分泌抗人喉单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

中国人民解放军白求恩国际和平医院冯金辉等4人在《免疫学快报》1987年7(1)10～11发表本文,报道已建立抗人喉单克隆抗体杂交瘤细胞系三株,经4次克隆化,体外传代培养167天,经液氮冻存复苏,以间接荧光法和ELISA测抗体,均能稳定地分泌抗体。经染色体     

分泌抗HCG单克隆抗体的杂交瘤细胞系

<正> 人绒毛膜促性腺激素(HCG)的免疫测定在妊娠诊断上有极其重要的作用。本工作目的是决定能否用单克隆抗体取代传统抗血清进行该项测定,为此我们进行了用杂交瘤技术制备抗HCG单克隆抗体的研究。 近交的BALB/c小鼠,以孕妇小便中提纯的HCG免疫,3天后,取脾细胞,与无分泌性的小鼠骨髓瘤细胞SP_2融合。聚乙二醇4,000为促触剂,融合率达100％。融合后10天,用HCG交联的胶乳作凝集试验,测定细胞培养上清液,阳性率为6％。取细胞生长好,阳性强的杂交瘤细胞克隆化四次以上,最后获得10个杂交     

32株分泌抗HBsAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

<正> 取纯化HBsAg免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,选原始抗体阳性孔细胞进行多次克隆化。两次融合试验共得32株分泌抗HBsAg-McAb的杂交瘤细胞株。其培液上清的PHA效价为1:32～1:1,024,对流(CEP)效价为1:2～1:16。诱生小鼠腹水的PHA效价,25/32株为10~(-4) ～10~(-5),7/32株>10~(-6),其中8/32株ELISA法效价可达10~(-7)。CEP和AGD效价最高分别达1:6,400和1:3,200。 选出21株分泌抗体能力较强者进行冻存,并对其纯度和特异性进行鉴定。结果证明,21株杂交瘤分泌的McAb均属小鼠IgG_1亚类,能较好地中和乙肝患者血清中的HBsAg。与人白蛋白或正常人血清进行CEP或AGD试验,均无沉淀线出现。说明这些McAb具有良好的纯度和专一性。     

分泌抗人结肠癌细胞单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

结肠癌是一种严重危害人类健康的常见恶性病症。本病高发于大洋、欧、美洲等地区。在我国,结肠癌在恶性肿瘤中居第六位;因此,对结肠癌的研究受到国内外的重视。自1975年Kohler和Milstein首次报告杂交瘤技术以来,已渗透到生物医学的各个领域,在肿瘤学中亦得到了广泛应用。目前已制备出抗人肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、白血病等的单抗隆抗体。这为肿瘤的进一步研究提供了有用的手段。抗人结肠癌单克隆抗体的研究,国外     

抗绿脓杆菌外毒素A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

本文采用绿脓杆菌外毒素A(PEA)免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与Sp2/0细胞进行融合。取有克隆生长孔上清用EL-ISA法筛选有抗体分泌阳性孔,再选阳性孔用有限稀释法进行连续亚克隆。共进行8次融合,由于假阴性及假阳性的干扰,在前7次融合中,仅建株成功杂交瘤1株。命名为14F10。在排除假阴性及假阳性干扰后,在第8次融合中建株成功5株,命名为:23B9,23F1,23C12,24A6及24B5。在传代培养     

抗绿脓杆菌毒素A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

本文采用绿脓杆菌外毒素A免疫BALB/c小鼠取脾细胞与Sp2/0细胞融合,建立了6株分泌单克隆抗体的杂交瘤,分别命名为14F10,23B9,23F1,23C12,,24A6及24B5。其中,23F1及24A6在传代培养中逐渐丧失了分泌抗体的能力,其余4株可稳定地分泌抗体。它们的Ig亚类鉴定;14F10为IgM,23B9为IgC1,23C12为JgG2b,24B5为JgG1。注射入同系小鼠腹腔,可产生高滴度抗体,在夹心ELISA试验中己证实均为抗绿脓杆菌外毒素A特异性的。此外,文中还讨论了在间接ELISA初次筛选中出现的假阴性及假阳性的原因及其排除方法。     

分泌抗HBe单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

乙型肝炎e抗原(HBeAg)是乙型肝炎病毒核心颗粒主要构成蛋白,其合成受乙肝病毒遗传密码所控制。HBeAg检测对肝病临床诊断、传染性判定以及预后等方面均具有重要价值。目前常用的检测方法均是以乙肝患者血清中的e抗体(抗-HBe)作为检测试剂。由于试剂来源困难,且每批效价不一,很难制备统一,标准HBcAg检测试剂,不利于质量控制。近年来改用杂交瘤技术制备抗HBe单克隆抗体(McAb),先后已有一些成功的报道;这些抗HBe McAb对乙型肝炎研究、HBeAg的兔疫化学结构、HBeAg与乙型肝炎c抗原(HBcAg)之关系的研究起了很好的推动作用。但是这些抗HBe McAe效价尚不很理想,     

分泌抗H_(815)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

制备兔抗正常615小鼠肝癌细胞免疫血清,以此处理615小鼠肝癌细胞用处理过的瘤细胞免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0融合,以间接免疫荧光法和细胞ELISA二种方法检测,建立两株分泌抗615小鼠肝癌细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞系。两杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体与正常615小鼠的肝、脾、肺、肾、脑、心肌、横纹肌、胸腺组织细胞和多     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和初步应用

应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,取该鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞系(HE_(20)1B_8,HE_(21)2C_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2×6.4×10~6。因相捕捉HBeAg,HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验均证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂包被抗体,配合人抗HBe-HRP,结果与Abbott试剂非常一致。     

一组分泌抗人粒细胞单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

用正常人的外周血粒细胞免疫Balb/c小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,用间接免疫荧光法及扁桃腺冰冻切片免疫过氧化物酶染色技术,从2次细胞融合中筛选并经克隆化得到一批稳定分泌抗粒细胞单抗的杂交瘤细胞系。对其中4株(FPMNI-FPMN4)杂交瘤细胞系所分泌的单抗作了系统的鉴定,证实它们是粒细胞特异性的单抗。     

抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立秦玉倩吴悦周月梅（上海生物制品研究所免疫研究室，上海２０００５２）Ｖｅｔｅｒｌｅｉｎ等［１］报道用抗尿激酶（ＵＫ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）亲和层析柱，能从ＵＫ粗制品、甚至新鲜尿液中提取高纯度的ＵＫ，从而大大降低制备...     

