浸润和转移过程中起重要作用,有望成为判断大肠癌预后的分子指标之一.     

Survivin、VEGF与Caspase-3在乳腺癌中的表达研究

目的观察存活素(Survivin)、血管内皮生长因子(VEGF)与细胞凋亡酶-3(Caspase-3)在乳腺癌中的表达变化。方法选择本院2009至2012年乳腺癌患者病理标本40例(a组),乳腺癌组织旁5厘米正常乳腺组织(b组),乳腺良性增生标本12例(c组),进行免疫组织化学检测Survivin、VEGF与Caspase-3表达。结果 Survivin阳性表达率在a、b、c组分别为77.50%,2.50%,16.67%(P<0.01),VEGF阳性表达率在a、b、c组分别为72.50%,7.50%,25.00%(P<0.01),Caspase-3阳性表达率在a、b、c组分别为70.00%,7.50%,33.33%(P<0.01)。结论 Survivin、VEGF及Caspase-3在a组的表达明显高于b组和c组,在乳腺癌发生、发展中可能起重要作用。     

Survivin蛋白在宫颈癌组织中的表达和意义

目的:探讨Survivin蛋白在宫颈癌组织中表达及其与肿瘤增殖、微血管密度计数、肿瘤细胞凋亡的关系和临床意义。方法:采用免疫组化SP法和DNA原位未端标记TUNEL法分别测定45例宫颈癌(CC)组织和10例正常宫颈(NC)组织中Survivin、Ki-67、CD34的表达和细胞凋亡。结果:Survivin蛋白在CC中的阳性表达为68.89%,与病理分级、临床分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05),正常宫颈组织中无阳性表达。Ki-67标记指数(LI)在CC及NC中分别为(14.12±5.19)%和(7.32±2.98)%,其差异有统计学意义(P<0.05)。CC中MVD计数33.24±9.17显著高于正常宫颈组织17.63±5.54,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。CC组织及NC组织中细胞凋亡指数(AI)分别为7.55±2.35、5.64±1.81,其差异有统计学意义(P<0.01)。Survivin蛋白的表达与Ki-67 LI、MVD计数呈正相关(r分别为0.477和0.386,P<0.05);Survivin蛋白的表达与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.541,P<0.01)。结论:Survivin蛋白的异常表达而引起细胞凋亡抑制或逃避、肿瘤细胞增殖和微血管增生增加,在宫颈癌的发生、发展中起一定的作用;Survivin蛋白检测有助于对肿瘤细胞的分化程度、病理分期作出正确评价,以指导临床治疗及估计预后。     

凋亡抑制蛋白Survivin在人非小细胞肺癌中的表达及其与COX-2蛋白表达和细胞凋亡的关系

目的探讨Survivin蛋白和COX-2蛋白在人非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及与细胞凋亡水平的关系,并探讨与预后的关系.方法对75例非小细胞肺癌石蜡组织切片、30例正常肺组织,使用免疫组织化学S-P法检测Survivin和COX-2的表达,用TUNEL法原位测定细胞凋亡水平.结果非小细胞肺癌组织中Survivin和COX-2的阳性率分别为70.6%和68.0%,均显著高于正常肺组织中的阳性率6.7%和10.0%(P均＜0.05).Survivin表达与COX-2表达呈正相关(r=0.78,P＜0.05),Survivin与凋亡指数呈负相关(r=-0.86,P＜0.05),COX-2与凋亡指数呈负相关(r=-0.75,P＜0.05).Survivin阴性组的AI高于Survivin阳性组(z=5.10,P＜0.0001).生存分析显示Survivin阳性组的5年生存率明显低于Survivin阴性组.结论Survivin与COX-2在NSCLC中表达升高,在NSCLC的发生发展中起了重要作用,并与NSCLC的恶性行为相关,Survivin对于监测预后有重要意义.同时Survivin可能成为治疗NSCLC的靶点.     

