胃癌的基因异常及其意义

现代分子生物学研究证实 ,从正常上皮细胞发展到临床所见的肿瘤是一个复杂的过程 ,与多种基因异常的积蓄有关。胃癌也呈现出多基因的改变 ,其中包括基因的不稳定性、细胞周期调节蛋白、肿瘤抑制基因与细胞粘附因子、原癌基因、生长因子及转移相关基因等。本文就其中有代表性的研究进展作一回顾。一、基因不稳定性基因不稳定性可能是胃癌发生过程中众多步骤的基础。微卫星座位的不稳定性包括简单重复序列的扩大与缩小 ,它可能源于肿瘤发生过程中ＤＮＡ复制错误。Ｈａｙｄｅｎ等[1] 发现3 9 %的胃癌有微卫星不稳定性 ,64%的低分化胃癌、17%的…     

CD24在胃癌中的表达及其临床意义

目的检测CD24mRNA和蛋白在胃癌原发灶、癌旁黏膜及区域淋巴结中的表达情况．并探讨其表达与胃癌临床病理特征及预后的关系。方法对收集的55例胃癌患者的标本．采用RT-PCR和免疫组织化学染色的方法．检测CD24在胃癌原发灶、癌旁黏膜及区域淋巴结中的表达情况．并分析CD24的表达情况与患者临床病理特征及预后之间的关系。结果胃癌中CD24mRNA和蛋白的表达均高于癌旁黏膜（P〈0．05）：转移淋巴结中CD24mRNA和蛋白的表达均高于未转移淋巴结（P〈0．05）。除男性患者CD24的表达高于女性患者（P〈0．05）．CD24的表达与其他临床病理特征及预后之间并无相关性（均P〉0．05）。结论CD24的高表达可能在胃癌的发生和转移中具有重要作用。     

Bcl-2在胃癌中的表达及其临床意义

目的 研究B细胞淋巴瘤／白血病-2基因(Bcl-2)在胃癌中的表达,以探讨其与胃癌临床生物学行为和预后的关系.方法 应用免疫组织化学SP法分别检测Bcl-2在42例胃癌患者的胃癌及切缘上皮组织中的表达.结果 Bcl-2在胃癌和胃切缘上皮组织中的阳性表达率分别为69.05％和21.43％,两者差异有统计学意义(P＜0.05);Bcl-2表达水平与胃癌患者的年龄、性别和浸润深度无关(P＞0.05),而与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 胃癌中Bcl-2表达可能是胃癌侵袭、转移、演进和预后的生物学标志之一.     

MAGE-3在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的：检测黑色素瘤抗原基因-3（MAGE-3）在胃癌组织中的表达，探讨其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法：应用RT-PCR方法对40例胃癌组织和相应的癌旁组织以及20例胃慢性炎症组织中的MAGE-3基因进行检测，随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行测序，并结合临床病理参数进行研究分析。结果：在40例胃癌组织中，MAGE-3基因的表达阳性率为67.5％（27／40），明显高于在相应的癌旁组织15％（6／40）及胃慢性炎症组织中的表达阳性率1O％（2／20）。DNA测序证实RT-PCR产物确为MAGE-3基因的目的片段。胃癌组织中MAGE-3基因表达的阳性率与胃癌的浸润深度有关，而与病理分期、分化程度和淋巴转移无关。结论：MAGE-3基因在胃癌组织中有较高的表达率，可望将其编码的蛋白作为靶分子应用于胃癌的免疫治疗。     

TNIK在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-2和Nck相互作用蛋白激酶(Traf-2 and Nck-interacting protein kinase,TNIK)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法回顾性收集2014年7月至2017年12月期间在郑州大学附属洛阳中心医院普通外科行手术切除并经病理科确诊的胃癌组织及其癌旁组织标本78份,以及同期胃溃疡组织标本42份。采用免疫组织化学染色法及Western blot法检测上述3种组织中TNIK蛋白的表达情况,并探索TNIK蛋白表达与胃癌临床病理学特征及预后的关系。结果免疫组织化学染色结果显示,胃癌组中,TNIK蛋白的阳性表达率为66.67%(52/78),癌旁组织组为11.54%(9/78),胃溃疡组为21.43%(9/42)。胃癌组的TNIK蛋白阳性表达率高于癌旁组织组和胃溃疡组(P<0.05),但癌旁组织组和胃溃疡组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果显示,在胃癌组中,TNIK蛋白的表达水平高于胃溃疡组及癌旁组织组,差异均有统计学意义(P<0.05);但癌旁组织组与胃溃疡组比较差异无统计学意义(P=0.772)。TNIK蛋白的表达与胃癌患者的性别、CEA值、肿瘤直径及病理学类型均无关(P>0.05),但与胃癌患者的年龄、TNM分期、分化程度、远处转移及淋巴结转移相关(P<0.05);TNIK蛋白阳性表达患者的预后差于阴性表达者(P<0.001)。结论TNIK蛋白在胃癌组织中高表达,且与胃癌预后不良因素及较差的预后相关,可能是潜在的胃癌诊治靶点。     