分泌结核菌单克隆抗体的杂交瘤细胞系

<正> 结核菌单克隆抗体对结核菌的菌种鉴定、分型,抗原提纯及结核病血清学诊断等都有重要意义。我们以超声波打碎的结核菌上清作抗原腹腔注射BALB/e小鼠二次,间隔数月后,再连续四天,每天免疫一次,第五天取脾与小鼠骨髓瘤细胞 NS-1融合,以45%PEG 1,000为促融剂,融合率为90%。以     

分泌抗α_2-巨球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系建立

α_2-巨球蛋白(α_2-Macroglobulin,α_2-M)是人血清中α球蛋白的一种重要成分。含量约占血清总蛋白量的3％,分子量82万左右,α_2-M有抑制多种蛋白分解酶和活化生长激素与胰岛素的作用。参予免疫调控,具有抗放射性损伤的作用。最近我们用细胞融合技术建立了分泌抗α_2-M单克隆抗体的杂交瘤细胞系,本文就这一细胞系的建立情况及初步鉴定结果报告如下:     

分泌本周氏蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

本文报道通过鼠-鼠之间的配合,成功地获得长期分泌本周氏蛋自(BJK)的单克隆抗 体杂交瘤细胞株。 应用人的BJK免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0-Ag14 /小鼠骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG,MW4000)作用下配合,HAT选择培养,以小鼠腹腔巨噬细胞作为饲养细胞,     

分泌抗α_2-巨球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系建立

<正> α_2-巨球蛋白(α_2-M)是人血清中α球蛋白的一种重要成分,含量约为血清总蛋白含量的3％,分子量82万左右。α_2-M有抑制多种蛋白分解酶和活化生长激素与胰岛素的作用,参予免疫调控,并可能具有抗放射性损伤的作用。     

分泌鼠疫F_1单克隆抗体的杂交瘤细胞系建立

<正> 鼠疫 F_1抗原是鼠疫菌的特异性抗原成分,抗鼠疫 F_1抗体广泛应用于鼠疫的诊断和防治研究。鼠疫 EV菌免疫 BALB/c 小鼠,间隔两个多月,再用鼠疫 F_1抗原免疫一次,于鼠疫 F_1抗原免疫后第4天,取脾与小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0融合。35%PEG 1,200为促融剂。用间接血凝和金葡菌 A 蛋白酶联免疫吸附试验检测F_1抗原单克隆抗体。选取单克隆抗体阳性细胞株增殖后冻存,复苏其中5株,经有限稀释法克隆2～5次,5株细胞分泌的单克隆抗体经鉴定,1株属 IgM,2株属 IgG_1,2株属 IgG_3。5株细胞分泌的单克隆抗体间接血凝滴度:培养上清液为2~(-2)～2~(-5),诱生小鼠腹水为2~(-10)～2~(-16)。5株细胞经连续体外培养2个月,反复冻存复苏培养3次,均稳定分泌鼠疫 F_1单克隆抗体。     

抗尿激酶单克隆抗体的研究——Ⅰ.分泌抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

用市售的尿激酶(UK),免癌BALB/c小鼠。取脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得六株分泌抗尿激酶单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1UB_5、1UD_2、3UA_2、3UD_(12)、3UG_2、3UH_7。其中,1UB_5及1UD_2连续传代培养4个月以上,其培养液抗体的ELISA效价仍为10~(-2)～10~(-3)。两株细胞经扩大培养后,注入C_(57)×BALB/c杂交后的F_1代小鼠,诱生的腹水抗体效价为5×10~(-6)～10~(-7)1UB_5、1UD_2所分泌的抗体经ELISA鉴定,分属IgG_1和IgG2a。用高纯度的低分子量UK包被,ELISA检测后表明,两株细胞所分泌的为抗高分子量UK的McAb。 抗UK的McAb用于粗制品UK的纯化及监察某些肿瘤发生与发展的进一步工作正在进行之中。     

抗禽巴氏杆菌5A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

禽霍乱对我国养禽业危害极大,目前国内外尚无较理想的免疫制剂应用于禽霍乱的实际防制。5A是我国发生禽霍乱最多的一个血清型。本研究对于禽霍乱多杂性巴氏杆菌的免疫研究及建立一种快速,简便的诊断方法将有很大裨益。我们建立了一株抗禽巴氏杆菌5A单克隆抗体的杂交瘤细胞株,经5次克隆化、将近半年的冻存和传代,能稳定地分泌高滴度的     

分泌抗脊髓灰质炎Ⅲ型Saukett株病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

<正> 自从 Kohler和 Milstein(1975,1976)成功地发展了淋巴细胞杂交瘤技术后,自内外已有不少学者先后建立起分泌抗不同抗原的单克隆抗体细胞系。为了便于对脊灰炎病毒株特征的研究以及对脊灰炎活疫苗的安全性和流行病学监测,我们建立了