Survivin及Caspase-3在浅表性膀胱移行细胞癌中表达及临床意义

目的 Survivin及Caspase-3在浅表性膀胱移行细胞癌表达及其临床意义.方法 应用S-P免疫组织化学法检测47例行TUR-BT术切除膀胱移行细胞癌标本中Survivin和Caspase-3表达的情况,结合临床资料进行分析.所有标本均经病理证实为T1期内.10例正常膀胱黏膜为对照.结果 Survivin在膀胱移行细胞癌标本中的表达阳性率为68.1%(32/47),而正常对照组中无一例呈阳性表达;Caspase-3在膀胱移行细胞癌标本中的表达阳性率为38.3%(18/47),与对照组阳性率90%(9/10)相比差异有统计学意义(P<0.05).Survivin的表达与膀胱移行细胞癌的组织学分级、初发和复发有关(P<0.05),但与肿瘤数目无关;Caspase-3的表达与膀胱移行细胞癌的初发复发有关,但与组织学分级、肿瘤数目无关.膀胱移行细胞癌中Survivin的表达与Caspase-3表达呈负相关.结论 Survivin及Caspase-3蛋白在膀胱癌组织中选择性表达与膀胱移行细胞癌的分化程度有关,Survivin及Caspase-3蛋白对于判断膀胱移行细胞癌预后有重要临床指导意义.     

理冲消瘤汤对子宫肌瘤凋亡基因的调控作用

目的探讨理冲消瘤汤对子宫肌瘤大鼠模型凋亡基因的调控作用。方法制备子宫肌瘤大鼠模型,随机分为正常组、模型组、理冲消瘤汤高剂量组、理冲消瘤汤低剂量组、阳性对照组,灌胃给药,连续4周。电镜观察子宫肌瘤细胞微观结构;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测细胞凋亡调控基因(Survivin、Caspase-3)的表达;采用免疫荧光检测细胞凋亡调控基因(Survivin、Caspase-3)的表达和分布。结果与阳性对照组比较,理冲消瘤汤组细胞排列基本正常,细胞器基本接近正常,线粒体增生肥大减轻,胶原纤维排列基本规则,增生不明显;Real-time PCR结果显示,理冲消瘤汤组的Survivin表达降低(P<0.01),Caspase-3的表达升高(P<0.05);免疫荧光结果显示,与阳性对照组比较,理冲消瘤汤组的Survivin表达显著降低(P<0.05),而Caspase-3的表达显著升高(P<0.05)。结论理冲消瘤汤对子宫肌瘤细胞的生长有抑制作用,可改善子宫肌纤维紊乱和肌瘤细胞的超微结构。其作用机制可能与其调控子宫肌瘤平滑肌中凋亡基因Survivin、Caspase-3的表达有关。     

P21活化激酶1蛋白在大肠癌及大肠腺瘤异型增生中的表达及意义

目的 探讨p21活化激酶1(PAK1)蛋白与大肠癌发生及生物学行为的关系.方法 采用免疫组化染色法对10例正常大肠黏膜、40例大肠绒毛状或管状腺瘤及60例大肠癌组织进行标记分析.结果 PAK1蛋白在正常大肠黏膜中的阳性率为10.0%,在大肠腺瘤伴轻、中、重度异型增生中的阳性率分别为25.0%、33.3%和33.3%,在大肠癌中的阳性率为65.0%.大肠癌PAK1蛋白阳性率高于正常大肠黏膜(P<0.01)及大肠绒毛状或管状腺瘤(P<0.01),且高于伴轻度异型增生腺瘤(P<0.01)及伴中度异型增生腺瘤(P<0.05).低分化大肠癌患者PAK1蛋白阳性率高于高分化大肠癌患者(P<0.05);而有淋巴结转移者PAKI蛋向阳性率高于无淋巴结转移者(P<0.05);Dukes分期中的C期和D期患者PAK1蛋白阳性率高于A期患者(P<0.05).结论 PAK1蛋白的表达与大肠癌的发生有一定的相关性,可作为判断大肠癌生物学行为及预后的一个有用指标.     

大肠癌组织中Skp2的表达及其临床意义

目的研究Skp2蛋白在大肠癌组织及大肠其他良性病变中的表达,探讨Skp2蛋白的表达与大肠癌临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组化方法检测Skp2蛋白在83例大肠癌、18例大肠腺瘤和20例大肠正常黏膜中的表达。结果大肠癌组织中Skp2蛋白阳性率[(28.65±12.60)%]显著高于大肠腺瘤组织[(17.28±10.66)%]](P<0.01)和大肠正常黏膜组织[(6.60±5.54)%](P<0.01)。Skp2蛋白表达与细胞分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移有关(P<0.01)。结论大肠癌组织中Skp2的高表达与大肠癌的发生发展、淋巴结转移及预后有一定关系。     