survivin在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨胃癌组织中凋亡抑制因子survivin的表达及其与各临床病理因素的关系,评价survivin在胃癌预后判断中的价值。方法应用免疫组织化学EnVision两步法检测140例胃癌组织中survivin的表达情况,回顾性分析survivin与各临床病理因素及预后之间的关系。结果胃癌组织中survivin表达阳性率为46.4%(65/140)。累及浆膜层的胃癌survivin表达阳性率(53.2%)明显高于未及浆膜层者(32.6%),TNM分期Ⅲ、Ⅳ期的胃癌survivin表达阳性率(55.2%)明显高于Ⅰ、Ⅱ期者(38.4%)(P均<0.05)。分化较差的胃癌survivin表达阳性率(52.2%)与分化较好者差异无显著性意义(35.4%,P=0.059)。survivin表达阳性患者5年生存率(34.4%)明显低于表达阴性者(58.6%,P<0.006)。Cox回归模型分析显示,survivin表达状态是胃癌根治术后独立的预后因素,阳性表达提示预后不良。结论凋亡抑制因子survivin在胃癌组织中具有较高的表达率,其表达与胃癌的浸润深度和TNM分期相关。survivin的表达状态是胃癌根治术后独立的预后因素,阳性表达提示预后不良。     

RASSF1A在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨抑癌基因RASSF1A在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生、发展的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测58例胃癌组织及癌旁正常组织RASSF1A基因产物的表达水平。结果癌旁正常组织RASSF1A全部表达,而胃癌组织的表达率为46.5%。TNM分期Ⅲ期表达缺失率为74.3%,显著高于Ⅰ、Ⅱ期的27.3%、31.3%(P<0.05)。低分化腺癌表达缺失率为65.6%,显著高于高分化腺癌的38.5%(P<0.05)。RASSF1A基因表达与性别、年龄无明显关系(P>0.05)。结论RASSF1A表达缺失在胃癌的发生、发展中起重要的作用。     

p53上调促凋亡因子在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究p53 上调促凋亡因子(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)在胃癌绀织中的表达及其与临床病理学指标的关系.方法 应用组织芯片和免疫组化Envision方法 检测84例胃癌及配对的癌旁正常胃黏膜组织中PUMA和p53蛋白表达;分析PUMA表达与临床病理学指标的关系;分析PUMA表达与p53表达的相关性.结果 PUMA在胃癌组织中的阳性率(33%)低于癌旁正常胃黏膜组织(62%),两者之间筹异有统计学意义,P<0.01;PUMA的表达与肿瘤浸润深度、pTNM分期及预后有关(P<0.05).p53在胃癌组织中的表达(45.2%)显著高于癌旁正常胃黏膜组织(0),两者之间差异有统计学意义,P<0.01;PUMA与p53表达有显著的相关性(P<0.05).结论 PUMA低表达与胃癌浸润深度、胃癌中、晚期及预后不良相关,有可能成为胃癌预后的预测指标.     

RASSF1A在胃癌中的表达及其甲基化状态的研究

目的：研究胃癌组织中RASSF1A基因启动子区甲基化及其蛋白表达情况,分析两者之间的关系及其在胃癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组化SP法检测39例胃癌组织,39例相应癌旁组织及30例对照组织中RASSF1A蛋白表达,应用甲基化特异性PCR法检测上述组织RASSF1A启动子CpG岛甲基化状态。结果：1）胃癌组RASSF1A蛋白表达阳性率53.8%明显低于癌旁组97.4%及正常对照组100%（P〈0.05）;2）胃癌组织中RASSF1A基因启动子区甲基化率为64.1%,显著高于癌旁组织甲基化率7.7%及对照组0%（P〈0.05）;3）在胃癌组织中,甲基化组RASSF1A蛋白表达明显低于非甲基化组（P〈0.05）。结论：胃癌组织RASSF1A蛋白表达缺失或低下,与其启动子甲基化程度增高显著相关,RASSF1A启动子甲基化在胃癌发生、发展中起一定作用。     