Survivin和bcl-2在膀胱移行细胞癌中表达及其相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及与bcl-2蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织链酶卵白素-过氧化物酶复合物（SP）方法，检测40例膀胱移行细胞癌组织标本中Survivin、bcl-2蛋白的表达，并与15例正常膀胱粘膜移行细胞进行对照研究。结果40例膀胱移行细胞癌中，Survivin蛋白的阳性表达率为58．14％，而正常膀胱粘膜组织中未见Survivin蛋白阳性表达（P〈0．01）。Survivin蛋白表达与膀胱移行细胞癌的WHO肿瘤分级有相关性。根据Spearman相关分析表明Survivin与bcl-2蛋白表达正相关（P〈0．01）。结论Survivin基因可通过抑制膀胱移行细胞癌细胞凋亡，对膀胱移行细胞癌的发生发展起重要作用。Survivin的表达与膀胱癌组织中bcl-2蛋白的异常表达密切相关。     

EphA2与E—cadherin在大肠癌组织中的表达

目的探讨EphA2和E—cadhefin在大肠癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学S-P方法检测67例大肠癌和28例正常大肠黏膜组织中EphA2和E—cadherin的表达,并分析其与临床病理因素的关系。结果大肠癌组织中EphA2阳性和E-cadhefin阴性表达均显著高于正常大肠黏膜组织（P〈0．01）。EphA2阳性和E-cadhefin阴性表达与大肠癌分化程度、浸润深度和淋巴结转移差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）,而与大肠癌大体类型差异无统计学意叉（P〉0．05）。EphA2与E-cadherin表达呈负相关（r=-0．45,P〈0．05）。结论EphA2与E—cadhefin异常表达可能共同参与大肠癌的发生、发展与转移,EphA2可与E-cadhefin结合作为判断大肠癌恶性程度和预后的指标。     

乳腺癌中Survivin和Ki-67的表达及其临床意义

目的 检测Survivin和Ki-67在乳腺癌中的表达,探讨两者的相关性及临床意义.方法 应用免疫组织化学法检测49例乳腺癌组织和12例正常乳腺组织中Survivin和Ki-67的表达.结果 Survivin和Ki-67在乳腺癌组织中的表达阳性率明显高于正常乳腺组织中的表达(P<0.05);Survivin的表达与患者的临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与其他临床病理特征无关;Ki-67的表达与患者的临床分期、淋巴结转移和病理学分级有关(P<0.05),而与其他临床病理特征无关;Survivin和Ki-67在乳腺癌组织中的表达呈明显相关性(r=0.734,P<0.05).结论 Survivin与Ki-67可能通过相互协同作用参与乳腺癌的发生、发展过程,可作为评价乳腺癌生物学行为的重要依据.     

Survivin和bcl-2在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨Survivin和bcl-2在结肠癌中的表达及临床意义。方法免疫组化方法检测20例正常结肠黏膜组织及92例结肠癌组织Survivin,bcl-2蛋白的表达。结果结肠癌与正常结肠黏膜组织中Survivin阳性表达率分别为68．5％和0％,二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;Survivin的高表达与结肠癌组织学分级、Dukeg分期相关（P〈0．01）,与淋巴结转移密切相关（P〈0．01）。结肠癌与正常结肠黏膜中bcl-2阳性表达率分别为59．8％和0％,二者差异有统计学意义（P〈0．01）;bcl一2蛋白的高表达与结肠癌Dukeg分期及肠系膜淋巴结转移相关（P〈0．05）。经Spearman等级相关分析,Survivin与Bcl-2之间呈正相关（r=0．333,P〈0．05）。结论Survivin和bel-2的表达与结肠癌发生、临床进展及预后密切相关,二者在结肠癌中起相互协同作用。     

ASC与Caspase-1在结肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨ASC与Caspase-1在结肠癌组织及癌旁组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化LSAB法对30例术前无放化疗的结肠癌标本及其相应的癌旁组织进行ASC、Caspase-1检测，并结合各指标进行分析。结果癌旁组织及肿瘤组织中ASC阳性率分别为60．00％（18／30）和13．33％（4／30），组间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01）；Caspase-1阳性率分别为60．00％（18／30）和30．00％（9／30），组间阳性表达率差异有显著性（P〈0．05）。ASC与Caspase-1两指标在肿瘤组织中的表达呈负相关，但无统计学意义（P〉0．05），在癌旁组织中表达高度正相关（P〈0．01）。结论结肠癌中有ASC、Caspase-1的低表达，且显著低于癌旁组织，提示ASC、Caspase-1在结肠癌的凋亡、发生及发展过程中有重要作用。     