Snail在胃癌中的表达及其临床意义

目的研究Snail在胃癌的表达与肿瘤转移的关系。方法采用免疫组化S-P法分别检测Snail在胃癌及切缘组织中的表达。结果 Snail高表达于胃癌组织的细胞核,在胃癌及切缘组织中的表达率分别为85.42%、27.08%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。Snail高表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论胃癌中Snail高表达与肿瘤的浸润转移密切相关,Snail可能是胃癌侵袭转移的生物学标志之一。     

FRZB基因在胃癌组织中的表达和胃癌细胞内定位及其意义

目的研究FRZB基因在胃癌中的表达和在细胞内的定位及其意义。方法通过免疫组织化学（免疫组化）链霉菌抗生物素蛋白．过氧化酶连接法（SP法）对90例胃癌组织及正常胃黏膜组织FRZB基因的表达进行分析。通过定量PCR和Western印迹检测胃癌细胞株和胃上皮细胞株GES-1的FRZB表达，并用免疫荧光技术对FRZB的细胞内定位进行研究。结果FRZB在胃癌中的表达高于正常胃黏膜，在胃癌组织中，FRZB表达阳性率为92．2％，而正常胃黏膜中除了1例（10．0％）为弱阳性表达外，其余均为阴性。FRZB在胃癌组织中的表达与分化程度（P=0．220）和Lauren分型（P〈0．01）相关，与其他的临床病理参数不相关。免疫荧光和Western印迹结果显示，FRZB在细胞核和细胞质中均有表达。定量PER结果显示，在胃癌细胞株中FRZB表达高于GES-1。结论FRZB与胃癌的分化和肠型及弥漫型的发生相关，FRZB在细胞核的定位可能与其在胃癌中的作用相关。     

TFPI-2基因在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨TFPI-2基因在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集临床胃癌患者术后大体标本64例,采用免疫组织化学方法检测TFPI-2蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达,采用RT-PCR法检测TFPI-2 mRNA在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达。结果:TFPI-2蛋白在正常胃黏膜组织中的表达高于胃癌组织(P0.05),无淋巴结转移胃癌组织的TFPI-2蛋白表达高于有淋巴结转移的胃癌组织(P0.05)。TFPI-2 mRNA在正常胃黏膜组织中的表达明显高于胃癌组织(P0.05),无淋巴结转移胃癌组织的TFPI-2 mRNA表达高于有淋巴结转移的胃癌组织(P0.05)。结论:TPFI-2基因是胃癌发生、侵袭和转移的重要调节因子,其低表达与胃癌淋巴结转移的生物学行为密切相关。     

Ezrin在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨Ezrin在胃癌发生及发展过程中的作用.方法 收集2008年6月至2009年5月第三军医大学西南医院全军普通外科中心收治的60例胃癌患者的胃癌组织及正常胃黏膜组织标本,分别采用RT-PCR和Western blot法检测标本中Ezrin mRNA及蛋白的表达情况,分析Ezrin与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、病理分期、浸润深度及淋巴结转移间的关系.采用t检验、x2检验、Spearman等级相关检验进行统计学分析.结果 60例正常胃黏膜组织中有33例(55％) Ezrin mRNA表达水平升高,45例(75％)Ezrin蛋白表达水平升高;60例胃癌组织中有21例(35％) Ezrin mRNA表达水平升高,22例(37％) Ezrin蛋白表达水平升高.Ezrin mRNA及蛋白在正常胃黏膜组织中的表达水平分别为1.30±0.04和3.57±0.45,在胃癌组织中的表达水平分别为0.53±0.36和0.96±0.18,两者比较,差异有统计学意义(t=5.309,22.617,P＜0.05).胃癌组织中Ezrin mRNA及蛋白表达水平呈正相关(r=0.602,P＜0.05).Ezrin mRNA和蛋白表达在胃癌不同病理分期、不同浸润深度、有无淋巴结转移方面差异有统计学意义(x2=6.41,6.49,4.62;5.40,8.87,4.12,P＜0.05),而在性别、年龄和分化程度方面差异无统计学意义(x2=0.50,0.07,1.07;0.01,1.16,1.96,P＞0.05).结论 胃癌组织中Ezrin表达水平降低,这可能是胃癌的发生、发展及转移的机制之一.     

胃癌患者外周血调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞比例的变化及其临床意义.方法 采用流式细胞技术检测30例胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞玎分比,对照组为30例慢件胃炎患者.结果 胃癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为8.7%±1.3%,与胃炎患者相比差异无统计学意义.胃癌患者外周血中CD8+CD28-调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为30.3%±3.3%,明显高于胃炎患者的20.3%±2.7%.外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞百分比与胃癌淋巴结转移、病理分型无明显相关性.结论 外周血中调节性T细胞在胃癌发展中可能发挥一定作用.     

基质金属蛋白酶及Ⅳ型胶原在胃癌中的表达及其意义

目的 探讨基质金属蛋白酶（ＭＭＰ２）及Ⅳ型胶原与胃癌浸润转移的关系。方法 对２７例胃癌患者采用临床观察及免疫组化方法观察ＭＭＰ２及Ⅳ型胶原在癌组织中的表达。结果 ＭＭＰ２在低分化腺癌、管状腺癌的癌细胞和癌间质中表达率分别为８５．７％、７７．７％,同时有Ⅳ型胶原的破坏;在血管淋巴管癌栓及淋巴结转移癌病例中表达率分别为８３．３％、８６．７％。结论 ＭＭＰ２的高表达与胃癌浸润和转移有关,主要是破坏细胞外     

胃癌患者术前腹腔冲洗液中CDH1甲基化状态及其临床意义

目的探讨术前腹腔冲洗液中CDHl基因的异常甲基化与胃癌进展的关系。方法采用实时荧光甲基化特异性聚合酶链反应技术．检测92例胃癌患者术前腹腔冲洗液中CDHl基因启动子区域5’-CpG岛的甲基化状态．并分析其与临床病理因素及预后之间的关系。结果92例胃癌患者中．有45例（48．9％）检测到了CDHl基因异常甲基化现象,其中完全甲基化12例（13．0％）,部分甲基化33例（35．9％）。CDHl基因甲基化与肿瘤大小、生长方式、分化程度、淋巴管侵犯、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及临床分期有关（均P〈0．05）,而与性别、年龄、肿瘤部位及幽门螺杆菌感染无关（均P〉0．05）。CDHl甲基化与非甲基化患者术后中位无进展生存期分别为20和38个月,差异有统计学意义（P〈0．01）。经Cox模型分析证实,术前腹腔冲洗液DNA中的CDHl甲基化状态是影响胃癌患者术后生存的独立预后因素（P=0．000,RR=332．88,95％CI：21．71-5105．07）。结论CDHl基因启动子区域5＇-CpG岛的异常甲基化在胃癌中属于高频分子事件．术前腹腔冲洗液DNA中CDHl甲基化分析可反映胃癌进展状况。     

端粒酶基因hTR在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨胃癌中端粒酶hTR基因表达与临床参数的关系，评价hTR表达在胃癌诊断中的价值。方法：用原位杂交的方法检测端粒酶hTR基因在胃癌，癌旁组织和胃良性病变中的表达和分布情况，并分析与各临床参数的关系。结果：57例胃癌中hTR基因表达阳性率为94．7％（54／57），57例癌旁组织中hTR基因表达阳性率为0（0／57），69例胃良性病变中hTR基因表达阳性率为2．9％（2／69）。胃癌组织中hTR基因的表达与癌旁组织，胃良性病变比较差异有显性（P均＜0．001），并与肿瘤分化程度，淋巴结转移相关（P均＜0．05），与肿瘤分期无相关性（P＞0．05）。结论：端粒酶hTR基因表达检测在胃癌诊断中可能有一定的价值。     

Notchl和NUMB在胃癌组织中的表达水平及其意义

目的研究Notchl和NUMB在胃癌组织中的表达情况及其与胃癌临床病理特征的关系。方法采用Real—time PCR和Western blotting检测胃癌肿瘤组织和相应正常组织内Notchl和NUMB的表达。结果Notchl mRNA在胃癌中的平均表达水平是正常胃组织的1．67倍（P〈0．05）,且与肿瘤的分化程度和淋巴转移有关。NUMB mRNA在胃癌中的平均表达水平仅是正常胃组织的0．597倍（P〈0．05）,与肿瘤分化程度有关。Notchl和NUMB在胃癌组织中的表达呈负相关关系（r=-0．459,P〈0．05）。胃癌肿瘤组织中Notchl蛋白的相对含量为（0．348±0．133）,明显高于正常组织中Notchl蛋白的相对含量（0．208±0．140）（P〈0．05）,胃癌肿瘤组织中NUMB蛋白的相对含量为（0．490±0．440）,明显低于正常组织中NUMB蛋白的相对含量（0．746±0．390）（P〈0．05）。结论在胃癌中存在Notch信号转导通路的过度活化,Notchl的上调和NUMB的下调在胃癌发生、发展中可能发挥重要的作用。