程序性坏死阻断剂对铝致神经细胞凋亡的影响及其机制

目的 了解程序性坏死阻断剂necrostatin(Nee-1)对铝诱导的神经细胞凋亡的影响,并探讨Nec-1对Caspases凋亡通路的作用机制.方法 用4 mmol/L铝染毒神经母细胞瘤细胞株(SH-SYSY)制备铝致神经细胞死亡模型,在不同浓度铝和(或)Nec-1作用下检测细胞活力的变化,用Heochst 33342/碘丙啶(PI)双染法观察细胞的凋亡和坏死现象,Annexin V/PI双染法定量细胞的凋亡率和坏死率.用Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9酶活力的变化检测凋亡通路,用免疫细胞化学法检测核转录因子(NF-κB)和细胞色素c(Cyt-c)蛋白表达的变化.结果 随着铝染毒剂量的加大,细胞活力明显下降;但加入60 μmol/L Nec-1后,细胞活力明显增强.差异有统计学意义(P<0.05). Nec-1浓度的提高使细胞活力明显上升,表现了明显的促进神经细胞生长、抑制细胞死亡的作用.凋亡和坏死的荧光显微镜观察及流式细胞术定量检测结果 表明,随着铝染毒剂量的增加,神经细胞的凋亡率与坏死率明显上升,但在0～90μmol/L Nec-1作用下,Nec-1浓度越高,细胞的坏死率降低越明显,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).同时,虽然Nec-1是程序性坏死的阻断剂,但其对凋亡率也有明显的影响,可以使染铝细胞的凋亡率明显下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).对Nec-1作用后细胞的凋亡相关酶Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活力变化检测结果 表明,Nec-1对Caspase-9活力的影响不明显,且对线粒体通路的凋亡诱导分子Cry-c的作用也不明显;但对Caspase-8活力的影响明显,表现在可以明显降低各染铝细胞的Caspase-8活力,提高NF-κB蛋白表达量和在高剂量染铝细胞中降低Caspase-3的活力.结论 Nec-1可以降低铝诱导的神经细胞凋亡,并通过死亡受体通路Caspase-8上调NF-κB表达,降低细胞凋亡率.     

宫颈鳞癌组织中Survivin和Smac蛋白的表达

目的:探讨宫颈鳞癌组织中凋亡调控因子生存素(Survivin)和第二线粒体衍生的半胱天冬酶激活蛋白(Sec-ond mitochondrial activator of caspase,Smac)的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学技术检测70例宫颈鳞癌和11例正常宫颈组织中survivin和Smac蛋白的表达情况。结果:①Survivin和Smac蛋白在宫颈鳞癌中表达水平高于正常宫颈组织(P<0.01);②Survivin蛋白在宫颈鳞癌中的阳性表达率与临床分期和肿瘤分化程度有关,Smac蛋白的阳性表达率与临床分期有关。结论:Survivin和Smac蛋白的异常表达与宫颈鳞癌的发展有关,它们可能参与了细胞异常增殖和凋亡并使之失衡。     

急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的相关性

目的探讨急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的关系。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注模型。应用原位末端标记法检测细胞凋亡,免疫组化法及Western-blotting蛋白印记技术分别检测Caspase-3及Caspase-10蛋白表达。结果①脑缺血大鼠海马CA1区3h出现凋亡阳性细胞,48 h达到高峰,72 h凋亡阳性细胞的数量开始下降。②脑缺血大鼠海马CA1区3 h可见Caspase-3及Caspase-10蛋白阳性细胞,48 h表达达高峰,72 h表达开始减少。③脑缺血大鼠海马CA1区Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的变化与细胞凋亡数呈正相关(r=0.976,P﹤0.01;r=0.986,P﹤0.01)。结论脑缺血大鼠海马CA1区存在细胞凋亡,且与Cas-pase-3及Caspase-10蛋白表达的变化一致,Caspase-3及Caspase-10蛋白可促进细胞凋亡发生。